Introduccin Esta publicacin tiene como objetivo describir los principios bsicos del recogido de fluidos corporales encontrados

en la escena y sus aplicaciones prcticas, as actualizar el artculo publicado el 3 de diciembre de 2007. Uno de los problemas principales que confrontan las sociedades modernas es el de la criminalidad. A pesar de los esfuerzos realizados por los sistemas de justicia criminal, el crimen y la delincuencia continan en aumento sin que puedan ser prevenidos y muchas veces esclarecidos. La mayora de los sistemas legales se basan en el testimonio de los testigos principalmente para lograr convicciones en corte. Pero en muchos casos stos se niegan a declarar o se les olvida o confunden detalles relevantes a la comisin del delito, lo cual resulta en absoluciones en los tribunales. Esto implica que muchos ofensores se queden sin castigo y que continen su carrera delictiva. Lo anterior ha obligado a los especialistas en las Ciencias Forenses a enfatizar la bsqueda de los testigos mudos en el lugar de los hechos: la evidencia fsica que es el resultado de la Teora de la Transferencia. Teora de la transferencia Edmond Locard, considerado el padre de la Medicina Forense Moderna, desarroll la Teora de la Transferencia o Intercambio en el 1928. (Sosa, 2008, Biografa de Edmond Locard). La misma contina citndose en importantes textos del Siglo XX y XXI. Uno de ellos, Investigacin de delitos de Charles Vanderbosh (2001) explica que siempre que se comete un delito ocurre un intercambio de evidencias entre el sospechoso, la vctima y la escena del crimen, lo que permite al investigador recolectar las pruebas necesarias para la identificacin del sospecho y recrear el hecho delictivo. Evidencia puede ser cualquier cosa que pueda identificar al autor de los hechos y lograr su conviccin en los tribunales. Dentro de esa amplia gama de pruebas se encuentran los fluidos corporales. Fluidos corporales Se definen como ".las secreciones o lquidos biolgicos, fisiolgicos o patolgicos que se producen en el organismo." (Gobierno de Chile, Ministerio de Salud, 2004, Norma 6, Precauciones Estndar) Permiten a los expertos del laboratorio realizar anlisis en busca del ADN para identificar al sospechoso y reconstruir la escena del crimen. Se considera prueba irrefutable que demuestra la veracidad de unos hechos. (Lic. Valentn, 2001, Conociendo el ADN) Debido a su importancia de tienen que recolectar mediante una serie de procedimientos sistemticos.

Los fluidos corporales contienen ADN. El Acido desoxirribonucleico es una huella gentica. Consiste de serie de molculas que contienen material gentico que son el resultado de la herencia. (Paul Recer, s.f., "La huella de mayor exclusividad", El Nuevo Da). Se utiliza en la Investigacin Criminal desde 1980 en Inglaterra y en los Estados Unidos desde 1987. (Jos Alegra Coto, 2001, Biologa molecular: Herramienta biotecnolgica) La mayora de los estados (Estados Unidos) han aprobado leyes para crear una base o banco de datos. En Puerto Rico la reglamentacin al respecto est contenida la Ley #175 del 24 de julio de 1998. La misma establece el Banco de ADN administrado por el Instituto de Ciencias Forenses. Delitos que requieren la muestra: 1. Asesinato en todas sus modalidades

2. Homicidio en todas sus modalidades

3. Violacin 4. Sodoma 5. Actos lascivos o impdicos 6. Incesto 7. Bestialismo

8. Cualquier delito grave tipificado en la Ley Nm. 54 del 15 de agosto de 1989, segn enmendada.
(Violencia Domstica)

9. Secuestro en todas sus modalidades 10. Robo en todas sus modalidades 11. Agresin agravada en su modalidad de delito grave 12. Perversin de menores 13. Fabricacin y distribucin de sustancias controladas 14. Distribucin de sustancias controladas a personas menores de 18 aos 15. Empresa criminal continua de sustancias controladas

16. Maltrato de menores en todas sus modalidades 17. Mutilacin Secretores y no secretores Para poder utilizar el ADN como medio para identificar sospechosos los cientficos han clasificados a las personas entre secretores y no secretores. En la primera categora tenemos a individuos cuyos fluidos corporales (sangre, semen y saliva, entre otros) pueden ser clasificados. Se puede determinar su grupo sanguneo. La saliva es la sustancia ms ideal para este tipo de anlisis. Los no secretores pueden ser clasificados pero no se detectan partculas de sangre en los fluidos. No se puede determinar el tipo de sangre. Del 65 al 80% de la poblacin son secretoras. (Machado Schiaffino, 2006, Pericias) Serologa forense De acuerdo al FBI Law Enforcement Bulletin (2005) los investigadores criminales o forenses no necesitan tener conocimientos sobre la Gentica ni conocer de complicadas frmulas trigonomtricas o de clculo. Su adiestramiento est dirigido hacia el reconocimiento del valor de las manchas producidas por los fluidos corporales. No determinan ADN. Su labor consiste en encontrarlas, tomar medidas, levantarlas, embalarlas e identificarlas para enviarlas al laboratorio forense (Secured.com). Serologa Forense es el trmino que se utiliza para identificar a la disciplina cientfica que estudia e identifica los fluidos del cuerpo (Lic. Olga Resumil, Criminologa general 2000). En Puerto Rico el Instituto de Ciencias Forenses cuenta con una Divisin de Laboratorio Forense de DNA / Serologa, el cual ".fue inaugurado el 18 de marzo de 1998. Tiene como objetivo analizar diferentes tipos de evidencia biolgica recuperada de las escenas de crmenes violentos tales como asesinatos, homicidios, violaciones, atropello y fuga, robos, escalamientos, entre otros, para contribuir a esclarecer unos hechos delictivos.Este Laboratorio cuenta con tres unidades: Serologa, ADN y Banco de Data de ADN". (Instituto de Ciencias Forenses de Puerto Rico, 2009, http://www.icf.gobierno.pr/criminalistica/index.php) Ventajas del ADN

1. Se puede encontrar en la sangre, orina, excreta, saliva, pelo, semen y en las clulas de la piel. 2. Ayuda a identificar cuerpos que han estado enterrados por mucho tiempo como las momias.
3. Indica relaciones de parentesco.

4. No se puede combinar; en una escena se puede encontrar sangre de la vctima y del sospechoso mezcladas, pero se puede identificar la huella gentica de cada uno de ellos. (Genge. 2004, The Forensic Casebook )

El Forensic Casebook recomienda la evidencia que debe ser recolectada. Las pruebas pueden ser cualquier cosa, pero gracias a la experiencia obtenida en la bsqueda de fluidos corporales, estos objetos tienen que ser analizados: 1. uas, 2. pauelos, 3. papel toalla, servilletas, toallas,

4. la bolsa de basura del zafacn,

5. palillos para limpiar odos o dientes, 6. colillas de cigarrillos, 7. sorbetes, 8. celulares, 9. todo lo que aparente haber tenido contacto con la boca, 10. sbanas, almohadas, frisas, 11. ropa sucia, 12. gorras, 13. espejuelos, 14. sobre y sellos usados, 15. tape, 16. cordones, 17. sogas, 18. condones usados

Medidas preventivas

Cuando se va a manejar la evidencia de fluidos corporales el investigador tiene que evitar la contaminacin: la mezcla accidental de los fluidos encontrados en la escena con otras sustancias biolgicas. (Secured.com, 2006). Genge tambin presenta unas guas para el investigador: 1. Utilizar guantes desechables y cambirselos continuamente. 2. El equipo debe ser desechable para evitar la transferencia del ADN de un objeto a otro. 3. Evitar tocarse la cara o el pelo. 4. No tocar las superficies. 5. Utilizar mascarilla y trajes desechables. 6. Todos los fluidos corporales deben considerarse como potencialmente infecciosos. 7. Se deben lavar las manos antes y despus de manejar la evidencia, aunque utilicen los guantes; 8. no fumar, beber o comer en la escena

En Segured.com (2006) tambin se recomienda: Verificar el equipo antes de tomar las muestras.

Seguir el procedimiento establecido.

Manipular la prueba una sola vez. Si se le cae la evidencia o entra en contacto con otro equipo, se debe sustituir el mismo y comenzar la recoleccin de nuevo. Acercar el envase y no embalar los indicios juntos. El tamao del contenedor debe ser adecuado.

Almacenar a la temperatura adecuada. Recoger las envolturas, los guantes y depositarlos en los envases destinados para estos fines: bolsas
porosas y de papel, envases de cartn o de plstico si el objeto esta hmedo. Muestras de fluidos

Los resultados de las pruebas para anlisis de ADN dependen de la pureza de la muestra, el tiempo transcurrido entre la obtencin de la misma y su llegada al laboratorio. La habilidad del Criminalista depende de los cuidados que se tuvieron durante el recogido de las muestras. (Schiaffino, 1995, Pericias) Procedimientos generales: 1. El primer oficial que llegue a la escena protege la misma en su totalidad. 2. Se incluyen los fluidos para protegerlos de toda contaminacin, posible prdida o destruccin. 3. Si estn expuestos a las inclemencias del tiempo se deben cubrir con una caja o recipiente de metal. 4. Se deben buscar en lugares no obvios. Si el sospechoso se lav las manos, el cao de curva debajo de desage se debe dejar secar y enviar al laboratorio. 5. El sospechoso pudo limpiarse las manos en lugares poco visibles como debajo de un mueble, alfombra u objetos oscuros. (Schiaffino, 1995, Pericias) 6. Se deben buscar debajo de las patas de los muebles 7. Se debe buscar en las rajaduras o hendiduras del piso, en especial entre las losetas.

Sangre La evidencia de sangre es comn en los delitos violentos como el asesinato, homicidio, mutilacin y agresin, entre otros. (Resumil, Olga. 2000 Criminologa General) Generalmente se encuentra en las armas utilizadas, objetos e instrumentos, cristales rotos, ropa de la vctima y el sospechoso, superficies lisas o porosas, etc. (Schiaffino, 1995, Pericias) 1. La muestra debe tomarse lquida o slida o en forma de manchas secas o unidas a otras partculas.

2. Su color puede variar dependiendo del lugar en donde ha estado expuesta.

3. Se debe tomar en consideracin que tambin se descompone.

Al buscar evidencia de sangre se debe tener en mente las siguientes interrogantes: (Colacci Arrascue Nellkhand, s.f., Huellas y manchasen la escena del delito) 1. Es sangre? 2. Es humana o animal?

3. A cul clasificacin pertenece? 4. Cul es la edad de la mancha? 5. De qu parte del cuerpo es?

En Criminalistica.net se hace referencia a una prueba de campo que ayuda al investigador a identificar si la mancha es de sangre y a conservar intacta la evidencia para entregarla al laboratorio. El producto qumico para la identificacin se conoce como Hemident. El procedimiento a seguir es el siguiente: Utilizar guantes de ltex.

Si la mancha est seca se debe disolver con dos o tres gotas de agua destilada. Se pasa un palillo de algodn sobre la mancha y se inserta en el tubo de ensayo que contiene el
reactivo. Se rompen las ampollas que estn en el fondo del tubo de ensayo y se agita por 20 0 30 segundos. Si la sangre recogida cambia de a un color azul verdoso la prueba resulta positiva.

Tambin se utiliza un visor nocturno. Es una linterna con un filtro especial de luz azul es que capaz de detectar la presencia de sangre, localizar huellas y restos fisiolgicos en la escena de un crimen. (www.segurimagen.com)

Otro producto que utilizan los investigadores forenses para localizar manchas es el Luminol. Es solucin qumica especial, extremadamente sensitiva, que puede detectar sangre que ha sido removida con agua o inclusive con detergentes y clorox. Es un qumico fluorescente que cuando se roca en una sustancia que contiene o puede contener sangre hace que las partculas de hierro se hagan luminosas y fluorescentes. Para efectuar esta prueba los investigadores necesitan completa oscuridad. (Arrascue Nellkhand, Colacci. s.f., Huellas y manchas en la escena del delito)

Para recoger muestras de la sangre del sospechoso, la misma se extrae y se deposita en tubos de ensayo que contienen anticoagulantes. Esto es necesario para compararla con la encontrada en la escena del crimen. Lo anterior es funcin del tcnico del laboratorio. Para procesar las manchas de sangre en el lugar de los hechos, Charles Vanderbosch nos recomienda: 1. Protegerlas 2. Localizarlas (inspeccin ocular)

3. Fotografiarlas cuidadosamente: acercamiento, por secciones, a distancia.

4. Grabar en video y ubicar su posicin en el croquis.

5. Levantarla y embalarla cuidadosamente. 6. La sangre fresca se recoge con un papel absorbente. 7. Objetos pequeos que contengan sangre se llevan al laboratorio. 8. Transportarlas al laboratorio inmediatamente.

