comprenden las bacterias del suelo y el agua que obtienen carbono y nitrgeno de la atmsfera y de la materia inorgnica simple. Las bacterias hetertrofas requieren compuestos orgnicos ms complejos como fuente de carbono y nitrgeno, as como protenas o sus derivados, tambin requieren carbohidratos y grasas. Este ltimo grupo de organismos es el ms importante en bacteriologa mdica. Protenas: Se suministran generalmente como peptonas que se encuentran disponibles en el comercio, preparadas por digestin parcial de carne con enzimas ppticas, consisten en polipptidos, dipptido y aminocidos.
III. MATERIALES. Placas Petri. Tubos de Ensayo. Mecheros de Bunsen. Autoclave. Matraces. Pinzas de madera. Bao mara. Trpodes Rejillas de asbesto. Medios de cultivo a prepararse.
V. PREPARACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO La preparacin de medios de cultivo se ha simplificado en gran medida por la comercializacin de medios deshidratados, en los que los diferentes nutrientes se encuentran ya mezclados en las debidas proporciones, siendo slo necesario la adicin de la cantidad correcta de agua destilada para disolver sus componentes. Cuando se prepara un medio lquido se debe disolver totalmente todos sus componentes en agua destilada. A continuacin el caldo se envasa en los recipientes adecuados (matraces o tubos), tapando los mismos y esterilizndolos. La preparacin de un medio slido puede hacerse de dos maneras: Preparar el caldo y aadir Agar al 1,5% o bien utilizar un medio slido comercial. Independientemente de la forma elegida para hacerlo, la preparacin de los medios de cultivo slidos requiere procedimientos especiales, ya que el Agar es insoluble en agua. Por ello, una vez aadida el agua, se debe calentar la mezcla hasta 100C, para permitir que el Agar se funda y quede incorporado al resto de los nutrientes disueltos. El medio fundido se dispensa en tubos o matraces, que se tapan y se esterilizan.
Los medios slidos contenidos en tubos pueden dejarse enfriar en posicin vertical, si van a ser inoculados en profundidad, o bien pueden inclinarse para que al solidificarse en esa posicin adopte la forma inclinada que proporciona una mayor superficie de siembra. Si se desean preparar placas de Petri, se utilizar el medio de cultivo que ha sido esterilizado en un matraz y, una vez atemperado, se verter en placas vacas en un ambiente asptico, como el que proporciona la proximidad de la llama de un mechero o una campana de flujo laminar. En algunas ocasiones, el medio de cultivo destinado a placas puede conservarse estril en tubos, que se fundirn al bao Mara cuando se vayan a preparar las placas. Si se han de incorporar al medio compuestos termolbiles, como vitaminas o antibiticos, se esterilizarn stos por filtracin y se aadirn al medio de cultivo previamente esterilizado en autoclave y una vez que este se haya atemperado. En todos los casos se han de seguir las instrucciones del fabricante. La conservacin de los medios ya preparados puede hacerse a temperatura ambiente, pero es preferible conservarlos a 4C para retrasar su deshidratacin. VI. CUESTIONARIO 1. Qu usted entiende por medio de cultivo? 2. Cules son los objetivos de la nutricin microbiana? 3. Cmo se clasifican los medios de cultivo atendiendo a su composicin? 4. Qu es un medio artificial? 5. Cmo se clasifican los medios de cultivo atendiendo a los objetivos de su empleo? 6. Qu informacin aportan los medios diferenciales? 7. Cmo se denomina el producto que se aade a los medios de cultivo para sodificarlos? 8. Cules son los compuestos nutritivos bsicos? 9. Qu compuestos podemos incorporar al medio de cultivo que le sirva a la bacteria como fuente de nitrgeno? 10. Qu compuesto nutritivo aporta el carbono que le sirve a la bacteria para obtener energa? 11. Explique como usted realiza la pesada de un medio de cultivo deshidratado. 12. Describa como se hidrata el medio de cultivo una vez pesado. 13. De cuantas maneras se puede ajustar el pH del medio de cultivo? 14. Cmo se distribuye el medio de cultivo antes de su esterilizacin? 15. Cmo se conservan los diferentes medios una vez elaborados? 16. Cmo se comprueba la esterilidad de los medios de cultivo recin elaborados? 17. Qu proceder debe seguirse cuando se va a realizar la siembra en un medio que est conservado en refrigeracin?