Sangue

O sangue um tecido conjuntivo especializado fludo constitudo por clulas e plasma, (componente extracelular + matriz extracelular fluida), que circula pelo sistema cardiovascular Estes componentes podem ser separados por centrifugao de sangue com anti-coagulante: Eritrcitos: constituem 45% do sedimentado (hematcrito) Leuccitos e plaquetas: constituem a camada leucocitria depositada acima dos eritrcitos. Plasma: poro sobrenadante trasnlcida

Quantidade: Volume total de sangue cerca de 5L (aproximadamente, 7% do peso corporal)

Funes
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Transporte de hormonas e de outros agentes de regulao Transporte de oxignio Transporte de dixido de carbono e de resduos metablicos Transporte de substncias nutritivas Importncia das protenas plasmticas; coagulao sangunea Equilbrio trmico Equilbrio cido-base e osmtico Funes imunitrias

Plasma
Cerca de 54% do volume sanguneo. Cerca de 92% gua, solvente de muitos solutos, os quais ajudam a manter a homeostasia

Constituio do plasma
gua Electrlitos e ies Nutrientes Hormonas Lipidos Vitaminas Gases respiratrios Produtos do metabolismo

Protenas plasmticas (3 tipos principais): 1. Albuminas: mais abundantes; 70kDa; presso osmtica de aproximadamente 70%; transporte de hormonas, metabolitos e frmacos 2. Globulinas : incluem anticorpos e certas protenas responsveis pelo transporte de lpidos e de alguns ies de metais pesados a. Alfa globulinas: ceruplasmina, fatores de coagulao b. Beta-globulinas: transferrina, lipoprotenas, fatores das cascatas de complemento, fibrinognio, fatores de coagulao, etc c. Gama-globulinas: imunoglobulinas 3. Fibrinognio: protena solvel que se polimeriza para formar a protena insolvel fibrina, durante a coagulao sangunea

Nota: quando o sangue removido da circulao o fibrinognio vai ficar activado gerando a fibrina, protena que forma redes onde ficam retidos os elementos figurados formando o cogulo. Ao remover-se o cogulo obtm-se um lquido amarelado soro, ou seja, Soro = plasma sanguneo, mas sem fatores de coagulao As protenas plasmticas exercem uma presso osmtica dentro do sistema circulatrio que ajuda a regular a troca da soluo aquosa entre o plasma e o lquido extracelular. Funo do plasma: Transporte de gases, nutrientes, produtos metablicos de excreo, clulas e hormonas por todo o corpo. Protenas do plasma e as doenas que tratam: 1. Albumina a. Choques b. Queimaduras c. Sndrome de Stress Respiratrio do Adulto d. Cirurgia de Bypass Coronrio 2- IVIG (Intravenous Immonuglobulin)Deficincias de imunodeficincias primrias a) b) c) Doenas auto-imunes Polineuropatia inflamatria desmielinizante Idiopatic Thrombocytopenic Syndrome

3- Alfa-1 Antitripsina- Deficincia de alfa-1 antitripsina 4- Fatores de coagulao (VIIII e IX) Hemofilias A e B

Sndrome de von Willebrand Doenas hemorrgicas

Hematocrito: volume de eritrcitos empacotados numa amostra de sangue. 45% do volume sanguneo Observao das clulas sanguneas - Preparao - sem parafina, corte e incluso ESFREGAOS Coloraes: 1- Misturas tipo Romanovsky - policromtica, como o mtodo de Giemsa, de Wright ou de Leishman, usada para o exame ao microscpio ptico. 2- Corante de Wright eosina e mistura de azuis de metileno 3- Corante de Leishman eosina e azur I 4- Corante de Giemsa mistura com azur II Acidofilia/eosinofilia (rosa): afinidade para a eosina, que um corante bsico uma caracterstica particular da hemoglobina q preenche o citoplasma dos eritrcitos. Basofilia: afinidade para o azul de metileno, que um corante bsico Esta uma caracterstica do DNA nos ncleos e do RNA no citoplasma, isto , dos ribossomas. Azurofilia: afinidade para tinturas azuis, que resultam da oxidao do azul de metileno na mistura. tpica dos lisossomas, um dos tipos de grnulos encontrados nos leuccitos Neutrofilia: afinidade para coloraes complexas que so formadas nas misturas, que tm uma cor salmo a lils. Caracterstica dos grnulos citoplasmticos especficos dos neutrfilos.

Eritrcitos
So glbulos anucleados, com forma bicncava e com dimetro normal de 7,5m. So constituidos por: Membrana plasmtica Citosqueleto Hemoglobina Enzimas glicolticas A forma bicncava dos eritrcitos determinada por: Citosqueleto - banda 3 e 4 protena que funciona como canal de troca inica, protenas contrteis espectrina, actina. O citoesqueleto torna as hemcias elsticas/flexveis, para se poderem introduzir nos capilares mais finos Contedo em H2O (relacionado com a concentrao de ies inorgncios dentro da clula). A membrana plasmtica composta por uma dupla camada lipdica e protenas de membrana Protenas integrais: Glicoforina C e protena banda 3 Protenas perifricas: organizadas de forma hexagonal: spectrina, actina, protena banda 4.1, 4.9, aducina, tropomiosina e anquirina. a forma de disco bicncavo, juntamente com a fluidez da membrana plasmtica, que permite a deformabilidade do eritrcito que lhe permite conseguir passar nos capilares de menor dimetro (3-4 m) Imediatamente abaixo da membrana h uma rede de protenas formando um citosqueleto, ancorado membrana por diversas protenas. A principal protena esqueltica a espectrina.