El investigador forense debe poder identificar los patrones que establecen las manchas. Estos son el resultado de la transferencia de la sangre lquida, cuando sta entra en contacto con una superficie. El estudio de los patrones incluye:

Localizacin de la mancha y descripcin de los patrones.

Cmo se crearon las manchas Direccin en que viajaron las gotas Origen Objeto utilizado durante el ataque Cantidad de heridas Presencia del sospechoso en la escena Posicin de la vctima, el sospechoso y los objetos durante la comisin del delito.

La secuencia de los eventos (Wikipedia, 2009, Bloodstain Pattern Analisis)

Patrones de sangre Patrn de flujo: Cambio en la figura y direccin de la mancha de sangre debido a la influencia de la gravedad o el movimiento del objeto.

Chorro: es el patrn que resulta del flujo de la sangre que sale del cuerpo a una presin baja, formando un charco de sangre.

Coagulo: masa gelatinosa de tejido sanguneo formada por factores coagulantes en la sangre. Los cogulos detienen el flujo de sangre de una herida. (http://es.mimi.hu/medicina/coagulo_sanguineo.html)

Patrn de goteo sobre sangre: Es el patrn que resulta del gotereo de sangre en sangre.

Lanzamiento: El patrn de la mancha creada cuando la sangre es sacudida o tirada a una superficie u objeto, en movimiento.

Patrn Arterial o de Chorro: El patrn de la mancha que resulta cuando la sangre sale del cuerpo, bajo una presin ejercida, causada por el rompimiento de una arteria.

Manchas circulares: Las manchas o gotas que se encuentran en superficies horizontales son de forma circular, dependiendo de la altura desde donde caen. A mayor altura, el impacto puede ocasionar que se proyecten en forma de estrellas. (Brian Innes, 2000, Bodies of Evidence)

Formas de cadas de manchas circulares (bloodspatter.com)

Caractersticas morfolgicas Las formas y figuras pueden variar en tamao y caractersticas morfolgicas, debido a la cantidad, calidad, origen, dimensin, profundidad y longitud de la lesin. (Montiel)

Huellas que gotean sobre un plano inclinado, sin que la persona tenga movimiento, se presentan ovaladas y alargadas con escurrimientos largos en la parte inferior. Son manchas estticas. (Montiel)

Las huellas que caen en un plano horizontal cuando el movimiento es rpido se presentan en forma de lgrimas, con una sola estra o alargamiento, que indica la direccin del movimiento. Se conocen como manchas dinmicas.

Las manchas producidas por un goteo ininterrumpido sobre un plano horizontal presentan un rastro de sangre en forma de franjas desplazndose estras en los lados, que segn su direccin indican movimiento. (bloodspatter.com)

Categoras Se clasifican en tres grupos: pasiva, proyectadas y transferidas. Pasiva: se crea cuando la fuerza que la produce acta sobre su gravedad. Puede ser un patrn producido por goteo o flujo. (bloodspatter.com)

Proyectadas: la mancha se produce cuando una forma de energa ha sido transferida desde la fuente de origen de la sangre. son creadas cuando sale la sangre expuesta por un objeto en accin o una fuerza mayor que la fuerza de gravedad. El tamao, la figura y el nmero que resultan de la mancha van a depender del tipo de fuerza que se utilice para hacer brotar la sangre. (bloodspatter.com)

 1) Producida por una velocidad de bajo impacto. (bloodspatter.com)

2) Velocidad media: la agresin

3) Impacto de alta velocidad por una fuerza mayor como las armas de fuego. (bloodspatter.com)

Lo anterior no describe la velocidad de las gotas de sangre cuando viajan por el aire. Solo describe la cantidad de energa necesaria crear las manchas. (Bloodstain Pattern Analisis).

Tranferidas: Se produce cuando un objeto con sangre entra en contacto con la superficie de otro que no tiene sangre. (bloodspatter. com)

En el 2005 el FBI public un artculo sobre el Valor de la evidencia en donde recomiendan:

Medir el largo y ancho de una gota de sangre y describir la direccin en que viaj. Anotar la
informacin en el croquis y tomar fotografas. (bloodspatter.com)

Las gotas que caen a alta velocidad se producen por una fuerza extrema mayor de 100 pies por segundos. Pueden medir menos de un milmetro. Pueden ser producidas por armas de fuego o explosivos.

Se considera velocidad media cuando se necesita una fuerza extrema mayor de 5 pies pero menor de 25. Estas manchas miden de 1 a 3 milmetros. Pueden ser producidas por objetos cortantes.

Las manchas creadas por una fuerza menor de 5 pies se catalogan como velocidad menor y se producen debido a la fuerza de gravedad. Pueden medir 3 milmetros o ser ms largas. Son el resultado del movimiento de la vctima o el arma.

Cuando la sangre se dispersa en varias direcciones desde la herida las gotas tienden a esparcirse.
Cuando golpean el suelo son ovaladas. (Bloodstain Pattern Analisis). Una lnea imaginaria a travs de la mancha rastrea el rea de dnde provino. Se dibujan lneas a travs de los patrones de sangre hasta donde la persona estaba parada. Este punto se conoce como convergencia. (Wikipedia, 2009, Bloodstain Pattern Analysis) Para Juventino Montiel es importante que el investigador reconozca que la sangre arterial es de color rojo y una vez lesionada una arteria la sangre se proyecta con fuerza, originando huellas dinmicas. La venosa es de color oscuro, casi no tiene potencia y slo se produce cuando la hemorragia es leve. Otra caracterstica que se debe conocer es que la sangre ante morten se coagula entre 5 a 8 minutos posterior a su salida del cuerpo, lo que nos indica que la vctima no muri inmediatamente. La post morten no se coagula. La forma, direccin y estado de las manchas pueden indicar los movimientos posteriores de la vctima, si existi lucha o forcejeo, si estaba con vida, si fue encontrada o movida de su posicin original. Tambin nos indica que las manchas hmedas en ropas y telas se deben dejar secar antes de embalarlas y no exponerlas nunca al sol o calor. Es difcil que permanezcan en superficies como metales, cristales, porcelana, pisos pulidos, encerados o barnizados porque se escurren. Se encuentran en lugares que ofrecen la mejor superficie para su adherencia: piel, ropa o telas, paredes, madera, muebles, cortinas, pisos de cemento, alfombras, en el bao, cocina, lavabo, pasillos, telfonos y otros lugares que pueden indicar desplazamiento de la vctima o huda del sospechoso. (Juventino Montiel, 2009, Criminalistica Tomo 1) Recoleccin 1. El rastreo es importante as como el examen metdico porque pueden estar visibles o invisibles.

2. Se deben documentar todas las manchas de sangre durante la investigacin preliminar.

3. Los proyectiles pueden contener restos de tejido y sangre. 4. Para recolectar una muestra de la sangre seca, se puede utilizar una navaja de afeitar o bistur. 5. Hay que desinfectarla aunque sea nueva.

6. Se coloca un papel limpio, previamente doblado y pegado con cinta adhesiva, debajo de la mancha, de modo que se reciba la costra al ser raspada. Luego se dobla el papel y se guarda en un sobre sellado.

7. Si la sangre cay en tierra y fue absorbida por sta, se debe recoger una cantidad suficiente para
obtener toda la sangre.

8. Se coloca en un envase de vidrio o plstico, se sella y se anota la informacin necesaria. 9. Esta muestra se tiene que enviar rpidamente al laboratorio para evitar que las bacterias y moho
de la tierra destruyan en valor de la prueba. 10. La ropa de las personas y la de cama, cuando estn hmedas, deben ser envueltas de manera que no pasen a las partes limpias de la prenda. 11. Para evitar la transferencia se puede colocar un trozo de papel limpio entre cada capa de tela. 12. Esta evidencia puede contener tambin pelo, vello pbico, fibras o manchas de semen. (Schiaffino) Semen En los delitos sexuales este fluido corporal es elemento de identificacin humana. Tambin se utiliza para eliminar sospechosos. La ausencia de espermatozoides no descarta que el fluido sea semen porque stos se destruyen con facilidad y el sospechoso puede ser oligozooesprmico (poca cantidad de semen) o azooesprmico (ausencia de espermatozoides). Es el qumico forense el que determina que la mancha es de semen. (Fernando Cardini, 2001, Tcnicas de Investigacin Criminal) Para Juventino Montiel las manchas de semen tambin se pueden encontrar en escenas de delitos no sexuales en donde hubo una masturbacin. Recomendaciones: 1. Semen en tierra se recoge igual que la sangre, la vestimenta y la ropa de cama. 2. Se tiene que ocupar la ropa interior de la vctima y el sospechoso.

3. Si el delito se comete al aire libre, se debe examinar minuciosamente la vegetacin y el suelo. Si

estn sobre la vegetacin, se debe retirar la planta y colocar en un envase rgido, en donde pueda permanecer inmvil para evitar la friccin durante el traslado. 4. Pueden encontrarse tambin en toallas, papel sanitario, pauelos desechables o de algodn, pisos, asientos de auto o inodoros y en el cuerpo de la vctima.

5. Montiel recomienda: a. Buscar manchas visibles e invisibles. Se aprecian por el color blanco semi-transparente y de aspecto grumoso; cuando son frescas el color es ligeramente amarillo y textura endurecida.

b. Una mancha fresca o seca que se observe sobre una superficie puede corroborarse con la aplicacin de luz ultravioleta, presentando un color blanco azuloso fluorescente: Luz de Wood.

c. Cuando la mancha es vieja y ha sido raspada, es posible que se destruyan los espermatozoides. En tal caso se recurre al laboratorio para pruebas qumicas.

Recomendaciones para la recogida y envo de muestras con fines de identificacin Gentica: Grupo Espaol y Portugus de la ISFG, (2000) Este Grupo public unas sugerencias generales para el recogido de fluidos corporales:

 Manchas secas en muestras pequeas y de fcil transporte se introducen por separado en bolsas de
papel o cartn. Evidencia de colillas y chicles se recogen con pinzas. Estos ltimos se guardan en envases de plstico. Los sobres y sellos se introducen en bolsas de papel o plstico, sin despegarlos. Para manchas secas en lugares no transportables o no absorbentes como metal y cristal se recomienda utilizar un hisopo estril ligeramente mojado con agua destilada. Se puede raspar la mancha con una navaja o bistur sobre un papel blanco limpio. Debe ser doblado cuidadosamente y embalado en una bolsa de papel. Para lugares absorbentes como las telas, manteles, alfombras, etc. se recorta la mancha y se guarda en una bolsa de papel. El semen encontrado en la piel se recoge con un hisopo estril.

Siempre es necesario obtener informacin de los hechos, de la vctima y del sospechoso. Semen lquido encontrado en preservativos se atan para que no se derrame su contenido y se introduce en un frasco plstico.

De la boca se pueden hacer dos muestras bucales con hisopos estriles que se pasan con cuidado y
sin frotar mucho por la lengua, encas, los dientes y el paladar.

Saliva

Curiosamente la saliva carece de ADN, pero est en un medio lleno de clulas epiteliales que se desprenden constantemente y que llegan a formar parte de la misma. An as, es el mejor medio para obtener muestras de esta huella gentica. La localizacin de manchas en la escena del crimen es difcil, ya que es mnima la secrecin. Pero en los secuestros o robos, cuando la vctima ha sido amordazada, se produce una mxima salida-expulsin de saliva. En estos hechos delictivos la vctima por la fuerte excitacin que sufre, segrega gran cantidad de saliva, espuma y en ocasiones vestigios sanguinolentos, como consecuencia de ligeras autolesiones debidas al forcejeo para evadirse de la mordaza. (Gaston Passi, 2008, http://unicitcriminalistica.blogspot.com/) Bsqueda y localizacin 1. Sobre las telas las manchas de saliva son blanquecinas o amarillentas. 2. En el suelo da la apariencia de "rastros de caracol", con aspecto de focos brillantes. 3. En el caso de soporte impermeable presenta la forma de pequeas costras-escamas.

