Estrutura e Funo dos cidos Nuclicos Adriana Stein Cardoso Fernando Kessler Borges CIDOS NUCLICOS: ESTRUTURA MOLECULAR

O cido nuclico formado por um grande polmero de molculas individuais chamadas de nucleotdeos. Cada nucleotdeo formado por: - uma base nitrogenada, que pode ser uma purina (adenina ou guanina) ou uma pirimidina (timina ou citosina no DNA; uracila ou citosina no RNA); - uma pentose (desoxirribose no DNA, e ribose no RNA) e - um grupo fosfato (PO4). O conjunto de base + acar denomina-se nucleosdio, chamando-se nucleotdeo ao conjunto de base + acar + fosfato.

H dois tipos de cidos nuclicos, o cido ribonuclico (RNA) que contm acar ribose de cinco carbonos, e o cido desoxirribonuclico (DNA) no qual o grupo hidroxila na posio 2 da ribose trocado por um hidrognio, i.e., uma molcula de oxignio perdida, de onde vem o prefixo desoxi. Os nucleotdeos sucessivos so ligados por ligaes covalentes fosfodister, em que um grupo fosfato liga o carbono 3 de um acar ao carbono 5 do acar vizinho. O RNA est presente no citoplasma e em concentraes particularmente altas no nuclolo do ncleo. O DNA achado principalmente nos cromossomos, mas tambm est presente nas mitocndrias e em cloroplastos das clulas de plantas. Watson e Crick sugeriram que a molcula de DNA era composta de duas cadeias de nucleotdeos dispostas em espiral em torno de um mesmo eixo imaginrio, formando uma estrutura de dupla hlice. Cada cadeia de DNA tem sua polaridade determinada pela orientao da ligao acar-fosfato. A extremidade da cadeia terminada pelo carbono 5 referida como extremidade 5, e a terminada com o carbono 3 chamada extremidade 3. O final 5 de uma cadeia oposta ao final 3 da outra, i.e., elas possuem orientaes (ou polaridades) opostas e so ditas antiparalelas. As duas molculas de DNA que formam a dupla hlice esto unidas por fracas pontes de hidrognio. Essas ligaes dispem-se entre bases opostas das duas fitas de DNA formando pares de base de acordo com as regras de Watson e Crick: purina sempre pareia com pirimidina (adenina liga-se a timina e citosina a guanina). As ligaes ocorrem dessa maneira porque o espao ocupado

por duas bases oponentes pequeno, e duas bases grandes no caberiam nesse espao, assim como duas pequenas no se aproximariam o suficiente para interagir. Desse modo so criadas cadeias complementares. Como resultado, a composio de bases do DNA no randomizada, havendo as mesmas quantidades de de bases pricas e pirimdicas, de tal forma que A+G = T+C . Verifica-se, igualmente, que as quantidades de adenina e timina so equivalentes, o mesmo ocorrendo com a guanina e a citosina. A composio pode ser especificada sem dvidas quantificando-se a % de GC.

comum descrever a seqncia de DNA pela seqncia de bases de uma das cadeias na direo 5 3, que a dire o de sntese de uma nova molcula de DNA durante sua replicao. Ao descrever a seqncia de DNA que compreende duas bases vizinhas (um verdadeiro dinucleotdeo) de uma das cadeias, usual inserir a letra p para denotar a ligao fosfodister (ex. CpG). A associao da dupla hlice do DNA com um grupo especfico de histonas forma a estrutura primria do DNA. O nucleosomo formado quando um octmero (duas cpias de quatro histonas: H2A, H2 B, H3 e H4) envolto por um segmento de DNA dupla-hlice. A unidade fundamental de organizao da cromatina o solenide, que uma estrutura secundria helicide de compactao dos nucleossomos pela histona H1. Com a formao do solenide, tem-se a ao de protenas nohistonas que formam estruturas em alas ou domnios. As alas podem ser o incio dos espessamentos parecidos com ns, denominados crommeros. medida que os cromossomos se condensam mais, os crommeros adjacentes fundem-se em estruturas maiores e tornam-se depois as bandas cromossmicas.

