Purinoreceptores.

El ATP es un compuesto qumico lbil, presente en todas las clulas y es la fuente de energa utilizada por el ser humano. Cuando se produce la degradacin o catabolismo de los nutrientes se libera energa que se trasforma en ATP, el cual es utilizado en el msculo para realizar sus funciones. El ATP es un nucletido con enlaces de alta energa de grupos fosfato y est conformada por adenina, ribosa y tres fosfatos. Los 2 ltimos radicales fosfatos se unen a la molcula mediante los denominados enlaces de alta energa, cuando estos enlaces se rompen se libera energa cercana a 7.3kcal/mol, suficiente para realizar trabajo celular. Pero en las condiciones de temperatura y concentracin, de los reactantes en el cuerpo es de casi 12kcal, por tanto cada separacin de cada radical fosfato libera dicha cantidad de energa. El ATP se convierte en difosfato de adenosina (ADP) despus de la prdida de un radical fosfato y tras perder el segundo radical fosfato se convierte en monofosfato de adenosina (AMP). Molcula de ATP. Las conversiones son las siguientes: ATP 12kc ADP + PO4 12kc AMP + 2PO4

El ATP esta ampliamente distribuido en el citoplasma y en el nucleoplasma de todas las clulas; casi cualquier mecanismo fisiolgico que requiera energa la obtiene de manera directa del ATP o algn otro compuesto similar de alta energa como el GTP (trifosfato de guanosin). Como se puede apreciar de la conversin previa, el ATP podr ser regenerado a partir del ADP y del fosfato, pero tambin es necesaria cierta cantidad de energa, la cual se puede obtener de tres diferentes reacciones qumicas que reproducen en el organismo. 2 de estas tienen que ver con la degradacin de los hidratos de carbono y las grasas (metabolismo aerbico y anaerbico) y la restante con la degradacin de la fosfocreatina. De esta manera al tener resntesis de ATP se asegura un suministro constante de la sustancia. Adems de obtenerse ADP y AMP se obtiene tambin adenosina, nuclesido formado de la unin de la adenina con un anillo de ribosa (tambin conocido como ribofuranosa) a travs de un enlace glucosdico -N9. Es una purina endgena sintetizada de la degradacin de aminocidos como metionina, treonina, valina e isoleucina as como de AMP (precursor mayor) es producto de la fragmentacin de ATP por fragmentacin mediante 5ectonucleotidasas. La adenosina tiene una importante funcin en procesos bioqumicos, tales como la transferencia de energa, en la forma de ATP y ADP, as como transductor de seal en la forma de adenosn monofosfato cclico o AMPc, su captura y trasporte en direccin intra o extracelular es por medio de trasportadores de nuclesidos. La adenosina acciona mediante su unin a receptores A1, A2A, A2B y A3, ampliamente distribuidos en los tejidos del cuerpo produciendo vasodilatacin, broncoconstriccin, inmunosupresin, etc., la adenosina se encuentra ligada a protenas a nivel intracelular en un porcentaje cercano al 90% y solo se activa por desaminacin, para lo cual se ha propuesto que sea mediante aminodeaminasa o SAH (S-adenocilhocisteina hidrolasa), estor procesos se pueden incrementar ante la presencia de hipoxia aumentando la concentracin de adenosina.

Adenosina. ATP A nivel renal la energa que se obtiene del ATP se utiliza primordialmente en los procesos de resorcin a nivel renal. Recientemente se ha reportado que las clulas endoteliales, epiteliales, msculo liso, miocitos y de los nervios perivasculares liberan ATP y este tiene efecto paracrino en diversos tejidos predominantemente del msculo esqueltico, cardiaco y vascular. Burnstock descubri esta funcin del ATP a nivel extracelulares mediante los purinorreceptores afectando procesos como neurotrasmisin, modulacin de tono vascular y contraccin de clulas musculares incluyendo las clulas cardiacas y agregacin plaquetaria entre otros.

RECEPTORES PURINERGICOS: Los receptores purinrgicos han sido clasificados en dos tipos: P1 y P2. Los receptores P1 tienen mayor afinidad por AMP y adenosina, en tanto que los receptores P2 tiene mayor afinidad por ATP y ADP. Los receptores purinrgicos P1 comprende 4 subtipos: A1, A2a, A2b y A3. Los receptores A1 y A3 se acopla a la protena G0/G1 produciendo inhibicin de adenil ciclasa con disminucin de AMP, en tanto que A2a y A2b se acoplan a la protena Gs generando mayor activad de adenil ciclasa. Estos receptores al influir de manera negativa o positiva sobre la adenilcilcasa acta de manera directa sobre la distribucin de calcio en el retculo sarcoplasmico-citosol y con ello afectar la contraccin a nivel vascular. Los receptores P2 se han clasificado en P2X y P2Y. La familia P2X se subdividen a su vez en 7 subtipos: P2X1-7 y su efecto es ionotrpico. Los receptores P2Y se subdividen en: P2Y1, P2Y2, P2Y4, P2Y6, P2Y11, P2Y12, P2Y13, P2Y14 y tienen efecto metabotrpico. El receptor P2X es un canal de Na +, Ca++ y el ATP se une al asa externa de este canal lo cual permite la entrada de Ca++ y Na+ al citosol as como la salida de K+, lo cual produce contraccin. MECANISMO DE SEALIZACIN DE LOS RECEPTORES PURINERGICOS Los receptores P2Y, tienen siete regiones transmembranales, se acoplan a protenas G. Los subtipos P2Y1, P2Y2, P2Y4, P2Y6 y P2Y11 se acoplan a protenas Gq con lo cual se activa a la fosfolipasa C (PLC) y aumenta la concentracin citoslica de Ca2, (Ca2i). En algunos epitelios, la unin a Gq tambin regula indirectamente a AMPc afectando otras funciones celulares a travs de la activacin de la fosfolipas A2 (PLA2) con la subsecuente produccin y liberacin de prostaglandina E2 (PGE2). En tanto que P2Y12, P2Y13 y P2Y14 se acoplan a la proteina Gi con lo cual se inhibe a la adenil ciclasa y disminuye los niveles de AMPc y por lo tanto tambin disminuyen los niveles de Ca++ a nivel citoslico.

Receptor P2X1 P2X2 P2X3 P2X4 P2x5 P2X6 P2X7 P2Y1 P2Y2 P2Y4 P2Y6 P2Y11 P2Y12 P2Y13 P2Y14

Afinidad ATP ATP ATP ATP ATP ATP ATP ADP y ATP ATP UTP UDP, UTP, ADP ATP y ADP ADP y ATP ADP y ATP UDP glucosa, UDP galactosa

Mecanismo de accin. Canal de cationes Ca y Na. Canal de iones (particularmente Ca) Canal de cationes . Canal de iones (particularmente Ca) Canal de iones. Canal de iones. Canal de iones de poro largo. Gq/G11 PLC- (aumenta) Gq/G11 (G1/G0) PLC- (aumenta) Gq/G11 (G1?) PLC- (aumenta) Gq/G11 (G1/G0) PLC- (aumenta) Gq/G11 & GS: PLC- (aumenta) Gi/otros. Gi/Go/otros. Gi/Go/otros.

Por tanto P2Y tiene a nivel vascular una respuesta dual ya que es capaz producir vasodilatacin y vasoconstriccin el primero por incremento en la liberacin de vasodilatadores endoteliales como lo son ON y PGI2 y la vasocontriccin por incremento de Ca a nivel intracelular y/o por activacin de Rho cinasas. La activacin de P2Y inicia numerosos eventos que incluyen inhibicin de adenilcilcasa, activacin de fosfolipasa C e incremento de Ca en el citosol.

LOCALIZACIN DE LOS RECEPTORES PURIONERGICOS P2X: 1 Msculo liso, plaquetas, cerebelo, espina dorsal. 2 Msculo liso, SNC, retina, clulas cromafn, ganglios autonmicos. 3 Neuronas sensitivas, algunas neuronas simpticas. 4 SNC, testculo, colon. 5 clulas proliferativas en piel, intestino, vejiga, timo y espina dorsal. 6 SNC, neuronas motoras en cordn espinal. 7 Clulas apoptticas (inmunes, pncreas, piel).

P2Y:

1 2 4 6 11 12 13 14

Clulas epiteliales y endoteliales, plaquetas y clulas inmunes Clulas inmunes, epiteliales y endoteliales, tmulos renales y osteoblastos. Clulas endoteliales. Algunas clulas de epitelio, placenta, clulas T y timo. Bazo, intestino, granulocitos. Plaquetas, clulas gliales. bazo, cerebro, ganglios linfticos. medula sea. Placenta, tejido adiposo, estomago, intestino, algunas regiones del cerebro.