Normocitose manuteno da forma, com dispndio energtico e de glicose; 90% gasto por via anaerbia e 10% por via das pentoses fosfato Anisocitose macrcitos e micrcitos; Poiquilocitose drepancitos, equincitos, esfercitos e eliptcitos; poiquilo forma; Eliptocitose hereditria problemas com a protena 4.1. Desde portadores assintomticos at situaes raras de pacientes com anemia hemoltica grave So as clulas sanguneas mais numerosas encontrando-se em nmero de 4,1 a 6 milhes/l no homem e 3,9 a 5,5 milhes/l na mulher. Tm como funo principal o transporte de oxignio e CO2, para a qual contribui o facto de conterem elevadas quantidades de hemoglobina (Hb), protena acidfila/bsica. Durante o processo de maturao: perde o ncleo (antes de serem libertados no sangue) todos os organelos citoplasmticos degeneram so sintetizadas grandes quantidades do pigmento respiratrio hemoglobina

O tempo de vida de um eritrcito em mdia 120 dias e regido em parte pela sua capacidade de manter a forma bicncava. Sem os organelos apropriados, os eritrcitos so incapazes de substituir as enzimas e as protenas em deteriorao da membrana, o que leva a uma capacidade diminuda de bombear ies de Na+ para fora da clula, de captar gua e de assumir a forma bicncava. Essas clulas so removidas da circulao por fagocitose por macrfagos no bao, medula ssea e fgado ou destruidos por hemlise no bao. O rim produz eritropoietina (EPO) que induz o desenvolvimento de eritrcitos na medula ssea. Havendo mais eritrcitos em circulao, aumenta a capacidade de transporte de oxignio. Posteriormente, a quantidade de eritrcitos aliviada, o que leva a uma baixa capacidade de transporte de oxignio, o que leva produo de eritropoietina, e recomea o ciclo. Processo este dependente de ferro Dopping e eritropoietina: com o uso de EPO como dopping, o efeito secundrio mais comum parece ser um aumento na presso sangunea. Este aumento no se deve ao aumento do hematcrito e da viscosidade, mas pode ser o efeito direto da hormona nos vasos sanguneos, causando a constrio dos vasos. Esta constrio pode ter vrios efeitos muito graves, incluindo a morte!

Reticulcitos: So a forma imatura na qual os eritrcitos so libertados na circulao a partir da medula ssea. Sem ncleo, mas produzem cerca de 35% da quantidade total de hemoglobina que possuir um eritrcito maduro Ainda contm mitocndrias, ribossomas e elementos de Golgi suficientes para completar o citosqueleto e os 20% remanescentes da sntese da hemoglobina. So ligeiramente maiores que os eritrcitos maduros. A densidade citoplasmtica menor, devido menor concentrao de hemoglobina. A maturao final em eritrcitos ocorre dentro de 24 a 48 horas aps a libertao. A taxa de libertao de reticulcitos geralmente igual taxa de remoo dos eritrcitos gastos pelo bao e fgado. Como o tempo de vida dos eritrcitos circulantes de 120 dias, os reticulcitos constituem um pouco menos de 1% dos eritrcitos em circulao. A percentagem de reticulcitos aumenta como um ndice de eficcia da administrao de ferro, em anemias ferropnicas Quando ocorre uma depleco grave de eritrcitos (como aps hemorragia ou hemlise) a taxa de produo de eritrcitos na medula ssea aumenta e a proporo dos reticulcitos no sangue circulante eleva-se (reticulocitose). Assim, a contagem dos reticulcitos fornece uma medida conveniente da formao dos eritrcitos na medula ssea. Os eritrcitos, ao serem libertados, ainda tm resduos de reticulina, podem apresentar presena anormal de fragmentos nucleares, Corpos

de Howell Jolly e, raramente, tambm de resduos de microtbulos do fuso mittico e Anis de Cabot (remanescncias de mitocndrias) Colorao: azul-brilhante-de-cresilo ou novo-azul-de-metileno

Metabolismo do eritrcito:
A fixao, o transporte e a entrega do oxignio pela hemoglobina no so dependentes do metabolismo do eritrcito. Os eritrcitos utilizam energia na: manuteno dos gradientes electrolticos normais atravs da membrana plasmtica manuteno dos tomos de ferro da hemoglobina na forma divalente manuteno dos grupos sulfidrilos das enzimas dos eritrcitos e da hemoglobina na forma activa, reduzida. A energia necessria a esse processo derivada do metabolismo anaerbio da glicose, uma vez que a ausncia de mitocndrias exclui a produo de energia aerbica.

As clulas coram de rosa (eosinfilas/acidfilas) devido ao seu alto contedo em hemoglobina (protena bsica). A colorao plida da regio central do eritrcito o resultado da sua forma de disco bicncavo. A alta densidade electrnica dos eritrcitos deve-se aos tomos de ferro da hemoglobina.

Leuccitos
So clulas cujo citoplasma pouco corvel com qualquer tipo de mistura cromtica e apresentam grnulos azurfilos inespecficos ou primrios. Alguns deles apresentam tambm grnulos especficos ou secundrios. O seu nmero varia com a idade, sexo e condies fisiolgicas. No adulto normal de 6000 a 10000/l. Tm como funo geral a defesa humoral e tecidular e podem migrar atravs da parede dos capilares. Todos os leuccitos exibem movimentos ameboides, que lhes permitem migrar para dentro e para fora (diapedese) do sistema circulatrio e pelos tecidos H 5 tipos de leuccitos (neutrfilos, eosinfilos, basfilos, linfcitos e moncitos) dividos em 2 grupos principais com base na sua forma nuclear e nos grnulos citoplasmticos. As leucemias podem afetar qualquer tipo de leuccito

Granulcitos

Agranulcitos

neutrfilos eosinfilos basfilos linfcitos moncitos

Never Let Monkeys Eat Bananas (do maior para o menor; neutrfilos, linfcitos, moncitos, eosinfilos e basfilos) Tipo de leuccito Neutrfilos Linfcitos Moncitos Eosinfilos Basfilos Clulas/microlitro 3000-6000 1500-4000 300-600 150-300 0-100 Percentagem distribuio 60-70 % 20-40 % 2-6 % 1-4 % 0-0,5 % de

Granulcitos
Apresentam grnulos azurfilos e especficos ou secundrios So clulas fagociticas com ncleo multilobulados e polimorfos. Distinguem-se, quanto afinidade para os corantes, em neutrfilos, eosinfilos e basfilos.