4. Son restos pequeos y la mancha aparece como cuarteada. (Gaston Passi, 2008, http://unicitcriminalistica.blogspot.com/)

 5. Recoger con un hisopo hmedo (agua destilada) la mancha en cuestin, dejar secar a temperatura
ambiente y enfundar el hisopo. (www.slagf.org/toma.html) 6. La saliva puede encontrarse en el piso, paredes o ropas. Chicle, hueso de aceituna, boquilla de cigarro pueden contener clulas del epitelio bucal y por tanto ADN.

7. Debido a la existencia de mucosidades, la mancha de saliva observada con la lmpara de Word da

fluorescencia azulada. (Gaston Passi, 2008, http://unicit-criminalistica.blogspot.com/) 8. Tambin puede utilizarse la Luz Forense UltraLite ALS

9. Si la muestra est seca puede rasparse con un instrumento cortante esterilizado. (Procuradura
General de la Repblica Dominicana, 2006, Procedimientos Bsicos de Recoleccin en el Sitio del Suceso) Admisibilidad de fluidos corporales Todas las muestras de fluidos corporales tienen que cumplir con la cadena de evidencia. Esta establece un control sobre las personas que manejan la prueba desde el inicio de la investigacin hasta que se presente en corte. Vanderbosch recomienda tomar las siguientes medidas de seguridad: Limitar el nmero de personas que manejan o entran en contacto con la evidencia. Si la evidencia deja de estar bajo la custodia del investigador:

a. Anote a quien se la entrego. b. Fecha y hora c. Motivo d. Condiciones al ser entregadas e. Cuando y por quien fue devuelta

f. Condiciones al ser recibida g. Documentar el procedimiento con recibos Los fluidos corporales corresponden a caractersticas fsicas del sospechoso. La presentacin en corte es admisible por tratarse de pruebas cientficas cuyas garantas de confiabilidad deben ser corroboradas por el juzgador de los hechos. (Rafael Daz, 1997, Evidencia Criminal para el oficial del orden pblico) El Tribunal Supremo de Puerto Rico ha emitido importantes decisiones judiciales que han limitado la forma de recogido de muestras que luego sern presentadas como piezas de evidencia, debido a que se utilizan para comparar y analizar los fluidos corporales caractersticos de una persona. No constituyen una intromisin irrazonable en contra del derecho a la autoincriminacin. En una sociedad tan compleja como la nuestra, en donde cada da tenemos menos testigos dispuestos a testificar, la evidencia fsica relacionada a los fluidos corporales tiene un valor incalculable. Por eso es tan importante que los investigadores forenses sigan los procedimientos establecidos para garantizar que las muestras levantadas en la escena no se contaminen o destruyan, perdiendo as su valor probatorio. Mientras ms conserven sus caractersticas originales ms fcil y confiable ser el trabajo de los especialistas en Serologa Forense. Se podr lograr la identificacin del sospechoso, la evidencia ser admisible en los tribunales, se lograra la conviccin y castigo del verdadero autor del delito. Son muchos los que desean trabajar como investigadores forenses; pero son pocos los que tienen las cualidades necesarias para seguir los procedimientos establecidos para recolectar y embalar adecuadamente la evidencia de fluidos corporales en la escena del crimen. Se pueden adiestrar yproveerles las herramientas necesarias para realizar un trabajo de excelencia que garantice el cumplimiento de la justicia.

QUMICA FORENSE: QUMICA ANALITICA APLICADA A LA CRIMINOLOGIA La ciencia forense se basa en la aplicacin de los mtodos cientficos a los procesos de la materia que se involucran con un crimen. Existen muchas ramas de la ciencia forense debido a que las ciencias en general tienen alguna aplicacin en los asuntos pblicos y criminales. Algunas de sus principales reas son las siguientes: Qumica Biologa Odontologa Patologa Entomologa Psicologa Antropologa La Qumica Forense es otra alternativa a los muchos caminos que puede seguir un qumico en el mbito de la investigacin, adems de ser una buena opcin a la hora de hacer aportes

significativos a la sociedad, donde su actuar, junto con su alto nivel de conocimiento analtico y su capacidad de manejo instrumental, es de vital importancia para descifrar las evidencias y contribuir a la bsqueda de la verdad. Uno de los principios fundamentales en los cuales se rige la Ciencia Forense y especficamente la Qumica Forense se basa en la premisa de que cuando dos objetos entran en contacto, habr un intercambio entre los dos. Es decir, cada contacto deja un rastro, frase que populariz Edmund Locard, padre de la Criminalstica moderna, provocando as un giro en la metodologa investigativa. Es por esto que el qumico forense rastrea este intercambio entre materiales y trae a la luz lo que es invisible a los ojos. Basndose en sus conocimientos y en las tecnologas desarrolladas, tiene la capacidad de rastrear sustancias o huellas que stas dejan en una escena del crimen. El qumico forense, por lo tanto trabaja con sustancias no-biolgicas, tales como pintura, vidrio o lquidos, Lic. Gabriela Valdebenito Zenteno Departamento de Qumica Inorgnica y Analtica Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacuticas Universidad de Chile Dra. Maria E. Bez Contreras Departamento de Qumica Inorgnica y Analtica Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacuticas Universidad de Chile trazas de plvora provenientes de un disparo, todas muestras que pueden ser muy bien analizadas mediante mtodos analticos apropiados. Otro de los campos en que un qumico forense puede desarrollarse es en Toxicologa donde principalmente trata con muestras biolgicas, orina, pelo, sangre, semen, saliva o contenido gstrico y as poder determinar por ejemplo el nivel de alcohol o drogas que una persona ha consumido. Entender la evidencia requiere de herramientas provenientes de muchas disciplinas como la Qumica Analtica, la Biologa, Ciencias de los Materiales y Gentica. De hecho, el anlisis de ADN est haciendo que el conocimiento en gentica sea de mucha importancia. Con el paso del tiempo la Qumica Analtica ha adquirido una gran importancia en la investigacin criminal, sobre todo a la hora de conocer la naturaleza intrnseca de cualquier sustancia o elemento y ms an, cuando sirve para auxiliar en la investigacin cientfica de los delitos. Por lo tanto los qumicos forenses tienes tres tareas principales: primero, analizar las evidencias en el laboratorio, luego, se interpreta la informacin que se saca de ellas y por ltimo, se puede llegar a defender lo encontrado, mediante la testificacin del qumico forense en un juicio. Aplicaciones La Qumica Forense es aplicada en una gran variedad de tcnicas, tanto cualitativas como cuantitativas, cuya principal finalidad es la bsqueda de respuestas provenientes de las diferentes evidencias que ayuden a la resolucin de algn caso criminal. Algunos de estos anlisis se detallan a continuacin: Test de drogas En la actualidad se busca presencia o ausencia de drogas, ya sea en polvos, lquidos, tabletas o cpsulas. Son pruebas cualitativas de laboratorio que se hacen uniendo un antgeno y su anticuerpo homlogo, para identificar y calificar el antgeno y anticuerpo especficos de una muestra; a stos se les denomina inmunoensayos. El mtodo consiste en el uso de una mezcla de anticuerpos selectivos para las distintas drogas (principios activos) y sus metabolitos, obteniendo un resultado con un alto grado de sensibilidad. Anlisis de muestras de incendios La manera en que un incendio ocurre naturalmente en una habitacin indica si su comienzo fue deliberado o no, pero la evidencia es difcil de encontrar en estos casos ya que generalmente est cubierta por escombros. Habitualmente los incendios son provocados por el uso de acelerantes de la combustin, los cuales son examinados mediante Cromatografa Gaseosa, acoplada a Espectrometra de Masas, donde se pueden identificar aquellos residuos de lquidos de ignicin presentes en las muestras de escombros. El qumico

forense debe concentrar la pequea cantidad de muestra, mediante la adsorcin del residuo de acelerante en tiras de carbn activado. Luego este concentrado es eluido desde el carbn activado disolvindolo en un solvente adecuado, dejando la muestra de una forma apropiada para luego analizarla por medio de cromatografa. Anlisis de pisadas Los ensayos fisicoqumicos sirven en el caso de estudiar las huellas de pisadas dejadas en una escena del crimen para luego compararlas con las obtenidas desde el calzado de algn sospechoso. Mediante un procedimiento electroesttico, se obtiene la muestra final sobre una matriz gelatinosa la cual contiene una capa de adhesivo que permite levantar las huellas de casi la gran mayora de las superficies, incluyendo materiales porosos o carbnicos. Este procedimiento tambin puede ser usado cuando la pisada no pueda ser vista (por ejemplo en el caso de que el sospechoso se haya parado sobre una hoja de diario), ya que el polvo proveniente de la hoja de diario mostrar la impresin de la forma nica de la pisada, o incluso la marca de calzado que el individuo us. Anlisis de rastros de pintura. El rastro de pintura que queda en un accidente de auto donde el culpable huye en su vehculo, sirve para relacionarla con el vehculo sospechoso. De esta manera se puede obtener datos sobre la manufactura del vehculo y el ao en el que fue fabricado. Este tipo de prueba puede ser realizada observando el espectro de absorcin de la muestra de pintura u observando su composicin en un Fluormetro Uso del agua fuerte (cido ntrico - agua). Cada arma de fuego tiene grabado un nmero de serial nico, el cual en algunos casos criminales son borrados o lijados para impedir el rastreo e identificacin del tipo de arma y a que fabricante pertenece. Mediante el uso de la restauracin qumica, en este caso el uso de agua fuerte, estos nmeros pueden volver a ser legibles nuevamente. Anlisis de residuos de disparo y balas Los residuos de las descargas de armas de fuego es otra rea de investigacin. Estos residuos pueden ser encontrados en las manos o en la ropa de algn sospechoso. Los qumicos forenses pueden encontrar la clasificacin del arma y relacionarla con el tipo de bala encontrado en una escena del crimen. Cuando un arma de fuego es disparada, se generan gases que contienen componentes incinerados y no incinerados provenientes de los casquillos de la bala y del propulsor del arma. Este material se puede depositar en la ropa de la vctima o en las manos de la persona que dispar el arma, pasando a ser un residuo. Mediante el uso de un Microscopio de Barrido Electrnico acoplado con un Espectrmetro de Energa Dispersiva, se pueden examinar las muestras recolectadas de los posibles sospechosos. Este instrumento es capaz de buscar en cientos de lugares microscpicos la presencia de pequeas partculas del residuo. Falsificacin de documentos. Usando un aparato de deteccin electroesttico se pueden identificar las diferentes hendiduras de la escritura en el caso de firmas falsas o alteracin de documentos. En este caso al aplicar una descarga electroesttica sobre la superficie del papel, causar diferentes patrones en los lugares donde estn las hendiduras provocadas por la escritura. Al aplicar una carga opuesta, una tinta negra se adherir en los lugares de las hendiduras. Anlisis cualitativo en caso de envenenamiento. En este caso se determina la molcula individual que est presente en la muestra. Con el tiempo se ha podido recolectar mucha informacin acerca de este tipo de sustancias, su composicin, que tipo de drogas son etc. Este tipo de test se realiza generalmente por fotometra, aun cuando existen test qumicos especficos para algunas sustancias. Cuando se trata de sustancias naturales venenosas, son ms difciles de identificar. Aun si la especie es identificada correctamente, existen variaciones en la cantidad de sustancia activa presente, por lo que se deben llevar a cabo estudios sobre la composicin molecular y as confirmar la presencia de sustancias nocivas. Bsqueda de huellas dactilares. La tcnica ms popular usada para revelar huellas dactilares es la que usa polvo de carbn activado finamente tamizado. La mayora de los dedos de las personas son de composicin grasosa y oleosa. Cuando stos entran en contacto con cualquier superficie o material