LOCALIZACIN DE LOS RECEPTORES PURIONERGICOS A NIVEL RENAL P2X: 1 2 3 4 Arteriola aferente Arteriola aferente --------------------Tbulo contorneado proximal, tbulo proximal porcin recta, Segmento descendente de asa de Henle, porcin delgada ascendente de asa de Henle, porcin gruesa del asa de Henle, tbulo contorneado distal, tbulo colector cortical, conducto colector mdula interna, conducto colector mdula externa. Porcin gruesa del asa de Henle, tbulo contorneado distal, tbulo colector cortical, conducto colector mdula interna, conducto colector mdula externa. Tbulo contorneado proximal, porcin recta de tbulo proximal, Segmento descendente de asa de Henle, porcin delgada ascendente de asa de Henle, porcin gruesa del asa de Henle, tbulo contorneado distal, tbulo colector cortical, conducto colector mdula interna, conducto colector mdula externa. ---------------------Arteriola aferente, glomerulo Arteriola eferente, glomerulo, porcin gruesa del asa de Henle, conducto colector mdula interna, conducto colector mdula externa. Tbulo contorneado proximal, porcin recta de tbulo proximal, -------------------------------------------

5 6

7 P2Y: 1 2 4 6 11

FUNCIN DE LOS RECEPTORES PURINERGICOS A nivel renal por uso de inmunohistoquimica y tcnicas de biologa molecular P1 y P2 se han encontrado en medula, tbulo proximal, asa de Henle, tbulo distal, tbulo colector y vasculatura renal. En base a ello se ha considerado que la accin de los purinoreceptores sea uno de los mecanismos que contribuyan a la autorregulacin renal incluso se ha sugerido que ATP o adenosina sirve como molcula responsable de sealizacin para trasmitir la respuesta en los cambios en la TFG

Tambin se ha encontrado evidencia que los purinoreceptores pueden tener un rol importante en la patofisiologa de la hipertensin, ya que los purinoreceptores pueden influir en la adaptacin a nivel de la funcin microvascular sobre todo mediante los recetores P2X1 y P2Y2 a nivel de arteriola aferente y con ello participar en los mecanismos que la hiertensin. La adenosina como hemos expresado tiene la capacidad de tener efectos vasodilatadores y/o vasoconstrictores por lo cual seria una posibilidad viable para estudio en bsqueda de un paso susceptible de bloqueo en hipertensin y el dao que conlleva a nivel renal. Recientemente se ha estuadiado la relacin que puede tener la va de los receptores purinrgicos y el sistema renina-angiotensina de tal manera que en ratas en las que se administrado angiotensina II, con aparente efecto predominante constrictor secundario a la adenosina e incremento en la actividad de la misma favoreciendo este mecanismo e incluso con posibilidad de expresar a la baja los receptores A2 que podrian equilibrar la situacin mediante su efecto vasodilatador,tambin se ha descrito la participacin de otros receptores purinrgicos (P2Y) como participantes en el desarrollo de fibrosis, mediante infiltracin tublo intersticial por macrofagos y proliferacin tubular.

Mecanismos de liberacin de ATP.

El ATP se libera por 3 mecanismos: (grfica pagina 341). 1) trasporte de conduccin de ATP a traves de canales liberadores de ATP. 2) trasporte no conductivo por un trasportador de ATP (permease o flippase) y/o 3) exocitosis de ATP a travs de vesiculas o granulos. La cantidad de ATP que libera la celula al pool extracelular es de menos del 0.1% del total de ATP intracelular. Las moleculas de ATP liberadas al medio externo tienen una diversidad de posibles destinos, al ser barrido por la circulacin o sufrir degradacin en los tejidos vecinos, por lo cual ATP y sus metabolitos pueden actuar de manera autcrina o paracrina dentro de los distintos microambientes, la luz tubular, el intersticio que rodea la macula densa el glomerulo y la arteriola aferente son ideales microambientes para ello. El ATP puede ser degradado a sus metabolitos mediante ecto-enzimas (enzimas expresadas en la superficie celular), an as ADP tiene mayor afinidad hacia algunos agonistas dopaminergicos en tanto adenosina tiene su propios receptores P1 acoplados a proteinas G. ATP`puede ligarse a 2 tipos de receptores: los P2Y que son receptores acoplados a proteina G y los canales P2X, estos ltimos se cre que adems son permeables a Ca++. Schwiebert Erik M. Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology 340350. 2001. 28:

Adenosina y receptores.
Los riones desempean un papel fundamental en la homeostasis del organismo originando adaptacin de la excrecin renal de lquidos y electrolitos a las necesidades corporales. Para que esto suceda adems de la interaccin con otros aparatos y sistemas existen tambin mecanismos locales (intrarrenales) de regulacin los cuales son importantes un adecuado funcionamiento renal. Estos mecanismos locales adems de su accin fisiolgica, pueden proporcionar una mejor comprensin de los procesos fisiopatolgicos de entidades como la hipertensin arterial sistmica entre otros y por tanto inclusive abarcar nuevos enfoques teraputicos. Varios autacoids son candidatos potenciales para contribuir a las cascadas de sealizacin implicadas en mecanismos de regulacin local incluyendo molculas como el xido ntrico, la bradicinina, endotelina, angiotensina II, y prostanoides, aunque desde hace varias decadas se ha descrito a la adenosina como portencial mediador dentro de la funcin renal, de manera reciente es cuando se ha estudiado de mayor manera, se ha visto adems que participa dentro de la respuesta de control aguda a una

mayor mayor carga de trabajo, ya que esto genera aumento de hidrlisis de ATP y consecuentemente de generacin de adenosina. La adenosina extracelular se fija en receptores de proteinas G y se ha visto que en rganos como cerebro, corazn y msculoesqueltico, induce la vasodilatacin favoreciendo la entrega de O2 y su metabolismo de combustible para el consumo. Adicionalmente posibles mecanismos de defensa incluyen una represin de la liberacin de neurotransmisores estimulantes y una reduccin de la actividad celular. El contenido de adenosina se ha encontrado en ratas normooxemicas en concentracin de 5nmol/gr, en tejido renal, del cual solo 2-5% se encuentra presente a nivel extracelular, en caso de que se origine hipoxia la concentracin a nivel intracelular de adenosina se incrementa, por reduccin rapida de ATP, a este hecho precede un incremento de inosina e hipoxantina. a nivel extracelular se ha encontrado que la concentracin de adenosina es distinta entre la corteza y la mdula, para la primera es de 55nM en la corteza, en tanto es de 212 en la medula de riones de ratas. El receptor A1 se encuentra en arteriola aferente, glomerulo, clulas mesangiales, celulas yuxtaglomerulares, vasa recta, as como tubulo proximal, porcin delgada y porcin gruesa del asa de Henle as como tbulos colectores, el gen se encuentra en el humano en el cromosoma 1q32.1, la familia de receptores A2 consiste n 2 subtipos A2a y A2b los cuales poseen una alta y baja afinidad agonista respectivamente. El gen A2a localizado en cromosoma 22q11.2, estos receptores se han encontrado en estudios experimentales en la papilas de riones de rata, en glomerulo tanto de ratas como ratones as como en medula externa y vasa recta. Receptor A2b su gen correponde al cromosoma 17q12, existe solo escasa informacin sobre estos receptores a nivel renal, aunque se ha encontrado su presencia a nivel renal sobre todo en la porcin cortical e la porcin gruesa del asa de Henle as como en el tubulo contorneado distal, as como en vasa recta, y vasos preglomerulares, inicialmente su descripcin fu en cerebro de humanos y ratas. Elreceptor A3 su gen localizado en el cromosoma 1p, se ha sealado solo en escasos reportes su presencia en el borde en cepillo de tubulo proximal en riones de cerdo. Los receptores de adenosina pertenecen a la superfamilia de receptores que se acoplan a proteina G, A1 mediante acoplamiento G1/G0 produce inhibicin de adenilciclasa y estimulacin de fosfolipasa C, en tanto que A2a y A2b estimula la activacin de adenilciclasa, A3 de manera similar tiene efecto inhibitorio sobre adenilciclasa y fosfolipasa C, pero mediante inhibicin de proteina Gq/1. La accin de la adenosina a nivel vascular difiere de si es producida de manera exogena o endogena. En la primera desde 1964 existen reportes de produccin de vasoconstriccin rapida y de corta duracin con la administracin de adenosina intrarrenal, con disminucin del filtrado glomerular en porcentaje entre 50-80%, con el uso sostenido se ha apreciado que a pesar de este hecho pasando unos minutos puede producir vasodilatacin a nivel cortial profundo, contrarrestando el efecto vasoconstrictor que esta presente a nivel superficial de manera persistente. Sin embargo en diversos estudios los investigadores no han encontrado este mismo efecto. Se ha especulado el hecho que adenosina a dosis bajas puede propiciar vasoconstriccin por activacin de receptores A1 en tanto que a dosis altas estimularia a receptores A2a y A2b para producir vasodilatacin, esto se ha apreciado en experimentos sobre todo en los vasos rectos. A nivel pre y postglomerular se ha apreciado que la adenosina origina vasoconstriccin preglomerular, predominantemente en arteriola aferente, sobre todo por efecto sobre receptores A1 en tanto que el efecto sobre receptores A2 origina vasodilatacin predominantemente a nivel postglomerular, aunque otros sealan que tanto arteriolas aferentes y eferentes pueden desarrollar efecto vasocontrictor y efecto vasodilatador el cual es dependiente de la activacin de los receptores A1 o A2 confirmando que el efecto puede ser depndiende de dosis. En el rion humano se ha notado disminucin del filtrado glomerular en un 28% con la administracin de adenosina intravenosa, sin que la presinarterial o el flujo sanguineo renal sufran ningn cambio. Vallon Volker, Mhlbauer Bernd, Osswald Hartmut. Adenosine and kidney function. Physiol Rev 86: 901-940, 2006 .