1. Neutrfilos:
So o tipo mais comum de leuccitos no sangue: perfazem 60 a 70 % do nmero total de leuccitos do adulto. Tm 12 a 15m de dimetro. Tm vida mdia de 6 a 7 horas e podem viver at 4 dias no tecido conjuntivo. Os neutrfilo tm ncleos altamente lobulados:

 Neutrfilos maduros: ncleo com 2 a 5 lbulos reunidos por pontes de cromatina. Neutrfilos menos maduros: ncleo geralmente no to lobulado, alongado ou em bastonete Neutrfilos idosos - hipersegmentado Contm um nmero considervel de grnulos limitados por membrana: Grnulos primrios: So os primeiros grnulos a aparecer durante a diferenciao dos neutrfilos. So grnulos de cor prpura: grnulos azurfilos. So grandes lisossomas. Contm as hidrolases cidas usuais lisossmicas mas tambm alguns agentes microbicidas, inclusive a mieloperoxidase (esta usada como marcador para os grnulos primrios) Grnulos secundrios: So os grnulos mais numerosos no citoplasma. So muito menores que os grnulos primrios. Forma de basto, geralmente. So especficos dos neutrfilos (fosfatase alcalina, colagenase, lactoferrina, lisozima). Usa-se a fosfatase alcalina como marcador histoqumico para estes grnulos especficos dos neutrfilos. A actividade enzimtica indicada por um depsito granular castanho no citoplasma do neutrfilo (e menor nos menos maduros). Contm e secretam substncias envolvidas na resposta inflamatria aguda, como mediadores inflamatrios e activadores do complemento. Essas substncias so libertadas no espao extracelular durante a inflamao. Grnulos tercirios: Mais difceis de identificar. Contm enzimas que so libertadas no espao extracelular, metaloproteinases inclusiv a gelatinase (degrada o colagneo lesado) e colagenases, ou ento com fostatases Inserem molculas de aderncia nas membranas celulares, desse modo possivelmente facilitando a fagocitose. Metabolismo: Gliclise anaerbia (demonstrada pela pobreza em mitocndrias e a abundncia de glicognio), o que permite a sobrevivncia em meios pouco oxigenados dos tecidos lesados Via das fosfopentoses gera oxidantes microbicidas.

 Reduzida sntese proteca (demonstrada pela cromatina condensada e poucos organitos), logo tem uma capacidade muito limitada de regenerar as enzimas lisossmicas. O neutrfilo incapaz de actividade contnua e degenera aps um nico surto de actividade. Os neutrfilos exibem motilidade e a intensa actividade fagocitria, caracteristicas reflectidas no grande contedo de protenas contrcteis (actina, miosina, tubulina e protenas associadas aos microtbulos). A migrao assegurada pela presena de L-selectina e integrinas com afinidade para ligantes da clulas endotelial como as molculas de adeso intercelular 1 e 2 (ICAM-1 e -2) Funo: eliminao de bactrias e outros microorganismos invasores, destruio de tecido lesado. Os neutrfilos na circulao so atrados pela presena de microorganismos este processo mediado por quimiotaxinas libertados pelo tecido lesado e gerados pela interaco dos anticorpos com os antignios na superfcie dos microorganismo. A opsonizao (revestimento dos organismos com os anticorpos e o complemento) acentua a actividade fagocitria dos neutrfilos O microoganismo circundado por pseudpodes que depois se unem para englob-lo completamente numa vescula endocitria: fagossoma. O fagossoma funde-se com grnulos citoplasmticos, em particular com grnulos primrios, que descarregem o seu contedo, expondo o organismo a uma mistura potente de enzimas lisossmicas. A morte muito acentuada pela produo de perxido de hidrognio e superxido, por meio da reduo enzimtica do oxignio. Um efeito secundrio dessa grande capacidade destrutiva a leso considervel dos tecidos circundantes no caso de vazamento do contedo dos grnulos para dentro do ambiente extracelular. Um precursor importante na descarga dos grnulos um fenmeno conhecido como estimulao do neutrfilo. Esta envolve a fixao da fraco C5a do complemento a uma proporo significativa dos receptores na membrana plasmtica do neutrfilo. C5a induz a quimiotaxia, a desgranulao e a produo de perxido de hidrognio e de superxido.

Histopatologia
- Corpos de Dhle: So incluses remanescentes de ribossomas livres que permaneceram aps um estgio de desenvolvimento mais precoce. Podem ser encontrados com freqncia em infeces bacterianas, traumas e queimaduras. - Exagero de neutrfilos em banda ou excessivamente polimorfonucleados deficincia de vitaminas B9 (cido flico) ou B12 - Nos neutrfilos femininos, o cromossoma X condensado (corpsculo de Barr), existe sob a forma de um pequeno apndice (em formato de baqueta de tambor) num dos lbulos nucleares.
- H muitas doenas hereditrias de diferenciao de neutrfilos. Exs.: no se

forma NADPH oxidase; dificuldade de formao de mitocndrias (falta mobilidade, no atacam, se forem pulmonares ou peritoneais morte!)