relativamente suave, la friccin suelta los aceites provenientes de las ranuras de la huella. Cuando el polvo es aplicado a la superficie, se pega a estos aceites y revela el patrn de la huella. Esta tcnica es muy usada en muestras de lana, metales, vidrio o plstico. En el caso de que la huella digital est sobre una superficie muy colorida, se usa polvo fluorescente. Cuando la superficie es expuesta a la luz ultravioleta, el polvo brillar mostrando la huella digital, sin importar el color de fondo en que se encuentre. En materiales porosos, tales como el cuero, superficies de madera o papel, la tcnica preferida es el uso de polvo magntico, compuesto de partculas de hierro finamente divididas las cuales son suspendidas en la superficie mediante el uso de una barra magntica. Deteccin de manchas de sangre. Todos los test usados en la deteccin de sangre se basan principalmente en la actividad de las enzimas peroxidasas presentes en la sangre, las cuales reaccionan con los agentes qumicos causando un cambio de color. Algunas de las pruebas usadas son: el test de benzidina, de leucomalaquita verde, fenolftaleina o tetrametil benzidina. Pero uno de los ms famosos es el uso del Luminol, que se utiliza en qumica forense para detectar trazas de sangre. ste compuesto es un derivado del cido ftlico que cataliza la oxidacin con perxido de hidrgeno bajo emisin de luz, es decir su mayor importancia reside en la reaccin de qumioluminiscencia que da con perxidos en presencia de complejos de hierro como catalizador. Anlisis de muestras biolgicas (orina, sangre o contenido gstrico) y pelo. Las muestras biolgicas usadas entregan informacin acerca de la presencia de algn txico en particular, o de sus metabolitos en el organismo. Se debe tomar en cuenta los tiempos de vida media de los txicos, el volumen de distribucin y su afinidad por los distintos tejidos. Las muestras principales en este tipo de anlisis, son la sangre, el plasma o el suero, ya que stas distribuyen las sustancias por todo el cuerpo. En los casos de las intoxicaciones o muertes por envenenamiento, se eligen las muestras de contenido gstrico ya que pueden contener restos de comprimidos o lquidos que pueden orientar la investigacin. En los rganos, como el rin y el hgado y en la bilis, procedentes de las autopsias, se pueden encontrar grandes concentraciones de txicos. Tambin en el tejido cerebral, el cual aporta informacin en la deteccin de sustancias psicoactivas que acten en el sistema nervioso central. Para el caso en que se investigue el consumo reciente de drogas en individuos vivos, la muestras de orina son importantes ya que en ella se excretan los principios activos y/o sus metabolitos de la sustancia txica. El consumo crnico, en cambio, es principalmente analizado en muestras de pelo ya que stas proveen una especie de calendario de consumo debido a que la sustancia txica no se metaboliza en el pelo. Papel de las Tcnicas Analticas. Es importante destacar el papel fundamental que cumple la analtica instrumental dentro de las tcnicas mencionadas anteriormente, ya que gracias a los avances instrumentales hechos por cientficos forenses es posible llegar a resultados certeros, tan necesarios a la hora de defender las metodologas y los resultados obtenidos ante la ley. Por esta razn es cada vez ms importante contar con instrumentos ms sensibles capaces de llegar a lmites de deteccin ms pequeos, mediante el uso de cantidades mnimas de muestra y tcnicas analticas acopladas, para poder determinar la presencia de sustancias donde en un pasado cercano se crea que no existan. Hoy en da, el desarrollo de la analtica instrumental est fuertemente orientado a la investigacin de campo, donde los cientficos se han volcado a la implementacin de laboratorios mviles, que se caracterizan por el uso de equipos porttiles tiles a la hora de trabajar con sustancias inestables, perecibles o demasiado txicas como para llevarlas al laboratorio. Un ejemplo de este tipo de equipo es el Cromatgrafo porttil de Gases acoplado a Espectrmetro de Masas (GC-MS), donde se ha reducido el tamao del equipo convencional de 114 kilogramos a uno de 28 kilogramos. Sin la base qumica necesaria, muchas de las tcnicas mencionadas no podran ser aplicadas a las Ciencias Forenses, por lo tanto es importante que el desarrollo de la Qumica Analtica siga avanzando y aportando a la investigacin criminal. En nuestro pas, la introduccin de la Reforma Procesal Penal al nuevo sistema de justicia,

hace necesaria la formacin de una polica cientfica o de instituciones forenses capaces de dar respuestas rpidas en la interpretacin de las evidencias, capaces de crear nuevas tcnicas analticas apropiadas a nuestra realidad nacional y, sobre todo, capaces de generar profesionales dedicados ciento por ciento a la ciencia de la investigacin criminal. Si bien la Ciencia Forense, y en especial la Qumica Forense, en nuestro pas an es una ciencia incipiente entregada principalmente a las instituciones policacas y al Servicio Medico Legal, es posible vislumbrar un futuro auspicioso de la investigacin forense en las universidades, abriendo caminos a nuevos investigadores ansiosos por expandir los lmites de la Qumica hacia una ciencia que es pilar fundamental de la criminologa y un eslabn muy importante al momento de administrar justicia y buscar la verdad. Referencias Manual de Qumica Forense. Patricia M. Caro. Ediciones la Roca. Buenos Aires, Argentina. 2004 Web del laboratorio Lawrence Livermore Nacional, Forensic Science Center. San Francisco, USA Handbook of Forensic Services 2003. Manual de Laboratorio Forense del FBI. QUMICA FORENSE: QUMICA ANALITICA APLICADA A LA CRIMINOLOGIA La ciencia forense se basa en la aplicacin de los mtodos cientficos a los procesos de la materia que se involucran con un crimen. Existen muchas ramas de la ciencia forense debido a que las ciencias en general tienen alguna aplicacin en los asuntos pblicos y criminales. Algunas de sus principales reas son las siguientes: Qumica Biologa Odontologa Patologa Entomologa Psicologa Antropologa La Qumica Forense es otra alternativa a los muchos caminos que puede seguir un qumico en el mbito de la investigacin, adems de ser una buena opcin a la hora de hacer aportes significativos a la sociedad, donde su actuar, junto con su alto nivel de conocimiento analtico y su capacidad de manejo instrumental, es de vital importancia para descifrar las evidencias y contribuir a la bsqueda de la verdad. Uno de los principios fundamentales en los cuales se rige la Ciencia Forense y especficamente la Qumica Forense se basa en la premisa de que cuando dos objetos entran en contacto, habr un intercambio entre los dos. Es decir, cada contacto deja un rastro, frase que populariz Edmund Locard, padre de la Criminalstica moderna, provocando as un giro en la metodologa investigativa. Es por esto que el qumico forense rastrea este intercambio entre materiales y trae a la luz lo que es invisible a los ojos. Basndose en sus conocimientos y en las tecnologas desarrolladas, tiene la capacidad de rastrear sustancias o huellas que stas dejan en una escena del crimen. El qumico forense, por lo tanto trabaja con sustancias no-biolgicas, tales como pintura, vidrio o lquidos, Lic. Gabriela Valdebenito Zenteno Departamento de Qumica Inorgnica y Analtica Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacuticas Universidad de Chile Dra. Maria E. Bez Contreras Departamento de Qumica Inorgnica y Analtica Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacuticas Universidad de Chile trazas de plvora provenientes de un disparo, todas muestras que pueden ser muy bien analizadas mediante mtodos analticos apropiados. Otro de los campos en que un qumico forense puede desarrollarse es en Toxicologa donde principalmente trata con muestras biolgicas, orina, pelo, sangre, semen, saliva o contenido

gstrico y as poder determinar por ejemplo el nivel de alcohol o drogas que una persona ha consumido. Entender la evidencia requiere de herramientas provenientes de muchas disciplinas como la Qumica Analtica, la Biologa, Ciencias de los Materiales y Gentica. De hecho, el anlisis de ADN est haciendo que el conocimiento en gentica sea de mucha importancia. Con el paso del tiempo la Qumica Analtica ha adquirido una gran importancia en la investigacin criminal, sobre todo a la hora de conocer la naturaleza intrnseca de cualquier sustancia o elemento y ms an, cuando sirve para auxiliar en la investigacin cientfica de los delitos. Por lo tanto los qumicos forenses tienes tres tareas principales: primero, analizar las evidencias en el laboratorio, luego, se interpreta la informacin que se saca de ellas y por ltimo, se puede llegar a defender lo encontrado, mediante la testificacin del qumico forense en un juicio. Aplicaciones La Qumica Forense es aplicada en una gran variedad de tcnicas, tanto cualitativas como cuantitativas, cuya principal finalidad es la bsqueda de respuestas provenientes de las diferentes evidencias que ayuden a la resolucin de algn caso criminal. Algunos de estos anlisis se detallan a continuacin: Test de drogas En la actualidad se busca presencia o ausencia de drogas, ya sea en polvos, lquidos, tabletas o cpsulas. Son pruebas cualitativas de laboratorio que se hacen uniendo un antgeno y su anticuerpo homlogo, para identificar y calificar el antgeno y anticuerpo especficos de una muestra; a stos se les denomina inmunoensayos. El mtodo consiste en el uso de una mezcla de anticuerpos selectivos para las distintas drogas (principios activos) y sus metabolitos, obteniendo un resultado con un alto grado de sensibilidad. Anlisis de muestras de incendios La manera en que un incendio ocurre naturalmente en una habitacin indica si su comienzo fue deliberado o no, pero la evidencia es difcil de encontrar en estos casos ya que generalmente est cubierta por escombros. Habitualmente los incendios son provocados por el uso de acelerantes de la combustin, los cuales son examinados mediante Cromatografa Gaseosa, acoplada a Espectrometra de Masas, donde se pueden identificar aquellos residuos de lquidos de ignicin presentes en las muestras de escombros. El qumico forense debe concentrar la pequea cantidad de muestra, mediante la adsorcin del residuo de acelerante en tiras de carbn activado. Luego este concentrado es eluido desde el carbn activado disolvindolo en un solvente adecuado, dejando la muestra de una forma apropiada para luego analizarla por medio de cromatografa. Anlisis de pisadas Los ensayos fisicoqumicos sirven en el caso de estudiar las huellas de pisadas dejadas en una escena del crimen para luego compararlas con las obtenidas desde el calzado de algn sospechoso. Mediante un procedimiento electroesttico, se obtiene la muestra final sobre una matriz gelatinosa la cual contiene una capa de adhesivo que permite levantar las huellas de casi la gran mayora de las superficies, incluyendo materiales porosos o carbnicos. Este procedimiento tambin puede ser usado cuando la pisada no pueda ser vista (por ejemplo en el caso de que el sospechoso se haya parado sobre una hoja de diario), ya que el polvo proveniente de la hoja de diario mostrar la impresin de la forma nica de la pisada, o incluso la marca de calzado que el individuo us. Anlisis de rastros de pintura. El rastro de pintura que queda en un accidente de auto donde el culpable huye en su vehculo, sirve para relacionarla con el vehculo sospechoso. De esta manera se puede obtener datos sobre la manufactura del vehculo y el ao en el que fue fabricado. Este tipo de prueba puede ser realizada observando el espectro de absorcin de la muestra de pintura u observando su composicin en un Fluormetro Uso del agua fuerte (cido ntrico - agua). Cada arma de fuego tiene grabado un nmero de serial nico, el cual en algunos casos criminales son borrados o lijados para impedir el rastreo e identificacin del tipo de arma y a que fabricante pertenece. Mediante el uso de la restauracin qumica, en este caso el uso