Sealizacin purinergica.
En 1929 Drury y Gyrgy describieron las potentes acciones del nuecleotido ATP y nucleosido adenosina. Los purinoreceptores fueron descritos en 1976 y 2 aos despus se distinguieron 2 subtipos P1 y P2 (para adenosina y ATP/ADP respectivamente), del primero con 4 subtipos (A1, A2a, A2b, A3), todos los receptores para adenosina son acoplados a receptores de protena G y por tanto se le llaman metabotropos y agonistas y antagonistas son viables para cada subtipo. En 1985 los receptores P2 en base a su farmacologa en P2X y P2Y ya que los primeros es una familia de receptores ligados a canal de iones en tanto que los segundos los receptores se acoplan a protena G. Del primero 7 subtipos y del segundo 8 subtipos han sido clonaos y caracterizados funcionalmente. Los receptores P2X considerados ionotropicos (ligados a canal de iones) demuestran las siguientes caractersticas: componente amino intracelular y carboxilo terminal, con dos regiones que se extienden a travs de la membrana (TM1 y TM2) las cuales a nivel extracelular estn unidas por una asa de 10 residuos de cistena, que forma cadenas disulfuro y un sitio que liga ATP, entres los receptores P2X1-7 comparten una secuencia de aminocidos en un 30-50%. Receptores P2Y se caracteriza un componente amino extracelular y un componente carboxilo intracelular. Tiene siete dominios transmembrana los cuales tienen una gran homologa entre s, adems de una gran diversidad de asas intracelulares y carboxilos entre los subtipos de P2Y, esto tiene influencia en el grado de acoplamiento con las protenas Gq11, Gs y Gi, y se liga a una sola protena, que tpicamente es Gq/11, aunque P2Y11 puede acoplarse con 2 Gq/11 y Gs, en tanto que P2Y12 se acopla a Gi. Algunos son activados principalmente por nucletidos difosfatos (ADP) P2Y1,6,12,13, otros son activados por nucleotidos trifosfatos (ATP) P2Y2,4. Otros son activados por ambos nucletidos purinas y pirimidinas, P2Y2,4,6 y otros por nucletidos de Purina nicamente P2Y1,11,12,13. En respuesta a la activacin de nucletidos los receptores activan fosfolipasa C liberan calcio intracelular o afectan adenilciclasa y alteran los niveles de AMPc ATP liberacin y rompimiento. El mecanismo de trasporte de ATP de intracelular a extracelular es motivo de debate, se reconoce la presencia de exocitosis, como manera de liberar el ATP celular pero predominantemente a nivel de nervios, en tanto que en clulas no neurales, adems de este mecanismo el uso de trasportadores de ATP ligados a casette (ATP-binding cassette ABC- transporters). Adems de uso de hemicanales los cuales posiblemente son dependientes de voltaje. Con el incremento en la liberacin de ATP como por ejemplo durante procesos inflamatorios agudos enzimas extracelulares (ectonucleotidasas) pueden romper rpidamente el ATP originando nucleosidos trifosfato difosfohidrolasas (NTPDasa 1, 2 y 3) nucletidos pirofosfatos (NPP1, 2 y 3), fosfatasa alcalina y 5-nucleotidasa. En cuanto a su fisiologa y patologa especficamente a nivel renal, se ha encontrado una presencia sustancial de purinoreceptores en diferentes regiones de la nefrona, el glomrulo y el sistema vascular renal incluyendo receptores P1 y P2 envueltos en la regulacin de renina, filtracin y trasporte de agua, iones, nutrientes y toxinas, adems tambin con alguna secrecin de hormonas que influyen directamente en el funcionamiento renal como el hecho que ATP module la produccin de aldosterona o incremente la liberacin de vasopresina. Adems de contribuir a la regulacin del tono vascular, no solo por vasoconstriccin en respuesta a estimulacin perviosa mediante P2X, sino tambin de vasodilatacin mediante activacin endotelial de P2Y1 y P2Y2 y probablemente de P2Y4 y P2X4 originando liberacin de factores relajantes de endotelio, mayoritariamente de ON dando como resultado vasodilatacin, adems la adenosina producida por rompimiento de ATP contribuye a vasodilatacin por activacin de receptores P1 en msculo liso. Adems se ha notado que el co-trasmisor purinrgico de los nervios simpticosse encuentra incrementado a nivel vascular en ratas estontaneamente hipertensas.

Purinas y pirimidinas pueden estimular la progresin del ciclo celular e inhibir esto en una diversidad de tejidos entre ellos el endotelio. Por ello la sealizacin purinergica es importante en la regeracin y el ATP tiene un rol importante en el crecimiento de las clulas vasculares y la formacin de la neointima y por ello se asocia con hipertensin dao vascular renal y ateroesclerosis. Burnstock Geoffrey, British Journal of Pharmacology 147: S172S181. 2006. Renal Cell-to-Cell Communication via Extracellular ATP. Hace ya ms de 70 aos, que Drury y Szent-Gyrgyi, reportaron el concepto de sealizacin extracelular de purinas. En aos recientes se ha visto un incremento se ha hecho conciencia de de las adenilpurinas extracelulares incluyendo ATP tienen importancia dentro de diversos procesos biolgicos. A pesar de que nucletidos pueden ser liberados de clulas daadas o necrosis celular, se ha evidenciado la liberacin o movimiento a partir de intra a extracelular, resultando en incremento de la concentracin extracelular de nucletidos y concentraciones de microdominos extracelulares adyacentes al punto donde el nucletido es liberado. Considerando que los nucletidos extracelulares de los cuales forma parte ATP se degradan de manera rpida por vas enzimticas, es evidente que la mayora de los efectos biolgicos de los nucleotidos extracelulares envuelven localiza sealizacin paracrina o autocrina. La transduccin de sealizacin extracelular de nucletidos ocurre por receptores purinrgicos especficos en la superficie de la membrana. La sealizacin del ATP envuelve 3 pasos: la liberacin de ATP a partir de la clula, regulacin extracelular de las concentraciones de ATP va degradacin y la capacidad de fijarse ATP a receptores especficos. Liberacin de ATP. El ATP liberado puede ser medido por tcnicas de bioluminiscencia, algunos de los estimulos que se han encontrado que incrementan liberacin de ATP son: hipotonicidad celular, incremento de Ca intracelular y elevados niveles de AMPc, actualmente se ha pensado que la salida de ATP es mediante trasporte vesicular o mediado por canales, a causa de que ATP se encuentra presente ms comnmente en su forma con carga negativa, los canales de aniones se han considerado como candidatos para esta liberacin de ATP. Diversas protenas para estos canales de ATP han sido propuestos, incluyendo hemicanales de conexina, el ATP binding cassette transporters (que incluye la protena resistente a multidrogas y CFTR o asociada a protenas-) una variante de cruce de protenas mitocondriales de voltaje dependientes de canales de aniones (VDAC) y el recientemente clonado grupo de proteinas TTYH, a pesar de ello se carece de datos concluyentes de que dichas protenas sen la principal va para que el ATP cruce la membrana. Degradacin extracelular de ATP. Esta ocurre por un minimo de tres nucleotidasas que se encuentran fuera de la membrana celular o son secretadas dentro del intersticio. Ecto-nucleosido trisfosfato difosfohidrolasas (E-NTPDases) son capaces de remover un fosfato convirtiendo ATP en ADP. Ectonucleotido pirofosfatasas/fosfodiesterasas (E-NPPases) tambin degrada ATP incrementando AMP y pirofosfato. Ecto-5_-nucleotidasa es la enzima responsable de la degradacin final del ATP va remocin de un grupo fosfato de AMP. Receptores purinrgicos. Los receptores a los que se fija ATP se denominan P2 para diferenciarlos de P1 que son activos ante adenosina, los receptores P2 se han encontrado en la mayora de los tejidos de los mamiferos y se subdividen en P2X que son ionotrpicos y P2Y que forma parte del grupo de receptores que se acoplan a la protena G. Activacin de los receptores P2Y ms comunes origina un incremento de trifosfato inositol (IP3) mediando con ello movilizacin de Ca++. En tanto que los receptores P2X es un canal no selectivo de cationes, que es permeable a Ca++. Existen mltiples miembros de ambos receptores P2X y P2Y y estas isoformas individuales difieren en la distribucin tisular y su afinidad a los nucletidos as como especificidades de antagonismo/agonismo. Estudios recientes sugieren que varias isoformas entre P2X y P2Y pueden tambin formar complejos multimericos. Liberacin de ATP por clulas de macula densa.

