ISSN 1980-3540

03.01, 4-7 (2008) www.sbg.org.br

CNCer: uma doeNa geNtICa

Roberta Losi Guembarovski1* e Ilce Mara de Syllos Clus2 Departamento de Biologia Geral CCB Universidade Estadual de Londrina
Pro-Doc do Programa de Mestrado em Gentica e Biologia Molecular da UEL E-mail: rolosi@uol.com.br
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Docente do Departamento de Biologia Geral e do Programa de Mestrado em Gentica e Biologia Molecular da UEL. E-mail: colus@sercomtel.com.br
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Palavras-chave: cncer, proto-oncogenes, genes supressores de tumor. 1. Introduo Desde 1930, a anlise de dados relativos ao ndice de mortalidade no Brasil mostra que, os tumores malignos e as doenas do aparelho circulatrio, so responsveis por um nmero cada vez maior de bitos, apontando para uma mudana no perfil relativo ao ndice de mortalidade semelhante quela observada nos pases desenvolvidos (PISANI et al., 2002). De um modo geral, o termo cncer empregado para designar mais de uma centena de diferentes doenas heterogneas que, segundo Hanahan e Weinberg (2000), surgem a partir de alteraes essenciais na fisiologia da clula, as quais, coletivamente, contribuem para o crescimento dos tumores malignos. Dentre as alteraes essenciais podem ser citadas: - suficincia em relao aos fatores de crescimento; - insensibilidade aos inibidores de crescimento; - evaso morte celular programada por apoptose; - potencial ilimitado de replicao; angiognese aumentada; - invaso tecidual; - disseminao distncia (metstase). Sabe-se que os fatores ambientais possuem um importante papel na etiologia do cncer e dentre os principais fatores para o surgimento dos tumores malignos esto os carcingenos qumicos e fsicos, agentes infecciosos e o estilo de vida do indivduo. Esses fatores podem ser assim exemplificados : a - certos carcingenos qumicos ambientais como os encontrados na fumaa do cigarro e contaminantes de dieta, como a aflatoxina B1; b - agentes fsicos, como a radiao UV; c - outros fatores incluem vrus e bactrias patognicas, como Helicobacter pylori, o vrus do papiloma humano (HPV), e os vrus das hepatites B e C (HBV/ HCV); d - estilos de vida que ignoram determinados fatores de risco, como o hbito tabagista, exposio excessiva luz solar, dieta gordurosa e o estresse. Ao contrrio disso, a ingesto alimentar de fibras, antioxidantes e a prtica de exerccios fsicos podem contribuir na preveno ao desenvolvimento de tumores malignos. Entre os fatores endgenos que influenciam na carcinognese, podemos citar as variaes individuais nos mecanismos de defesa que incluem o sistema de reparo a danos do DNA e o sistema de detoxificao e eliminao de carcingenos (Minamoto et al., 1999). 1.1 Cncer: uma doena gentica O cncer pode ser considerado uma doena gentica uma vez que desencadeado por alteraes no DNA da clula. No entanto, ao contrrio das demais sndromes genticas humanas, o cncer no necessariamente uma doena hereditria. Os cnceres humanos so, na sua maioria, de origem somtica resultantes da interao de fatores genticos e ambientais (PERERA, 1997). No caso do cncer hereditrio, as mutaes germinativas esto diretamente associadas predisposio familial para o desenvolvimento de tumores e, nesses casos especficos, o cncer uma doena gentica e hereditria (CAMARGO et al., 1999). Assim, cerca de 5% a 10% dos cnceres so hereditrios, provenientes de mutaes na linhagem germinativa (FEARON, 1997) e diversos genes vm sendo identificados como sendo importantes na etiologia destes tumores. Como exemplos podem ser citados os genes BRCA1 (breast cancer 1) e BRCA2 (breast cancer 2), do cncer de mama e ovrio hereditrio e o gene APC (adenomatous polyposis coli), da polipose adenomatosa familial (Minamoto et al., 1999). O cncer uma doena cuja iniciao e progresso envolvem passos nos quais o DNA acumula uma srie de mutaes. Em geral, as mutaes incluem alteraes de seqncia, perdas, ganhos e rearranjos cromossmicos (simples ou extremamente complexos). Evidncias do envolvimento de mutaes em casos de cncer surgiram inicialmente da observao de alteraes genticas re-

