Biologia Molecular

genes
- elementos biolgicos que so constitudos por DNA (cido desoxirribonucleico)

estudo da biologia e da natureza humana dissecao gentica

- anlise e identificao dos componentes de qualquer processo biolgico

anlise da sade humana das populaes

- alteraes no genoma humano por aco de agentes ambientais (radiaes/qumicos) anlise de doenas genticas - hereditrias (fenilcetonria, fibrose cstica, distrofia muscular) - somticas (cancro / tendncia hereditria) - aberraes cromossmicas (sndroma de Down)

engenharia gentica
BR - Biologia Molecular FFUP

- criao de estirpes altamente produtivas que permitem a produo, por exemplo, de insulina humana, hormona de crescimento, activador do plasminognio, eritropoietina, factor anti-hemoflico, etc.

terapia gnica
- requer a introduo de uma cpia de um gene normal em

 interaco gene / meio ambiente

- plantas (altitude) - Drosophila (19/25C)

(a)

BR - Biologia Molecular FFUP

(b)

GENE
unidade de informao gentica segmento de DNA com regies codificantes (produo de uma protena)

- contem regies anteriores (montante) e posteriores (jusante) - exes - regies codificantes - intres - regies no codificantes

BR - Biologia Molecular FFUP

Eucariotas
- vrios cromossomas e compartimentos - uma ou mais clulas com ncleo envolvido por membrana

Procariotas
- um nico cromossoma - no tm compartimentos - no tm membrana nuclear

BR - Biologia Molecular FFUP

Genes

Cromossomas

Cromatina

Ncleo

eucromatina polmeros de DNA Cromatina heterocromatina constitutiva (seq.repetidas) protenas histonas no histonas facultativa (genes inactivos)

Genoma = material gentico de um conjunto de cromossomas

BR - Biologia Molecular FFUP

25 000 t 30 000

 Gentipo = composio gentica de um organismo Fentipo = expresso fsica de um gentipo (morfologia, comportamento,
fisiologia e relaes ecolgicas)

Alelos
G A C A B T

- formas alternativas do mesmo gene responsveis pela expresso de uma caracterstica particular - a nvel molecular a maioria da sequncia do DNA idntica, mas pode apresentar um ou mais nucletidos diferentes

Homozigoto - se os dois alelos so idnticos Heterozigoto - se os dois alelos so diferentes Alelo dominante - alelo que expressa o seu fentipo mesmo quando
heterozigoto com um alelo recessivo

Alelo recessivo - no expresso fenotipicamente num heterozigoto

BR - Biologia Molecular FFUP

 Cromatdeos irmos ou cromatidas irms - duas cpias de um

cromossoma, replicado durante a fase S do ciclo celular, que se separam durante a mitose

Cromossomas homlogos - emparelham durante a meiose ou

correspondem a cromossomas de espcies diferentes que mantm o mesmo nmero de genes durante a evoluo

BR - Biologia Molecular FFUP

 Caritipo = nmero, tamanho e forma do conjunto de

cromossomas metafsicos de uma clula eucariota

Caritipo humano:
22 pares - autossmicos ou somticos 1 par - sexual (XX ou XY) ou heterocromtico

BR - Biologia Molecular FFUP

Fred Griffit, 1928 - Transformao

Diplococcus pneumonia - forma lisa (S) cpsula polissacardica - forma rugosa (R)

BR - Biologia Molecular FFUP

Alfred Hershey e Marta Chase, 1952

Bacteriofagos marcados com 35S

BR - Biologia Molecular FFUP

Bacteriofagos marcados com 32P

ESTRUTURA DO DNA

Bases

Purinas

Pirimidinas

Nuclesido

Desoxinucletido

BR - Biologia Molecular FFUP

DNA - cido desoxirribonucleico

RNA - cido ribonucleico

BR - Biologia Molecular FFUP

Cadeia de polinucletidos
- constituda por um conjunto de nucletidos adjacentes com ligaes covalentes (ligaes fosfodister) entre a posio 5 de uma pentose e a posio 3 de outra pentose atravs de um grupo fosfato, que fornecido por um nucletido trifosfatado

BR - Biologia Molecular FFUP

Emparelhamento de bases ou complementaridade de bases A:T e C:G

Dupla hlice do DNA constituda por duas cadeias anti-paralelas

(Watson e Crick 1953)

BR - Biologia Molecular FFUP

Anlise de Raios-X

Estabilidade: - pontes de hidrognio

- interaces hidrofbicas

BR - Biologia Molecular FFUP

Conformaes do DNA

Caractersticas de vrias conformaes do DNA

BR - Biologia Molecular FFUP

BR - Biologia Molecular FFUP

Metilao do DNA

Tautomerismo
- por isomerizao: amino

ceto

imino enol

BR - Biologia Molecular FFUP

Sequncias invertidas (Palindromas)

sequncia de DNA de cadeia dupla que a mesma quando as duas cadeias so lidas numa direco definida

Estruturas cruciformes
BR - Biologia Molecular FFUP

~50 bp

5-10 bp

Estruturas secundrias

Estruturas tercirias

BR - Biologia Molecular FFUP

Desnaturao e renaturao do DNA

Tm = temperatura de fuso Desnaturao - aumento da hipercromicidade

Maior contedo em GC maior Tm

BR - Biologia Molecular FFUP

Aco da formamida da ureia

BR - Biologia Molecular FFUP