2. Eosinfilos
Constituem 1 a 3 % dos leuccitos sricos. Nmeros acentuados de eosinfilos circulantes (eosinofilia) encontrados em doenas parasitrias e alguns distrbios alrgicos. O seu nmero maior pela manh e so menos numerosos tarde. Tm 10 a 15m de dimetro (maior que o neutrfilo). Apresentam um ncleo bilobulado (a maioria).

so

Localizao: Permanecem na medula ssea por vrios dias aps a sua produo. Depois circulam por cerca de 3-8 horas. A maioria entra na pele, nas mucosas pulmonares e gastrointestinais, de onde podem migrar para dentro das secrees O destino e o tempo de vida dos eosinfilos no so conhecidos. Contm grnulos especficos: Os grnulos especficos so fixados membrana, de tamanho uniforme e forma ovoide. 200 grnulos especficos/clula primrios e secundrios contveis Cada um deles contendo um cristaloide constitudo por uma protena muito alcalina protena bsica principal (major basic protein), por outras protenas bsicas, protena catinica de eosinfilo, enzimas hidrolticas lisossmicas (aryl-sulfatase, glucuronidase, catepsina, fosfolipase, RNAase, elastase) e mieloperoxidase.Tambm contm histaminases Grnulos menores tambm esto presentes nos eosinfilos maduros e contm aryl-sulfatase e fosfatase cida (a concentrao da primeira 8 vezes maior nos eosinfilos que em outros leuccitos e parece ser secretada independentemente da fagocitose e da desgranulao). Os grnulos especficos (com teor alcalino) coram de vermelho brilhante pela eosina e em vermelho-tijolo pelos mtodos de Romanowsky. Os grnulos azurfilos so lisossomas. Contm uma variedade das habituais hidrolases cidas lisossomais A matriz contm uma variedade de enzimas hidrolticas, inclusiv a histaminase

Produzem mediadores chave: 1. 2. 3. 4. Major basic protein confere a acidofilia intensa dos grnulos Protena catinica eosinoflica Interleucinas Leucotrieno

Funes: Eliminao de parasitas (devido presena de receptores para a IgE) atravs da libertao do contedo dos grnulos para dentro do ambiente externo e no por fagocitose. Fagocitose normal

 Migrao mediada por quimiotaxia em resposta a produtos bacterianos e do complemento, mas principalmente por substncias libertadas pelos basfilos e mastcitos, sobretudo histamina e o factor quimiottico eosinoflico da anafilaxia (ECF-A), bem como por linfcitos activados reaces alrgicas Destruio de complexos antignio-anticorpo Limitao e circunscrio de processos inflamatrios Os eosinfilos podem ter um papel na melhoria de certos aspectos das reaces de hipersensibilidade medida que neutralizam a histamina e tambm produzem um factor chamado inibidor derivado do eosinfilo, que se acredita inibir a desgranulao dos mastcitos. O SRS-A, uma substncia vasoactiva produzida pelos basfilos e mastcitos, inibido pelos eosinfilos activados. Histopatologia - H leucemia eosinoflica crnica. Pode ser por causa iatrognica! (alergias medicamentosas, p.e.) - A heparina confere metacromasia

3. Basfilos:
Constituem menos de 1% dos leuccitos sricos. Tm 12 a 15m de dimetro Ncleo mais homogneo que os outros granulcitos e bilobulado., ncleo volumoso com forma irregular (em forma de S), geralmente, encoberto pelos grnulos Citoplasma contm ribossomas livres, mitocndrias e glicognio. Caracterizados por grandes grnulos citoplasmticos muito basfilos (azul escuro), que os distinguem dos outros So em menor nmero que os dos eosinfilos. So maiores e em menor nmero que os dos mastcitos. So muito solveis em gua e tendem a ser diluidos nas preparaes comuns dos esfregaos de sangue, aumentando assim a dificuldade de se identificarem os basfilos nos esfregaos. Quando corados pelo azul de toluidina, um corante bsico, os grnulos fixam o corante, que muda de cor para o vermelho (metacromasia). Os grnulos citoplasmticos dos basfilos e dos mastcitos contm proteoglicanos constitudos por glicosaminoglicanos ligados a um cerne proteico, o que explica a metacromasia. Os proteoglicanos que constituem os grnulos so uma mistura varivel de heparina e condroitino-sulfato. Contm histamina, calicrena, a substncia de reaco lenta da anfilaxia (SRS-A) e o factor quimiottico eosinfilo da anafilaxia (ECF-A).

Os grnulos tm heparina, responsvel pela metacromasia destas clulas.

Compartilham muitas semelhanas estruturais e funcionais com os mastcitos teciduais. Os basfilos so os precursores dos mastcitos a caminho dos tecidos perifricos. A diferena entre os 2 tipos celulares que os mastcitos so maiores que os basfilos, contendo serotonina e 5-hidroxitriptamina que e libertada extra-celularmente, ao contrrio dos basfilos. O seu tempo de vida desconhecido. Funo: Participao nos processos alrgicos (possuem receptores para as IgE) Resposta imunolgica a certos parasitas. A exposio ao alergnio resulta num antignio a formar pontes entre molculas de IgE adjacentes, o que deflagra a exocitose rpida dos contedos dos grnulos (desgranulao). A libertao de histamina e outros mediadores vasoactivos , portanto, responsvel pela chamada reaco imediata da hipersensibilidade (anafilactoide), caracterstica da rinite alrgina (febre do feno), de algumas formas de asma, de urticria e do choque anafiltico. No entanto, h outros estmulos independentes da IgE para a desgranulao dos mastcitos. Tal como os mastcitos, ligam-se a um anticorpo secretado pelos plasmcitos, a IgE, atravs de uma elevada afinidade dos receptores Fc expressos na superfcie celular. A subsequente exposio aos antignios (alergnios) e reao com os mesmos despoleta a ativao dos basfilos e dos mastcitos e a libertao de agentes vasoativos, atravs dos grnulos

Histopatologia Basofilia aumento do nmero de basfilos (mais do que 150/L de sangue). Observa-se em: 1. Reaes agudas de hipersensibilidade; 2. Infees virais; 3. Doenas inflamatrias crnicas, como artrite reumatide e colite ulcerosa 4. Os basfilos tambm podem constituir algumas das clulas infiltrantes na dermatite alrgica e na rejeio dos aloenxertos de pele, fenmeno conhecido por hipersensibilidade basfila cutnea (hipersensibilidade tardia)

Agranulcitos
No apresentam granulaes especficas, apenas os grnulos lisossomais (inespecificos) O ncleo redondo ou reniforme, no lobulado. So altamente fagocitrios, destruindo microorganismos, detritos celulares e partculas. Essa actividade pode ser acentuada e dirigida por respostas imunes a agentes estranhos especficos So subdivisveis em linfcitos e moncitos.

