1. Apa faktor pembeda dengan penelitian sebelumnya ?

Ahmad melakukan penelitian dengan menggunakan limbah cair sintetik yang mengandung KH, protein, minyak-lemak, yang mana tiap-tiap bahan menggunakan 1 masing-masing media yaitu media 1 untuk limbah cair yang mengandung KH, media 2 untuk limbah cair yang mengandung protein, media 3 untuk limbah cair yang mengandung minyak-lemak. Yang mana proses aklimatisasi berlangsung pada kondisi operasi suhu 35 oC, pH awal 6 dan diaduk, proses aklimatisasi berlangsung selama 28 hari. Selain itu bakteri yang berasal dari pencernaan anaerob banyak yang mati daripada yang hidup, hal ini dikarenakan bakteri yang berasal dari pencernaan anaerob hanya terbiasa mendapatkan beban organik secara batch dengan pembebanan rendah sehingga makanan dan nutrisi yang diperoleh tidak cukup. Febyanti melakukan penelitian dengan menggunakan limbah cair sawit, dengan kondisi operasi suhu ruang dan tanpa pengaduk, tetapi pH awal (pH limbah cair sawit 4-6) berlangsung selama 55 hari. Sedangkan penelitian ini menggunakan limbah cair sagu yang memiliki kondisi yang kurang asam (pH yang tidak terlalu rendah=asam) sehingga bagaimana pertumbuhan bakteri nya, yang mana pH mempengaruhi pertumbuhan bakteri dapat hidup pada rentang pH 5-9, tetapi pH yang sesuai untuk proses pencernaan anaerob ini 7-8,5, dan jika pH awalnya sudah mencapai mendekati nilai pH proses maka proses aklimatisasi dapat berlangsung dengan cepat. 2. Apa guna pengadukan ? Bahan baku yang sukar dicerna dalam dicerna dalam digester akan membentuk lapisan kerak pada permukaan cairan. Apabila hal ini dibiarkan, lapisan kerak akan mengeras dan menghambat laju produksi biogas. Pengadukan berfungsi untuk mencegah lapisan kerak agar tidak terbentuk. 3. Alat untuk mempertahankan suhu yaitu inkubator yang berfungsi untuk memeram mikroba pada suhu yang terkontrol. 4. Kenapa menggunakan NaCl, untuk menjaga kondisi anaerob ? Karena kalau menggunakan air nanti akan menghasilkan Hidrogen Peroksida (H2O2) H2O + O2 H2O2 Hidrogen peroksida adalah produk sampingan yang tidak diinginkan dari metabolisme aerob, misalnya pada pemecahan asam amino dan asam lemak. Hidrogen peroksida merupakan senyawa yang sangat reaktif dan dapat merusak sel.Oleh karena itu,

hidrogen peroksida dikumpulkan dalam peroksisom,kemudian didegradasi oleh katalse. 5. Kenapa menggunakan larutan garam, kenapa gak air aja pada penampung gas ? Karena dalam proses pembentukan biogas ini, kandungan utama dari biogas ini adalah gas metan dengan komposisi sebanyak 54-70%, jika nantinya menggunakan air maka akan menghasilkan gas CO (karbon monoksida) CH4 + H2O CO + 3H2 Jika metana direaksikan dengan air maka akan menghasilkan gas karbonmonoksida, yang mana gas karbonmonoksida ini bersifat racun 6. Apakah bakteri dalam kotoran sapi itu ada semuanya bakteri hidrolitik, asidogenesis, asetogenesis dan metanogenesis ? Ada, karena bakteri clostridium merupakan enzim eksoselular pada proses hidrolitik dan termasuk bakteri fermentatif yang menghasilkan asam lemak volatil, CO2 dan H2. Clostridium merupakan kelompok bakteri pembentuk asam yang terhambat pada oksigen terlarut rendah. Kelompok bakteri pembentuk asam pada hakekatnya terdiri dari bakteri hidrolitik, asidogen dan asetogen. Enzim-enzim yang dibutuhkan dalam proses hidrolisis juga berasal dari genus clostridium. 7. Apa guna penambahan 200 mL/hari ? Gunanya untuk penambahan bahan makanan sehingga mikroorganisme tidak mengalami kekurangan makanan (defisiensi) baik nutrisi maupun mineral. Kecukupan makanan tidak mendorong pertumbuhan bakteri ke arah fase kematian (dead) 8. Apa arti 2,02 g/L pada VSS ? Berarti ada sebanyak 2,02 gr bakteri yang hidup dalam 1 liter. 9. Bagaiman karakteristik bakteri yang ada di dalam ekstrak kotoran sapi ? 1. Clostridum sp Genus clostridium sangat baik tumbuh dalam kondisi anaerob dan dapat menghasilkan gas hidrogen. Clostridium merupakan bakteri penghasil obligat hidrogen yang mampu menyesuaikan diri pada konsentrasi substrat rendah dan tekanan hidrogen rendah. 2. Clostridium butyricum Dapat tumbuh sedikit bahkan tidak tumbuh pada agar nutrien namun tumbuh subur pada agar glukosa. Produk fermentasinya termasuk asam asetat, asam butirat, butanol dan penghasil gas hidrogen yang berlimpah. 3. Clostridium sporogenes

