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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAO, CINCIA E TECNOLOGIA - IF CURSO DE LICENCIATURA PLENA EM QUMICA DISCIPLINA: TPICOS ESPECIAIS EM FSICO QUMICA PROFESSORA:

: DBORA S. C. DOS ANJOS.

RELATRIO DE EXPERIMENTO 04

ESPECTROFOTOMETRIA

PETROLINA PE JUNHO. 2010

INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAO, CINCIA E TECNOLOGIA IF CURSO DE LICENCIATURA PLENA EM QUMICA o Relatrio de Experimento N 04: Espectrofotometria Alunos: Fernando Antnio; Rafaela Candido e Tairine Medrado

1. APRESENTAO
Este relatrio descreve as atividades desenvolvidas pelos alunos Fernando Antnio, Rafaela Candido e Tairine Medrado, alunos do curso de Licenciatura Plena em Qumica, no mbito da parte experimental da disciplina Tpicos Especiais em Fsico - Qumica, durante o 1o semestre/2010. Sero descritos os objetivos, a parte experimental, os resultados, os clculos, a discusso e as concluses referentes ao experimento intitulado Espectrofotometria.

Petrolina, 15 de junho de 2010.

__________________________________ Fernando Antnio Gomes S. Jnior

__________________________________ Rafaela Alves Candido.

__________________________________ Tairine Maria Medrado Santos.

Disciplina: Tpicos Especiais em Fsico Qumica.

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2. INTRODUO TERICA

Espectroscopia de Absoro Molecular

A espectroscopia de absoro molecular est baseada na medida da transmitncia T ou absorvncia A de solues contidas em clulas transparentes tendo um caminho ptico de b cm, afirma Skoog, em Princpios de Anlise Instrumental. De forma comum, a concentrao C de um analito absorvente est relacionada linearmente absorvncia, conforme representado pela equao:

A = - log T = log

= ebc

VOGEL (Anlise Qumica Quantitativa), afirma que na anlise espectrofotomtrica a fonte de radiao emite at a regio ultravioleta do espectro. Desta radiao selecionam-se comprimentos de onda definidos que constituem bandas, com largura menor que 1nm. Este procedimento necessita de um instrumento mais complicado, e por isso mais caro. O instrumento um espectofotmetro. Veja a figura abaixo.

Figura 01: Espectofotmetro

Um espectrofotmetro ptico um instrumento que dispe de um sistema ptico que pode provocar a disperso da radiao eletromagntica incidente, e com o qual se

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pode fazer medidas da radiao transmitida num certo comprimento de onda da faixa espectral. Um fotmetro destina-se a medir a intensidade da radiao transmitida ou uma frao desta intensidade. Um espectrmetro e um fotmetro, combinados num espectrofotmetro. Pode gerar um sinal que corresponde diferena entre a radiao transmitida em um material tomado como referncia e a radiao transmitida pela amostra analisada, num certo comprimento de onda. Os espectrofotmetros, em geral, contm cinco componentes principais: fontes de radiao, monocromador, recipientes para conter as solues, detectores e indicadores de sinal.

Fontes de radiao

Monocromado r

Compartimento Amostra/padro

Dispositivo de processamentos de dados

Sistema detector

Figura 02: Esquema dos componentes principais de um espectrofotmetro

Fontes de radiao

As fontes de radiao mais comuns baseiam-se na incandescncia e so muito prticas no infravermelho e no visvel, mas devem atuar em temperaturas elevadas na faixa do ultravioleta. As fontes de radiao so constitudas por filamentos de materiais que so excitados por descargas eltricas com elevada voltagem ou aquecimento eltrico.

Para que uma fonte de radiao seja considerada de boa qualidade deve: Gerar radiao continua, ou seja, emitir todos os comprimentos de onda, dentro da regio espectral utilizada;

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Ter intensidade de potncia radiante suficiente para permitir a sua deteco pelo sistema detector da mquina; Ser estvel, isto , a potncia radiante deve ser constante. Alm disso, deve ter vida longa e preo baixo. Tipos de fontes de radiao

Lmpada de filamento de tungstnio: incandescente, produz emisso continua na faixa e 320 a 2500nm. O invlucro de vidro absorve toda radiao abaixo de 320nm, limitando o uso da lmpada para o visvel e infravermelho.