de agua fuerte, estos nmeros pueden volver a ser legibles nuevamente. Anlisis de residuos de disparo y balas Los residuos de las descargas de armas de fuego es otra rea de investigacin. Estos residuos pueden ser encontrados en las manos o en la ropa de algn sospechoso. Los qumicos forenses pueden encontrar la clasificacin del arma y relacionarla con el tipo de bala encontrado en una escena del crimen. Cuando un arma de fuego es disparada, se generan gases que contienen componentes incinerados y no incinerados provenientes de los casquillos de la bala y del propulsor del arma. Este material se puede depositar en la ropa de la vctima o en las manos de la persona que dispar el arma, pasando a ser un residuo. Mediante el uso de un Microscopio de Barrido Electrnico acoplado con un Espectrmetro de Energa Dispersiva, se pueden examinar las muestras recolectadas de los posibles sospechosos. Este instrumento es capaz de buscar en cientos de lugares microscpicos la presencia de pequeas partculas del residuo. Falsificacin de documentos. Usando un aparato de deteccin electroesttico se pueden identificar las diferentes hendiduras de la escritura en el caso de firmas falsas o alteracin de documentos. En este caso al aplicar una descarga electroesttica sobre la superficie del papel, causar diferentes patrones en los lugares donde estn las hendiduras provocadas por la escritura. Al aplicar una carga opuesta, una tinta negra se adherir en los lugares de las hendiduras. Anlisis cualitativo en caso de envenenamiento. En este caso se determina la molcula individual que est presente en la muestra. Con el tiempo se ha podido recolectar mucha informacin acerca de este tipo de sustancias, su composicin, que tipo de drogas son etc. Este tipo de test se realiza generalmente por fotometra, aun cuando existen test qumicos especficos para algunas sustancias. Cuando se trata de sustancias naturales venenosas, son ms difciles de identificar. Aun si la especie es identificada correctamente, existen variaciones en la cantidad de sustancia activa presente, por lo que se deben llevar a cabo estudios sobre la composicin molecular y as confirmar la presencia de sustancias nocivas. Bsqueda de huellas dactilares. La tcnica ms popular usada para revelar huellas dactilares es la que usa polvo de carbn activado finamente tamizado. La mayora de los dedos de las personas son de composicin grasosa y oleosa. Cuando stos entran en contacto con cualquier superficie o material relativamente suave, la friccin suelta los aceites provenientes de las ranuras de la huella. Cuando el polvo es aplicado a la superficie, se pega a estos aceites y revela el patrn de la huella. Esta tcnica es muy usada en muestras de lana, metales, vidrio o plstico. En el caso de que la huella digital est sobre una superficie muy colorida, se usa polvo fluorescente. Cuando la superficie es expuesta a la luz ultravioleta, el polvo brillar mostrando la huella digital, sin importar el color de fondo en que se encuentre. En materiales porosos, tales como el cuero, superficies de madera o papel, la tcnica preferida es el uso de polvo magntico, compuesto de partculas de hierro finamente divididas las cuales son suspendidas en la superficie mediante el uso de una barra magntica. Deteccin de manchas de sangre. Todos los test usados en la deteccin de sangre se basan principalmente en la actividad de las enzimas peroxidasas presentes en la sangre, las cuales reaccionan con los agentes qumicos causando un cambio de color. Algunas de las pruebas usadas son: el test de benzidina, de leucomalaquita verde, fenolftaleina o tetrametil benzidina. Pero uno de los ms famosos es el uso del Luminol, que se utiliza en qumica forense para detectar trazas de sangre. ste compuesto es un derivado del cido ftlico que cataliza la oxidacin con perxido de hidrgeno bajo emisin de luz, es decir su mayor importancia reside en la reaccin de qumioluminiscencia que da con perxidos en presencia de complejos de hierro como catalizador. Anlisis de muestras biolgicas (orina, sangre o contenido gstrico) y pelo. Las muestras biolgicas usadas entregan informacin acerca de la presencia de algn txico en particular, o de sus metabolitos en el organismo. Se debe tomar en cuenta los tiempos de vida media de los txicos, el volumen de distribucin y su afinidad por los distintos

tejidos. Las muestras principales en este tipo de anlisis, son la sangre, el plasma o el suero, ya que stas distribuyen las sustancias por todo el cuerpo. En los casos de las intoxicaciones o muertes por envenenamiento, se eligen las muestras de contenido gstrico ya que pueden contener restos de comprimidos o lquidos que pueden orientar la investigacin. En los rganos, como el rin y el hgado y en la bilis, procedentes de las autopsias, se pueden encontrar grandes concentraciones de txicos. Tambin en el tejido cerebral, el cual aporta informacin en la deteccin de sustancias psicoactivas que acten en el sistema nervioso central. Para el caso en que se investigue el consumo reciente de drogas en individuos vivos, la muestras de orina son importantes ya que en ella se excretan los principios activos y/o sus metabolitos de la sustancia txica. El consumo crnico, en cambio, es principalmente analizado en muestras de pelo ya que stas proveen una especie de calendario de consumo debido a que la sustancia txica no se metaboliza en el pelo. Papel de las Tcnicas Analticas. Es importante destacar el papel fundamental que cumple la analtica instrumental dentro de las tcnicas mencionadas anteriormente, ya que gracias a los avances instrumentales hechos por cientficos forenses es posible llegar a resultados certeros, tan necesarios a la hora de defender las metodologas y los resultados obtenidos ante la ley. Por esta razn es cada vez ms importante contar con instrumentos ms sensibles capaces de llegar a lmites de deteccin ms pequeos, mediante el uso de cantidades mnimas de muestra y tcnicas analticas acopladas, para poder determinar la presencia de sustancias donde en un pasado cercano se crea que no existan. Hoy en da, el desarrollo de la analtica instrumental est fuertemente orientado a la investigacin de campo, donde los cientficos se han volcado a la implementacin de laboratorios mviles, que se caracterizan por el uso de equipos porttiles tiles a la hora de trabajar con sustancias inestables, perecibles o demasiado txicas como para llevarlas al laboratorio. Un ejemplo de este tipo de equipo es el Cromatgrafo porttil de Gases acoplado a Espectrmetro de Masas (GC-MS), donde se ha reducido el tamao del equipo convencional de 114 kilogramos a uno de 28 kilogramos. Sin la base qumica necesaria, muchas de las tcnicas mencionadas no podran ser aplicadas a las Ciencias Forenses, por lo tanto es importante que el desarrollo de la Qumica Analtica siga avanzando y aportando a la investigacin criminal. En nuestro pas, la introduccin de la Reforma Procesal Penal al nuevo sistema de justicia, hace necesaria la formacin de una polica cientfica o de instituciones forenses capaces de dar respuestas rpidas en la interpretacin de las evidencias, capaces de crear nuevas tcnicas analticas apropiadas a nuestra realidad nacional y, sobre todo, capaces de generar profesionales dedicados ciento por ciento a la ciencia de la investigacin criminal. Si bien la Ciencia Forense, y en especial la Qumica Forense, en nuestro pas an es una ciencia incipiente entregada principalmente a las instituciones policacas y al Servicio Medico Legal, es posible vislumbrar un futuro auspicioso de la investigacin forense en las universidades, abriendo caminos a nuevos investigadores ansiosos por expandir los lmites de la Qumica hacia una ciencia que es pilar fundamental de la criminologa y un eslabn muy importante al momento de administrar justicia y buscar la verdad. Referencias Manual de Qumica Forense. Patricia M. Caro. Ediciones la Roca. Buenos Aires, Argentina. 2004 Web del laboratorio Lawrence Livermore Nacional, Forensic Science Center. San Francisco, USA Handbook of Forensic Services 2003. Manual de Laboratorio Forense del FBI. La qumica es la rama de las ciencias naturales que se encarga de estudiar los elementos as como sus interacciones las transformaciones y la energa. Si bien esto es la qumica en general la qumica forense es la rama de la qumica que se encarga de clasificar y dosificar todos aquellos indicios relacionados con un presunto hecho delictivo.

Obviamente se presentan diversas areas de investigacin como son hematologa , sexologa, toxicologa etc. La hematologa es el estudio de la sangre que es el nico tejido lquido en el ser humano y esta compuesta de dos fracciones, la liquida y la solida, la primera conformada por agua, protenas, lpidos, carbohidratos y sales minerales. La segunda compuesta por clulas que se pueden dividir en tres series a saber, roja, blanca y plaquetas. La serie roja esta compuesta por los eritrocitos que en su forma madura carecen de ncleo, tienen la funcin de trasportar el oxgeno y en su superficie se encuentran los antgenos que configuran el grupo sanguneo , por tener la hemoglobina reaccionan con la peroxidasa permitindonos identificar la sangre. La serie blanca esta conformada por varios tipos de clulas cuya funcin esta ligada a la respuesta del organismo a la infeccin por lo cual poseen muchos anticuerpos y tienen la caracterstica de ser nucleadas motivo por el cual se pueden utilizar para extraer Acido dexosi ribonucleico a diferencia de los eritrocitos que no nos sirven para esta funcin. Por ltimo las plaquetas son clulas encargadas de proporcionar la hemostasia o sea la reparacin del dao al organismo a travs de la coagulacin y formacin de un coagulo que sella las heridas. En la figura 1 se observa la composicin de la sangre con los porcentajes aproximados de cada componente y las principales clulas.

La hematologa es el estudio de la sangre la cual puede analizarse desde el punto de vista fsico, bioqumico e inmunolgico. Desde el punto de vista fsico podemos describir la sangre por sus caractersticas como son color, forma de escurrimiento, absorcin, y adsorcin caractersticas de las manchas. Esto da al criminalista mucha informacin puesto que puede saber si el individuo sigui vivo hacia donde camino, si el cadver fue movido o no.

Para tal fin se basa en los diferentes tipos de manchas que pueden ser producidas por goteo que puede ser esttico con manchas casi circulares o bien dinmico que por el movimiento las manchas van adquiriendo la forma de una raqueta. Por escurrimiento que generalmente son manchas lineales. Por proyeccin cuando se rompe una cavidad o se secciona un gran vaso y se caracterizan porque el latido del mismo produce sangrado y expulsin de un chorro de sangre. Las manchas de apoyo o contacto se producen al macularse el sujeto con sangre y tocar objetos y paredes dejando en las mismas impresiones que asemejan sus manos. Las manchas de arrastramiento se producen al movilizar un cuerpo y nos informan la direccin en la que fue desplazado . El lago hemtico se caracteriza por ser una mancha de sangre uniforme que se produce al quedar mucho tiempo el sangrado por lo que se produce una mancha irregular de grandes dimensiones. En cuanto a el aspecto bioqumico tenemos que recurrir a las reacciones enzimticas de la sangre [1]que reacciona especficamente con la peroxidasa. Basndonos en esta reaccin podemos realizar pruebas de orientacin de dos maneras por un lado con las leucobases como la fenoftaleina y el verde malaquita[2]as como la quimioluminicencia que al usar el luminol y la fluroceina nos permite revelar rastros de sangre. En cuanto a el aspecto inmunolgico nos basamos en reacciones especificas antgeno anticuerpo . lo que nos permite identificar por un lado si la sangre encontrada es humana o no y por otro lado el tipo sanguneo que ayuda al criminalista a incluir o excluir a un sujeto dentro de una investigacin. Para obtener anticuerpos necesitamos inyectar a un animal de experimentacin una pequea dosis de sangre para posteriormente sangrar al animal y al centrifugar extraer los anticuerpos especficos.

El criminalista ante el hallazgo de sangre tiene que hacerse 4 preguntas fundamentales que son: Es realmente sangre? Es humana o animal? A que grupo pertenece? De quien es?. Con respecto a la primera pregunta todas las sangres reaccionan ante la peroxidasa por lo cual con tener una reaccin positiva a esta podemos decir si es sangre o algn otro liquido de coloracin roja.

Con respecto a la segunda pregunta tenemos que basarnos en las precipitinas que son anticuerpos especficos , en el caso del criminalista solo le interesa si es humana o de otro animal puesto que pudieran tericamente hacerse reacciones para identificar la especie pero eso no le interesa al criminalista. El tipo sanguneo esta basado en que en los eritrocitos poseemos antgenos de superficie que sirven como un marcador gentico y se pueden identificar por reacciones de aglutinacin.

La existencia de estos grupos sanguneos en la practica clnica puede presentar problemas graves cuando por equivocacin se pone un tipo de sangre no compatible con el paciente puede llegar a ser tan violenta la reaccin que puede desencadenar desde una hemolisis o destruccin de la sangre hasta un shock anafilctico. Se han descubierto cerca de 15 sistemas diferentes como el Dufyy Diego MN pero en la practica clnica solo se observan dos sismas principales el ABO y el RH. De manera que se puede clasificar a la gente en 8 grupos diferentes. El sistema ABO se hereda siguiendo tres reglas que son A y b son dominantes sobre O los genes estn cifrados por dos alelos y pueden ser homocigotos o heterocigotos de tal manera que pueden ser puros o mezclados siendo los fenotipos A,A B,B y O,O homocigotos mientras que los A,O B,O y A,B heterocigotos.

Otro tpico muy importante dentro de la qumica forense son las armas de fuego dentro de lo que tenemos que estudiar como parte importante el cartucho de las mismas formado por 4 partes a saber casquillo, capsul carga de detonacin y bala o ojiva. El casquillo es una pieza metlica que contiene todos los elementos del cartucho y que generalmente es de latn, acero y aluminio aunque para las escopetas puede ser de plstico. El capsul o fulminante est compuesto por un explosivo muy sensible a los golpes al calor y a la friccin que est destinado a iniciar los fenmenos de la balstica interna al recibir el impacto del percutor. La carga de proyeccin desde los inicios de las armas de fuego estaba formada por la plvora negra, aunque en la actualidad con mayor frecuencia se encuentran en la actualidad la plvora blanca de doble o blancas que contienen una mezcla de nitrocelulosa, nitroglicerina y acetona. Tiene como funcin producir una gran cantidad de gases que producen que el proyectil sea impulsado a gran velocidad y a una distancia considerable. La bala u ojiva es un cuerpo slido que se convierte en proyectil al ser disparada del arma de fuego y puede clasificarse por el nmero de elementos en un solo elemento cuando esta formada por un solo ncleo de plomo, de dos elementos cuando contienen adems una mezcla de antimonio y por ltimo de tres elementos cuando hay una camisa de zinc.