Bakteri yang tumbuh sangat subur dalam agar nutrien dan kaldu daging masak. Produk fermentasi sebagian besar asam butirat dan sejumlah kecil asam asetat, isobutirat, isovalerat, isokaproat serta penghasil gas hidrogen yang berlimpah. 10. Apa guna parameter pH, VSS dan biogas ? VSS ini dapat juga dinyatakan dalam konsentrasi biomassa yang berguna untuk seberapa banyak bakteri yang dapat bertahan dalam proses anaerob atau menunjukkan seberapa banyak sel yang mati dalam proses aklimatisasi. Jadi, jika konsentrasi biomassa (VSS) rendah menunjukkan biomassa tidak mampu bertahan pada substrat ynag diberikan sehingga banyak sel yang mati ditunjukkan nilai konsentrasi biomassa yang rendah.,berarti pertumbuhan bakteri tidak baik. Sedangkan jika konsentrasi biomassa tinggi maka pertumbuhan bakteri sangat baik. pH berguna untuk mengetahui kondisi mikroorganisme di dalam digester anaerob. Karena kebanyakan bakteri hidup pada rentang 6-8, jika pH dibawah rentang, maka substrat akan mempunyai sifat toksik (racun) terhadap bakteri metanogenik. Biogas berguna melihat hasil perombakan M.O. karena bakteri ini memakan substrat (limbah cair sagu yg mengandung KH, Protein, Minyak) untuk hidup, dan menghasilkan gas buang yang berupa biogas, jadi dapat juga dijadikan sebagai parameter untuk melihat kondisi bakteri apakah dalam keadaan hidup atau mati. 11. Apa itu aklimatisasi ? Aklimatisasi merupakan suatu upaya penyesuaian fisiologis atau adaptasi dari suatu organisme terhadap suatu lingkungan baru yang akan dimasukinya 12. Apa guna larutan garam ? Mencegah masuknya bakteri dari udara, menjaga proses anaerob. 13. Mengapa memilih gas N2 untuk mengusir O2 daripada menggunakan H2? Karena gas nitrogen memiliki sifat inert (tidak dapat beraksi) sehingga tidak akan menggangu reaksi fermentasi di dalam bioreaktor tersebut. Selain itu tidak terlalu berbahaya karena tidak akan terbakar, dibandingkan Hidrogen yang mudah terbakar. 14. Mengapa suhu furnace 5500C dan suhu oven 1030C ? Karena bahan organik akan hilang dengan pembakaran suhu tinggi yaitu rentang 500600oC dan menyisahkan bahan anorganik yang disebut abu. Kandungan abu yang berwarna putih keabu-abuan adalah hasil dari pembakaran yang sempurna, yaitu dengan menggunakan suhu pembakaran 5500C. 15. Mengapa perlu proses pembibitan ?

Karena untuk membibitkan bakteri, agar bakteri dapat menumbuhkan bakteri pada substrat tertentu. Selain itu juga, akan berhubungan juga dengan tahap pertumbuhan bakteri, jika tidak dilakukan proses pembibitan maka fasa lag akan lama, karena bakteri masuk ke dalam lingkungan yang berbda (limbah cair sagu) dengan lingkungan sebelumnya, sehingga membutuhkan waktu yang lama nanti pada proses aklimatisasi. 16. Bagaimana mekanisme pembentukan biogas ? 1. Proses hidrolisis Yaitu perubahan senyawa kompleks organik menjadi senyawa organik sederhana. 2. Proses asetogenesis Yaitu permanfaatan substrat glukosa dan asam amino menjadi asam asetat berlangsung dalam proses fermentasi, sedangkan asam lemak bebas menjadi asam asetat disebut tahap proses oksidasi anaerob. 3. Tahap Metanogenesis Yaiitu penguraian asam asetat menjadi gas metean dan pembentukan metan dari H2 dan CO2 disebut tahap proses konversi. 17. Disini dikatakan adanya bantuan enzim-enzim, enzim apa saja itu ? Karbohidrat menjadi glukosa oleh enzim amilase. Protein menjadi asam-asam amino oleh enzim protease Minyak-lemak menjadi asam lemak bebas oleh enzim lipase Semua proses ini berlangsung pada tahap hidrolisis oleh bakteri hidrolitik. 18. Pada proses metanogenesis merupakan proses perubahan asam asetat menjadi gas metan dan perubahan CO2-H2 menjadi gas metan. Proses metanogenesis ini melibatkan bakteri metanogen hidrogenotrof dan metanogen asetotrof. Bakteri metanogen hidrogenotrof mengubah CO2 dan H2 menjadi gas metan, sedangkan bakteri metanogen asetotrof berfungsi untuk mengubah asam asetat menjadi gas metan. Perubahan asam asetat menjadi gas metan di daam proses metanogenesis menyebabkan terjadi penurunan kandungan COD di dalam sistem. 19. Bagaimana jika pH nya di bawah rentang atau diatas rentang ? Jika pH nya dibawah rentang atau diatas rentang maka dilakukan penambahan zat kimia NaOH 4M (jika pH nya asam) dan ditambahkan HCl 4M (jika pH nya basa). Penambahan zat asam atau basa ini dilakukan pada saat sebelum dimasukkannya substrat baru (limbah cair sagu), pada saat itu ditambahkan zat kimia tersebut.