correntes e especficas em determinados tipos tumorais, a partir da observao de alteraes em nvel cromossmico. Hoje se sabe que estas alteraes afetam diferentes passos nas vias que regulam os processos de proliferao, diferenciao e sobrevivncia celulares. O cncer ento resultante do crescimento de sucessivas populaes celulares nas quais as mutaes se acumularam em um processo denominado de expanso monoclonal. Este processo culmina na formao de uma massa tumoral com clulas contendo diferentes padres de alteraes genticas e com extensa heterogeneidade intra-tumoral e de paciente para paciente, mesmo para subtipos histologicamente idnticos. Assim, o cncer uma doena associada a alteraes genticas mltiplas, originando-se a partir de uma nica clula normal que acumulou mutaes aps sucessivas divises celulares num processo de evoluo clonal (CAVENEE e WHItE, 1995). Atualmente sabe-se que o cncer resulta de alteraes estruturais e/ou funcionais em genes cuja funo controlar o crescimento normal e a diferenciao das clulas que compem o organismo e, ainda, que estas alteraes envolvem tanto a ativao de proto-oncogenes quanto inativao de genes supressores de tumor (CHANG et al., 1995; HANAHAN e WEINBERG, 2000). Genes associados aos mecanismos de reparo aos danos do DNA so considerados como um terceiro grupo que pode atuar direta ou indiretamente no processo de carcinognese (HOEIJMAKERS, 2001). 1.2 genes do Cncer Sendo o cncer uma doena gentica, a identificao e caracterizao dos genes envolvidos na sua origem e progresso de fundamental importncia para a compreenso das bases moleculares da doena (PARMIGIANI e CAMARGO, 200). Os proto-oncogenes so genes celulares normais que atuam no controle positivo, ou seja, estimulam o crescimento e a diferenciao celular (IRISH e BERNStEIN, 1993). So genes capazes de induzir ou manter a transformao celular em animais experimentais ou em culturas de clulas. Podem tornar-se oncogenes por meio de mutaes resultantes da exposio aos agentes carcinognicos fsicos, qumicos ou biolgicos acima j citados. A ativao desses genes ocorre por meio de translocaes cromossmicas, amplificaes gnicas ou mutaes de ponto, de maneira que alteraes em um nico alelo so suficientes para transform-los em oncogenes e contribuir na transformao maligna. Como conseqncia dessas alteraes, a expresso dos oncogenes leva a uma proliferao celular anormal, resultando na formao do tumor (COOPER, 199). Muitos dos conhecimentos atuais relacionados aos oncogenes foram obtidos inicialmente de estudos com retrovrus. Estes so vrus de RNA e, durante o seu ciclo

de vida, necessitam da sntese de DNA atravs da transcriptase reversa. O conceito de que alguns tipos de genes celulares possuam potencial oncognico ficou claro com a descoberta de um homlogo do gene viral do sarcoma de Rous (v-src) no genoma de clulas normais. A partir desta constatao, outras seqncias de retrovrus oncognicos tiveram seus homlogos identificados em clulas de animais superiores. Assim, os oncogenes presentes no genoma viral recebem a designao de v-onc (oncogenes virais) enquanto que aqueles presentes no ncleo de clulas animais so chamados de c-onc (oncogenes celulares). Atualmente esto descritos cerca de 100 proto-oncogenes que podem ser classificados em diferentes grupos, baseados nas propriedades funcionais de seus produtos proticos: fatores de crescimento, receptores de fatores de crescimento, protenas transdutoras de sinais, fatores de transcrio e reguladores de apoptose (SILVA, 200). Uma segunda classe de genes, os supressores tumorais, atuam como reguladores negativos, ou seja, funcionam como freios da proliferao celular (VERMA e tRIANtAFILLOU, 1998). Existem aproximadamente 30 genes supressores tumorais identificados que codificam para protenas reguladoras dos checkpoints celulares e inibem a progresso do ciclo celular, caso o DNA esteja danificado. Muitos autores incluem nesta classe as protenas que promovem apoptose e aquelas envolvidas no reparo a danos do DNA. Uma vez que estes genes controlam negativamente a proliferao e a sobrevivncia celulares, mutaes que levam perda das funes por eles reguladas podem contribuir para o desenvolvimento de um tumor. Conseqentemente, alteraes inativadoras liberariam a clula da inibio imposta por estes genes, levando proliferao desordenada, caracterstica das clulas cancerosas (WEINBERG, 1991). Em contraste com as mutaes para proto-oncogenes, que atuam como dominantes celulares, as mutaes que inativam genes supressores de tumor so recessivas pois somente afetam o seu funcionamento quando ambos os alelos so mutados. A descoberta dos genes supressores de tumor ocorreu com base em trs linhas principais de evidncias: estudos com hbridos entre clulas malignas e normais, cncer familial e estudos de perda allica ou de heterozigose (Loss of heterozygosity- LOH) em tumores (SILVA, 200). O conhecimento atual sobre esta classe de genes veio da observao de Knudson, em 1971, de que aproximadamente 30% dos casos de retinoblastoma eram bilaterais. Assim, foi sugerido que estes tumores possuam uma base hereditria (KNUDSON, 2001) e a hiptese postulada por Knudson conhecida por inativao em dois passos e prope que tanto os casos hereditrios quanto aqueles espordicos seriam causados por dois eventos mutacionais no gene retinoblastoma (RB1). No retinoblastoma hereditrio, um alelo mutado herdado

pelo indivduo determinando o aparecimento dos tumores em idade precoce, ainda na infncia, mas a inativao somtica do segundo alelo necessria para o desenvolvimento tumoral. No retinoblastoma no hereditrio, para que haja a inativao das duas cpias do gene RB1,

so necessrios dois eventos somticos independentes, levando ao aparecimento dos tumores em idade mais tardia, j na fase adulta do indivduo (SILVA, 200). A tabela 1 ilustra as principais diferenas entre proto-oncogenes e genes supressores de tumor.