1. Linfcitos
Perfazem 20 a 40% do nmero total de leuccitos (2 tipo mais comum de leuccitos no sangue) As infeces virais tendem a excitar uma resposta linfocitria e um aumento do nmero e da proporo dos linfcitos na circulao perifrica (linfocitose). Tempo de vida: uns vivem alguns dias, enquanto outros vivem nos tecidos dias a anos! So esfricos. A maioria so pequenos ( 6 a 9 m O); medios e grandes ( 9 a 18 m O). P 8-10 m; M 12-15 Linfocitos m; G 15 a 18 m. Ncleo redondo, densamente corado. Citoplasma relativamente pequeno, plido basfilo (muitos ribossomas livres) e no-granular. A quantidade de citoplasma depende do estado de actividade do linfcito. No sangue circulante h uma predominncia de linfcitos inactivos pequenos (6-9m dimetro). Os linfcitos pequenos apresentam ncleos esfricos, por vezes com incisuras e o seu citoplasma ligeiramente basfilo e pode conter grnulos azurfilos. Os linfcitos grandes (9-15m dimetro) constituem cerca de 3% dos linfcitos no sangue perifrico. Os linfcitos grandes representam linfcitos B activados a caminho dos tecidos, onde se transformaro em plasmcitos secretores de anticorpos; e os linfcitos NK. Os linfcitos desempenham sempre o papel-chave em todas as respostas imunes e, em contraste com os outros leuccitos, a sua actividade sempre dirigida contra agentes estranhos especficos. O sangue fornece o meio no qual os linfcitos circulam entre os vrios tecidos linfoides e todos os outros tecidos do corpo. A maioria dos linfcitos na circulao encontra-se num estado metablico e funcional relativamente inactivo. Podem distinguir-se: quanto ao tamanho: pequenos, mdios e grandes; quanto origem:

Linfcitos B de origem medular, participam na imunidade humoral. Linfcitos T de origem timica, participam nas respostas imunitrias mediadas por clulas. As clulas NK - "natural killer" - so em nmero reduzido e podem apresentar-se como linfcitos de maiores dimenses.~

2.

Moncitos
Contabilizam 3 a 8% dos leuccitos sricos. Tempo mdio de vida: circulam no sangue aproximadamente 20h, saindo ento da circulao Tm dimetro entre 12 e 20m (so os leuccitos maiores). Ncleo tem forma varivel (geralmente oval) com chanfraduras ou reniforme. Localiza-se excntricamente e cora menos intensamente que o dos outros leuccitos. Citoplasma basfilo (cora em azul-acinzentado plido pelos mtodos de Romanowsky) e contm numerosos grnulos lisossmicos pequenos de 2 tipos: Lisossomas primrios: contm fosfatase cida, arilsulfatase e peroxidase. So anlogos aos grnulos primrios dos neutrfilos O contedo do outro tipo de grnulos no conhecido. Ao contrrio dos neutrfilos, os moncitos so capazes de actividade lisossmica contnua e de regenerao que utiliza vias metablicas aerbicas e anaerbicas, dependendo da disponibilidade de oxignio nos tecidos. So clulas altamente mveis e fagocitrias e so os precursores dos macrfagos, grandes clulas fagocitrias de vrios tipos encontradas nos tecidos perifricos e nos orgos linfoides.

Sistema moncito-macrfago (sistema fagocitrio mononuclear): constitudo pelos moncitos circulantes, pelos seus precursores da medula ssea e pelos macrfagos teciduais (tanto livres como fixados). Includos nesse sistema esto: clulas de Kupffer (fgado) microglia (SNC) clulas de Langerhans (pele) clulas apresentadoras de antignio (orgos linfoides) osteoclastos (osso) Podem-se formar clulas gigantes multinucleadas pela fuso de macrfagos ou pela duplicao nuclear. Funo: Os moncitos parecem ter pouca funo no sangue circulante. Respondem presena de material necrtico, aos microorganismos invasores e inflamao, migrando para dentro dos tecidos e diferenciando-se em macrfagos. Com a sua grande capacidade de fagocitose e o abundante contedo de enzimas hidrolticas, os macrfagos envolvem e destroem os detritos dos tecidos e material estranho, como parte do processo de cura e de restaurao da funo normal. Algumas destas funes formam parte integrante dos mecanismos imunolgico.

Plaquetas
So fragmentos citoplasmticos, anucleados e rodeados de membrana, derivados de megacaricitos, sob o controlo da trombopoietina (sintetizada no rim e figado) Os megacaricitos desenvolvem projeces citoplasmticas que originam as pr-plaquetas, que se fragmentam em plaquetas. As plaquetas ligam-se e degradam a trombopoietina, um mecanismo que regula a produo de plaquetas. Forma de disco biconvexo ou oval. 2 a 4m de dimetro. So normalmente em nmero de 150 000 a 300 000/l de sangue perifrico. Tempo de vida: cerca de 10 ou 11 dias

Citoplasma: Aparncia granular. Corado em prpura, devido aos numerosos organitos que esto concentrados no centro da clula (granulmero)

O citoplasma perifrico (hialmero) cora pouco.