20. Fase pertumbuhan yang paling diperhatikan dalam sistem batch adalah fasa eksponensial, karena pada fasa inilah tercapainya laju pertumbuhan optimum. 21. Fasa-fasa pertumbuhan bakteri apa saja ? a. Fasa lag yaitu fasa penyesuian diri mikroorganisme terhadap lingkungan barunya. Pada fasa ini, mikroorganisme belum memperbanyak diri dengan cara membelah, namun proses metabolisme sesungguhnya telah berlangsung. Fasa ini biasanya sangat singkat atau tidak ada sama sekali. b. Fasa logaritmik atau eksponensial. Merupakan suatu kondisi laju pertumbuhan mikroorganisme sedang dalam berada pada puncak metabolisme.

Mikroorganisme akan terus melakukan pembelahan sampai pasokan nutrien yang esensial habis atau timbul produk toksik yang menjadikannnya sebagai inhibitor (penghambat) bagi pertumbuhan mikroorganisme. c. Fasa stasioner. Merupakan fasa keseimbangan antara laju pertumbuhan sel dengan kematian sel mikroorganisme. Selama fasa ini tidak ada perubahan atau peningkatan jumlah populasi. Secara bertahap mikroorganisme, mulai berhenti menggandakan diri dan umur mikroorganisme semakin tua. d. Fasa endogen atau dead. Merupakan fasa kematian mikroorganisme setelah terganggunya keseimbangan jumlah miikroorganisme terhadap nutrien. Pada fasa ini, mikroorganisme yang tidak dapat bertahan pada kondisi tersebut akan mati. Hal ini disebabkan semakin sedikit nutrien atau menumpuknya bahanbahan toksik. 22. Apakah bakteri metanogenesis menyebabkan terjadinya penurunan atau kenaikan pH? Menyebabkan terjadinya kenaikan pH karena bakteri metanogenesis (pembentuk gas metan) dapat berlangsung pada pH 6.8-7,2, sehingga jika pH turun maka bakteri metanogenesis akan menaikkan pH agar terbentuknya gas metan. 23. Apa jenis bakteri pada biomassa kotoran sapi ini ? Bakteri yang berasal dari biomassa kotoran sapi berasal dari konsorsium bakteri anaerob yaitu bakteri Clostridium spI, Clostridium Butyricum dan Clostridium Sporogenes. 24. Bagaimana proses pembuatan ekstrak sapi ? Kotoran sapi di ambil dari peternakan sapi, kemudian kotoran tersebut disimpan dalam suatu bak selama 1 minggu kemudian diukur suhu dan pH-nya. Kemudian kotoran tersebut dicampur dengan air dengan perbandingan 1:3 w/v, campuran diaduk

dan diinkubasi. Hasil inkubasi di ekstrak dengan melaukan penyaringan dengan kain kasa kemudian di dapatkan lah ekstrak kotoran sapi. 25. Apa itu inkubasi ? agar kita dapat melihat pertumbuhan atau perkembangbiakan pada mikroorganisme. 26. Apa itu inokulasi ? Yaitu penanaman bakteri apa atau proses pemisahan bakteri dari medium yang lama ke medium yang baru. Tujuan dari inokulasi yaitu untuk menumbuhkan mikroba dan mendapatkan populasi mikroba yang murni. 27. Apa beda minyak dengan lemak ? dan juga asam lemak rantai panjang ? Lemak adalah ester dari gliserol dengan asam-asam karboksilat suku tinggi. Asam penyusun lemak disebut asam lemak. Contoh asam lemak yaitu asam palmitat (C15H31COOH), asam stearat (C17H35COOH), asam oleat (C17H33COOH). Pada lemak, satu molekul gliserol mengikat 3 molekul asam lemak, oleh karena itu lemak adalah suatu trigliserida. CH2-COO-R1 CH-COO-R2 CH2-COO-R3 28. Apa rumus struktur asam propionat, formiat dan butirat, apakah sudah termasuk asam lemak rantai panjang ? Asam formiat Asam propionat Asam Butirat = HCOOH = CH3-CH2-COOH = CH3-CH2-CH2-COOH