Lmpada de quartzo-iodo: incandescente, o invlucro de quartzo emite radiao de 200 a 3000nm. Sua vantagem que pode atuar na regio do ultravioleta.

Lmpada de descarga de hidrognio ou de deutrio: a mais usada para emisso de radiao ultravioleta. Consiste em um par de eletrodos fechados em um tubo de quartzo ou vidro, com janela de quartzo, preenchido com gs hidrognio ou deutrio. Aplicando alta voltagem, produz-se uma descarga de eltrons que excitam outros eltrons gasosos a altos nveis energticos. Quando os eltrons voltam a seus estados fundamentais, emitem radiao contnua de 180 a 370nm.

Lmpada de catodo oco: tipo especial de fonte de linha. preenchida com um gs nobre, a fim de manter uma descarga de arco. O ctodo tem a forma de um cilindro oco, fechado em uma extremidade, revestido com o metal cujas linhas espectrais se desejam obter. O nodo um fio reto ao lado do ctodo. A energia do arco causa ejeo dos tomos metlicos do revestimento do ctodo os quais, excitados, emitem os seus espectros caractersticos.

Laser: pelo processo de emisso estimulada, os lasers produzem uma enxurrada de feixes muito estreitos e intensos de radiao. Todas as ondas procedentes ao material emissor esto em fase entre si, e, por isso, praticamente no apresenta disperso

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quando se propaga. Isso permite uma concentrao de energia num ponto muito pequeno, mesmo que esteja numa distncia considervel. Monocromadores

So dispositivos essenciais dos espectrofotmetros e tem como funo a seleo do comprimento de onda e que se tem interesse para a anlise. constitudo de uma fenda de entrada de um elemento de disperso de radiao e de uma fenda de sada. O elemento de disperso pode ser um prisma ou uma rede de difrao. Recipientes

So usados como recipientes cubas ou cubetas retangulares de vidro ou quartzo. As cubetas de vidro so usadas quando se trabalha na regio do visvel. Para a regio do ultravioleta, devem-se usar as cubetas de quartzo, que so transparentes radiao ultravioleta, pois o vidro absorve a mesma. Uma cubeta ideal deve ser de 1 cm, para simplificar os clculos da expresso da Lei de Beer. As cubetas tambm podem ter dimenses diferentes, e esse dado deve ser considerado na hora do clculo.
1 cm

Figura 03: Cubeta convencional

Para aplicaes industriais, como, por exemplo, no controle de qualidade de lotes de produo, utiliza-se um sistema automatizado em que as amostras circulam em srie em cubetas adequadas. Esse sistema chamado de anlise por injeo de fluxo ou FIA (do ingls Flow Injection Analysis)

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As substncias tm diferentes padres de absoro, a espectrofotometria permite identificar substncias com base no espectro da substancia. Permite tambm quantificlas, uma vez que a quantidade de luz absorvida est relacionada com a concentrao da substncia. A medida da luz absorvida permite inferir sobre a concentrao do soluto em determinada soluo. Compostos desconhecidos podem ser identificados por seus espectros

caractersticos ao ultravioleta, visvel ou infravermelho. Quando uma radiao eletromagntica, por exemplo, a luz visvel, incide em uma soluo, se os ftons da radiao tm energia adequada, a energia associada a essa radiao pode sofrer trs diferentes tipos de variaes: Ser refletida nas interfaces entre o ar e a parede do frasco contendo a soluo (cubeta); Ser dispersa por partculas presentes na soluo; Ser absorvida pela soluo.

