Introduo Uma soluo padro a quantidade conhecida de analito adicionado amostra com concentrao desconhecida.

a. A partir do aumento do sinal deduzimos quantos do analito estava presente na amostra. Este mtodo requer uma resposta linear para o analito. Objetivo Parte A: Obter a curva de calibrao e calcular a concentrao de cido ascrbico na amostra Parte B: Obter a curva de adio de padro e determinar a concentrao de cido ascrbico na amostra Procedimento Parte A. Em um balo volumtrico de 25 mL adiciono-se 2,5 mL de sulfato de ferro (II) amoniacal e a mesma quantidade de soluo tampo de acetato pH 5 e volume igual para 1,10 fenatrolina, aps adiciono 0,5 mL de EDTA-Na2. Completou-se o volume com gua deionizada e homogeneizou-se a soluo. Repetiu-se o experimento mais sete vezes, sendo que cada uma variou-se os volumes da soluo padro de cido ascrbico 6.10-4 mol/L em 0; 0,5; 0,75; 1; 1,25; 0,125 e 0,125 mL, os dois ltimos volumes citados so referentes amostra. Em seguida, deixaram-se os tubos em repouso por aproximadamente 10 minutos, para o desenvolvimento da cor e para a leitura mais precisa no espectrofotmetro Ajusto-se o comprimento de onda em 512 nm , foi zerado com gua e realizouse a leitura das sete solues no espectrofotmetro, conforme a Tabela 1. Parte B Em um balo volumtrico de 25 mL, adicionou-se 2,5 mL de sulfato de ferro (II) amoniacal e a mesma quantidade de soluo tampo de acetato pH 5 e volume igual para 1,10 fenatrolina, aps adicionou-se 0,5 mL de EDTA-Na2 e 0,125 mL de amostra. Completou-se o volume com gua deionizada e homogeneizou-se a soluo. Repetiu-se o experimento mais cinco vezes, sendo que cada uma variou-se os volumes da soluo padro de cido ascrbico 6.10-4 mol/L em 0; 0,5; 0,75; 1 e 1,25 mL. Em seguida, deixaram-se os tubos em repouso por aproximadamente 10 minutos, para o desenvolvimento da cor e para a leitura mais precisa no espectrofotmetro. Ajusto-se o comprimento de onda em 512 nm , foi zerado

com gua e realizou-se a leitura das sete solues no espectrofotmetro, conforme a Tabela 2. Resultados e discusso Como os dados coletados na parte A, foi obtido uma curva de calibrao apresentados no Grfico 1.Onde foi adquirido a equao da reta que definida por em qual y a varivel depende do sinal analtico, x a varivel independente (concentrao) e b o coeficiente angular (branco) e a, a sensibilidade coeficiente linear. A partir dessa equao pode-se, ento, determinar a concentrao da amostra, em funo da curva, utilizando a eq.1. Na Tabela 1 apresentado s respostas das concentraes das amostras se determinou atravs da eq. 1.

Tabela 1
Sulfato de Ferro (II) Amoniacal (mL) 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 Tampo de acetado pH 5 (mL) 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5

cido 1,10 Ascrbic fenatrolin o (mL) a (mL) 0 2,5 0,25 2,5 0,50 2,5 1 2,5 1,25 2,5 1,50 2,5 0,125 2,5 0,125 2,5

EDTA. Na2 (mL) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

Volume fina (mL) 25 25 25 25 25 25 25 25

ABS Concentra (U.A) o (mol/L) 1,441 0 1,451 6,00E-06 1,477 1,20E-05 1,517 2,40E-05 1,527 3,00E-05 1,546 3,60E-05 1,51 2,42E-05 1,503 2,24E-05

Grfico 1: Curva de calibrao Absorbncia versus cido ascrbico

Com a adio do padro obteve-se tambm uma curva que determinou uma equao da reta 3,26E-04 mol/L. .Atravs da eq.2 se se determinou a

concentrao de vitamina C na amostra que foi de

(eq.2)

Tabela 2
Sulfato de Ferro (II) Bal Amoniac o al (mL) 0 2,5 1 2,5 2 2,5 3 2,5 4 2,5 5 2,5 Tampo de acetado pH 5 (mL) 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 cido Amost 1,10 EDTA. Volum Ascrbi ra fenatroli Na2 e fina co (mL) (mL) na (mL) (mL) (mL) 0 0,125 2,5 0,5 25 0,25 0,125 2,5 0,5 25 0,50 0,125 2,5 0,5 25 1 0,125 2,5 0,5 25 1,25 0,125 2,5 0,5 25 1,50 0,125 2,5 0,5 25

ABS (U.A) 1,428 1,48 1,515 1,575 1,58 1,59

Concentra o (mol/L) 0 6,00E-06 1,20E-05 2,40E-05 3,00E-05 3,60E-05

Grfico 2: Curva de adio de padro Absorbncia versus cido ascrbico

Comparando os resultados obtidos e linearidade de cada reta, pode-se observar que a resposta obtida na curva com adio de padro teve um resultado melhor, pois seu R2 apresentou um nmero mais prxima de 1 e sendo este um resultado mais verdadeiro. Concluso Pode-se concluir-se que a adio de padro fundamental nas anlises pois, fornece comparao entre as espcies analisadas apresentando uma resposta mais exata, alm de ser um excelente parmetro de exatido. Bibliografia Leite, Flavio. Validao de anlise qumica- Campinas, SP: Editora tomo, 2008. 5Edio