En el rin los receptores P2Y y P2Y son expresados tanto en la membrana apical y basolateral, de clulas epiteliales, as como en la vasculatura renal, clulas de mesangio glomerular y podocitos. La activacin de receptores P2 juega un papel importante en los procesos renales, incluyendo regulacin de la hemodinmica renal y funciones de trasporte tubular. El ATP tiene un papel interesante en la activacin de estos receptores dentro de las clulas de epitelio renal, principalmente en las clulas de la macula densa y las clulas adyacentes a ellas que son de la arteriola aferente. Las clulas de la macula densa son son la nica poblacin de clulas que se encuentran presente en la porcin gruesa del asa de Henle en el punto en que dicha asa retorna al glomerulo, por lo cual la porcin apical de estas clulas se encuentra expuesto al fluido tubular, y con ello tiene un importante funcin en el monitoreo a nivel del flujo y composicin del mismo a nivel tubular, trasmitiendo esta informacin a la vasculatura. A causa del trasporte de Na Cl y la impermeabilidad al agua a este nivel la concentracin de Na Cl disminuye pero puede incrementar en repuesta a incrementos del flujo sanguneo tubular. Las clulas de la mcula densa detectan el incremento del Na Cl y trasmiten cnales que causan contraccin del msculo liso de la arteriola aferente resultando en una disminucin del filtrago glomerular, mecanismo llamado retroalimentacin tubuloglomerular. A causa de de esta funcin que interrelaciona las clulas de la mcula densa con las clulas mesangiales se ha presumido que existen mediadores qumicos responsable de la sealizacin entre estos 2 tipos de clulas. Ante ello se a considerado al ATP como uno de dichos mediadores en base a trabajos previos de Inscho y Navar. Tambin las clulas de la macula densa expresan altos niveles de Na K ATPasa a nivel mitocondrial y bajos a nivel basolateral. Presumiblemente estas clulas pueden tener una alta capacidad de generar ATP, con un consumo mnimo del mismo, al menos en trminos de trasporte de Na Cl. Adems en las clulas de la mcula densa se han identificado canales largos (~380 pS) los cuales conducen aniones. Esto ha sugerido que existe activacin de voltajes, las propiedades de estos canales en cuando a tamao y voltaje son similares a los trasportadores de ATP a nivel pared mitocondrial. Tambin se han usado celulas PC12 que expresan receptores purinnergicos P2X mediante tcnicas de biosensores, este se ha localizado en la membrana basolateral de la macula densa y liberacin de ATp fue observada con incrementos en el naCl luminar, nosotros encontramos que el ATP cruza la a membrane basolateral de la macula densa fu consistente con el rol de sealizacin, el ATP liberado incrementa en proporcin la cantidad en la luz de Na Cl y fue inhibida por bloqueo de trasporte de sal mediante furosemide. Ante estos estudios se ha demostrado que la sealizacin paracrina envuelve la liberacin de ATP cruzando la membrana basolateral de las clulas de la mcula densa. Algunas vias de conduccin de ATP no han sido descubiertas y actualmente se esta en busca de ellas. Sealizacin de la macula densa. Clulas mesangiales y clulas de msculo liso de arteriola aferente poseen receptores P2 y en el afea del aparato yuxtaglomerular posee abundantes nucleotidasas que son responsables de la degradacin de ATP esto es importante por la rapidez de los cambios que se pueden encontrar en el filtrado glomerular en cuestin de segundos. Es posible tambin que una rapida degradacin de ATP origine una carga en la formacin de adenosina con la subsecuente activacin de receptores P1, influyendo en la sealizacin del filtrado glomerular. Ante ello se ha demostrado por diversos grupos que el filtrado glomerular responde a la inhibicin de receptores A1 o a la 5nucleotidasa que produce adenosina. Tambien otros estudios han demostrado que la concentracin de ATP modifica de manera paralela el filtrado glomerular dependiente de ajustes en sus resistencias durante cambios en la presin de perfusin renal. Tambin infusin intersticial de ATP origina cambios probablemente por desensibilizacin de receptores P2, bloqueando la respuesta al flujo glomerular. Tambin Inscho ha propuesto que la activacin de P2X1 por ATP es un prerrequisito para autorregulacin del filtrado glomerular, dependiendo de vasoconstriccin de arteriola aferente. Sin embargo ATP puede rpidamente difundir de las clulas del msculo liso de la arteriola aferente y ligarse a P2X1 y/o P2Y2 y as producir vasoconstriccin de arteriola aferente. ATP liberado cruza la membrana basolateral produciendo un incremento en Ca++ mesangial va activacin de receptores P2, Esto ha sido claramente visto en cultivos de celulas mesangiales. Tambin se ha visto que activacin nicamente de receptores P1 no incrementa el Ca++ a nivel mesangial. A

causa de que las celulas mesangiales y las del msculo liso de las arteriolas aferentes se encuentran interconectadas por uniones gap., se ha visto de manera lgica que un componente de la sealizacin del filtrado glomerular envuelve a los receptores P2 mediante sealizacin a traves de las clulas mesangiales y de las celulas de msculo liso de arteriola aferente. Este paradigma es soportado por la demostracin que la eliminacin de clulas mesangiales inhibe la respuesta de flujo glomerular in Vitro. Sin embargo estudios adicionales son necesarios para especificar el rol de los receptores P1 y P2 dentro de la mcula densa y filtrado glomerular. Recientemente se ha visto que la actividad enzimatica correlaciones con la expresin de receptores P2 ante lo cual se considera que la degradacin de ATP es necesaria para la activacin de receptores P2. Komlosi Peter , Fintha Attila, Bell P. Darwin, Physiology 20: 86-90, 2005. SRA. En 1898 Tigerstedt y Bergman demostraron que un extracto de rin no manipulado provocaba un aumento sostenido de la TA y lo llamaron renina como principio activo. Ms tarde se identifico como enzima proteoltica que actuaba sobre sobre un componente del plasma para producir una sustancia presora potente la angiotensina. Ms tarde se han identificado dems componentes y funciones del SRA, el cual cumple funcin de mantenimiento y modulacin de la TA y autorregulacin del flujo sanguneo renal, as como se ha implicado la participacin en otras enfermedades como hipertensin, hipertrofia cardiaca, infarto al miocrdico, enfermedad renal progresiva, etc. El angiotensinogeno (peso molecular de 52 a 60 kD -452 aa-) se secreta principalmente del hgado haca la circulacin, aunque se han descrito isoformas locales sobre todo a nivel de glandula suprarrenal, sistema nervioso central, rin, corazn y tejidos vasculares, donde ms bien cumpliria con una accin paracrina. En la circulacin es degradada por la renina, una proteasa aspartilo producida por las clulas del aparato yuxtaglomerular granular presentes en la capa media de las arteriolas aferentes, sintetizandose a partir de un precursor que es la prerrenina, y para convertrse requiere la remocin de un carboxilo, adquiriendo la capacidad enzmatica, las enzimas que orginan la renina se encuentran en neutrfilos, clulas endoteliales y rin, la eliminacin de la renina es a nivel heptico y tiene uns semivida de 10 a 20 minutos aproximadamente. La renina al actual sobre el angiotensinogeno libera el decapeptido angiotensina I ( la cual es la nica funcin conocida del angiotensinogeno precursor-), el cual es un metabolito intermedio inactivo que posteriormente es procesado por la enzima convertidota de angiotensina (ECA) una metaloproteasa producida en la superficie de clulas endoteliales, liberando el pptido Ang II que es octapeptido, la Ang II se une a los receptores de alta afinidad de la superficie celular los subtipos 1 y 2 (AT1 y AT2) como los ms conocidos, por el efecto vascular que provocan, adems Ang II se puede producir a partir de otras enzimas como catepsina G, catepsina A, quimasa, enzima generada por la AngII sensible a quimostatina (CAGE), el activador tisular del plasminogeno (t-PA) y la tonina. La Ang II induce la constriccin del msculo liso vascular y eleva la resistencia vascular perifrica, en respuesta a la AII Las clulas del epitelio del tbulo proximal renal y del intestino aumentan la absorcin de sal y agua, en glandula suprarrenal estimula a la zona glomerular para la produccin de aldosterona quien se encarga de la reabsorcin de sodio en tbulo distal, incrementa la resistencia de arteriola aferente y eferente, y con ello modifica el filtrado glomerular, adems de provocar contraccin de clulas mesangiales, , en corazn se asocia con efectos inotrpicos positivos, en el cerebro induce respuesta como inicio de sed y liberacin de vasopresina. Acciones enaminas a final de cuentas encaminadas a elevar volumen intracelular, resistencia vascular perifrica y presin arterial, adems de otras acciones que van desde el crecimiento y reparacin celular. Debido a ello se han desarrollado medicamentos que busquen bloquear esta va, como el uso de inhibidores de la ECA y o inhibicin competitiva de receptores.

