FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

DOCENTE: Dra. Ana Mara del Socorro Vsquez del castillo ALUMNO: David M. Zurita Julca

I.- GENERALIDADES
1. Ttulo del Proyecto: Efecto hipoglicemiante in vitro del extracto acuoso de Stevia rebaudiana en Rattus norvergicus

2. Personal Investigador:
Autor: David Zurita Julca Patrocinador: Lic. Blgo. Julio Silva Estela 3. Carrera Profesional/Especialidad: Carrera Profesional de Biologa - Especialidad de Microbiologa y Parasitologa

4. Tipo De Investigacin:

De acuerdo al fin que se persigue: Aplicada. De acuerdo a la tcnica de contrastacin: Experimental.

5. Rgimen de Investigacin: Libre

6. Localidad e Institucin donde se desarrollar el proyecto: Laboratorio de Bioqumica de la Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo Lambayeque

7. Duracin del proyecto: 8 meses

ACTIVIDADEs
Abr May Jun
FASE DE PLANEAMIENTO Revisin Bibliogrfico Elaboracin de Proyecto Presentacin de Proyecto Aprobacin del Proyecto Implementacin del proyecto FASE DE EJECUCIN Recoleccin de muestras Procesamiento de Muestras Registro de datos Anlisis estadstico de datos

2012
Jul Ago Sep Oct Nov

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8. Cronograma de trabajo

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FASE DE COMUNICACIN
Anlisis e interpretacin Elaboracin del informe Presentacin del informe ---------------------

II.- PLAN DE INVESTIGACION

1. Realidad Problemtica
La diabetes mellitus tipo 2 (DMT2), afecta a ms del 90% de la poblacin con diabetes, y es una compleja enfermedad metablica, caracterizada por los elevados niveles de glucosa plasmtica, adems es

ocasionada por resistencia a la accin de la insulina y por falla de las clulas . Estos dos trastornos suceden simultneamente y se manifiestan de manera variable en cada persona que la padece. La hiperglicemia es causada por un incremento de la produccin de glucosa heptica, como consecuencia de la resistencia a la insulina. Por otra parte, la hiperglicemia post-prandial resulta de la secrecin anormal de insulina por las clulas en respuesta a la comida, produccin heptica excesiva de glucosa y el dficit de captacin de glucosa por los tejidos sensibles a insulina particularmente del msculo esqueltico.(ADA) La prevalencia de diabetes en Per se estima en un incremento del 8% de la poblacin general, siendo Piura y Lima como los departamentos ms afectados. Se menciona que en la actualidad la Diabetes Mellitus afecta a ms de un milln de peruanos y menos de la mitad han sido diagnosticados. Segn la facultad de Medicina Humana de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

Para el tratamiento y control de la diabetes, se han ido desarrollando muchos mtodos ms precisos para
combatir los diagnsticos errneos y poder identificar personas que se encuentran en riesgo y de una manera darle un tratamiento potencial para la prevencin. Sin embargo se han realizado muchos estudios en plantas medicinales como Stevia rebaudiana bertoni,Geranium adyavence, etc cuyos componentes podran realizar un poder hipoglicemiante, utilizado para el control y disminucin de la Diabetes Mellitus.

 IDENTIFICACIN DEL PROBLEMA: Efecto hipoglicemiante del extracto acuoso de Stevia rebaudiana DELIMITACIN DEL PROBLEMA: Diabetes Miellitus 2. PROBLEMA PROBLEMA: Tiene efecto hipoglicemiante el extracto acuoso de Stevia rebaudiana en Rattus novergicus(ratas)?

3. HIPTESIS: El extracto acuoso de Stevia rebaudiana a una concentracin de 0.5ml , si tiene efecto hipoglicemiante en Rattus novergicus.

VARIABLES

Variable independiente: Efecto hipoglicemiante de Stevia rebaudiana Variable dependiente: Rattus novergicus

4. Justificacin e Importancia.
El rango ideal de concentracin de glucosa para una persona en buen estado oscila entre 80 y 90 mg/dL de sangre en las personas en ayunas, por la maana antes del desayuno, esta concentracin se eleva a 120 a 140 mg/dL durante ms o menos una hora despus de una toma de alimento, pero el sistema de retroaccin de control de la glucemia devuelve la glucemia rpidamente al nivel de control, habitualmente dentro de las 2 horas que siguen a la ultima

absorcin de alimentos.

Es por ellos que es necesario el uso de medicamentos con propiedades hipoglicemiantes y la obtencin de medicamentos que sean accesibles a la poblacin por ser de bajo costo. Por esta apreciacin, es importante el reconocimiento de plantas medicinales que cuentan con componentes de poder hipoglicemiante . en este presente proyecto he querido presentar el empleo de un extracto acuoso de una planta medicinal Stevia rebaudiana y comprobar que su empleo facilite el control de glucosa en la sangre, y poder ser aplicado a personas que padecen de Diabetes Mellitus

OBJETIVO GENERAL:

5. OBJETIVO.
Determinar el efecto hipoglicemiante in vitro en Rattus norvergicus con el extracto acuoso de Stevia rebaudiana.