tabela 1. Caractersticas principais dos oncogenes e genes supressores de tumor

Mutao

Caractersticas

Mecanismo de ativao/inativao Eventos mutacionais necessrios Associao com cncer hereditrio Funes das protenas codificadas Exemplos

Dominante (ganho de funo) Mutao pontual, translocao, amplificao gnica e insero viral 1 evento Raramente (EX: Neoplasia Endcrina Mltipla tipo 2) Fatores de crescimento, receptores de fatores de crescimento, protenas de transduo de sinal, fatores de transcrio ABL1, MYC, K-RAS, RET

Oncogenes

Recessiva (perda de funo) Mutao pontual, perda allica, metilao e insero viral 2 eventos Freqentemente (EX: Sndrome de Li-Fraumeni) Protenas envolvidas no controle do ciclo celular, no reparo do DNA e na induo da apoptose RB1, TP53, BRCA1, MLH1

Supressores de tumor

Legenda: ABL1: c-abl oncogene 1; MYC: v-myc myelocytomatosis viral oncogene homolog; K-RAS: v-Ki-ras2 Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog; RET: ret proto-oncogene; RB1: retinoblastoma 1; TP53: tumor protein p53; BRCA1: breast cancer 1; MLH1: mutL homolog 1, colon cancer, nonpolyposis type 2. 2. Perspectivas Futuras As vias atravs das quais uma clula torna-se maligna so muito variveis e a descoberta dos genes envolvidos neste processo representou um marco no entendimento das bases moleculares do cncer. Assim, os oncogenes e os genes supressores de tumor desempenham um papel fundamental na gnese tumoral, e o aumento do conhecimento sobre eles ir, sem dvida, contribuir de forma decisiva para o desenvolvimento de mtodos diagnsticos mais sensveis e permitir uma atuao melhor, mais especfica e eficaz no campo da preveno, prognstico, seguimento e teraputica dos pacientes (PARMIGIANI e CAMARGO, 200). Atualmente a importncia prtica do conhecimento dos chamados genes do cncer deve-se ao fato de que eles so alvos potenciais para novos tipos de terapias que procuram eliminar seletivamente as clulas cancerosas, poupando as clulas normais e reduzindo os efeitos colaterais para os pacientes. Exemplos deste tipo de abordagem que j esto sendo utilizados com sucesso: o Herceptin, um anticorpo humanizado especfico (so anticorpos modificados, contendo seqncias de aminocidos encontrados em humanos para evitar reaes de rejeio) para clulas que hiper-expressam o gene ERBB-2 e que utilizado no tratamento do cncer de mama, e o Gleevec, um agente qumico inibidor da atividade tirosina-quinase da protena de fuso BCR/ABL, resultante da translocao entre os cromossomos 9 e 22, na leucemia mielide crnica (SILVA, 200). O mapeamento e o seqenciamento do genoma desenvolvidos durante o Projeto Genoma Humano revolucionaram a Oncogentica. Depois de mais de duas dcadas de pesquisa relativa ao DNA, surgiu a necessidade de se investigar o cncer em relao atividade transcricional das clulas tumorais, pois acredita-se que tal atividade transcricional pode fornecer valiosas informaes sobre a doena (SKRZYPSKI, 2007). As metodologias baseadas em microarrays para a avaliao da expresso gnica surgiram como uma ferramenta de grande poder, pois possuem a capacidade de avaliar os processos biolgicos em larga escala, substituindo a anlise isolada pelo estudo de centenas a milhares de genes em um mesmo experimento (GUIMARES E FERREIRA, 200). Alm disso, segundo SKRZYPSKI (2007), a tcnica de qRt-PCR (PCR Real Time), tambm amplamente utilizada em estudos de expresso gnica, pode levar ao conhecimento de perfis de expresso com valores prognstico e teraputico que muito iro contribuir para um melhor conhecimento das bases moleculares da doena. De um modo geral, espera-se que, com o avano dos estudos na rea de gentica do cncer, aumente o nmero de marcadores moleculares, possibilitando um


conhecimento maior da etiologia da doena e o desenho de novas e eficazes estratgias teraputicas, menos txicas e mais especficas para cada paciente e para cada tipo especfico de tumor (SILVA, 2004). De acordo com Hanahan e Weinberg (2000), futuramente ser possvel entender como e quando um determinado tratamento falhar ou beneficiar um paciente, uma vez que sero desenvolvidas drogas-alvo direcionadas para combater cada uma das propriedades adquiridas de um tumor. Referncias Bibliogrficas
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