Una de las cuestiones ms importantes dentro de la qumica forense es saber si un persona realizo un disparo recientemente o no.

Esta cuestin es facl de contestar a travs de nuestro conocimiento que en el momento del disparo se forman dos conos con gases que van a arrastrar una gran cantidad de elementos, el anterior que va a llevar la bala junto con residuos de plvora y suciedad del canon que en el momento de hacer impacto con el cuerpo a distancias menores de 70 centmetros forman el tatuaje y el anillo de enugamiento. Por otro lado se forma el cono posterior que sobre todo cuando se trata de revlveres dejan una gran cantidad de residuos que se pueden identificar en la mano del autor de un disparo.

En qumica es muy fcil hacer pruebas para demostrar estos residuos en la mano del presunto culpable de disparar un arma de fuego en donde podemos encontrar niveles elevados de tres elemento qumicos que son. el plomo, el bario y el antimonio que son los restos del fulminante. Para lo cual debemos tomar con una tela limpia para cada parte[3]teniendo cuidado de usar guantes y cambiarnos en cada toma para evitar la contaminacin y embalar cada muestra por separado bajo cadena de custodia para evitar alteraciones de la evidencia.

COMPARACIN DE DOS MTODOS PARA DETECTAR ESPERMA Toulouse Cedes, Francia Existen dos mtodos bioqumicos para probar la presencia de semen en muestras biolgicas de mujeres que sufrieron ataques sexuales. La tcnica que mide la actividad de la fosfatasa cida es ms fehaciente que la que detecta la presencia de zinc. Generalmente no existen testigos de las violaciones, por lo que la identificacin de semen juega un papel crucial para confirmar los dichos de las vctimas. El examen mdico permite recolectar evidencia fsica y muestras biolgicas para confirmar la presencia

de esperma y condenar al violador. El hallazgo de espermatozoides es el criterio utilizado actualmente para aseverar el antecedente de relaciones sexuales. Dicha evidencia biolgica es aceptada por los equipos mdicos forenses, para quienes la citologa es el estndar de oro, y por las autoridades judiciales. Existe una amplia variedad de mtodos alternativos que ayudan al forense a pesquisar la presencia de esperma en una muestra. Cientficos franceses compararon los dos mtodos ms simples con el fin de determinar cul de ellos es el mejor en relacin con la citologa. Fueron estudiadas 174 mujeres atendidas en un centro de infertilidad masculina de Toulouse, con una edad media de 30 aos. A ellas se les realiz un cuestionario mediante el cual se determin exactamente la fecha de su ltima relacin sexual. Luego se tomaron muestras del contenido vaginal. Todos los extendidos fueron examinados mediante citologa, la cual fue elegida como prueba de referencia para confirmar la presencia de semen. La tcnica que mide la actividad de la fosfatasa cida result ser notablemente ms efectiva que la que identifica cinc para la deteccin de esperma. El primer mtodo es el ms sencillo y varios trabajos han evaluado su utilizacin. Sin embargo, su uso en medicina forense es limitado debido a la corta vida media de la protena. El intervalo ms prolongado entre la ltima relacin sexual y la toma de la muestra que permiti la deteccin de esperma mediante la fosfatasa cida fue de 106 horas. Los autores se valieron de tiras de papel disponibles comercialmente para llevar a cabo la tcnica enzimtica. El material del extendido cervical es puesto en contacto directamente con la cintilla y el tcnico registra el cambio de color inmediatamente. Generalmente la actividad de la fosfatasa cida dura 48 horas. Esta prueba tiene una buena sensibilidad y especificidad. El dato estadstico ms importante es que tiene un valor predictivo negativo de 98%. Por lo tanto, es valioso para pesquisar y no como confirmacin. Algunas de las muestras positivas para la fosfatasa cida con citologa negativa correspondieron a hombres con azoospermia u oligospermia. Este descubrimiento promueve dudas sobre si la prueba de la fosfatasa cida no es ms sensible que la citologa en dichos casos. La tcnica del cinc, por el contrario, puede ser efectuada sin lmites de tiempo. Para descubrir su presencia se utiliz el reactivo mejorado de Hooft. El cambio en la coloracin tambin es ledo en forma inmediata por el personal de laboratorio. Lamentablemente los resultados obtenidos por esta prueba fueron decepcionantes. Una muestra positiva para el cinc tiene apenas 50% de posibilidades de contener semen. El valor predictivo positivo es de 49% y su valor predictivo negativo es demasiado bajo para un estudio de tamizaje (84%). Hay otros exmenes que deben ser estudiados con mayor detenimiento para estimar su utilidad prctica. La medicin de la colina libre es uno de ellos, aunque sta es rpidamente degradada en el ambiente de la vagina (antes de las 24 horas). Tambin existen mtodos inmunolgicos altamente especializados que pueden detectar sustancias especficas, como la isoenzima C4 de la lactato deshidrogenasa o los antgenos especficos de las vesculas seminales y de la pared de los espermatozoides. Hasta se ha desarrollado un mtodo cromatogrfico de extraccin de la prostaglandina E, pero su compleja tecnologa limita el uso rutinario en la medicina forense.

La conclusin de los investigadores es que la prueba de la fosfatasa cida es til como examen de pesquisa y puede ser utilizado en forma rutinaria por la medicina forense. Debido a su simpleza, rapidez y elevado valor predictivo negativo parece ser el mtodo de eleccin para los detectives en las primeras horas luego de una denuncia de violacin. La tcnica del cinc, realizada tal cual est descripta en la literatura, no es satisfactoria para identificar semen.

A partir de estas muestras podemos realizar dos tipos de pruebas por un lado las cualitativas como son el Rodizononato, la prueba de Harrison y la de activacin de neutrones en las que podemos afirmar la existencia de residuos. El otro tipo de pruebas son las cuantitativas que no solo nos indican la presencia o ausencia de estos elementos sino la cantidad de los mismos que se conocen como pruebas cualitativas y estn representados por la absorcin atmica [4]y la microscopia electrnica. Un segundo punto de inters es el de la identificacin de residuos de la deflagracin en las ropas para lo cual es utilizada la prueba de Walker que es una prueba colorimtrica que esta destinada a buscar residuos de nitratos ya sea alrededor de orificios de entrada o bien en las mangas y puos de la ropa de sospechosos de haber disparado un arma de fuego. Es importante que las prendas de ropa a analizar estn totalmente secas puesto que la humedad pudiera diluir los residuos y hacer poco fable la negatividad de la prueba. El resultado positivo de esta prueba indica una cercana de 80 centmetros entre el disparo y el arma de fuego. Un tercer punto de inters es determinar si un arma fue disparada o no recientemente lo que se logra a a trves de la prueba de Gries que consiste en la bsqueda de nitritos en el nima del caon de un arma . Esta es una prueba colorimtrica basada en la reaccin de la alfa naftil amina y que da un color rosa cuando el resultado es positivo. Otro tema de mucho inters dentro de la qumica forense son los delitos sexuales puesto que este tipo de ilcitos deja profundas alteraciones psicolgicas en la victima. Si bien es importante la revisin por parte del medico legista este podr encontrar muchas alteraciones e indicios pero necesita la ayuda del qumico forense para poder confirmar la certeza de sus hallazgos y en el caso necesario intentar extraer de ellos factores de individualizacin que permitan demostrar la inocencia o culpabilidad de un presunto delincuente. Vargas Alvarado[5]dice que en estos casos se deben buscar indicios en tres areas que para el son: el area genital, el area extragenital y el area paragenital . la primera abarca al regin genital y el ano, la segunda la cara interna de los muslos, glteos y monte de Venus y por ltimo la tercera abarca otras zonas ergenas como son mamas y cuello.

Dentro de los indicios que se pueden encontrar podemos mencionar sangre, saliva clulas epiteliales de descamacin pelos [6]y semen. El semen es uno de los elementos ms importantes puesto que se puede estudiar mucho y es prueba irrefutable de eyaculacin[7]y esta conformado para su estudio qumico de dos fracciones , la primera que es la fraccin celular que esta compuesta por los espermatozoides que son sus clulas caractersticas y que pueden no estar presentes por diversas situacines como son la azoespermia o oligoespermia, la vejez del sujeto y la realizacin de la vasectoma[8] La fraccin liquida esta conformada por protenas, sales minerales, lpidos y carbohidratos dentro de los cuales destaca la fructuosa que es un azcar que utilizan los espermatozoides como fuente de energa. Para la identificacin qumica del semen existen dos tipos de pruebas las presuntivas y las confirmativas dentro de las primeras tenemos la del desarrollo del color, las cristalogrficas y la luz de Wood y dentro de las segundas la observacin al microscopio de los espermatozoides y las inmunolgicas[9] Puesto que los espermatozoides constituyen solo el 5% del semen y mueren con facilidad fuera del cuerpo y son fciles de fragmentarse si bien su observacin es una prueba irrefutable y la mas sencilla de la presencia de semen muchas veces se tiene que recurrir a otras pruebas que indican la presencia de liquido seminal y por lo tanto dan resultados mas confiables.

La fosfatasa acida es una enzima presente en abundancia en el liquido seminal desafortunadamente no es especifica de este y puede encontrarse en hgado y en secreciones vaginales motivo por el cual muchas pruebas dirigidas a demostrar su presencia pueden ser falsas como la reaccin de desarrollo del color y se necesitan pruebas especficas como la protena P-30 que reacciona especficamente con la fraccin prosttica de la enzima y puede identificarse por radioinmunoensayo o por inmunoelectroforesis. Otro aspecto importante dentro de la qumica forense son los pelos que plantean varios problemas al criminalista uno de los principales que se presentan es la identificacin si se tratan de seres humanos o se tratan de un animal. A la observacin microscpica podemos decir que el pelo del humano predomina la corteza sobre la medula adems de que contiene dentro de esta una estructura desordenada mientras que en el pelo del animal esta tiende a ser geomtrica.

La toxicologa forense tambin es una rama de estudio de la qumica que se encarga de estudiar la accin de las sustancias nocivas al organismo Existen una infinidad de sustancias txicas que potencialmente pueden daar al cuerpo humano pero se pueden clasificar por su origen en tres grandes grupos, en orgnicos, inorgnicos y semisinteteticos. Y a su vez podemos dividir los orgnicos en animales, vegetales todos hemos visto el ataque de un alacrn o nos ha producido alergia alguna planta que justamente produce sustancias txicas. En cuanto a los txicos inorgnicos tenemos a los metales pesados que se producen muchas veces como residuos de reacciones qumicas y que contaminan el ambiente adems de existir cidos y bases fuertes que son fciles de conseguir y se utilizan frecuentemente en suicidios.

Por ultimo tenemos los elementos semisinteticos que son una serie de sustancias producidas no de manera natural sino por el hombre y que pueden causar dao al organismo dentro de este grupo se encuentran los medicamentos y drogas .

Para la qumica forense es importante el estudio de sus rutas metablicas desde que ingresa una sustancia al organismo hasta su excrecin final en lo que se conoce como toxicocinetica. El primer paso de la toxicocintica es la absorcin que se puede dar por va digestiva respiratoria, cutnea parenteral y mucosa y es la va de ingreso del txico al organismo.

Obviamente la va oral es la mas frecuente porque implica la ingestin voluntaria del toxico al organismo, la va respiratoria se refiere a ciertos gases que penetran al organismo a travs de esta va, la cutnea a algunos txicos que se absorben por la pi, la parenteral puede estar relacionada mas bien con el ataque de algunos animales que inyectan su ponzoa o bien la administracin de medicamentos y por ltimo la via mucosa esta relacionada con la inhalacin de algunas sustancias o bien el uso de medicamentos que se aplican utilizando la ventaja de la rapidez de absorcin de algunas mucosas como es el caso de los supositorios. La distribucin esta relacionada con el paso de la sustancia al torrente sanguneo o a los rganos blanco donde acta y se deposita. La biotranformacin tiene como objeto eliminar el txico o por lo menos hacerlo menos toxico lo cual se logra en dos fases la de oxidacin reduccin e hidrlisis y la de conjugacin . Este fenmeno se desarrolla principalmente en el hgado pero otros txicos pueden actuar a nivel de otros rganos como son el rin, pulmn. Intestino y cerebro. Por ultimo tenemos la excrecin o eliminacin de los txicos que puede ser a travs de varios rganos como el pulmn para eliminar los anestsicos voltiles, la bilis para las sustancias liposolubles y el rin para sustancias solubles en agua.

