Dra. Ana Marta de los ngeles Lobo Snchez Zaira Guerrero Gonzlez
Los sistemas celulares utilizados para propagar los virus en el laboratorio son:
tripsina
estudio y propagacin
1935.virus gripal
Agua
Componentes
. y mem. extraembrionarias
sustratos variados
Cmara de aire
Intraperitoneal, o intracerebral
Temperatura
Dilucin
Tiempo de incubacin
Vas de inoculacin
Inoculacin por saco alantoideo
Liquido alantoideo: virus hemaglutinantes o produccin de hemaglutininas Embrin de 9-12 das, inoculo de 0.10.2ml
3 mm
45
1cm
Permite cuantificar aquellos grupos virales que producen lesiones localizadas Embrion de 10-12 das, inoculo de 0.10.5ml
MEMBRANA
VIRUS
TIPO DE EMBRIN
Se emplean embriones de 5 8 das Se emplean embriones de 10 12 das
CANTIDAD DE INOCULACIN
0.2 1 ml
SIGNOS DE CRECIMIENTO
Muerte
Saco vitelino
Herpes simple Neumona y Rickettsias Herpes simple Poxvirus Sarcoma de Rous Varicela Virus de Laringotraqueitis aviar Enfermedad de Beyer Influenza New Castle Virus de la bronquitis infecciosa Parotiditis Virus de la Gripe Virus de la Leucemia Virus del herpes Rabia
Cariolantoes
0.1 0.5 ml
Alantoides
0.1 0.2 ml
Hemoglutinacin
Amnitica
0.1 0.2 ml
Muerte
Intravenosa
10 - 15 das
Pstulas
Intracerebral
8 14 das
0.01 0.02 ml
Alteraciones cerebrales
VENTAJAS
Control preciso y fino del medio ambiente (fcil manipulacin) Caracterizacin y homogeneidad de la muestra Economa
DESVENTAJAS
tcnica sensible calidad y costos Inestabilidad Apreciacin difcil durante los tres primeros das de edad del embrin
Capacidad de anclaje
clasificacin
Monocapa
Suspencin
La inoculacin en animales de experimentacin de muestras clnicas o de virus para su aislamiento o propagacin. Poco usada Se emplea nicamente cuando se trata de propagar virus cuya replicacin en los otros sistemas no es posible. Los animales ms utilizados: monos, los cobayos y los ratones lactantes
La inoculacin animal sigue siendo un mtodo de gran valor para estudiar: La oncognesis viral La patologa de los padecimientos virales La respuesta inmune a los virus El efecto de los factores ambientales sobre infecciones virales
cambios bioqumicos y moleculares, morfolgicos y de viabilidad celular, visibles a microscopa ptica, causados durante el ciclo de replicacin viral. Aunque todos los virus lticos producen efecto citoptico, puede observarse una gran diversidad de manifestaciones
En clulas infectadas en cultivo, en las que se aprecia: prdida de adherencia al sustrato inhibicin por contacto redondeamiento celular formacin de sincitios cuerpos de inclusin citoslicos transformacin celular lisis, etc.
Es la conclusin del conjunto de alteraciones celulares que se producen, secuencial o simultneamente en la clula infectada, liberando finalmente al medio las nuevas partculas virales.
Muchos tipos de virus inducen la aparicin de estructuras membranosas en el citoplasma, en algunos casos en forma de grandes vacuolas citoplasmticas o pequeas.
Los sincicios son grupos de clulas fusionadas apreciables como una masa celular multinucleada
Es una alteracin en el crecimiento normal de las clulas en cultivo con evidentes manifestaciones morfolgicas. Se asocia a una serie de cambio moleculares y est especialmente ligada a virus que insertan su genoma en el de la clula infectada, pudiendo causar mutagnesis insercional al interrumpir antioncogenes o activar pro-oncogenes, o alterando la correcta regulacin de la expresin gnica celular.
Las alteraciones bioqumicas son muy diversas y especficas de cada virus, si bien pueden sealarse las ms importantes a nivel general. Algunos virus son capaces de mostrar esta inhibicin en etapas tempranas de la infeccin pero la mayora de los virus animales lo hacen en etapas tardas. El efecto ms drstico suele producirse en la inhibicin de la expresin de protenas celulares por traduccin preferente o casi exclusiva de protenas virales.
1.- Inhibicin de la sntesis de protenas celulares 2.- Inhibicin de la sntesis de DNA celular 3.- Inhibicin de la sntesis de RNA celular
Cambios en la actividad de enzimas presentes en las membranas. Modificaciones en la funcionalidad del sistema vesicular.