O RNA constitui-se de molculas simples de cido ribonuclico, e mais sobre este componente ser visto adiante. FUNO DOS CIDOS NUCLICOS: Como os genes se compem de DNA, necessrio que este ltimo tenha uma estrutura suficientemente verstil para explicar a grande variedade de genes e, ao mesmo tempo, ser capaz de reproduzir-se de tal maneira que se forme uma cpia idntica em cada clula apta a dividir-se. A informao gentica, armazenada nos cromossomos e transmitida s clulas filhas atravs da replicao do DNA, e expressa atravs da transcrio em RNAm e traduo subseqente em cadeias polipeptdicas. Este fluxo de informao do DNA ao RNA e protena denominado de dogma central da biologia molecular, sendo descritivo de todos os organismos. O processo de traduo requer um cdigo gentico, atravs do qual a informao contida na seqncia de bases nitrogenadas dos cidos nuclicos expressa para produzir uma seqncia especfica de aminocidos na protena que ele especifica. Trs bases adjacentes codificam um aminocido e formam a unidade de informao gentica ou cdon, e a correspondncia entre cdons especficos e aminocidos conhecida como cdigo gentico. A ligao molecular entre estes dois tipos relacionados de informao (o cdigo de DNA dos genes e o cdigo de aminocidos das protenas) o cido ribonuclico (RNA). A seqncia de nucleotdeos deve conter o nmero suficiente de unidades codificadoras para representar 20 aminocidos (Aa). Como o DNA possui apenas 4 bases distintas, deve haver a combinao de vrias bases para codificar os diferentes tipos de Aa. Como as bases agrupam-se 3 a 3, so possveis 64 (43) arranjos, nmero maior do que o necessrio. Dos 64 cdons (RNAm) possveis, trs indicam o fim de um gene, e so conhecidos como cdons finalizadores (ou sem sentido) porque designam o trmino da traduo do mRNA neste ponto. So o UAA, o UGA e o UAG. Os outros 61 especificam aminocidos. Como h apenas 20 Aa diferentes, deduz-se que alguns Aa devem ser especificados por mais de um tipo de trinca ou por mais de um cdon. Por exemplo, a leucina e a arginina so especificadas por seis cdons. Apenas a metionina e o triptofano so cada um deles especificado por um nico cdon O cdigo gentico , portanto, dito redundante (ou degenerado). Embora um determinado aminocido possa ser especificado por mais de um cdon, cada cdon s pode designar um aminocido. Esse conceito fundamental para, entre outras coisas, compreendermos que nem toda alterao no cdigo gentico leva a uma doena. Uma caracterstica significativa do cdigo gentico ser universal, ou seja, virtualmente todos os organismos vivos usam os mesmos cdigos de DNA para especificar aminocidos. Em outras