Grnulos: constituem cerca de 20% do volume das plaquetas. So de 4 tipos: Grnulos : Variveis no tamanho e forma. Contm 2 protenas exclusivas das plaquetas: factor 4 plaquetrio (regula a permeabilidade vascular, a mobilizao do clcio a partir do osso, a quimiotaxia dos moncitos e dos neutrfilos); tromboglobulina (funo desconhecida, mas o nvel srico usado para monitorizar a activao plaquetria) Contm factores de coagulao: fibrinognio, factor V, factor VII/factor de von Willebrand. Contm outras protenas: fibronectina, trombospondina, factor de crescimento derivado das plaquetas :PDGF (podem estar envolvidos no reparo dos vasos sanguneos lesados). Contm outros factores de crescimento. Grnulos delta (densos) Parecem conter serotonina, ADP, ATP, clcio e histamina Lisossomas: Contm enzimas lisossmicas. Microperoxisomas: So pouco numerosos. Tm actividade de peroxidase, provavelmente catalase. Membrana plasmtica: tem 3 caractersticas nicas, relacionadas com a aderncia a superfcies de vasos sanguneos estranhos ou alterados: Capacidade de formar pontes fibrilhares entre uma plaqueta e outra. Glicoclice muito espesso e filamentoso, rico em mucopolissacridos cidos, confere substncia s pontes fibrilhares. (glicoprotenas + GAGs + fatores de coagulao vindos do plasma). As glicoprotenas integrais de membrana funcionam como recetores, na funo das plaquetas H o dobro das protenas de membrana expostas ao ambiente externo em relao s protenas voltadas para a superfcie interna ( o inverso do que se passa em todas as outras clulas; como se a face interna da membrana estivesse voltada para fora). Citosqueleto: Bem desenvolvido. Abaixo da periferia celular h uma faixa marginal de microtbulos que se despolimerizam no incio da agregao plaquetria.

O citoplasma rico em protenas contrcteis (actina e miosina) e outros elementos filamentosos, todos provavelmente envolvidos nas funes de retraco do cogulo e na extruso do contedo dos grnulos. Localizado profundamente faixa marginal de microtbulos e tambm espalhado por todo o citoplasma est o sistema tubular denso (DTS) (continuao do RER), constitudo por tbulos membranosos que contm uma substncia homognea que, por sua vez, contem uma isoenzima da peroxidase, que especfica das plaquetas. rede de apoio membrana plasmtica formada por microtbulos, filamentos de actina, protenas de ligao actina e miosina. H um feixe, constitudo por 8 a 24 microtbulos, que est imediatamente abaixo da rede de filamentos de actina. Tm um arranjo circunferencial e so responsveis pela manuteno em forma de disco das plaquetas

As plaquetas contm um sistema de canais interconectados que est em continuidade com o ambiente externo por meio de fossetas externas, estando a superfcie citoplasmtica dessas membranas associada a elementos do citosqueleto. A funo desse sistema canalicular de membrana no compreendida, mas pode estar envolvida na secreo do contedo dos grnulos . O sistema canalicular aberto o primeiro tipo de canal de membrana. uma remanescncia do desenvolvimento dos canais de demarcao das plaquetas e simplesmente uma membrana que no participou na subdiviso do citoplasma do megacaricito. So invaginaes para o citoplasma da membrana plasmtica. O sistema canalicular fechado contm material eletrodenso originrio do RER do megacaricito, que serve como local de reserva para ies clcio. Os canais no contactam com a superfcie das plaquetas, no entanto, ambos os tipos de canais fundem em vrias reas das plaquetas, para formar complexos membranosos que so importantes na regulao da concentrao de clcio dentro das plaquetas. Funo: Formam tampes para ocluir os stios de leso vascular, aderindo ao colagneo nas margens da leso. Mais tarde, o tampo de plaquetas substituido por fibrina. Promovem a formao dos cogulos, fornecendo uma superfcie para a montagem dos complexos proteicos da coagulao que so responsveis pela gerao da trombina. Secretam factores que esto envolvidos no reparo vascular.

Medula ssea
A medula ssea constituda por uma rede de seios vasculares e fibroblastos altamente ramificados, com os interstcios abarrotados de clulas hemopoiticas. A medula ssea localiza-se no canal medular dos ossos longos e nas cavidades intertrabeculares dos ossos esponjosos.

Funes da medula ssea:

1. 2. 3. 4. 5. hematopoiese armazenamento de ferro remoo de eritrcitos senescentes diferenciao dos linfcitos B secreo de anticorpo por plasmcitos

Distinguem-se dois tipos de medula ssea: 1. Vermelha: devido presena de sangue e de clulas hematopoiticas. 2. Amarela: devido acumulao de lpidos com o envelhecimento, nas clulas reticulares que se transformam em adipcitos, promovendo uma diminuio da funo hematopoitica. Em termos histolgicos distinguem-se estroma e parnquima. 1. O estroma compreende vrios tipos celulares: Fibroblastos Clulas reticulares com prolongamentos citoplasmticos Macrfagos implicados na fagocitose de detritos celulares Adipcitos fornecem uma fonte de energia local Matriz extracelular com colagnio I e III, fibronectina, laminina e proteoglicanos, qual podem estar associados factores de crescimento. 2. O parnquima (= compartimento celular hematopoitico) constituido pelas clulas hematopoiticas, sendo suportado por uma rede formada pela matriz e pelos prolongamentos citoplasmticos das clulas reticulares.

A medula ssea activa tem um sistema de sinusides sanguneos derivados da artria nutritiva, que drena em direo veia central. Os seios da medula ssea so de endotlio do tipo contnuo, mas com uma membrana basal subjacente descontnua. As clulas endoteliais dos seios so activas na endocitose e provavelmente controlam a passagem de todo o material Em alguns lugares, o citoplasma endotelial to delgado que a barreira endotelial pouco mais que as camadas interna e externa da membrana

plasmtica, e esses stios podem fornecer a rota de sada das clulas sanguneas maduras por migrao transendotelial activa. As clulas hematopoiticas imaturas no tm capacidade de migrao transendotelial e so retidas nos espaos extracelulares pelas clulas endotelais.

Num esfregao de medula ssea em que as celulas nucleadas dos eritrcitos em desenvolvimento e as linhagens celulares de leuccitos constituem uma proporo considervel, comparando com os esfregaos de sangue perifrico.

Hematopoiese
Hematopoiese: processo de diferenciao atravs do qual uma clula estaminal totipotente origina as diferentes clulas do sangue perifrico.