El angiotensinogeno es estimulado por otras hormonas como glucocorticoides, hormonas esteroideas y anrogenos y se ve inhibida por la renina, tambin se considera un reactante de fase aguda y la produccin heptica se incrementa durante situaciones de estrs. Riccardo Candido Louise M. Burrell Karin A. Jandeleit-Dahm Mark E. Cooper. Chapter 16 Vasoactive Peptides and the Kidney. Brenner & Rector's The Kidney, 7th ed The Intrarenal Renin-Angiotensin System: From Physiology to the Pathobiology of Hypertension and Kidney Disease. I.- Introduccin: El papel de SRA es importante en la regulacin renal. La Ang II es la sustancia con mayor poder en ese sistema para regular la presin arterial, eso a pesar de otros pptidos Ans III, IV y 1-7 que tambin tienen actividad biolgica (1). De manera reciente ha destacadado la regulacin local de SRA a nivel local y que esto es esencial para los mecanismos fisiopatolgicos de hipertensin (2). II.- Acciones fisiolgicas de Ang II a nivel renal. A.- Regulacin de efectos hemodinmicas. Ang II afecta la microvasculatura renal y mesangio renal. La observacin de que Ang II aumenta el filtrado glomerular, seala que puede tener accin sobre arteriola eferente (3). Aunque otros autores han sealado incremento paralelo de resistencias tanto a nivel de arteriola aferente como eferente (4). Tambin se ha sealado disminucin de filtrado glomerular, asociado a incrementos de las resistencias arteriolares aferente y eferente como a disminucin del coeficiente de filtracin por contraccin de clulas mesangiales (5,6) esta ltima gracias a la expresin de receptores AT1 y AT2 a nivel de mesangio. Aunque en experimentos los niveles incrementados de Ang II no producen proteinuria, en infusin crnica se ha demostrado que adems de inducir proteinuria produce dao glomerular en la barrera de filtracin (endotelio glomerular, membrana basal glomerular y podocitos) (7) y ante esto se han desarrollado medicamentos para bloquear el dao renal, mejorar el flujo renal y el filtrado glomerular y el manejo de la HAS como IECA y BRAt1. En adicin a los efectos sobre las arteriolas y mesangio Ang II tambin regula la hemodinamia renal al ejercer una influencia moduladora sobre la retroalimentacin Tbulo glomerular (6), esto por el balance entre la capacidad de reabsorcin de los tbulos y la carga filtrada por regulacin del filtrado glomerular. Cuando los cambios en la concentracin a nivel de la mcula densa son censados se trasmiten seales a la arteriola aferente y mesangio para originar constriccin o dilatacin, modificando con ello el filtrado glomerular. B.- Rol de angiotensina en la regulacin de la funcin tubular. Ang II es uno de las hormonas ms potentes en el organismo para generar retencin de Na, contribuyendo a incrementar la reabsorcin tubular, no solo por los efectos hemodinmicas y sobre flujo sanguneo medular, sino tambin por acciones directas en el trasporte de clulas epiteliales (8) y este efecto no es unicamente por producir incremento de aldosterona 1.- Tbulo proximal. El efecto natriurtico de Ang II es debido primariamente al incremento de reabsorcin tubular, este efecto parece ser bimodal, ya que a concentraciones fisiolgicas aumenta la reabsorcin tubular de sodio y a dosis farmacolgicas inhibe dicha absorcin, esta reabsorcin es acoplada a reabsorcin de HCO3, el cual es mediado por inhibicin de adenilciclasa (9). Los mecanismos moleculares de reabsorcin estimulados por Ang II, es por activacin de trasportador apical de Na+-H+ y basolateral Na+K+/ATPasa e insercin de H+ ATPasa dentro de la membrana apical (9,10). Estimulacin de traportador Na+-HCO3- por Ang II media diversas seales, que incluyen activacin de familia Src de tirosin cinasa y protein cinasas (11). Adems Ang II induce hipertrofia y proliferacin de clulas proximales tubulares (12), por diversas vas que incluyen factor de crecimiento de tejido conectivo. Otra funcin en tbulo proximal, regulada por Ang II es la endocitosis de protenas que componen la orina en condiciones fisiolgicas (incluyendo a la albumina) (13). 2.- Tbulo distal. Ang II incrementa la reabsorcin de Na+ por medio de estimulacin de receptores AT1 originando estimulo de Na+/H+. adems parece aumentar la reabsorcin de HCO3-