Nas aplicaes espectrofotomtricas, quando se usa energia monocromtica em um simples comprimento de onda (), a frao de radiao absorvida pela soluo, ignorando perdas por reflexo, ser funo da concentrao da soluo e da espessura da soluo. Portanto, a quantidade de energia transmitida diminui exponencialmente com o aumento da espessura atravessada Lei de Lambert e o aumento da concentrao ou da intensidade de cor da soluo Lei de Beer. A relao entre energia emergente (I) e energia incidente (I0) indica a transmitncia (T) da soluo. Em espectrofotometria, utiliza-se a absorbncia (A) como a intensidade de radiao absorvida pela soluo, seguindo as leis de Lambert-Beer. A determinao de concentrao de um soluto em uma soluo-problema por espectrofotometria envolve a comparao da absorbncia da soluo-problema com uma soluo de referncia, na qual j se conhece a concentrao do soluto. Em geral, utilizada uma soluo-padro com diferentes concentraes (pontos), que tem sua absorbncia determinada. Esses pontos so preparados diluindo-se a soluo-padro na proporo necessria para a obteno das concentraes desejadas.

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Com os valores de absorbncia e de concentrao conhecidos, pode-se traar um grfico cujo perfil conhecido como curva-padro. Nesse grfico, a reta, indica a proporcionalidade entre o aumento da concentrao e da absorbncia e a poro linear correspondente ao limite de sensibilidade do mtodo espectrofotomtrico para o soluto em questo. A espectrofotometria utilizada tambm para a determinao de ferro em amostras de suplementos alimentar. O Fe(II) e o Fe(III), podem ser determinados espectrofotometricamente. O complexo laranja avermelhado do Fe(II), absorve a 515 nm, e o complexo amarelo do Fe(III) e o complexo do Fe(II) absorvem identicamente a 396 nm, e a absoro dativa. A soluo ligeiramente cida com cido sulfrico, tratada pela ortofenantrolina e tamponada, no pH 3,9 por soluo de hidrogenoftalato de Potssio, a leitura a 396 nm d o ferro total e a 515 nm, o ferro II. A reao do Fe(II) com a ortofenantrolina d-se da seguinte maneira, O Fe(II) reage com a 1,10 fenantrolina para formar um complexo vermelho alaranjado [(C12H8N2)3Fe]2+. A intensidade da cor independente da acidez no intervalo de pH 2 a 9 e estvel durante longos perodos. O Fe(III) pode ser reduzido com o cloreto de hidroxiliamnio ou com o 1,4 benzenodiol (quinol). Interferem seriamente a prata, o bismuto, o cobre, o nquel e o cobalto, e tambm os percloratos, cianatos molibidatos. Complexo de ferro com a fenatrolina pode ser extrado pelo nitrobenzeno e medido a 515 nm contra um branco do reagente.

Reao:

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3. OBJETIVOS

Determinar a concentrao de uma analto, ou seja, uma substncia desconhecida, atravs da curva analtica.

4. PARTE EXPERIMENTAL

4.1 MATERIAIS E REAGENTES

Materiais Pipetas Volumtricas (5, 10 e 50 mL) Bales volumtricos (100, 50 e 25 mL) Proveta Graduada 100 mL Bquer 250 mL Cubetas para espectrofotrometria

Reagentes: gua destilada Sulfato ferroso FeSO4 cido ascrbico 1% (m.v-1); Orto fenantrolina 0,25% (m.v-1); Acetato de amnio 2,0 mol L-1.

4.2 Mtodo Experimental


Preparo da soluo estoque padro Sulfato ferroso hepatahidratado (FeSO4 . 7H2O) Foi preparada a soluo estoque de Fe(II) de concentrao 1000 mg.L-1. Para isto, foi pesado 0,498 g de sulfato ferroso heptahidratado e logo aps foi completado com gua destilada para 100 mL em balo volumtrico. Ento, preparou-se uma soluo padro de Fe(II) intermediria de concentrao 20 mg.L-1 a partir da soluo estoque preparada anteriormente. Para isto, foi utilizado um balo volumtrico de 100 mL.