Esto tiene mucha importancia en la medicina forense puesto que al hacer una autopsia de una persona que muri por intoxicacin y sabiendo cual es la toxicocinetica del producto que empleo sabemos que rganos deberan de estar daados y por lo cual tomar las muestras correspondientes con el objetivo de comprobar por medios qumicos nuestra sospecha.

Las muestras mas tiles pueden ser sangre porque en ella es distribuido el toxico. Orina porque conserva mas fiablemente las concentracines del toxico y al ser una via de excrecin nos permite obtener trazas del txico antes de ser eliminado. El humor vtreo localizado en los ojos al ser un punto alejado de la circulacin

general adems de ser muy fcil de obtener en la autopsia puncionando el ojo con una simple jeringuilla. El hgado como dijimos anteriormente es el centro principal de la biotranformacin por la gran cantidad de enzimas y la estructura que posee adems de que en cadveres en estado de putrefaccin es til para anlisis toxicolgico. En el estomago se pueden encontrar restos del toxico cuando se ingiri el mismo y se pueden encontrar tabletas parcialmente disueltas en el caso de suicidio.

COMPARACIN DE DOS MTODOS PARA DETECTAR ESPERMA Toulouse Cedes, Francia Existen dos mtodos bioqumicos para probar la presencia de semen en muestras biolgicas de mujeres que sufrieron ataques sexuales. La tcnica que mide la actividad de la fosfatasa cida es ms fehaciente que la que detecta la presencia de zinc. Generalmente no existen testigos de las violaciones, por lo que la identificacin de semen juega un papel crucial para confirmar los dichos de las vctimas. El examen mdico permite recolectar evidencia fsica y muestras biolgicas para confirmar la presencia de esperma y condenar al violador. El hallazgo de espermatozoides es el criterio utilizado actualmente para aseverar el antecedente de relaciones sexuales. Dicha evidencia biolgica es aceptada por los equipos mdicos forenses, para quienes la citologa es el estndar de oro, y por las autoridades judiciales. Existe una amplia variedad de mtodos alternativos que ayudan al forense a pesquisar la presencia de esperma en una muestra. Cientficos franceses compararon los dos mtodos ms simples con el fin de determinar cul de ellos es el mejor en relacin con la citologa. Fueron estudiadas 174 mujeres atendidas en un centro de infertilidad masculina de Toulouse, con una edad media de 30 aos. A ellas se les realiz un cuestionario mediante el cual se determin exactamente la fecha de su ltima relacin sexual. Luego se tomaron muestras del contenido vaginal. Todos los extendidos fueron examinados mediante citologa, la cual fue elegida como prueba de referencia para confirmar la presencia de semen. La tcnica que mide la actividad de la fosfatasa cida result ser notablemente ms efectiva que la que identifica cinc para la deteccin de esperma. El primer mtodo es el ms sencillo y varios trabajos han evaluado su utilizacin. Sin embargo, su uso en medicina forense es limitado debido a la corta vida media de la protena. El intervalo ms prolongado entre la ltima relacin sexual y la toma de la muestra que permiti la deteccin de esperma mediante la fosfatasa cida fue de 106 horas. Los autores se valieron de tiras de papel disponibles comercialmente para llevar a cabo la tcnica enzimtica. El material del extendido cervical es puesto en contacto directamente con la cintilla y el tcnico registra el cambio de color inmediatamente. Generalmente la actividad de la fosfatasa cida dura 48 horas. Esta prueba tiene una buena sensibilidad y especificidad. El dato estadstico ms importante es que tiene un valor predictivo negativo de 98%. Por lo tanto, es valioso para pesquisar y no como confirmacin. Algunas de las muestras positivas para la fosfatasa cida con citologa negativa correspondieron a hombres con azoospermia u oligospermia. Este descubrimiento promueve dudas sobre si la prueba de la fosfatasa cida no es ms sensible que la citologa en dichos casos. La tcnica del cinc, por el contrario, puede ser efectuada sin lmites de tiempo. Para descubrir su presencia se utiliz el reactivo mejorado de Hooft. El cambio en la coloracin tambin es ledo en forma inmediata por el personal de laboratorio. Lamentablemente los resultados obtenidos por esta prueba fueron decepcionantes. Una muestra positiva para el cinc tiene apenas 50% de posibilidades de contener semen. El valor predictivo positivo es de 49% y su valor predictivo negativo es demasiado bajo para un estudio de tamizaje (84%).

Hay otros exmenes que deben ser estudiados con mayor detenimiento para estimar su utilidad prctica. La medicin de la colina libre es uno de ellos, aunque sta es rpidamente degradada en el ambiente de la vagina (antes de las 24 horas). Tambin existen mtodos inmunolgicos altamente especializados que pueden detectar sustancias especficas, como la isoenzima C4 de la lactato deshidrogenasa o los antgenos especficos de las vesculas seminales y de la pared de los espermatozoides. Hasta se ha desarrollado un mtodo cromatogrfico de extraccin de la prostaglandina E, pero su compleja tecnologa limita el uso rutinario en la medicina forense. La conclusin de los investigadores es que la prueba de la fosfatasa cida es til como examen de pesquisa y puede ser utilizado en forma rutinaria por la medicina forense. Debido a su simpleza, rapidez y elevado valor predictivo negativo parece ser el mtodo de eleccin para los detectives en las primeras horas luego de una denuncia de violacin. La tcnica del cinc, realizada tal cual est descripta en la literatura, no es satisfactoria para identificar semen.

GENTICA FORENSE:
ASPECTOS CIENTFICOS, TICOS Y LEGALES
I. INTRODUCCIN

La Gentica forense consiste en el anlisis del polimorfismo o variabilidad gentica humana aplicada a los problemas judiciales. Estos pueden ser: Investigacin de la paternidad: Impugnacin por parte del supuesto padre o reclamacin por parte de la madre y/o del hijo. Criminalstica: Asesinato y delitos sexuales (violacin). Se analizan restos orgnicos humanos (sangre, pelo, saliva, esperma, piel). Identificacin: Restos cadavricos (por ejemplo, los restos del zar Nicols II de Rusia y su familia) o personas desaparecidas (como sucedi en Argentina con los nios desaparecidos durante la dictadura militar).

El contenido del presente texto est basado mayoritariamente en las publicaciones de Carracedo (1995), Guilln y col. (1998) y Chocln (1998) indicados en la bibliografa.

II.

ASPECTOS CIENTFICOS 1. QU ADN SE ANALIZA? ADN cromosmico (genmico): ADN repetido en tandem o VNTR (acrnimo ingls por Variable Number of Tandem Repeats), que puede ser: Minisatlite o MVR (minisatellite variant repeats): secuencia de unas 30 pb (pares de bases). Microsatlite o STR (short tandem repeats): secuencia de 2 a 6 pb, normalmente 4. Por ejemplo, la secuencia ACTTACTTACTT ... ACTT puede aparecer repetida 8 veces en un locus y 12 veces en otro locus. As, un individuo puede ser homocigoto 8-8, heterocigoto 8-12 u homocigoto 12-12.

ADN mitocondrial (ADN mt): Presenta herencia materna y es ms estable que el ADN cromosmico. Se suelen analizar dos regiones hipervariables del lazo D. Polimorfismo del cromosoma Y: Se analizan microsatlites (STRs) y el polimorfismo de nucletidos simples (SNPs). 2. ANLISIS DEL POLIMORFISMO Anlisis de ADN minisatlite mediante sondas: Se identifican como polimorfismos basados en la longitud de los fragmentos de restriccin (RFLPs) Sondas multilocus: La historia de las aplicaciones forenses de los polimorfismos de ADN se inici en 1984 cuando Weller y colaboradores descubrieron en un intrn del gen humano

de la mioglobina la existencia de una regin hipervariable constituida por cuatro repeticiones en tandem de una secuencia de 33 pares de bases (minisatlite). Al ao siguiente, Jeffreys y colaboradores (1985 a) encontraron que dicha regin hipervariable apareca con ligeras modificaciones en otros genes, diseando sondas de ADN (sondas multilocus) que permitan identificar simultneamente muchas de dichas regiones hipervariables. Este hecho les llev a pensar que dichos patrones de minisatlites multilocus detectables por la sonda seran caractersticos de cada individuo, constituyendo algo as como su huella dactilar de ADN (DNA fingerprint) (Jeffreys y col., 1985 b). Sin embargo, debido a la dificultad de estandarizacin de la tcnica y de la creacin de bases de datos, as como a los problemas de interpretacin bioestadstica de los resultados, esta metodologa tuvo una escasa utilizacin. Sondas de locus nico (SLPs, single locus probes): La tcnica permite detectar loci minisatlites nicos bajo condiciones de hibridacin molecular muy restrictivas. Se utiliza principalmente en investigaciones de paternidad porque identifica loci minisatlites muy informativos. Para validar estas tcnicas fue necesario estandarizar las enzimas de restriccin utilizadas para fragmentar el ADN (en Europa se eligi en principio la enzima Hinf I), as como las sondas que reconocen los loci minisatlites muy variables (con ms del 90% de heterocigosis). Los individuos se caracterizan por el tamao de los RFLPs y no por el nmero de repeticiones. Anlisis de polimorfismos de ADN mediante PCR (reaccin en cadena de la polimerasa):

Es una tcnica muy usada en criminalstica porque se puede realizar a partir de cantidades muy pequeas de ADN de la muestra (restos de sangre, semen, etc.) o por la propia degradacin del ADN (restos cadavricos). Aunque se han utilizado polimorfismos del locus HLA o minisatlites, sin embargo el mtodo PCR se aplica especialmente utilizando microsatlites (STRs). Por ejemplo, utilizando simultneamente cuatro microsatlites de cuatro bases se consigue un poder de discriminacin superior al 99,9 %. Otras aplicaciones forenses de la PCR La tcnica de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) se utiliza tambin en la determinacin del sexo a partir de muestras de ADN, amplificando loci especficos de los cromosomas sexuales X o Y (por ejemplo, el gen de la amelogenina). El anlisis del ADN mitocondrial (ADNmt) es especialmente til en aquellos casos en los que solamente se disponga de restos seos muy antiguos y deteriorados. Como el ADNmt se transmite slo por va materna, puede ser utilizado cuando se trate de investigar en la reconstruccin de linajes. Por ejemplo, tal es el caso del estudio de nios de padres desaparecidos al comparar el ADNmt de los nios con los de sus presuntos abuelos, tal como ocurri en muchos casos ocurridos durante la dictadura militar argentina (Orrego y col., 1990). Fue especialmente notable la identificacin llevada a cabo en 1994 de los restos seos de la familia del ltimo zar de Rusia (Nicols II, su mujer Alexandra y tres hijos) encontrados en una cueva a 35 Km de Ekaterinburgo y que haban sido asesinados el 16 de Julio de 1918 (Gill y col., 1994). Incluso se manej como muestra comparativa la del ADNmt del actual Duque de Edim-

burgo (esposo de la reina Isabel de Inglaterra) emparentado con la familia imperial rusa por va materna (bisnieto de la madre de la zarina Alejandra). Su ADNmt era idntico al de los supuestos restos de la zarina y sus tres hijos. El anlisis gentico realizado por Gill y colaboradores utiliz 5 repeticiones cortas en tandem (STR), 2 regiones hipervariables del ADNmt y la determinacin del sexo de los huesos utilizando el anlisis del gen de la amelogenina. Los resultados cientficos fueron congruentes con los datos histricos de que la familia imperial (el zar Nicols II, la zarina Alexandra y tres hijos) fue asesinada junto con tres sirvientes y el mdico de la familia. III. ASPECTOS TICOS Y LEGALES 1. EL VALOR DE LA PRUEBA EN LA INVESTIGACIN DE PATERNIDAD (basado en Castellano, 1995) Por reclamacin de la paternidad se entiende la accin de reivindicar la paternidad biolgica de un hombre determinado para un nio nacido de una mujer concreta. Por impugnacin de la paternidad se entiende la accin interpuesta por un hombre encaminada a rechazar o rebatir su paternidad biolgica con respecto a un nio; paternidad que, hasta ese momento, era tenida por legtima. Se indican a continuacin algunas caractersticas generales en relacin con las pruebas de paternidad: La Constitucin Espaola reconoce la posibilidad de la investigacin de la paternidad (art. 39.2). El Cdigo Civil espaol (Art. 127, Ttulo V De la paternidad y la filiacin) dice que