(14). 3.- Tbulo colector. Ang II disminuye la secrecin de H+ en los conductos colectores en mdula externa, por reduccin en la H+ ATPasa (15). Tambin regula la absorcin de Na+ independientemente de la accin de aldosterona, estimulando los canales de Na+ de la membrana apical (16). Tambin parecen influir en la concentracin de la orina al actuar en medula interna en los trasportadores de urea, que son los encargados de mantener el gradiente osmtico en el intersticio medular (17). Esto adems de los efectos en conductos colectores por la aldosterona, que estimula el trasporte inico en las clulas principales por incremento en el nmero de los canales de Na y K y la actividad de la bomba Na+/K+ ATPasa en la membrana basolateral, III.- Regulacin de sistema renina-angiotensina. Renina una proteasa aspartilo es liberada al plasma a partir de las clulas yuxtaglomerulares a las arteriolar aferentes renales, la prorenina y renina se producen en una menor cantidad en otros tejidos, la proteolisis de prorrenina a renina en el resto de la circulacin es llevada a cabo por la tripsina (18). Angiotensinogeno es primariamente formado y secretado por hepatocitos a la circulacin donde la renina rompe el angiotensinogeno y su terminacin amino a la forma de decapeptido Ang I, la concentracin de angiotensinogeno en el plasma es 1,000 veces superior a la concentracin de Ang I y Ang II. Ang I es fcilmente convertida en Ang II, no solo a la enzima convertidota de angiotensina, que es una dipeptidil carboxipeptidasa presente en las celulas endoteliales predominantemente en pulmn. Aunque otras vas han sido sealadas en otros tejidos. El incremento en Ang II origina activacin de receptores AT1. Otras angiotensinasas y peptidasas son capaces de metabolizar Ang II, adems se han reconocido otros pptidos pequeos que incluyen Ang III, Ang IV y Ang 1-7 que tienen actividad biolgica pero sus niveles en plasma son mucho menores que los de Ang II (excepto Ang 1-7) (19,20). IV. Mecanismos independientes de regulacin intrarrenal del sistema renina-angiotensina. Se conoce que el sistema renina angiotensina tiene accin endocrina, paracrina, autocrina e intracrina, se ha visto que en algunos tejidos esta regulacin es importante, dentro de ellos la que existe a nivel renal a sido cada vez ms estudiada. Destacando la formacin de Ang II a partir de angiotensingeno producido localmente por las clulas del tbulo proximal y posteriormente logrando su conversin a nivel cortical de Ang II (5,21). Ya que la liberacin de renina por las clulas del aparato yuxtaglomerular generan Ang I y en el rin de rata se encuentra la ECA en cantidad abundante. A.- Angiotensinogeno, la secrecin principal de la misma es a nivel heptico, aunque tambin es producida a nivel renal (22) en clulas tubulares renales a nivel proximal, secretndolo al fluido tubular, en donde se ha encontrado junto con Ang I y Ang II pero no en humanos. Para ello se ha propuesto actividad de la renina secretada en arteriola aferente y de la cual una pequea cantidad pasa al fluido tubular y la accin de la ECA a nivel tubular, predominantemente en el borde en cepillo en tbulo proximal (1), aunque tambin existe evidencia de secrecin de ECA en tbulo distal y tbulos colectores, la produccin de ECA a nivel renal es importante, ya que se ha visto que en ratones knockout para ECA a nivel renal, disminuye en un 80% la ang II intrarrenal (23), el incremento de Ang II a nivel intrarrenal se ha asociado con incremento de cifras sistlicas de TA e inclusive con la severidad de la hipertensin (24). B.- Renina y prorrenina, Estrictamente hablando renina no es una hormona, aunque se considera por la accin que tiene sobre angiotensinogeno. En la mayoria de las especies la renina se produce en las clulas del aparato yuxtaglomerular, aunque otros tejidos tambin secretan prorrenina (18) contribuyendo a la formacin tisular de renina. La forma activa de la renina contiene de 339 a 342 aa residuos del grupo N-terminal de prorrenina, pese a que se ha encontrado efectos titulares directos de renina (como la hipertrofa ventricular) el papel principal de renina sigue siendo el producir Ang I, un decapeptido de 52 a 64kDa a partir de angiotensinogeno, el receptor de renina tambin puede desarrollar cascada de sealizacin intracelular dependiente de cinasas. Estos receptores de renina se han descrito a nivel cardiaco y renaly se han descrito como mecanismo de dao como por ejemplo en la nefropata diabtica (25,26). C.- ECA. Se localiza en clulas de endotelio y en las membranas de otras clulas, incluyendo el borde en

cepillo de tbulos proximales. La localizacin de la ECA ha sido sealada en varias especies, se ha demostrado que en el humano con enfermedades no neoplasicas, se encuentra incrementada la expresin de la ECA a nivel de las clulas endoteliales (27), aunque aparentemente es menor la conversin de Ang I a Ang II en humanos que en otras especies. D.- Receptores de angiotensina II. La mayora de las acciones de Ang II es por la activacin de estos receptores los cuales se encuentran ampliamente distribuidos a nivel renal. Existen 2 categoras mayores de estos receptores tipo 1 (subtipos 1a y 1b) y tipo 2, los cuales ya han sido clonados y descritos. Sin embargo la mayora de los efectos por hipertensin son atribuidos a la activacin de los receptores AT1 (28). A nivel renal han sido localizado receptores a nivel de tbulo proximal, porcin gruesa ascendente del asa de Henle, vasculatura arterial, vasa recta, arterias arcuatas y clulas yuxtaglomerulares (29) en ratas maduras en membrana luminar y basolateral de varios segmentos de la neurona, as como en la microvasculatura renal tanto de corteza como de medula, celulas de msculo liso de arteriola aferente y eferente, clulas epiteliales de porcin ascendente del asa de Henle, en tbulo proximal a nivel apical y basolateral, clulas mesangiales, tbulos distales y tbulos colectores, clulas de macula densa (30), en cuanto a subtipos la arteriola aferente expresa 1a y 1b, en tanto la eferente solo 1a. La regulacin de Ang II es compleja en estados de hipertensin, ya que no tiene la misma respuesta a nivel glomerular como tubular. En general estados en los cuales existe aumento de Ang II asociado a una dieta baja en sal decrementa la expresin de receptores AT1 a nivel glomerular, pero los aumenta a nivel tubular (31), aunque la informacin todava es confusa por resultados distintos en diversos experimentos. Los receptores AT2, se encuentran son abundantes en el mesenquima renal en la vida fetal de humanos y roedores, pero disminuye de manera significativa pos terror al nacimiento, estos receptores se localizan a nivel de clulas de epitelio glomerular, tbulo proximal, tbulo colector y en parte de la vasculatura del rin adulto de la rata. A pesar de que el rol de los receptores AT2 es incierta se ha sugerido que tiene un efecto contrario a AT1 y que estimula la formacin de bradicina y xido ntrico, generando un incremento de la guanosin-monofosfato cclico (32,33). E.- Angiotensina II intrarrenal. 1.- Angiotensina II intersticial y tubular. La angiotensina no se encuentra distribuida de manera uniforme a nivel renal. Los niveles de Ang II son mayores a nivel medular que a nivel cortical (34) y se incrementa en ambos en ratas con hipertensin. El hecho de que exista mayor nivel de Ang II a nivel medular sugiere que existen vas locales de regulacin y acumulacin de Ang II pero en diversos experimentos no se ha logrado llevar a cabo. Tambin se ha visto que son mayores los niveles de Ang II en el intersticio que a nivel tubular (33). Considerando que los riones de ratas hipertensas estan repletados de renina y estan expuestos a TA elevadas, el hecho de encontrar valores altos de Ang II a nivel tbular proximal, refleja una inapropiada formacin de la misma. Se ha considerado que Ang II activa los receptores de bordes luminales en el tbulo proximal y se ha encontrado accin de Ang para activar canales epiteliales de Na sensibles a amiloride de manera reciente. Con lo cual se demuestra que tiene accin en la reabsorcin de Na tanto en tbulo proximal como en distal y colector. 2.- Angiotensina II intracelular. Se encuentra presenta por medio de endocitosis, ligndose a los receptors AT1 intracelulares generando seales de transduccin, adems la Ang II al entrar a la clula por endocitosis se protege de degradacin. La megalina un receptor fuertemente ligado a endocitosis de protenas se fija y media la introduccin de Ang II y Ang 1-7 a las clulas de tbulos proximales (35,36), indicando que no solo la megalina funciona como receptor de angiotensina, sino que forma parte importante de la regulacin del sistema renina-angiotensina a nivel renal. Dentro de las posibles funciones de la ang II intracelular se considera el hecho de reciclar la misma secretandola para de nueva cuenta tener la capacidad de ligarse a los receptores de Ang II a nivel de la membrana celular. Ang II puede actuar tambin sobre receptores citoslicos generando que se estimule la va del 1,4,5 inositol trifosfato, que es uno de los mecanismos de contraccin de las clulas de msculo liso vascular (37). Tambin existe la hiptesis de que Ang II migra al ncleo donde ejerceria efectos genmicos (38) F.- Vas enzimticas alternativas. Tonina, catepsinas y calicreinas son capaces de convertir el