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Preparo da soluo estoque padro CiVi = CFVF 100 . Vi = 20 . 10 Vi = 2000 1000 Vi = 2 mL

Preparo das solues padres Sulfato ferroso hepatahidratado (FeSO4 . 7H2O) A partir da soluo intermediria, foram preparadas solues padro com 0,124 mg.L-1, 0,248 mg.L-1, 0,500 mg.L-1, 1,00 mg.L-1, 1,500 mg.L-1 e 2,00 mg.L-1 de Fe(II). Para isto foram utilizados 6 bales de 25 mL e foi transferido para cada balo, com o auxlio de uma pipeta, os volumes necessrios da soluo de 20 mg.L-1 Fe(II), para que fossem obtidas as concentraes desejadas. Em seguida, adicionou-se 1 mL de cido ascrbico 1% m.v-1, 1 mL de ortofenatrolina 0,25% m.v-1 e 5 mL de acetato de amnio 2 mol.L-1. Os volumes foram completados com gua destilada e foi preparado tambm uma prova em branco [todos os reagentes, exceto Fe(II)]

a) 20 . V1 = 0,124 . 25 V1 = 3,1 20 V1 = 0,15 mL P1= 0,124 mg.L-1

b) 20 . V1 = 0,248 . 25 V1 = 6,2 20 V2 = 0,31 mL P2 = 0,248 mg.L-1

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c) 20 . V1 = 0,500 . 25 V1 = 12,5 20 V3 = 0,625 mL P3 = 0,500 mg.L-1

d) 20 . V1 = 1,00 . 25 V1 = 25 20 V4 = 1,25 mL P4 = 1,00 mg.L-1

e) 20 . V1 = 1,50 . 25 V1 = 37,5 20 V5 = 1,875 mL P5 = 1,500 mg.L-1

f) 20 . V1 = 2,00 . 25 V1 = 50 20 V1 = 2,5 mL P6 = 2,00 mg.L-1

OBS: Na prtica foram utilizados somente 5 padres, por falta de bales volumtricos de 25 mL, sendo q se utilizou os bales de 25 mL pois os bales de 50 mL no eram suficientes para todas as equipes. Preparo da amostra

A amostra foi preparada em duplicata, bem como um branco em paralelo s amostras. Este branco foi feito seguindo os mesmos passos para a decomposio das amostras, porm sem empregar a amostra. Inicialmente foi colocado m comprimido de vitamina que contm ferro em um bquer de 100 mL. Ento o ferveu suavemente (em uma capela) com 25 mL de soluo de HCl 6mol.L-1 por 15 minutos. Logo aps, a soluo foi filtrada em um bquer. Ento o

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bquer foi lavado cuidadosamente para no ultrapassar o volume de 100 mL. O esperou esfriar e o transferiu para um balo volumtrico de 100 mL. O volume do balo foi completado at a marca do menisco, ento misturou bem a soluo. Em seguida, diluiuse 5,00 mL dessa soluo at 100 mL em um novo balo volumtrico. Leitura das amostras

Ligou-se o equipamento e procedeu ao ajuste do espectrofotmetro para o comprimento de onda onde o complexo Fe(II) - ortofenantrolina pudesse apresentar o maior coeficiente de absoro (510 nm). Ajustou-se o 0% e 100% de transmitncia, empregando a soluo da prova em branco. Ento, foram feitas as leituras a partir da soluo diluda para a mais concentrada e, em seguida, foi feita a leitura da amostra e do branco. A cubeta foi lavada com a soluo que ia ser medida, e suas paredes foram enxugadas com um papel absorvente macio.

5. RESULTADOS E DISCUSSES

De inicio foram preparadas uma soluo estoque, e uma soluo intermediria e a partir desta foram preparadas as solues padro, pois a soluo tem que ficar mais clara para no atrapalhar na absoro, como mostra as figuras.

Figura 04: Soluo estoque;

Figura 05: Soluo intermediria

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Cada padro possui uma cor diferente, onde, quanto mais escuro, maior ser a sua absorbncia, como pode ser visto na figura abaixo:

Figura 06: Solues padro

Em seguida, preparou-se o branco, sem emprego da amostra e a digesto do comprimido de suplemento alimentar Amnemifer, como vistas nas figuras abaixo. O cido no conseguiu fazer totalmente a digesto da amostra, porque a digesto um processo demorado, que em uma prtica no da pra fazer com tanta eficincia.

A digesto da amostra passou por trs cores diferentes: amarela, laranja e por fim marrom.
O ideal seria que ao evaporar fosse colocado mais cido at que a digesto tivesse ocorrido totalmente. Foram trocados o funil e o papel de filtro para acelerar o processo de filtrao.