6. Antecedentes.
Paz y Prez (1991) En un estudio experimental, determinaron que el extracto alcoholeter de G. dielsianum administrado por va oral en Oryctolagus cunniculus con

diabetes experimental aloxnica, posee propiedad hipoglicemiente, el estudio fue

realizado en la Universidad Peruana Cayetano Heredia, donde concluye que el

extracto liofilizado de G. dielsianum a dosis de 0,416g/kg de p.c. exhibe una actividad hipoglicemiante en ratas con hiperglicemia experimental inducida con streptozotocina,

extendindose incluso hasta las 24 horas

Valdivia y Hidalgo (2000) Un estudio ms exhaustivo de este tipo de plantas medicinales, para poder demostrar su utilidad en el manejo de la Diabetes Mellitus No Insulino Dependiente (2). Es necesario dar una explicacin cientfica que justifique el uso emprico, en el Per, de las plantas medicinales, con especial atencin a un sector de ellas a las cuales se les atribuye efectos hipoglicemiantes. El conocimiento de su composicin qumica y las propiedades teraputicas que manifiesten, nos permitirn una mayor confiabilidad de sus usos.

7. MATERIALES: Material Biolgico: Rattus novergicus (ratas) Planta de Stevia rebaudiana Materiales No Biolgico: Vasos de Precipitacin de 100, 250 y 500 ml Lunas de reloj Pipeta de 10 ml Jeringas hipodrmicas de 1, 2, 5 y 20 ml Pipetas graduadas de 0.5, 5 y 10 ml Tubos de ensayo Algodn Capilares de hematocrito heparinizados Frasco de vidrio Frasco de polietileno Reactivos: Solventes qumicos Aloxano monohidratado Set de Glicemia enzimtica Wiener

Metodo: A. Recoleccin y preparacin de la muestra

Seleccin de la planta Acondicionamiento de planta Secado de la planta Extracto Transporte Durante 3 dias

Envasado en frascos de polietileno

Mantener la muestra a T 0 Aplicacion en ratas

Descongelado

B. C.

B. preparacin del material biolgico: Se usaran 24 ratas Rattus norvergicus de un peso aproximado de 250-300 g, los cuales seran colocados en jaulas individuales. Las condiciones ambientales sern: temperatura promedio 22-25 C y una humedad del 75% .

C. Preparacin del extracto acuoso Extracto acuoso, 100 g de hojas secas y molidas, se sometern a infusin, luego se filtrar y se desecar mediante refrigeracin a 5C por tres das. D. Induccin de la Hiperglicemia Experimental Se proceder a seleccionar a las ratas, para la administracin de aloxano despus de someter a los animales a un periodo de ayuno de 18 horas, se les administrara mediante inyeccin muscular y/o intraperitoneal, una dosis de 150 mg/kg de peso corporal de monohidrato de aloxano disuelto en agua destilada. Durante 14 das y a intervalos constantes se comprueba el comportamiento general y el nivel de glucosa en sangre. Transcurrido el nmero de das especificado, se registr un aumento estabilizado del nivel de glucosa en sangre y los animales con ms de 250 mg de glucosa por decilitro de sangre se separaron y seleccionaron para el experimento. Conformacin de los grupos de estudio y sumistracin de los tratamientos Las 24 ratas (Rattus norvergicus) , de 3 meses de nacidas con un peso promedio de 250 gramos sern agrupadas en 2 grupos: el primero para recibir un tratamiento con el extracto acuoso de Stevia rebaudiana , el segundo grupo seria el grupo control. Las ratas sern preparadas con un ayuno de 18 horas y se proceder a determinar la glicemia basal a todas las ratas. Luego se les administrara aloxano 150 mg/kg p.c, va intradrmica, al primer grupo de ratas. Al segundo grupo que actuara como grupo control, no se le administrar aloxano. Posteriormente, al primer grupo de ratas aloxanadas se les administrara por va oral un tratamiento diario con el extracto acuoso de Stevia rebaudiana a una dosis de 500 mg/kg p.c. El segundo grupo de ratas no aloxanadas no recibir tratamiento. A los dos grupos se les har tomas de sangre, para determinar los niveles de glicemia. D. Determinacin de la glucosa sangunea.

MTODOS Poblacin: Estar constituida por ratas hembras albinas de 250g a 300g de peso de 3 meses de edad Tamao de la Muestra: Estar constituida por 24 ratas las cuales han sido separadas en 2 grupos, el grupo control y el grupo experimental con 12 ratas cada uno. Al grupo experimental se le inducir la hiperglicemia con aloxano para luego ser tratadas con el extracto acuoso de Stevia rebaudiana

Grupo A Experimental

ESTIMUL O

Grupo B S/estimulo Control Comparaciones : A VS B A ---- A B --- B

A= Nivel de glucosa antes del tratamiento A= Nivel de glucosa despues del tratamiento B, B = Grupo control con extracto acuoso de Stevia rebaudiana