angiotensinogeno en Ang I o Ang II de manera directa (39). Tambin se ha descrito una va dependiente de quimasa que son serin-proteasas similares a quimiotripsina presentes predominantemente en los grnulos que secretan los mastocitos (40) y que requieren de un pH adecuado para ejercer su actividad y pueden ser inhibidas por inhibidores de quimasas como los inhibidores de serin-proteasas que tienen actividad enzimtica (como el quimostatn) predominantemente de manera local (en tejidos). Estudios en los cuales se han obtenido quimasas purificadas de vasculatura de ratas se ha visto que convierte angiotensina I a angiotensina II a nivel de msculo liso vascular de ratas espontneamente hipertensas (41) aunque tambin su sobre expresin induce hipertensin. Aunque en otros estudios se ha visto que la va de quimasas es ms dominante que la ECA para producir Ang II en extractos obtenidos de aorta de ratas normotensas (42). En el humano se ha demostrado a nivel cardiaco sntesis de quimasas en clulas endotelilaes y clulas mesenquimatosas que son secretadas directamente al intersticio contribuyendo al 80% de la produccin de Ang II (43), no existe mucha informacin sobre quimasas a nivel renal, aunque se ha sugerido que en presencia de quimasas aumenta la produccin de Ang II a nivel renal 14 veces. Estudios clnicos han sealado incremento en la actividad de quimasasa en injertos renales con cuadro de rechazo (44), tambin en pacientes con hipertensin renovascular (45) y en diabetes (46), todo esto contribuye a sealar la importancia de las quimasas dentro del dao renal por Ang II. Por otro lado otra carboxipeptidasa la ECA 2 rompe un solo aminocido de Ang I originando la Agn 1-9, que sera otra va de degradacin de Ang I, la ECA 2 no es capaz de romper otro enlace para poder generar Ang II, pero si es capaz de actuar sobre Ang II para degradarla y producir Ang 1-7, el cual se ha considerado un antagonista endgeno de Ang II al competir con los receptores AT1 (47) por estas 2 vas la ECA 2 interviene en la regulacin del sistema renina-angiotensina para disminuir la produccin y los efectos de Ang II. ECA 2 se encuentra en el endotelio y en las clulas del epitelio tubular proximal. Tambin se ha descubierto una molcula con funciones similares a ECA 2 que se llama colectrina y esta localizada en la superficie luminar y citoplasma de clulas de conductos colectores. En contraste con las ECA 1 y 2, no contiene dominios dipeptidil carboxipeptidasa y puede ser generador de hipertrofia (48). Otras formas biolgicamente activas, incluyen Ang III y IV que se producen como consecuencia de la accin de aminopeptidasas y otras enzimas a pesar del inters sobre estas 2 molculas solo se ha establecido hasta este momento que Ang II y Ang III tienen su accin al activas receptores AT1 influyendo en el trasporte de Na y en hipertensin (49, en tanto que Ang 1-7 y Ang IV as como Ang II median la activacin de receptores AT2 contraponiendo las acciones obtenidas por estimular AT1 y por tanto tener un efecto protector en ciertas circunstancias (50). G.- Otros factores. 1.- Desarrollo renal y edad. Se ha demostrado que el uso inadvertido de IECA o BRT1 durante el embarazo provoca alteraciones en el desarrollo renal, y que sise bloquea a angiotensinogeno, renina, o bloqueo de receptores At1a y AT1b desarrolla anormal glomerulognesis, hiperplasia o atrofia renal papilar, hidronefrosis, defectos de concentracin y fibrosis intersticial. Delecin de receptores AT2 causa anormalidades congnitas de tracto urinario y rin (51,52,53), la expresin de angiotensinogeno, renina, ECA y receptores AT1 y AT2 a sido demostrada en mesonefros (54), y Los compoenentes del sistema renina angiotensina se van expresando conforme se desarrolla el metanefros, de hecho en las ratas es mayor la actividad del sistema renina-angiotensina a nivel renal en el recin nacido que en la rata adulta, aunque en el adulto muestra efectos deletreos como reduccin en tamao renal, disminucin de nmero de glomerulos, disminucin de masa tubular, de flujo sanguneo renal, filtracin glomerular, esclerosis glomerular y fibrosis tbulointersticial e inflamacin (55,56) efecto que puede disminuir con el uso de IECA y BRAT (57) 2.- Diferencias de Gnero. La actividad de la renina es mayor en el hombre que en la mujer independientemente de edad y grupo etario, sin embargo el porque de esta diferencia se ignora. Se ha visto en estudios en animales que los niveles de RNAm en machos es mayor durante la pubertad, que los niveles de igual manera son menores en hembras adultas que machos adultos, que en machos adultos el RNAm de angiotensinogeno disminuye con la castracin y que se incrementa en las hembras cuando se les da tratamiento con testosterona. Esto indica claramente que los andrgenos sobrerregulan la expresin de RNAm de angiotensinogeno (58). En contraste a

los niveles de RNAm de angiotensinogeno, los niveles circulantes de angiotensinogeno son mayores en la mujer que en el hombre (59), sin embargo en la mujer postmenopasica los niveles de angiotensinogeno son ligeramente mayores que en el hombre pero se incrementan con el uso de terapia de reemplazo hormonal (60). Sin embargo al sobre regular el angiotensinogeno, los estrogenos tambin regular a la baja renina, ECA, receptores AT1 y AT2, por ello las diferencias de gnero son importantes para el control de la presin arterial (61). V.- Aumento intgrarrenal del sistema renina-angiotensina durante la progresin de hipertensin y dao renal. A pesar del papel de renoproteccin que se ha originado del bloqueo del sistema renina-angiotensina, solo existen estudios clnicos en humanos, ante la dificultad de medir directamente los componentes del sistema renina-angiotensina a nivel renal. A.- Estudios en animales. 1.- Modelos de hipertensin dependientes de angiotensina II. a. Animales hipertensos con uso de Ang II en infusin. Con uso de manera crnica a pesar del uso de bajas dosis desarrollan hipertensin e incrementa el RNAm de angiotensinogeno a nivel renal (62), este efecto por activacin de los receptores AT1 el cual puede ser bloqueado farmacolgicamente. Se ha visto que con el bloqueo de los receptores AT1 se incrementan las concentraciones sistmicas de Ang II sin tener cambios importantes en la cantidad de Ang II intrarrenal, lo cual seala que son mecanismos diferentes los que la regulan. Aunque la renina es producida en las celulas yuxtaglomerulares, se ha visto que en ratas que reciben infusiones de Ang II para inducir hipertensin se incrementan los niveles de RNAm de renina y niveles de proteinas en celulas de conductos conectores y colectores (63) y este aumento depende de la estimulacin de receptores AT1, este incremento a nivel distal de renina favorece la produccin de Ang I y II a nivel tubular, esto independientemente de que la infusin de Ang II provoque disminucin de produccin de renina por las clulas yuxtaglomerulares. Todos estos cambios en angiotensinogeno, ang I, Ang II y renina pueden causar sinergismo y contribuir al efecto de reabosorcin de sodio y supresin de la presunatruresis observadas en ratas que desarrollan hipertensin en respuesta a Ang II (64). b. Animales con hipertensin renovascular. El rin contralateral no isqumico juega un rol importante en el mantenimiento de la hipertensin renovascular por incremento de la reabsorcin de Na y agua para aumentar la presin arterial (65), esto a pesar de que no se han encontrado niveles significativamente elevados de Ang II en hipertensin renovascular. 2.- Otros modelos de hipertensin. a. Ratas Dahl sensibles a sal. Ya se ha relacionado el polimorfismo del gen de angiotensinogeno en la hipertensin sensible a sal del cual se ha encontrado una alta frecuencia en sujetos con hipertensin esencial, las ratas Dahl son usadas como m odelo de estudio a causa de su respuesta exagerada ante el consumo de sal en estas ratas predispuestas geneticamente para el desarrollo de hipertensin, en ellas se ha encontrado disminucin de la actividad de la renina indicando supresin del sistema renina angiotensina estudios han encontrado que con uso de IECA y BRAT1 se disminuye la respuesta hipertensiva en estas ratas pese al consumo de dietas ricas en sal (66), sugiriendo que sistema renina angiotensina contribuye a la respuesta hipertensiva en este modelo animal. En este tipo de modelos se ha demostrado que la produccin de especies reactivas de oxgeno juegan un rol importante en el desarrollo de hipertensin b. Ratas espontneamente hipertensas. Estudios indican una clara correlacin entre hipertensin gentica y el polimorfismo de los genes de angiotensinogeno (67). A pesar de ser un estado en que el sistema renina angiotensina se encuentra disminuido como respuesta a este estado de hipertensin se ha visto que tratamiento con IECA o BRAT1 reduce la disfuncin cardiaca y o renal, sugiriendo que el sistema renina angiotensina intrarrenal puede ser inapropiadamente activado y contribuir a el desarrollo de hipertensin y el dao producido por la misma a nivel renal (68). 3. Animales diabticos. Se ha observado que pese a la supresin del sistema renina angiotensina a nivel sistmico se encuentra aumentada a nivel intrarrenal, aunque en los modelos de diabetes algunos resultados no han sido constantes. Estudios han sealado que a pesar de mantener una actividad de renina plasmtica disminuida en modelos de diabetes se ha encontrado a la renina intrarrenal aumentada (69), de la misma manera ha ocurrido con la demostracin de la ECA (70), con lo cual Ang II se encuentra incrementada a nivel renal y el tratamiento con IECA podra revertir