Figura 06: Branco

Figura 07: Amostra

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Como pode perceber a amostra ficou marrom, pois possui muito ferro. O ideal seria que ela ficasse incolor, mas a digesto no pode ser totalmente concluda por conta do tempo. Leitura da amostra

Para a realizao da leitura dos padres e da amostra, ligou-se o equipamento Espectrophotometer SP 2000 UV Bel e ajustou-se para o comprimento de onda de 510 nm, onde o complexo Fe(II) ortofenantrolina, apresneta maior absoro. A partir dos valores obtidos no Espectrophotometer SP 2000 UV Bel para as absorbncias dos padres, foi construda a tabela 01:

Tabela 01: Valores de absorbncia encontrados para as solues-padro. Soluo-padro Branco Amostra 1 2 3 4 5 Concentrao 0 20 mg.L-1 0,124 mg.L-1 0,248 mg.L-1 0,500 mg.L-1 1,00 mg.L-1 1,500 mg.L-1 Absorbncia a 510 nm 0 0,118 0,038 0,067 0,112 0,214 0,323

Com os valores dispostos na Tabela 01 foi construda a seguinte curva analtica.

Figura 08: Curva analtica obtida atravs do no Espectrophotometer SP 2000 UV Bel.

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O valor da absorbncia encontrado para a amostra foi igual a 0, 118 ento para encontrar sua concentrao: y = 0,2052x + 0,0124 0,118 = 0,2052x + 0,0124 0,118 0,0124 = 0,2052x 0,1056 = 0,2052x x = 0,5146
Multiplicando o resultado encontrado pelos valores de diluio 50 e 20 temos: 0,5146 * 50 * 20 = 514,6 mg L
-1

De acordo com os dados acima e os resultados da tabela possvel observar que o valor assumido pela absorbncia cresce com a concentrao das solues, como descreve a lei de Lambert-Beer, uma vez que o aumento da concentrao resulta no aumento do nmero de partculas que interagem com a radiao. De acordo com esse mesmo princpio, observou-se graficamente a relao linear entre a absorbncia, A, e a concentrao C. Portanto, mantendo-se o caminho ptico constante, pode-se determinar a concentrao de Fe(II) ortofenantrolina (em soluo), atravs da medida de absorbncia. Sabendo-se que podem ter acontecido alguns possveis erros de pesagem,

impurezas nas amostras, na digesto incompleta da amostra e na diluio das solues.

CLCULO DO ERRO E = Vmedido Vreal x 100 Vreal E = 514,6 600 x 100 600

E = 14,23%

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6. CONCLUSES

O mtodo da curva analtica nos possibilitou a obteno das concentraes de Fe2+ na amostra. Esse mtodo se mostrou relativamente eficiente, j que os erros das medidas foram de certa forma pequena. Comprovou-se experimentalmente que medida que aumenta a concentrao de uma soluo aumenta sua absorbncia, como descrito na lei de Lambert-Beer e que atravs de processos fsicos, realizados pelo aparelho de espectrofotometria, podemos analisar as propriedades das solues, por exemplo, a concentrao. E com a utilizao de clculos juntamente com os resultados obtidos pela aparelhagem, possvel definir a concentrao de solues de concentrao desconhecida. A espectrofotometria de absoro molecular UV-VIS continua sendo uma das ferramentas mais amplas para se determinar espcies moleculares em soluo, pois grande parte das molculas absorve nesta regio do espectro eletromagntico.

7. REFERNCIAS

B. M. Mendham, J. Denney, RC; Barnes, S. D; Thomas, M; VOGEL: Anlise Qumica Quantitativa Grad. S. C. A. Afonso, P. F de Aguiar, R. B de Alencastro, 6 h, LTc, Rio de Janeiro, 2002. ANJOS, Dbora dos. Espectrofotometria. Petrolina - PE: Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia - Serto Pernambucano. 2010. 02p. VOGEL, Arthur Israel. [traduo por GIMENO, Antnio da] Qumica Analtica Qualitativa 5 Edio So Paulo: Editora Mestre Jou, 1981.

SKOOG, D. A.; HOLLER, F.; NIEMAN, T. A.; Princpios de Anlise Instrumental, 5o ed., Ed. Bookman, Porto Alegre, 2002.

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