INTRODUCCION

La cromatografa de gases se fundamenta en la volatilizacin de las muestras y su posterior inyeccin en la cabeza de una columna cromatografca. Es una tcnica muy utilizada en investigacin debido a su alta resolucin, sensibilidad y selectividad, tambin tiene dos importantes campos de aplicacin, por una parte tiene la capacidad para separar compuestos organicos complejos y sistemas bioqumicos. Por otro lado determinar cualitativa y cuantitativamente los componentes de una muestra. Adems de las aplicaciones anteriormente expuestas la cromatografa de gases puede utilizarse a escala preparativa para la obtencin de compuestos de elevada pureza, as como la posible obtencin de datos fsico-qumicos a propiedades superficiales. La cromatografa de gases se puede aplicar a gases y a cualquier compuesto que pueda ser volatilizado o convertido en un derivado voltil como, as es posible analizar compuestos como azucares o aminocidos totalmente no voltiles, pero que se transforman en derivados voltiles por reacciones apropiadas. Esta determinacin se ha llevado a cabo en muchas ocasiones con la aplicacin de la cromatografa de espacio de cabeza que su fundamento se explicara ms adelante. De igual manera se ha podido determinar aminas aromticas heterocclicas formadas durante la coccin de alimentos proteicos. Se ha demostrado que estos compuestos son mutagnicos potentes, representando un gran riesgo para la salud humana. Tambin se identifica y cuantifica mediante la cromatografa en fase gaseosa aquellos componentes que definen la calidad bsica de los procesos de destilado de los aguardientes a una mayor escala (industrialmente) como el grado alcohlico, acidez total, acetato de etilo, metanol, acetaldehdo, acetonas y alcoholes superiores. Son muchas las aplicaciones de esta tcnica a los alimentos, en su afn del reconocimiento y en la determinacin de compuestos voltiles que se forman en el alimento durante su procesado y que puede generar malestar y deterioro en si, del mismo. En este trabajo se define de manera breve el fundamento de la tcnica incluyendo partes del instrumento, tipos de cromatografa y de manera ms concreta la aplicacin que tiene en los alimentos, por mtodos indirectos y la aplicabilidad gas-liquido.

MARCO TEORICO

La cromatografa es un mtodo muy utilizado en todas las ramas de la ciencia ya que permite la separacin, identificacin y determinacin de los componentes qumicos en mezclas complejas. Es difcil definir el trmino de cromatografa, ya que se ha aplicado ese nombre a varias tcnicas. Sin embargo, todos esos mtodos tienen en comn el uso de una fase estacionaria y una fase mvil. En todas las separaciones cromatogrficas, la muestra se desplaza con una fase mvil, que puede ser un gas, un lquido o un fluido supercrtico. Esta fase mvil se hace pasar a travs de una fase estacionaria con la que es inmiscible. Su rapidez y buena resolucin se ha aplicado al anlisis de mezclas complejas. En cromatografa de gases la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatogrfica, eso implica que la muestra debe ser voltil y trmicamente estable. La elucin se produce por el flujo de un gas inerte, como, helio, nitrgeno e hidrogeno, aunque de acuerdo con el tipo de detector es necesario emplear gases especficos. (2) En la cromatografa de gases a diferencia de lo que ocurre en la cromatografa de lquidos, no existe interaccin entre la fase mvil y el analito; as pues, la velocidad de migracin del analito es en gran parte independiente de la naturaleza qumica de la fase mvil. (3) Existen dos tipos de cromatografa de gases el primero es la Cromatografa gas-slido (GSC) donde La fase estacionaria es un slido que tiene un rea superficial grande sobre la que se adsorbe el analito. La separacin tiene lugar gracias a las diferencias entre las posiciones de los equilibrios de adsorcin de los componentes gaseosos de la muestra sobre la superficie solida de la fase estacionaria. (3)Este proceso de adsorcin, que no es lineal, es el que ha provocado que este tipo de cromatografa tenga aplicacin limitada, ya que la retencin del analito sobre la superficie es semipermanente y se obtienen picos de elucin con colas. Su nica aplicacin es la separacin de especies gaseosas de bajo peso molecular, la segunda y la ms usada es la Cromatografa gaslquido (GLC) de reparto donde la fase estacionaria son molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un gas inerte. (1) Es uno de los mtodos ms importantes y generalizados para separar y determinar componentes qumicos de mezclas complejas. A continuacin se enunciaran los componentes bsicos de un instrumento para la cromatografa Suministro de gas portador; El gas portador, que debe ser qumicamente inerte que como antes se haba indicado puede ser helio, argn, nitrgeno o hidrogeno, aunque el que ms se usa es el helio. Con la fuente de gas van asociados los reguladores de presin, las conducciones y los medidores de caudal. Adems el sistema de gas portador a menudo incluye un tamiz molecular para eliminar el agua y otras impurezas. (4) Sistema de inyeccin de muestra; La eficacia de la columna requiere que la muestra sea de un tamao adecuado y que sea introducida como un tapn de vapor, la inyeccin lenta de muestras demasiado grandes provoca un ensanchamiento de las bandas y una pobre resolucin. El mtodo ms comn de inyeccin de muestra implica el uso de una microjeringa para inyectar una muestra liquida o gaseosa a travs de un diafragma de goma de silicona, en una cmara de vaporizacin instantnea situada en la cabeza de la columna. (4) Entre los tipos de inyeccin encontramos inyeccin con divisin, inyeccin sin divisin y inyeccin en columna. La inyeccin con divisin se utiliza en trabajos en que se requiere gran