Iya, karena dari ketiga itu merupakan gugus asam karboksilat, yang mana asam karboksilat juga disebut asam lemak yang mempunyai rantai hidrokarbon yang panjang dan tidak bercabang. Asam karboksilat merupakan hasil dari hidrolisis lemak dan minyak yang menghasilkan asam karboksilat dan gliserol. 29. Apa itu pati ? Pati merupakan karbohidrat kompleks yang tidak larut dalam air, berwujud bubuk putih, tawar dan tidak berbau. Pati merupakan bahan utama yang dihasilkan oleh tumbuhan untuk menyimpan kelebihan glukosa (sebagai produk fotosintesis) dalam jangka panjang. 30. Apa itu hidrolisis ? Hidrolisis adalah reaksi kimia yang memecah molekul air menjadi hidrogen dan oksigen.melalui proses kimia. Hidrolisis bertujuan untuk memecah selulosa dan

hemiselulosa menjadi monosakarida (glukosa dan xylosa) yang selanjutnya difermentasi lagi 31. Apa itu APHA, AWWA, dan WPCF ? APHA = American Public Health Association AWWA = American Water Works Association WPCF = Water Pollution Control Federation 32. Metoda yang digunakan menganalisis VSS apa ? Metoda gravimetri, yaitu suatu metoda analisa secara kuantitatif yang berdasarkan pada prinsip penimbangan. Gravimetri ini dibagi 3 melalui yaitu cara penguapan, cara elektrokimia dan cara pengendapan. Pada penelitian ini digunakan cara penguapan. 33. Mengapa cocok dengan proses biologi, kenapa tidak dengan kimia atau fisika ? Kalau secara kimia meliputi tahap-tahap pengendapan (presipitasi), koagulasi dan flokuasi, reduksi-oksidasi, pembentukan gas yang tidak larut dan pelepasan (BOD dan COD) serta reaksi kimia lain yang melibatkan pertukaran ion. Jadi, kalau menggunakan proses kimia, membutuhkan biaya yang besar, karena membutuhkan zst-zat kimia lagi, untuk melakukan proses pengendapan dan pertukaran ion, sementara itu juga membutuhkan lahan yang sangat luas untuk mengolah limbah ini. Kalau secara fisika, meliputi sedimentasi, flotasi, dan proses penghilangan zat terlarut dan tidak terlarut tanpa mengubah struktur kimai limbah tersebut. Ini sama juga dengan proses kimia yang membutuhkan biaya yang besar dan membutuhkan lahan yang luas. Kalau secara biologi, merupakan pengolahan limbah dengan melibatkan kehidupan mikroorganisme. Mikroorganisme dapat berasal dari biomassa pencernaan anaerob (kotoran sapi) serta juga tidak membutuhkan biaya yang mahal dan tidak membutuhkan lahan yang luas. Serta memiliki keuntungan jika dilakukan proses anaerob yaitu dapat menghasilkan biogas yang berguna untuk pembakaran. 34. Apa itu COD ? Jumlah oksigen (mg O2) yang dibutuhkan untuk mengoksidasi zat-zat organis yang ada dalam 1 liter sampel air, dimana pengoksidasi K2Cr2O7 digunakan sebagai sumber oksigen (oxidizing agent) atau umlah oksigen yang diperlukan agar bahan buangan yang ada dalam air dapat teroksidasi melalui reaksi kimia baik yang dapat didegradasi secara biologis maupun yang sukar didegradasi .

35. Aklimatisasi diberhentikan dengan syarat laju produksi biogas berfluktuasi 10 %. Mengapa harus 10 % ? 36. Mengapa limbah cair sagu dapat merusak lingkungan ? Karena limbah cair sagu memiliki kandungan bahan organik yang tinggi, yang mana bahan buangan organik yang tinggi dapat bereaksi dengan oksigen yang terlarut di dalam air, sehingga kandungan oksigen yang terlarut semakin sedikit sehingga kehidupan mikroorganisme yang ada di dalam air akan menyebabkan kematian. Dampak yang akan terjadi yaitu terjadinya pembusukan pada permukaan air dan pada selang waktu tertentu akan mengeras sehingga menutupi permukaan air, akibatnya menghambat kontak antara air dengan udara bebas sekitarnya.