palavras, os mesmos trpletes correspondem aos mesmos aminocidos, seja em seres humanos, seja em bactrias. Uma exceo conhecida a esta regra a das mitocndrias, as quais tm suas prprias molculas de DNA extranuclear. Vrios cdons do DNA mitocondrial codificam aminocidos diferentes dos cdons do DNA nuclear. Em sntese pode-se dizer que o Cdigo Gentico tem as seguintes caractersticas: - Especificidade - Universalidade - Redundncia A informao gentica est contida no DNA dos cromossomos dentro do ncleo celular, mas a sntese de protenas, durante a qual a informao codificada no DNA usada, ocorre no citoplasma. Devido compartimentalizao das clulas eucariticas, a transferncia de informao do ncleo para o citoplasma um processo muito complexo. Enquanto o DNA se forma e se replica no ncleo da clula, ocorre no citoplasma a sntese de protenas. A informao contida no DNA deve, portanto, ser transportada para o citoplasma e, assim, usada para ditar a composio das protenas. Isto envolve dois processos, transcrio e traduo. Resumidamente, o cdigo do DNA transcrito para o RNA mensageiro, que, ento, deixa o ncleo para ser traduzido em protenas. RNA: Existem trs tipos principais de RNA que participam do processo da sntese protica: RNA ribossmico (RNAr), RNA transportador (RNAt) e RNA mensageiro (RNAm). Os trs principais tipos de RNA diferem um do outro em termos de tamanho, funo e modificaes estruturais especiais. RNA ribossmico: encontrado em associao com uma srie de protenas diferentes, como componente dos ribossomos; forma a estrutura complexa que serve como stio para a sntese de protenas. No citosol eucaritico, existem quatro espcies de RNAr de tamanhos diferentes (28S, 18S, 5,8S e 5S). ["S" a unidade Svedberg, relacionada ao peso molecular do composto]. Juntos constituem at 80% do RNA da clula. RNA transportador: a menor das trs principais molculas de RNA (4S), tendo entre 74 e 95 resduos de nucleotdeos de tamanho. Existe no mnimo um tipo especfico de molcula de RNAt para cada um dos 20 aminocidos comumente encontrados nas protenas. Juntos, eles constituem cerca de 15% do RNA da clula. As molculas de RNAt contm bases incomuns e possuem extenso pareamento de bases intracadeia, o que lhes d a forma caracterstica de trevo. Cada RNAt serve como um "adaptador", que transporta seu aminocido especfico ao stio de sntese de protenas, onde reconhece o cdon que especifica a adio de seu aminocido cadeia peptdica em formao. RNA mensageiro: compreende somente cerca de 5% do RNA da clula e o tipo mais heterogneo de RNA em termos de tamanho. O RNAm transporta a informao gentica do DNA ao citosol, onde usado como molde para a sntese de protenas. As caractersticas estruturais especiais do RNAm eucaritico incluem uma longa seqncia de nucleotdeos adenina (uma "cauda poli-A") na extremidade 3' da cadeia de RNA, mais uma "cabea" na extremidade 5' ( cap 5), geradas a partir do processamento do mRNA.

PROCESSAMENTO: O transcrito de RNAm da maioria dos genes eucariticos sofre uma srie de reaes de processamento aps a sntese a partir de DNA, envolvendo a remoo de segmentos internos indesejveis e a reunio dos segmentos remanescentes (encadeamento do RNA ou splicing). Os xons ,seqncias codificadoras da maioria dos vertebrados, so divididas em segmentos, que so separados por seqncias intercaladas no-codificadoras (os ntrons). A trancrio consiste na produo de uma seqncia de RNA complementar ao comprimento total do gene, abrangendo xons e ntrons. Freqentemente, entretanto, o transcrito de RNA sofre o encadeamento, uma srie e reaes de processamento atravs das quais os segmentos de RNA dos ntrons so removidos e descartados e os segmentos de RNA dos xons so unidos ponta com ponta (encadeados) para obterse como produto um RNA mais curto. Essas reaes so mediadas por um complexo de RNA e de protenas bastante grande, o encadeossomo (spliceossomos), que consiste de cinco tipos de snRNA (small nuclear RNA, ou seja, RNA de pequeno tamanho) e mais de 50 protenas. Os spliceosomos removem os introns e aproximam os exons para formar uma cpia funcional de RNAm, a partir do qual ser feita a sntese protica. O splicing pode tambm ser realizado pelo prprio intron, sem a ajuda dos spliceossomos.

Unidade de transcrio

Alm do encadeamento, os RNAs transcritos pela polimerase II so sujeitos a dois outros eventos de processamento: Capeamento: Ocorre logo aps a transcrio. Nos casos dos transcritos primrios, que sero processados para produzir mRNA, um nucleosdeo metilado (7-metilguanosina) ligado ao primeiro necleotdeo 5 do transcrito de RNA por uma ligao fosfodister especial 5-5. Tendo em vista que o carbono 5 do resduo e o carbono 5 do primeiro nucleotdeo so efetivamente ligados, diz-se que a extremidade 5 est bloqueada ou capeada. As funes da capa so de proteger o transcrito do ataque da exonuclease 5- 3 (molculas de mRNA desencapadas so desnaturadas rapidamente),

facilitar o transporte do ncleo para o citoplasma, facilitar o encadeamento de RNA, desempenhar um papel importante no encaixe da subunidade 40S dos ribossomos citoplasmticos no mRNA;

