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INTRODUCCION: TINCIONES SIMPLES El microscopio de campo claro es ms til para la observacin de especmenes teidos.

Los colorantes son compuestos qumicos utilizados para aumentar el contraste. Existen algunos, llamados colorantes vitales, que pueden aadirse directamente a una preparacin en fresco; por tanto, colorean clulas vivas. No obstante, la mayora de los colorantes son solamente efectivos despus de que los microorganismos hayan sido fijados, es decir, se encuentren muertos y adheridos al portaobjetos. Para la fijacin por calor, se realiza una fina extensin de una gota de muestra lquida sobre un portaobjetos y se deja secar al aire; a continuacin, se pasa la preparacin de Forma rpida sobre la llama de un mechero. El calor de la llama mata las clulas microbianas por desnaturalizacin de sus protenas. Las protenas coaguladas unen las clulas al porta. Cuando se desea fijar especimenes delicados se utiliza la fijacin qumica, va que es menos lesiva que el calor. Para ello se aade una gota del fijador, por ejemplo, cido smico, formaldehdo, o glutaraldehdo, sobre la muestra lquida con los microorganismos. La fijacin posee algunos inconvenientes. Por ejemplo, a menudo distorsiona la apariencia real de las clulas, lo cual dificulta la identificacin; adems, no permite la observacin del movmiento de los microorganismos. Despus de la fijacin, se aade el colorante, que debe permanecer el tiempo suficiente en contacto con el espcimen, para que pueda ser absorbido. A continuacin, se retira el exceso de colorante, normalmente lavando con agua. Tipos de colorantes Casi todos los colorantes son sales, compuestos formados por iones cargados. Los colorantes bsicos son aquellos en los cuales el agente que tie es el ion cargado positivamente, mientras que en los cidos, el colorante es el ion cargado negativamente. Los colorantes ms utilizados son los de tipo bsico, va que la mayor parte de las clulas microbianas Poseen cargas dbilmente negativas en su superficie, lo cual facilita su unin. Entre los colorantes bsicos ms comunes se encuentran la safranina, la fucsina bsica, el cristal violeta y el azul de metileno. Los colorantes cidos se unen a las partes de las clulas cargadas positivamente. Se utilizan para teir tejidos animales infectados con microorganismos. Entre los ms frecuentes estn la eosina, la fucsina cida y el rojo Congo. En las tinciones simples los colorantes se combinan qumicamente con el protoplasma bacteriano; si la clula no ha muerto, el proceso mismo de la tincin la mata. El mtodo por consiguiente, es bastante severo y puede producir artefactos. Los colorantes mas comnmente usados son sales. Los bsicos consisten en un catin unido a un anin incoloro (ej. Clohidrato de azul de metileno) Los cidos constituyen exactamente lo contrario, (ej. Cosinato de sodio)

Las clulas bacterianas son ricas en cidos nucleicos, los cuales portan cargas negativas en forma de grupos fosfato, stos se combinan con los colorantes bsicos cargados positivamente, lo cual les hace ser de los ms usados en citologa bacteriana. Los colorantes cidos tien la clula bacteriana y por lo tanto pueden ser usados para impartir al fondo un color de contraste. En conclusin las tinciones simples son aquellas en donde se emplea uns solo colorante para teir.

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