resolucin los mejores resultados se obtienen con la mnima cantidad de muestra que puede detectarse bien. Una inyeccin sin divisin es apropiada para el anlisis de trazas de analitos que constituyen menos del 0,015 de la muestra a analizar y la inyeccin en columna se usa con muestras que se descomponen por encima de su punto de ebullicin y es mejor que las inyecciones con o sin divisin en anlisis cuantitativo.(5) Detector; El detector ideal para la cromatografa de gases debe tener una adecuada sensibilidad, buena estabilidad y reproducibilidad, respuesta lineal para los solutos que se extienda a varios rdenes de magnitud intervalos de temperatura entre la temperatura ambiente y 400C, un tiempo de respuesta corto y que sea independiente del caudal, alta afinidad y manejo sencillo, que brinde una respuesta semejante para todos los solutos y que no sea destructivo con la muestra. (4) Columnas; entre ellas encontramos las columnas de relleno que son tubos de vidrio que en su interior tienen partculas esfricas para interaccionar con el analito y las columnas capilares como las WCOT de pared recubierta siendo estas ms eficaces y la SCOT con soporte recubierto teniendo mayor capacidad de carga. La temperatura de la columna es una variable importante que para un trabajo preciso ha de regularse a las dcimas de grado, por ello la columna normalmente se introduce dentro de un horno termostatizado. La temperatura ptima de la columna depende del punto de ebullicin de la muestra y del grado de separacin requerido. En una columna cromatogrfica de gas-lquido las propiedades deseables para una fase lquida inmovilizada incluyen: baja volatilidad, estabilidad trmica, ser qumicamente inerte, hay que tener en cuenta caractersticas de disolvente.

Representacin esquemtica de un cromatografo de gases Para evaluar la importancia de la GLC, es necesario distinguir entre los papeles que desempea la tcnica. El primero como herramienta de separacin eficaz; en este sentido resulta inmejorable cuando se aplica a muestras orgnicas complejas, a organometlicos y a sistemas bioqumicos que sean especies voltiles o especies que pueden derivatizarse para dar sustancias voltiles. El segundo claramente distinto, es el de proporcionar un medio para llevar a cabo un anlisis. En este caso se emplean los tiempos o volmenes de retencin para la identificacin cualitativa, mientras