Poliadenilao: Nas clulas dos mamferos, uma vez ocorrida a clivagem do RNA posterior a transcrio, cerca de 200 resduos de adenilato so adicionados seqencialmente pela enzima poli(A)-polimerase para formar uma cauda poli(A) na extremidade 3. Supese que as funes dessa cauda sejam de facilitar o transporte das molculas de mRNA para o citoplasma, estabilizar ao menos parte das molculas de mRNA no citoplasma (o encurtamento da extenso da cauda poli[A] est associado com a degenerao do mRNA, com excees de algumas espcies de mRNA) e de facilitar a traduo, ao permitir uma intensificao de reconhecimento do mRNA pela maquinaria ribossmica TRADUO: Um grande nmero de componentes so requeridos para a sntese da cadeia polipeptdica. Estes incluem todos os aminocidos que so encontrados no produto final, o RNAm a ser traduzido, os RNAts, ribossomos funcionais, fontes de energia e fatores proticos necessrios iniciao, elongao e terminao da cadeia polipeptdica. A traduo o processo pelo qual o mRNA fornece um molde para a sntese de um polipeptdeo. O mRNA transportado do ncleo para o citoplasma, onde a seqncia de RNA codificada, ou traduzida, para determinar a seqncia de aminocidos na protena que est sendo sintetizada. O mRNA no pode, entretanto, se ligar diretamente a aminocidos. O RNA transportador (tRNA) fornece a ligao molecular entre a seqncia de bases do mRNA e a seqncia de bases da protena: o mRNA traduzido em protena pela ao de uma variedade de molculas de tRNA, cada uma especfica para um determinado aminocido. O RNAt tem a funo de transferir os aminocidos corretos para suas posies ao longo do molde de mRNA, para que sejam adicionados cadeia polipeptdica crescente.

O tRNA tem um stio em sua extremidade 3 para a ligao de um aminocido por uma ligao covalente. Na extremidade oposta do trevo h uma seqncia de trs nucleotdeos chamada de anticdon. O anticdon caracteriza cada tRNA, dando a especificidade de ligao a um nico Aa. Esta seqncia faz um pareamento de bases com um cdon apropriado no mRNA. A ligao do anticdon do RNAt ao cdon do RNAm segue as regras da ligao complementar e antiparalela isto , o cdon do RNAm lido de 5' para 3' por um anticdon pareado em orientao invertida -(3' 5'). O mRNA, portanto, especifica a seqncia de aminocidos agindo por meio do tRNA. O local citoplasmtico da sntese de protenas o ribossomo, que consiste em protenas enzimticas e RNA ribossomal (mais abundante). A funo do rRNA auxiliar a ligao do mRNA e do tRNA ao ribossomo. O ribossomo primeiramente liga-se a um stio de iniciao na seqncia do mRNA. Este stio consiste de um cdon especifico, AUG, que especifica o aminocido metionina. A traduo de um mRNA processado , portanto, sempre iniciada em um cdon AUG, sendo a metionina sempre o primeiro aminocido codificado (aminoterminal) de cada cadeia polipeptdica, embora em geral seja removido antes que a sntese da protena esteja completa. O cdon para metionina (iniciador AUG) estabelece a matriz de leitura do mRNA. O ribossomo liga o tRNA sua superfcie, de modo que possa haver pareamento entre o tRNA e o mRNA. O ribossomo move-se ao longo da seqncia de mRNA, cdon por cdon, no sentido usual 5 para 3. O ribossomo, ento, desliza ao longo do mRNA a cada trs bases, alinhando o cdon seguinte para o reconhecimento por outro tRNA com o prximo aminocido. medida que cada cdon processado, um aminocido traduzido pela interao entre mRNA e tRNA. A ligao entre o cdon e o anticdon coloca o aminocido apropriado na posio seguinte no ribossomo para formao de uma ligao peptdica com a ponta carboxila e a cadeia polipeptdica crescente. Neste processo, o ribossomo fornece uma enzima que catalisa a formao de ligaes peptdicas covalentes entre aminocidos adjacentes, resultando em um polipeptdeo crescente. Quando o ribossomo chega a um cdon finalizador na seqncia de mRNA, terminam a traduo e a formao de polipeptdeo. O terminal amino (NH2) do polipeptdeo correspondente ponta 5 do filamento de mRNA, e o terminal carboxila (COOH) corresponde ponta 3. Quando a snt ese est completa, o mRNA, o ribossomo e o polipetdeo se separam um do outro. O polipeptdeo ento liberado para o citoplasma. Todo esse especializado e refinado processo pode ser dividido em trs etapas bsicas: Iniciao: A iniciao da sntese de protenas envolve a reunio de componentes do sistema de traduo antes que ocorra a formao da ligao peptdica. Estes componentes incluem as duas subunidades ribossmicas, o RNAm a ser traduzido, o aminoacil-RNAt para metionina, especificado pelo cdon iniciador AUG na mensagem, o GTP (o qual fornece energia ao processo) e fatores de iniciao que facilitam a montagem deste complexo de iniciao. Alongamento: A elongao envolve a adio de aminocidos extremidade carboxila da cadeia polipeptdica em formao. Durante a elongao, os ribossomos movem-se da extremidade 5' 3' do RNAm que est sendo traduzido. H vrios fatores de alongamento envolvidos com esse processo. A formao das ligaes peptdicas catalizada pela peptidiltransferase. Aps formar-se a ligao peptdica, o ribossomo avana trs nucleotdeos em direo ao 3' terminal do RNAm. Isto causa a liberao do RNAt descarregado