Local de hematopoiese
No ser humano adulto, a hemopoiese ocorre na medula ssea sobretudo do crnio, das costelas, do esterno, da coluna vertebral, da pelvis e das epfises dos fmures. Antes da maturidade, no entanto, a hemopoiese ocorre noutros stios em diferentes estgios do desenvolvimento: 1 Trimestre de gestao: saco vitelino, em ilhotas hematopoiticas derivadas de hemangioblastos (progenitores de clulas hematopoiticas e endoteliais)

2 Trimestre de gestao: figado e bao 7 ms de vida intra-uterina: medula ssea, devido ao desenvolvimento dos ossos durante o 4 e o 5 ms da vida intrauterina Ao nascimento, a hemopoiese quase exclusiva da medula ssea, apesar de o fgado e o bao poderem retomar a actividade em tempos de necessidade. Do nascimento maturidade, o nmero de stios activos da hemopoiese na medula ssea diminui, apesar de toda a medula ssea ter o potencial hemopoitico.

Populaes celulares hematopoiticas

A medula ssea constituida por 3 populaes principais: 1. Clulas-fonte 2. Clulas progenitoras comprometidas 3. Clulas em amadurecimento A clula-fonte, em cada diviso mittica, origina uma clula parcialmente diferenciada e outra estaminal (auto-renovao), mantendo uma populao estvel de clulas estaminais. As clulas-fonte representam 0,05% da populao de clulas hematopoiticas, no sendo identificvel pela sua morfologia mas sim por marcadores de superficie (c-kit e Thy-1) Originam, num primeiro passo de diferenciao, clulas multipotentes; estas diferenciam-se depois em clulas progenitoras comprometidas (CD34+) que seguem a linhagem linfide ou mielide. 5 unidades formadoras de colnias (CFU) derivam do progenitor mieloide: 1. CFU de eritride eritrcitos 2. CFU de megacaricito plaquetas 3. CFU de basfilo basfilo 4. CFU de eosinfilo eosinfilo 5. CFU de granulcito-macrfago moncitos e neutrfilos Atravs de um processo de diferenciao em que ocorre aumento da condensao de cromatina e desaparecimento dos nuclolos e da capacidade mittica, obtm-se uma clula madura, isto , que no se divide e apresenta capacidade total para desempenhar as suas funes.

Factores de crescimento hematopoitico

Os factores de crescimento hematopoitico controlam as fases proliferativas e de maturaao da hematopoise Podem ampliar a vida mdia e a funo de clulas produzidas na medula ssea Factores de crescimento hematopoitico (= citocinas hematopoiticas) so glicoprotenas produzidas na medula ssea pelas clulas endoteliais, clulas reticulares, fibroblastos, adipcitos, linfcitos em desenvolvimento e macrfagos. 3 grupos principais: 1. Factores estimuladores de colnia: produzidos por leuccitos, afectando outros (mecanismo parcrino) ou os prprios (mecanismo autcrino) 2. Eritropoietina 3. Trompoietina

Linhagem mielide
1. Eritropoiese

A eritropoiese inclui a seguinte sequncia: 1. pro-eritroblastos 2. eritroblastos basfilo 3. eritroblastos policromtico 4. eritroblastos ortocromtico 5. reticulcito 6. eritrcito O pr-eritroblasto clula grande com numerosos organitos citoplasmticas (basofilia) e nenhuma hemoglobina. Os estgios adicionais da diferenciao so caracterizados por trs aspectos principais: 1. diminuio do volume celular 2. desaparecimento de mitocndrias e polirribossomas - basofilia 3. acumulao de hemoglobina 4. eosinofilia crescente do citoplasma 5. expulso do ncleo. A sntese da hemoglobina comea durante o estgio de eritroblasto basfilo e completa-se ao final do estgio de reticulcito. A diviso celular cessa no estgio de eritroblasto basfilo, aps o ncleo ser extrudo no estgio de eritroblasto ortocromtico.

O estgio de eritroblasto basfilo tambm marca o incio da perda progressiva das organitos citoplasmticas, e apenas remanescentes destas esto presentes no estgio de reticulcito. Esse processo, acompanhado pela sntese progressiva da hemoglobina, representado morfologicamente pela transio da basofilia para a policromasia at a eosinofilia (ortocromasia) do eritrcito maduro. No estgio de eritroblasto policromtico o ncleo condensado e acompanhado de vrios pequenos fragmentos corpos de Howell-Jolly. O processo da eritropoiese demora cerca de 1 semana.

A ilhota eritroblstica a unidade da eritropoiese dentro da medula ssea e constituda por um ou dois macrfagos circundados por clulas progenitoras dos eritrcitos. As membranas plasmticas dos macrfagos exibem longos prolongamentos citoplasmticos e profundas invaginaes, que acomodam as clulas eritrides em diviso. medida que a clula eritride se diferencia, migra para fora ao longo do prolongamento citoplasmtico do macrfago, deixando menos clulas maduras no seu rastro. Quando se aproxima da maturidade, o eritroblasto faz contacto com o endotlio sinusoidal vizinho e passa atravs de seu citoplasma para entrar na circulao. O ncleo extrudo antes da entrada na corrente sangunea e fagocitado pelos macrfagos peri-sinusoidais.

Regulao da eritropoiese - eritropoietina A eritropoietina uma glicoprotena sintetizada pelo rim, nas clulas peritubulares localizadas na regio cortical interna e na medula externa do rim. Em resposta hipxia, os progenitores eritroides maduros CFU eritroide, pr-eritroblastos e eritroblastos basfilos respondem eritroipoietina pelo aumento da transcrio gentica durante as diferentes fases do seu desenvolvimento. A taxa da eritropoiese tambm pode ser controlada pela disponibilidade dos componentes do eritrcito: ferro, cido flico, vitamina B12 e precursores de protenas.