las manifestaciones de la neuropata diabtica. En ratas que se induce diabetes con estreptozotocina se ha encontrado incrementado el RNAm para angiotensina, incluido el fluido del intersticio renal (71). El dao que se produce en las ratas diabticas por renina-angiotensina parece estar ligado se ha demostrado que esta ligado al desarrollo de especies reactivas de oxgeno. El dao principal renal por diabetes es una severa glomeruloesclerosis, dicho dao se puede atenuar con inhibicin de sistema renina angiotensina mediante uso de IECA o BRAT1. 4.- Otros modelos de enfermedad renal. Activacin del sistema renina angiotensina ha sido demostrada en una variedad de formas de enfermedades renalesque son mediadas por complejos inmunes como glomerulonefritis post estreptococica, membranosa, enfermedad de cambios mnimos, membranoproliferativa, neuropata por IgA y glomerulonefritis por LES. En la corteza renal de modelos de ratas con enfermedad por complejos inmunes se encontr incremento de la actividad de ECA (72) y la administracin de IECA disminuy el dao glomerular, tubular as como la proteinuria. Tambin se ha visto incrementada en casos de obstruccin ureteral, GMN FyS producida por puromicina o adriamicina. En el modelo de dao renal por uso crnico de ciclosporina se encontro aumento en los valores de renina, as como incrementos en los valores de Ang II a nivel de mdula externa (73) y a nivel plasmtico, estudios in Vitro han mostrado que la ciclosporina aumenta los receptores AT1 incrementando los niveles intracelulares de Ca (74). En los modelos de falla renal aguda estudios previos haban sealado que Ang II se haba atenuado en estos casos aunque recientemente se ha descrito aumento de Ang II a nivel tbulo intersticial. Tambin existe incremento de sistema renina angiotensina en modelos con falla cardiaca severa donde puede encontrarse incrementado hasta 50 veces ms los valores de ang II (75). 5.- Implicaciones cardiovasculares de la regulacin renal del sistema renina angiotensina. En estados de falla cardiaca e infarto al miocardio se presenta sobrerregulacin intrarrenal del sistema renina angiotensina (76) resultando en incremento de la reabsorcin de Na y agua. B.- Estudios clnicos. 1.- Pacientes con hipertensin. a. Hipertensin renovascular. La formacin intrarrenal de Ang II ha sido demostrada en pacientes con hipertensin renovascular en presencia de estenosis renales (77). b. Otros tipos de hipertensin. Algunos pacientes tienen marcada actividad de sistema renina angiotensina intrarrenal, esto pese a que no haya incremento significativo en los valores de renina plasmtica, en 249 pacientes de los cuales 68% eran hipertensos, la tensin arterial sistlica y diastlica correlacion negativamente con los niveles en flujo plasmtico renal de Ang II (78). 2.- Pacientes con dao renal. a. Enfermedad renal crnica. Ang II media efectos deletereos como estimulacin de factores fibrognicos, formacin de radicales libres, agrava la hipertensin glomerular e induce hipoxia tbulo intersticial. Con el uso de IECA se decrementa la fraccin de filtracin consecuente con un incremento en el flojo plasmtico renal circulante (79), en las glomerulopatas primarias comunes como neuropata por IgA y membranosa se ha encontrado activacin de sistema reninaangiotensina, en la primera la expresin glomerular de RNAm para renina, ECA, quimasas y receptores AT1 y AT2 se encuentra sobre rregulada y correlaciona con el grado de hipercelularidad y expansin mesangial (80), en tanto que en neuropata membranosa por inmunohistoqumica se ha encontrado niveles incrementados de ECA y Ang II en celulas tubulares e intersticiales (81). b. Diabetes. Pacientes con diabetes muestran un incremento en las resistencias vasculares y fraccin de filtracin, bloqueo de renina angiotensina con IECA o BRAT1 incrementa el flujo plasmtico renal y el filtrado glomerular (82) en pacientes con DM1 efectos similares se han encontrado en pacientes con DM2. Aparte de los efectos hemodinmicas tambin se ha inferido accin de sistema renina angiotensina sobre estrs oxidativo. Los niveles elevados de Ang II ha correlacionado con proteinuria e infiltrados celulares intersticiales. Tambin se ha visto que pese a suprimir el sistema renina angiotensina de manera sistmica, la sobre regulacin de quimasas a nivel de mesangio y clulas vasculares, incrementa la expresin de angiotensina a nivel intrarrenal (43) y esta correlacin se corresponde con la severidad de los depositos de matriz extracelular y el incremento de TA. c.- Pacientes en dilisis. Los mecanismos de hipertensin descritos en pacientes en dilisis son los

siguientes: 1) inapropiado incremento de Ang II en relacin a volumen y recambio de sodio, 2) incremento de la sensibilidad vascular a vasopresores endogenos, 3) incremento de gasto cardiaco en presencia de resistencias vasculares inapropiadamente altas, 4) falla de todos los sistemas vasopresores (83). Sin embargo en diversos estudios los resultados al medir la actividad de sistema renina angiotensina son variables. d.- Otras enfermedades renales. El sistema renina angiotensina es un mediador de vasoconstriccin renal en falla renal aguda, el dao tubular por isquemia o nefrotoxinas altera la reabsorcin de sodio y cloro esto genera que al paso del fluido, las clulas de la macula densa incrementen la liberacin de renina propiciando que se genere incremento de produccin de Ang II. Tambin varios reportes sealar hiperactividad de sistema renina en enfermedad renal poliquistica. La nefropata crnica del injerto es la principal causa de perdida del injerto en la primera decada del trasplante, incremento de los niveles de renina y Ang II conforme se deteriora la funcin del injerto. En la neuropata por ciclosporina se ha detectado incremento en la actividad de sistema renina angiotensina tanto a nivel sistmico como intrarrenal. VI. Efectos de la intervencin farmacolgica de antihipertensivos en el sistema renina-angiotensina. A. IECA. Su uso disminuye los niveles de Ang II a nivel de plasma e intrarrenal, la ECA tambin se expresa de manera abundante a nivel intrarrenal, incluyendo el endotelio vascular as como las membranas luminales y basolateralestanto de tbulos proximales como distales, pero con mayor actividad en el borde en cepillo a nivel proximal (81). El uso de IECA disminuye tambin los niveles endosomales de Ang II. Con ello se ha apreciado que los IECA disminuyen la actividad de Ang II en los diversos compartimentos a nivel renal. B. Bloqueadores de receptores de angiotensina. C. -bloqueadores. D. Calcio antagonistas. E. Inhibidores de renina y quimosinas. 1.- Kobori Hiroyuki, Nangaku Masaomi, Navar Gabriel, Nishiyama Akira. Pharmacol Rev. 2007 September ; 59(3): 251287. 2.- Navar LG, Nishiyama A. Intrarenal formation of angiotensin II. Contrib Nephrol 2001:115. 3.- Heller J, Horacek V. Angiotensin II: preferential efferent constriction? Ren Physiol 1986;9:357 365. 4.- Carmines PK, Perry MD, Hazelrig JB, Navar LG. Effects of preglomerular and postglomerular vascular resistance alterations on filtration fraction. Kidney Int Suppl 1987;20:S229S232. 5.- Rosivall L, Navar LG. Effects on renal hemodynamics of intra-arterial infusions of angiotensins I and II. Am J Physiol 1983;245:F181F187. 6.- Paul M, Mehr AP, Kreutz R. Physiology of local renin-angiotensin systems. Physiol Rev 2006;86:747803. 7.- Hoffmann S, Podlich D, Hahnel B, Kriz W, Gretz N. Angiotensin II type 1 receptor overexpression in podocytes induces glomerulosclerosis in transgenic rats. J Am Soc Nephrol 8.- Navar LG, Nishiyama A. Why are angiotensin concentrations so high in the kidney? Curr Opin Nephrol Hypertens 2004;13:107115. 9.- Liu FY, Cogan MG. Angiotensin II stimulates early proximal bicarbonate absorption in the rat by decreasing cyclic adenosine monophosphate. J Clin Invest 1989;84:8391. 10.- Liu FY, Cogan MG. Angiotensin II stimulation of hydrogen ion secretion in the rat early proximal tubule: modes of action, mechanism, and kinetics. J Clin Invest 1988;82:601607. 11.- Robey RB, Ruiz OS, Espiritu DJ, Ibanez VC, Kear FT, Noboa OA, Bernardo AA, Arruda JA. Angiotensin II stimulation of renal epithelial cell Na/HCO3 cotransport activity: a central role for Src family kinase/classic MAPK pathway coupling. J Membr Biol 2002;187:135145. 12.- Hannken T, Schroeder R, Stahl RA, Wolf G. Angiotensin II-mediated expression of p27Kip1 and induction of cellular hypertrophy in renal tubular cells depend on the generation of oxygen radicals. Kidney Int 1998;54:19231933. 13.- Caruso-Neves C, Kwon SH, Guggino WB. Albumin endocytosis in proximal tubule cells is modulated by angiotensin II through an AT2 receptor-mediated protein kinase B activation. Proc

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