Terminao: A terminao ocorre quando um dos trs cdons de encerramento so expostos no stio ribossmico. O fator de liberao faz a protena recm sintetizada ser liberada do complexo ribossmico e causa a dissociao entre o ribossomo e o RNAm. O polipeptdeo recm sintetizado pode sofrer modificaes subsequentes; as subunidades ribossmicas, o RNAm, o RNAt e fatores proticos podem ser reciclados e usados para sintetizar outro polipeptdeo.

MODIFICAES PS-TRADUCIONAIS: Antes que um polipeptdeo recm-sintetizado possa comear a sua existncia como protena funcional, ele freqentemente sofre outro processamento chamado de modificao ps-traducional. Estas modificaes podem ter uma variedade de formas, incluindo a clivagem em unidades polipeptdicas menores, ou uma combinao com outros polipeptdeos para formar uma protena maior. Outras modificaes possveis incluem a adio de cadeias laterais de carboidratos ao polipeptdeo. Estas modificaes so necessrias, por exemplo, para produzir o dobramento apropriado da protena final, ou para estabilizar sua estrutura. A cadeia polipeptdica, que o produto primrio da traduo, dobrada e associada em uma estrutura tridimencional especfica que determinada pela prpria seqncia de aminocidos. Duas ou mais cadeias polipeptdicas, produtos do mesmo gene ou de genes diferentes, podem se combinar para formar um nico complexo protico final. Os produtos proticos tambm podem ser modificados quimicamente por, por exemplo, adio de fosfato ou carboidratos em stios especficos. Outras modificaes podem envolver a clivagem da protena, seja para remover seqncias amino-terminais especficas aps terem direcionado uma protena para o seu local correto dentro da clula, ou para dividir a molcula em cadeias polipeptdicas menores. (animao: http://www.ncc.gmu.edu/dna/ANIMPROT.htm) REPLICAO Regras Fundamentais: 1. A replicao do DNA um processo semi-conservativo. Ambas fitas de DNA que formam um duplex servem como molde para sntese de uma fita nova complementar. Assim, durante um evento

de duplicao so produzidas duas molculas novas de DNA, cada uma delas consistindo de uma fita velha (do duplex original) e uma nova (recm -sintetizada). 2. A replicao tem incio em uma origem e a partir dela continua bidirecionalmente. A replicao de DNA sempre tem incio num ponto nico na molcula, caracterizado por uma seqncia de bases especficas denominado origem da replicao, a partir de onde a dupla fita se abre. As terminaes destes so pontos dinmicos, chamados de forquilhas de replicao, onde as fitas de DNA so separadas e replicadas.