que las alturas de los picos o sus reas dan informacin cuantitativa. Con fines cualitativos, la GLC es una tcnica mucho ms limitada que la mayora de los mtodos espectroscpicos. (4) El anlisis cualitativo por medio de los cromatogramas de gases se utiliza a menudo como criterio de pureza de compuestos orgnicos. Los contaminantes, si estn presentes, se manifiestan por la aparicin de picos adicionales; las reas de estos picos proporcionan una estimacin aproximada del grado de contaminacin. La tcnica tambin es til para evaluar la efectividad de los procedimientos de purificacin. No obstante, la cromatografa de gases es un medio excelente para confirmar la presencia o ausencia de un supuesto componente en una mezcla. El ndice de retencin fue propuesto como un parmetro para identificar solutos a partir de los cromatogramas. El ndice de retencin para un soluto dado puede deducirse del cromatograma de una mezcla del soluto y de al menos dos alcanos normales (de cadena lineal) patrones en los que se basa la escala de ndices de retencin, que tengan unos tiempos de retencin tales, que el del soluto considerado quede entre los mismos. Los ndices de retencin de un compuesto se deducen por interpolacin a partir de un cromatograma de una mezcla del soluto de inters y dos o ms alcanos. La seal del detector de una columna cromatogrfica gas-lquido se ha utilizado generalmente para anlisis cuantitativos y semicuantitativos. En condiciones cuidadosamente controladas se consigue una exactitud (relativa) del 1 %. Como con la mayora de los instrumentos analticos, la fiabilidad se relaciona directamente con el control de las variables; la exactitud tambin depende en parte de la naturaleza de la muestra. El anlisis cuantitativo se basa en la comparacin de la altura, o del rea del pico del analito.(6)

La cromatografa de gases tiene una alta aplicacin en el anlisis de alimentos en la caracterizacin de aceites esenciales basada en la deteccin de sustancias terpenicas responsables de propiedades aromticas en los alimento, el anlisis de nitrosaminas en agua potable ya que las nitrosaminas son sustancias carcingenas potenciales, se debe controlar su presencia en agua potable. Para esto se usa extraccin de la fase slida y GC con columna capilar, en controles de alcoholemia donde la GC se puede usar para determinar el volumen de alcohol en sangre, para la determinacin de trazas de pesticidas organofosforados (OPP) en aceite de oliva el GC en combinacin con los detectores de ionizacin de llama permiten la deteccin de estos pesticidas, que a pesar de ser baratos y de amplio espectro, son causantes de problemas irreversibles en la actividad de los neurotransmisores, en determinacin de la contaminacin por dioxinas donde se usan detectores de conductividad electroltica, ya que permite el anlisis de residuos de dioxinas muy perjudiciales para la salud humana, en la deteccin de pesticidas en aves y peces donde se usan columnas capilares para la deteccin de pesticidas voltiles o sustancias de vertidos txicos.(1)

Determinaciones indirectas por cromatografa de gases Existe una gran cantidad de compuestos qumicos que no pueden ser analizados directamente por cromatografa de gases, bien porque no sean suficientemente voltiles o por otros motivos. En muchos casos, puede llevarse a cabo la determinacin indirecta aplicando alguno de los mtodos que seguidamente se mencionan. Derivatizacin: Puede estimarse que entre el 80 y 90 % de los compuestos orgnicos no son adecuados para su determinacin directa por CG debido a su baja volatilidad. Tal es el caso de una gran cantidad de muestras biolgicas, como protenas, hidratos de carbono, aminocidos, etc. Una solucin a esta aplicabilidad limitada est en la preparacin de derivados adecuados, para lo que se utilizan normalmente los mtodos de sililacin, acilacin y esterificacin. La sililacin es la tcnica de derivatizacin ms empleada, y consiste en la sustitucin de algn tomo de hidrgeno activo del analito por un grupo trialquilsilil, tal como Si(CH3)3. As, por ejemplo, la reaccin entre un alcohol y trimetilclorosilano transcurre segn, R-OH + Cl-Si(CH3)3 > R-O-Si(CH3)3 + HCl Estos procesos se llevan a cabo normalmente usando piridina como disolvente y suelen ocurrir muy rpidamente. La esterificacin consiste generalmente en la formacin de steres metlicos, para lo cual se pueden emplear distintos reactivos, utilizndose con frecuencia trifluoruro de boro en metanol. La acilacin con anhidrido de cido o con acil-imidazoles se usa para transformar alcoholes y aminas primarias y secundarias en derivados estables R-OH +R1COOR1-COOR + R1-COOHR1COR-OH + R1-CO-NNR1 COOR + HNN. En muchas ocasiones se utilizan derivados fluorados para aumentar la sensibilidad cuando se usa un detector de captura electrnica. El mayor inconveniente de los mtodos de derivatizacin reside en la necesidad de utilizar una cantidad de muestra relativamente grande y la posibilidad de que se pierda algo del componente de inters. Adems, el exceso del reactivo utilizado puede reducir el tiempo de vida de la columna si no se elimina antes de la inyeccin. Cromatografa de espacio de cabeza. Es una tcnica que hace posible la determinacin de los constituyentes voltiles de muestras slidas o lquidas por anlisis de la fase de vapor que est en equilibrio termodinmico con la fase slida o lquida. Dichos voltiles pueden determinarse en casi todo tipo de matrices sin necesidad de recurrir a procesos de extraccin, disolucin o incluso dilucin. Para ello, las muestras se colocan en dispositivos adecuados que se mantienen a temperatura constante el tiempo suficiente para que se establezcan los equilibrios slido o lquido/vapor correspondientes y seguidamente se transfiere un determinado volumen de la fase gaseosa a la columna cromatogrfica. La temperatura debe ser controlada de forma precisa debido a la dependencia entre esta variable y la presin de vapor y, por supuesto, la calibracin tiene que hacerse en idnticas condiciones a las de la muestra.