2. Granulopoiese A granulopoiese caracterizada pela seguinte sequncia: 1. 2. 3. 4. 5. 6. mieloblasto pr-mielcito mielcito metamielcito clula em basto granulcitos

Os mieloblastos do origem a pr-mielcitos que so caracterizados pelo desenvolvimento de grnulos azurfilos; como os grnulos azurfilos se

desenvolvem antes dos grnulos especficos, estes so chamados de grnulos primrios. O mielcito marcado pelo desenvolvimento de grnulos especficos, com o processo estendendo-se por trs divises celulares adicionais. O nmero relativo e a proporo dos grnulos primrios decrescem progressivamente, e a proporo dos grnulos especficos (secundrios) aumenta progressivamente. Do estado de mielcito, passando pelo estgio de metamielcito at as formas dos granulcitos maduros, o ncleo toma-se cada vez mais segmentado. Os precursores imediatos dos granulcitos maduros tendem a ter o ncleo em forma irregular de ferradura ou s vezes em forma de anel, e so chamados de clulas em basto ou formas em faixa. Os mieloblastos, pr-mieloblastos e os mielcitos so clulas que se dividem mitoticamente, enquanto os metamielcitos e as clulas em basto no se podem dividir. Ao atingirem a maturidade, os neutrfilos entram na corrente sangunea, onde alguns parecem circular enquanto outros aderem s paredes endoteliais de pequenos vasos (grupo marginado), entrando no conjunto circulante em resposta ao exerccio e ao stress A medula ssea contm um grande conjunto de neutrfilos armazenados, que podem ser rapidamente mobilizados se houver necessidade. Os corticosterides aumentam a taxa de liberao a partir da medula ssea e reduzem a taxa de sada da circulao.

3. Linfopoiese caracterizada por apenas dois estgios precursores: 1. linfoblasto 2. pro-linfcito 3. linfcito maduro A principal caracterstica da linfopoiese uma diminuio progressiva do tamanho da clula. Os linfoblastos tm ncleos com cromatina laxa com um nuclolo proeminente, o citoplasma contm muitos polirribossomas e poucas cisternas de reticulo endoplasmtico. Os linfcitos B amadurecem na medula ssea e depois migram para os tecidos linfoides Os linfcitos T amadurecem no Timo e depois migram para a circulao e tecido linfoide secundrio.

4. Monopoiese

Os moncitos derivam da unidade formadora de colnias de moncitosgranulcitos (CFU-GM) Sob a influncia de um factor estimulador de colnia (CSF) especfico, cada clula progenitora celular estabelece a sua prpria hierarquia: CSF granulcito (G-CSF) induz a via do mieloblastos; CSF de granulcito macrfago (GM-CSF) induz a via do monoblasto A monopoiese caracterizada pela seguinte sequncia: 1. monoblasto 2. pr-monocito 3. moncito A monopoiese caracterizada por uma reduo do tamanho e uma indentao progressiva do ncleo. Os monoblastos tornam-se mais volumosos, basfilos, ncleo volumoso com 1 ou mais nuclolos e apresentam um desenvolvimento progressivo do retculo endoplasmtico e do aparelho de Golgi. O pr-moncito contm um ncleo grande com uma ligeira endentao e cromatina laxa. Tem citoplasma basfilo devido presena de muitos polirribossomas e contm grnulos primrios (com peroxidase, arilsulfatase e fosfatase cida) menores e em menor quantidade que nos prmielcitos. Os monoblastos e pr-monoblastos so mitoticamente activos. Os moncitos maduros deixam a medula ssea logo aps sua formao, e no h um grupo de reserva, como no caso dos neutrfilos. Os moncitos levam uma mdia de 3 dias na circulao antes de migrarem por diapedese para dentro dos tecidos de um modo aparentemente aleatrio, aps o que so incapazes de voltar circulao.

5. Trombopoiese

As plaquetas derivam na unidade formadora de megacaricitos e a sua formao inclui a seguinte sequncia: 1. megacarioblasto 2. pr-megacaricito 3. megacaricito 4. plaquetas O megacarioblasto apresenta um ncleo reniforme com vrios nuclolos O megacarioblasto expande-se para originar o pr-megacaricito com um ncleo irregular e um citoplasma rico em grnulos azurfilos.

O megacaricito contm um ncleo irregularmente lobado, formado por um processo de diviso endomittica, no qual ocorrem as divises nucleares sem diviso celular. O extenso citoplasma preenchido por pequenos grnulos basfilos, refletindo a profuso de organelas citoplasmticas. Apresenta um rede de zonas de demarcao no citoplasma, formada pela invaginao da membrana plasmtica. microscopia ptica, a margem da clula frequentemente difcil de definir com clareza devido s numerosas plaquetas que se desagregam P, aos prolongamentos citoplasmticos, s ondulaes e vesculas. O citoplasma do megacaricito dividido em trs zonas: Zona perinuclear: contm o aparelho de Golgi, retculo endoplasmtico liso e rugoso, grnulos em desenvolvimento, centrolos e tbulos do fuso; Zona intermediria: contm um extenso sistema de vesculas e tbulos interconectados, conhecido como o sistema de demarcao de membranas, que est em continuidade com a membrana plasmtica Zona marginal externa: preenchida por filamentos citoesquelticos e atravessada por membranas que se ligam com o sistema de demarcao de membranas.

As plaquetas so formadas pela fragmentao do citoplasma do megacaricito com a liberao dos campos plaquetrios demarcados Na medula ssea, os megacaricitos lanam pseudpodes chamados pr-plaquetas dentro do lmen dos sinusides, cada um deles representando um cordo de campos plaquetrios que se fragmentam na circulao. Os megacaricitos maduros tambm parecem entrar nos sinusides da medula ssea intactos e vo para o leito vascular pulmonar, onde se fragmentam em plaquetas.

Regulao da trombopoiese trombopoietina A trombopoietina produzida pelo figado tem uma estrutura semelhante eritropoietina e estimula o desenvolvimento dos megacaricitos. As plaquetas ligam-se e degradam trombopoietina, um processo de autoregulao.