3. A sntese de DNA procede na direo 5 - 3 e semi-descontnua. Uma fita nova de DNA sintetizada na direo 5 - 3, sendo a extremidade livre OH de cada nucleotdeo o ponto em que o DNA alongado. Devido a esta propriedade e considerando-se a natureza anti-paralela do DNA, a fita utilizada como molde s pode ser lida na da extremidade 3em direo a 5. Como a abertura da dupla fita gradual a partir da forquilha de replicao e o sentido de leitura obrigatoriamente na direo 5 - 3, a sntese das duas fitas ocorre em sentidos opostos, no sendo possvel que ambas as fitas sejam sintetizadas continuamente. Desta forma, uma das fitas sintetizada continuamente, sendo denominada de fita lder, enquanto a outra se faz em pequenos fragmentos, sendo chamada de fita tardia. Estes fragmentos so denominados de fragmentos de Okasaki.

As principais enzimas envolvidas na replicao so: 1. NUCLEASES So enzimas que tem a capacidade de clivar (cortar) cidos nuclicos, sendo, portanto, responsveis pela degradao do DNA. Existem inmeros tipos, que esto divididos em duas classes principais: exonucleases, que degradam cidos nuclicos a partir da extremidade da molcula; e endonucleases, que degradam a partir de qualquer stio (local) da molcula de DNA. 2. DNA POLIMERASES So as principais enzimas envolvidas na replicao, uma vez que adicionam nucleotdeos e participam do sistema de reparo. Na E. coli, utilizada como modelo para estudo da replicao, so mais de 5 enzimas conhecidas, sendo a I, II e III as principais. A reao bsica (polimerizao), comum a todas e responsvel pelo alongamento do DNA a partir da origem est representada na figura a seguir.

O estudo das polimerases revelou que, para a polimerizao ocorrer, so necessrios dois elementos principais: uma fita molde de DNA e um primer (iniciador). O molde, lido na direo 3 , determina a sequncia dos nucleotdeos da fita nova, obedecendo as leis de pareamento de -5 Watson e Crick. Ele normalmente representado pela fita velha. Desta forma, as caractersticas de complementariedade e antiparalelismo so mantidas no novo duplex de DNA. O primer necessrio porque a polimerase no consegue iniciar o alongamento de uma cadeia de polinucleotdeos a partir de nucleotdeos livres; ou seja, um pedao de fita nova j deve existir. O primer um pequeno segmento de RNA, sintetizado pela enzima primase, que depois ser substitudo por DNA pela prpria DNA polimerase. O papel especfico de cada polimerase pode ser simplificado da seguinte maneira: Polimerase I: funo de reparo nos processos de replicao e recombinao. Polimerase III: a principal enzimas envolvida no processo. Tm uma estrututa mais complexa, com vrias subunidades com funes especficas. 3. HELICASES, TOPOISOMERASES, SSB As helicases fazem a separao das duas fitas parentais para que a replicao possa ter incio. Esta separao cria um estresse topolgico que aliviado pela ao das topoisomerases, enzimas que atuam no enrolamento do duplex de DNA. J as SSB (single strand binding proteins ou protenas de ligao do DNA de fita simples) mantm as duas fitas separadas estabilizadas. 4. PRIMASES Sintetizam a pequena poro de RNA que servir como primer para incio da replicao. Estgios da Replicao O processo de replicao divido em 3 etapas: 1. INICIAO A origem da replicao da E. coli, chamada de OriC, consiste numa sequncia de 245 pb altamente conservada ( isto , aparece em diversos organismos e manteve-se idntica durante o processo evolutivo) entre as origens de replicao. As seqncias chave deste segmento consistem em duas sries altamente repetidas: 3 repeties de 13 pb e 4 repeties de 9 pb. Pelo menos 6 enzimas ou protenas participam na iniciao da replicao. Elas abrem o DNA na origem e estabilizam o complexo que se forma junto com as outras enzimas envolvidas na replicao (complexo pr-priming) para que ocorram as reaes subseqentes. O componente chave no processo a protena DnaA.Um complexo de 20 DnaAs se liga as 4 repeties de 9 pb na origem, depois reconhece e abre o DNA na regio das trs repeties de 13 pares de base. A DnaB, ento, se liga regio aberta e funciona como uma helicase criando assim uma forquilha de replicao e separando progressivamente a dupla fita, numa reao que requer DnaC como co-fator. A iniciao a nica fase regulada da replicao, de forma que ela (a replicao) s ocorre uma vez por ciclo celular. O tempo de incio da replicao afetado pela metilao do DNA.