La determinacin de especies voltiles en alimentos se lleva a cabo en muchas ocasiones utilizando la tcnica cromatogrfica de espacio de cabeza. Los compuestos voltiles presentes en muchos alimentos pueden ser aceites esenciales, compuestos aromatizantes o bien, distintos disolventes. Estos pueden proceder de la elaboracin de los propios alimentos (acetona en la purificacin de ciertas grasas, diclorometano en el caf descafeinado, etc.) o del material utilizado para el envasado (disolventes empleados en la fabricacin de las tintas usadas). En cualquier caso, en los alimentos, la proporcin entre las materias no voltiles y las sustancias voltiles es muy elevada. Por lo que si se introdujera la totalidad de la muestra en la columna, probablemente sta se inutilizara rpidamente. Sin embargo, mediante la tcnica de espacio de cabeza, se resuelve fcilmente el inconveniente mencionado. Pirlisis en cromatografa de gases. Una gran cantidad de materiales slidos pueden analizarse indirectamente por cromatografa de gases sometindolos a pirlisis. Para ello, la muestra se calienta en la cmara de inyeccin de un cromatgrafo de gases a una temperatura a la que tenga lugar su descomposicin. Cromatografiando los productos originados en el proceso de pirlisis, es posible, al menos tericamente, elucidar la estructura del material original. El mtodo ms comn para pirolizar muestras consiste en la utilizacin de un filamento metlico, con frecuencia de platino, que se calienta elctricamente. A veces, los productos de pirlisis pueden identificarse, pero a menudo, se obtiene un patrn complejo con muchas bandas de elucin no identificadas. En cualquier caso, con esta tcnica se obtiene algo as como una "huella digital" de la muestra. Aplicabilidad de la cromatografa gas-lquido Las aplicaciones concretas de la CGL son extraordinariamente numerosas, pues cada ao se publican miles de artculos en relacin con el tema y la tcnica se ha extendido a muchos otros campos aparte de la qumica. Por ello, a continuacin solo se mencionan algunas aplicaciones puntuales de inters. En anlisis de alimentos, ya se ha mencionado que la tcnica de espacio de cabeza se usa frecuentemente para determinar especies voltiles, las cuales son, en muchas ocasiones, responsables de olores y sabores caractersticos. A veces se recurre a procesos de derivatizacin, tales como la formacin de steres metlicos para la determinacin de lpidos y cidos grasos, hidrlisis cida seguida de esterificacin para las protenas, o procesos de sililacin para hidratos de carbono. El anlisis de drogas por cromatografa de gases suele complementarse por HPLC, si bien, en anlisis fornsico se utiliza extensamente la CG para la caracterizacin de ciertas sustancias. El material de partida suele ser muy diverso; desde preparaciones comerciales a fluidos biolgicos (sangre, orina). lo que hace necesaria la correspondiente extraccin previa. Adems, en ocasiones, despus de la extraccin o disolucin se requiere un proceso de derivatizacin. La pirlisis en CG se utiliza para la caracterizacin de alquitranes, pinturas, pelculas y fibras sintticas, e incluso material biolgico. As, por ejemplo, se ha descrito la caracterizacin de hasta cuarenta y siete especies de Salmonella de forma correcta en muestras de la bacteria sometidas a pirlisis. La CGL se aplica extensamente para el seguimiento y control de la distribucin de contaminantes en el medio ambiente. En este sentido, y por ejemplo, la Agencia de Proteccin del Medio Ambiente en Estados Unidos y la Unin Europea ha publicado un conjunto de mtodos para el anlisis de polutantes en aguas*, donde se incluyen hasta 40 derivados clorados, 40 organofosforados y varios carbamatos.