En los juicios sobre filiacin ser admisible la investigacin de la paternidad y de la maternidad mediante toda clase de pruebas, incluidas las biolgicas. El Juez no admitir la demanda si con ella no se presenta un principio de prueba de los hechos en que se funde. Segn el Tribunal Constitucional (Sentencia del 17 de enero de 1994), el demandado en un proceso de filiacin (...) slo podra legtimamente negarse a unas pruebas biolgicas si no existieran indicios serios de la conducta que se le atribuye o pudiera existir un gravsimo quebranto de su salud. Cuando el interesado no otorga el consentimiento, la decisin judicial que disponga la pericia gentica en contra de su voluntad deber valorarse en funcin de los derechos fundamentales siguientes: el derecho a la integridad fsica, el derecho a no declarar contra s mismo ( a no declararse culpable) y el derecho a la intimidad No obstante lo indicado en el prrafo anterior, la negativa a someterse a la prueba puede ser interpretada por el juez como certeza de paternidad. As ha sido considerado por el Tribunal Constitucional que ha sostenido la obligatoriedad de someterse a las pruebas, las cuales no atentan contra el derecho a la intimidad y a la integridad fsica (STC de 20 de diciembre de 1993). Ante la negativa a la prueba, la Sentencia del Tribunal Constitucional STC 7/1994 establece que los derechos del hijo, la madre y la sociedad priman sobre el derecho a la integridad fsica que pudiera suponer la toma de muestra. La investigacin biolgica de la paternidad se basa en que todo el patrimonio biolgico presente en un individuo procede a

partes iguales de su padre y de su madre a travs de la informacin gentica contenida en los gametos masculino y femenino, respectivamente. Por tanto, la constitucin gentica (genotipo) de un individuo debe ser explicada en trminos de las leyes genticas de la herencia. La exclusin directa de la paternidad hace referencia a que cuando un nio tiene una informacin gentica que no tiene la madre ni el presunto padre, ste debe ser excluido como padre biolgico del nio. Asimismo, se produce la exclusin directa de la paternidad cuando a un individuo homocigoto para un gen de un locus determinado se le atribuye la paternidad biolgica de un hijo que sea homocigoto para otro alelo del mismo locus. La probabilidad de exclusin a priori es la probabilidad de demostrar la no paternidad de un hombre falsamente implicado en una paternidad biolgica a travs del estudio de diversos marcadores genticos en los tres protagonistas: la madre, el hijo y el presunto padre. La probabilidad de exclusin a priori de cada marcador depende de su polimorfismo y de su distribucin en la poblacin general. Para una distribucin de las frecuencias de marcadores moleculares genticos en la poblacin espaola ver Castellano (1991). Cuando el resultado de los anlisis realizados nos dice que la probabilidad de exclusin a priori es del 99,9 % esto significa que si se realizaran 1.000 pruebas de paternidad de falsos padres, en 999 se demostrara la exclusin y solamente en un caso de esos mil el falso padre no sera excluido. La probabilidad de la paternidad debe calcularse cuando, tras realizar los oportunos anlisis, no se ha producido la exclusin del presunto padre. Esto sucede cuando todos los marcadores genticos presentes en el nio estn presentes en su madre o en el supuesto padre, lo cual significa que ha podido

ser l quien los ha transmitido. La probabilidad de paternidad indicar cul es la probabilidad de que ese hombre sea realmente el padre del nio. El clculo de la probabilidad viene dado por la frmula W = (X / X+Y) .100 donde X es la probabilidad que tiene el presunto padre de transmitir un marcador gentico del que es portador y que est presente en el nio, mientras que Y es la frecuencia con que dicho marcador est en la poblacin general El valor obtenido W representa la probabilidad de que el hombre en cuestin sea el verdadero padre del nio. En temas de paternidad para los peritos genticos los porcentajes de probabilidad se transforman en predicados verbales, tal como se indica a continuacin: 99,8-99,9 % : paternidad prcticamente probada 99,0-99,7 % : paternidad extremadamente probable 95,0-98,9 % : paternidad muy probable 90,0-94,9 % : paternidad probable 80,0-89,9 % : cierta insinuacin de paternidad menos de 80% : paternidad despreciable o no til Qu nivel de probabilidad aceptara un juez para dar por concluyente la prueba? 2. EL VALOR DE LA PRUEBA DE ADN EN LA INVESTIGACIN CRIMINAL

Es obvio que el mayor valor de la prueba de ADN depender del nmero de polimorfismos analizados. Una vez obtenidos los resultados se comparan con los datos genticos del supuesto agresor (restos orgnicos encontrados en la vctima) o de la vctima (manchas de sangre halladas sobre el supuesto agresor), establecindose las siguientes conclusiones:

Si los patrones comparados son diferentes, el supuesto agresor es inocente. Si los patrones comparados coinciden, entonces hay que valorar la probabilidad de que las muestras analizadas pertenezcan al presunto agresor habida cuenta de las frecuencias de tales polimorfismos en la poblacin a la que pertenece. Por ejemplo, tendra poco valor probatorio si se utilizara como elemento gentico de comparacin el hecho de que el resto de sangre del agresor en la vctima y la sangre del sospechoso pertenecieran al mismo grupo sanguneo, cuya frecuencia en la poblacin fuera, por ejemplo, del 40%. Suponiendo la coincidencia en las muestras tomadas de la vctima y del supuesto agresor de los perfiles genticos de los polimorfismos analizados y que la frecuencia de encontrar en la poblacin un individuo con dicho perfil gentico fuera de un 1%, la valoracin biolgica de la prueba puede dar lugar a lo que se conoce como falacia del fiscal y falacia de la defensa: El fiscal argumentara que el sospechoso tiene una probabilidad del 99% de ser el agresor La defensa argumentara que si en la ciudad donde se cometi el crimen haba un cierto nmero de personas (por ejemplo 100.000) potencialmente capaces de haber cometido el crimen atendiendo a sus caractersticas de edad, sexo, etc., entonces el 1% de las mismas (es decir, 1000) podan ser el criminal. Por consiguiente, segn la defensa del acusado, 1/1000 sera una probabilidad muy pequea para declarar culpable al sospechoso.

Dados los razonamientos anteriores, el anlisis bayesiano sera el modo correcto de valorar la prueba; es decir, calcular la probabilidad condicional de un suceso aplicando el teorema

de Bayes que permite calcular el valor de una probabilidad teniendo en cuenta datos previos: El juez debera valorar de forma objetiva la prueba cientfica multiplicando su grado de creencia previa sobre la culpabilidad del acusado, expresado en forma de apuesta (5 a 1 a favor de su inocencia, 10 a 1 a favor de su culpabilidad) por un factor (razn de verosimilitud, LR, o likelihood ratio ) que el perito gentico debe proporcionar al juez y que puede denominarse razn bayesiana de probabilidad, cuyo valor es: LR = P(E/C) / P(E/I) Es decir, LR es igual al cociente entre la probabilidad del hallazgo cientfico E, dada la culpabilidad C y la probabilidad del hallazgo cientfico E, dada la inocencia I. En el ejemplo que se pona en el apartado anterior, el valor de LR sera 1/0,01 = 100; es decir, la probabilidad de culpabilidad del sospechoso (en opinin del juez) expresada en forma de apuesta se habra multiplicado por cien. En la tabla siguiente, a modo de ejemplo, se incluyen las comparaciones entre las probabilidades a priori de culpabilidad basadas en otras pruebas judiciales y las probabilidades a posteriori despus de aplicar la prueba del ADN, suponiendo que LR = 100:
Probabilidad a priori Probabilidad a posteriori de culpabilidad de culpabilidad (basa(despus de la prueba de ADN)

da en otras pruebas judiciales) 1.000 a 1 en contra (1/1.000) 100 a 1 en contra (1/100) 10 a 1 en contra 1 a 1 (igual a favor que en contra)

10 a 1 en contra (1/10) 5 a 1 en contra (1/5) 1 a 1 (igual a favor que en contra) 5 a 1 a favor 10 a 1 a favor 100 a 1 a favor 1.000 a 1 a favor

10 a 1 a favor 20 a 1 a favor 100 a 1 a favor 500 a 1 a favor 1.000 a 1 a favor 10.000 a 1 a favor 100.000 a 1 a favor

Es decir, si por las otras pruebas que posee, el juez considera que el acusado es inocente con una probabilidad de 1.000 a 1, despus de la prueba de ADN del caso anterior (LR = 100) el acusado sigue teniendo ms probabilidad de ser inocente que culpable (10 a 1 contra su culpabilidad, o sea a favor de su inocencia). Si por las pruebas judiciales practicadas el juez duda a partes iguales entre inocencia y culpabilidad, despus de la prueba del ADN podr inclinarse objetivamente 100 contra 1 a favor de la culpabilidad del sospechoso. Finalmente, es necesario poner de manifiesto la importancia de la poblacin de referencia. El perito gentico debe escoger la poblacin del entorno del caso, que normalmente coincide con un grupo poblacional concreto.

3. LA PRUEBA DE ADN EN LOS TRIBUNALES DE JUSTICIA La utilizacin de la prueba de ADN en los tribunales de justicia plantea una serie de problemas generales tales como:

Difcil comprensin del significado de la prueba pericial gentica por parte de los juristas (jueces y abogados) Posibilidad de caer en la falacia del fiscal o en la falacia de la defensa La comunicacin de los resultados por el perito en el juicio oral es enormemente importante, siendo preciso dejar claros tres principios: Para calcular el valor de una prueba cientfica es necesario considerar (al menos) dos explicaciones para su ocurrencia La prueba de debe evaluar calculando su probabilidad bajo cada una de las explicaciones alternativas El valor de la prueba en relacin con una de las explicaciones es la probabilidad de su ocurrencia dada esa explicacin, dividida por la probabilidad de su ocurrencia dada la explicacin alternativa (razn bayesiana de probabilidad referida en el apartado anterior (LR, likelihood ratio)

Para paliar las dificultades de entendimiento, muchos peritos utilizan explicaciones semnticas de la probabilidad obtenida en forma de predicados verbales de forma similar a las pruebas de paternidad. En Europa la escala de predicados verbales ms utilizada en criminalstica es la de Ewett (1987).

4. LAS BASES DE DATOS DE ADN CON FINES DE INVESTIGACIN CRIMINAL (basado en Guilln y col. 1998) El establecimiento de bases de datos genticos y su regulacin legal en Europa es muy variable de unos pases a otros. Por ejemplo, en el Reino Unido, que es el ms permisivo se estn introduciendo a un ritmo de un milln / ao, hasta alcanzar los cinco millones de individuos, mientras que otros pases, como Holanda, solamente se incluyen los datos de individuos que hayan cometido delitos importantes contra las personas. Aqu habra que recordar que, dado que muchos de los criminales que producen delitos

de violacin son reincidentes, el disponer de un archivo policial de su ADN permitira esclarecer los posibles nuevos delitos. La creacin de las bases de datos de ADN a nivel nacional puede plantearse bajo las siguientes perspectivas: Bases de datos de ADN realizados a nivel general poblacional Segn algunos autores y sentencias de tribunales, este planteamiento podra afectar al derecho a la intimidad, la dignidad de la persona, el derecho a la integridad fsica y moral, el derecho a no declarar contra s mismo, a la presuncin de inocencia, al derecho a la salud y el derecho a la libertad Bases de datos restringidas por la vinculacin del sujeto pasivo con el delito, por razn del propio delito investigado y por el tiempo de conservacin de los anlisis Basado en el principio de proporcionalidad, se considera necesario que haya un grado de vinculacin entre el delito investigado y el sujeto a quien se va a hacer la prueba. Un segundo criterio delimitador es la determinacin de un catlogo de delitos que permita realizar la prueba de ADN incluso sin consentimiento del sospechoso. Ante el problema de la prescripcin del delito y de la pena, ser necesario plantear si los anlisis de las muestras se conservan de manera indefinida o si deben ser suprimidas.