Imediatamente aps o trmino da replicao o DNA hemimetilado; a oriC da fita parental metilada mas a da fita nova no. Enquanto a regio oriC da fita nova no for metilada, no pode ter incio um novo processo de replicao. 2. ALONGAMENTO Esta fase inclui duas operaes distintas mas relacionadas: a sntese da fita lder e a sntese da fita tardia. A sntese da fita lder um processo mais simples que se inicia com a sntese de um pequeno segmento de RNA pela primase na origem de replicao.Depois os desoxirribonucleotdeos so adicionados ao primer pela DNA polimerase III, obedecendo as regras j mencionadas. A sntese da fita lder prossegue continuamente at o final da molcula. O primer retirado e substitudo por DNA. A sntese da fita tardia realizada atravs da formao de pequenos fragmentos de Okasaki, j citados anteriormente. Primeiro formado um primer de RNA pela primase e, assim como na fita lder, desoxirribonucleotdeos so adicionados pela DNA polimerase III. Neste nvel, o processo parece simples, mas na realidade ele bem complexo. Sua complexidade reside na coordenao entre a sntese da fita lder contnua e a da fita tardia descontnua; sendo as duas realizadas por uma nica DNA polimerase III (em diferentes subunidades). Para tal processo ocorrer, criada uma ala na fita tardia, aproximando assim os dois pontos da replicao. Como a fita tardia sintetizada descontinuamente, isto , atravs da formao de vrios fragmentos, o processo de criao de um primer se repete diversas vezes, assim como o desconectamento do fragmento formado da polimerase III e a conexo de um novo fragmeno. No final todos os primers so retirados e os fragmentos de Okasaki unidos. 3. TERMINAO Tomando-se como um modelo a E. coli e tendo em vista seu DNA circular, h um momento em que as duas forquilhas de replicao ( que progridem na mesma direo ) finalmente se encontram em uma sequncia chamada Ter. Para que possa ter fim a replicao, ela foi arranjada de maneira a formar uma espcie de armadilha, em que a forquilha de replicao entre e no possa sair. Isso obtido pela ligao da protena Tus regio Ter, impedindo que a replicao do DNA recomece ou continue. Nos eucariotos a terminao da replicao dos cromossomos lineares enfrenta o problema de replicar a extremidade da fita tardia, que est sendo sintetizada em sentido oposto. A soluo envolve a sntese das partes terminais dos cromossomos, chamadas telmeros. Os telmeros possuem vrias cpias de uma seqncia consenso, as quais so adicionadas por uma enzima especfica (telomerase) na fita tardia, quando a replicao estiver prxima ao final. Na fita lder, a terminao ocorre naturalmente quando chega ao final do molde parental. (animao: http://www.ncc.gmu.edu/dna/repanim.htm). Referncias 1. BORGES-OSRIO MR, ROBINSON WM. Gentica Humana. Porto Alegre. Editora Artmed, 2 edio, 2002. 2. MUELLER RF, YOUNG ID. Elements of Medical Genetics. Itlia. Editora Churchill Livingstone, 11a edio, 2002. 3. STRACHAN T, READ AP. Human Molecular Genetics. Reino Unido. Editora WileyLiss, 2 edio, 2002. 4. http://www.accessexcellence.org/RC/AB/BA/dnaintro/index.html