En relacin con la contaminacin atmosfrica, unos compuestos particularmente importantes por su elevada peligrosidad son las dibenzo-p-dioxinas policloradas. Se conocen unos 75 ismeros de PCDD, muchos de los cuales se han identificado en las emisiones de los incineradores de basura municipales, tanto en las cenizas arrastradas por el aire, como en las emisiones de las chimeneas. El procedimiento de anlisis utilizado consiste en la toma de muestras atmosfricas con dispositivos especiales, someter a las cenizas a un tratamiento cido, seguido de extraccin con tolueno y metoxietanol y, finalmente, separar los compuestos por cromatografa gas-lquido (o por HPLC) e identificarlos por CG-EM. Por otra parte, hidrocarburos aromticos (benceno, tolueno) en gases de escape de automviles pueden determinarse fcilmente por CGL con detector de ionizacin de llama y polietilenglicol como fase estacionaria. Aunque muchos compuestos inorgnicos no son voltiles, pueden ser analizados por CG transformando las especies metlicas en derivados voltiles. Con esta finalidad y para la determinacin de ciertos elementos metlicos (Be, Al, Cu, Fe, Cr) se recurre a la formacin de quelatos bastante voltiles con acetilacetona y sus derivados fluorados. (7)

CONCLUSIONES

En la cromatografa de gases encontramos dos fases como la fase mvil y la fase estacionaria que nos ayudan a separar diferentes especies. La cromatografa de gases es utilizada en bebidas como el aguardiente realizando un Control de los procesos de destilado de aguardientes a escala industrial. La cromatografa de gases se puede utilizar para realizar una caracterizacin, identificacin de compuestos voltiles, anlisis de compuestos terpenicas etc. en diferentes clases de alimentos.

BIBLIOGRAFIA E INFOGRAFIA (1) http://es.scribd.com/doc/11642417/Cromatografia-Fundamentos-y-Aplicaciones (2) Barquero Miriam -Principios Y Aplicaciones de la Cromatografa de Gases- 2006Universidad de Costa Rica. (3) Douglas A. Skoog, Donald M. West, F. James Holler-Fundamentos de qumica analtica,Editorial Reverte-4 edicin-Volumen 2-2001. (4) Skoog, Holler, Nieman-Principios Analisis Instrumental-5 Edicin-Editorial McGraw-Hill. (5) Daniel C. Harris. Analisis Qumico Cuantitativo- 5 Edicin- Editorial Reverte. (6) http://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8247/4/T3gascromat.pdf (7) www.altavista.com

CROMATOGRAFIA DE GASES APLICABLE A LOS ALIMENTOS

LEIDY MILENA CRISTANCHO CRUZ ANA GISELLE GAMBA LAURA CAMILA PEREZ RINCON

PRESENTADO: Ms. Agobardo Cardenas Chaparro

ANALITICA III

UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS ESCUELA DE CIENCIAS QUIMICAS PROGRAMA DE QUIMICA DE ALIMENTOS Tunja- Boyac 2011