2.

Biomolculas composio qumica, estructura e reactividade

AULA 12 BIOQUMICA

LPIDOS MEMBRANAS BIOLGICAS E TRANSPORTE

Membranas biolgicas
Importante papel a nvel da estrutura e funo das clulas pro- e eucarioticas Definem o limite celular so a barreira para o meio exterior. Em eucariotas delimitam os organelos intracelulares, isolando o seu contedo do contedo citoplasmtico. Tm ainda uma funo muito importante na comunicao intra e entre clulas
So compostas por lpidos, protenas e glcidos

Membranas biolgicas
Propriedades das membranas biolgicas: 1. So flexiveis (permitem a alterao do tamanho e forma da clula) 2. tm permeabilidade selectiva -permite regular o conteudo intracelular de diversos metabolitos e ies -permite criar diferenas de concentrao inica entre o extterior e o interior gerando potencial elctrico 3. tm capacidade fusognica , i.e., conseguem fundir-se umas com outras (aspecto importante nos mecanismos de diviso celular, de endocitose e exocitose
K+ K+ Na+ Na+

K+

gluc ose

gluc ose

gluc ose

Composio lipdica das membranas

Glicerofosfolpidos Esfingolpidos

Colesterol

Colesterol (C27)

Os lpidos componentes das membranas biolgicas so insoluveis em gua, mas a sua natureza anfiptica permite estruturas estveis de interao com a gua As membranas biolgicas formam bicamadas lipdicas As clulas e organelos so lipossomas gigantes

Principais estruturas lipdicas Micela Bicamada lipdica

Lipossoma

As bicamadas nas extremidades no so estveis, e por isso tendem a formar os lipossomas

Fase hexagonal

A distribuio dos lpidos nas membranas no sempre igual.

Dependendo do tipo de membrana a sua constituio de lpidos varia
colesterol Fosfatidil colina Fosfatidil etanolami na Fosfatidil serina Fosfatidil inositol Esfingo mielina Difosfatidil glicerol

Membrana plasmtica Retculo endoplasmtico rugoso Retculo endoplasmtico liso

30 6 10

18 55 55

11 16 21

9 3 -

4 8 7

14 3 12

Mitocondria membrana interna

Mitocondria membrana externa Ncleo Golgi

3
5 10 8

45
50 55 40

25
23 20 15

1
2 3 4

6
13 7 6

3
5 3 10

18
4 -

% de cada lpido, em funo do total de lpidos nas diferentes membranas do fgado de rato

A distribuio dos lpidos nas membranas no sempre igual.

Monocamada externa

Esfingomielina, fosfatidilcolina

Monocamada interna

fosfatidilinositol

Os lpidos apresentao tambm uma distribuio assimtrica entre as duas camadas das membranas. Ou seja, h lpidos mais abundantes numa camada enquanto outros lpidos predominam na outra.

Fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilinositol

Sinalizao intracelular

Conceito de fluidez membranar o modelo do mosaico fluido

As membranas biolgicas so fluidas: Lpidos e protenas podem mover-se lateralmente no plano da bicamada lipidica, pois as interaes entre eles so no covalentes O conceito de fluidez deriva do modelo proposto em 1972 por Singer e Nicolson- o modelo do mosaico fluido.

Para alm da difuso lateral, os fosfolipidos esto em constante rearranjo/movimento de rotao, e podem trocar entre as duas camadas por um processo designado flip-flop. Esta troca catalizada por enzimas flipases

A temperatura e composio da membrana influencia a sua fluidez

Lipidos insaturados conferem fluidez
forma uma estrutura menos rgida e empacotada

A baixas temperaturas, a bicamada lipdica encontra-se num estado superempacotado estrutura cristalina, que rgida.
Fase semi-slida

O colesterol tambm aumenta a fluidez da membrana porque impede que as cadeias dos cidos gordos permaneam ordenadas

As membranas so fluidas quando esto na estrutura liquido-cristalina

A estrutra slida-cristalina estabilizada por interaces de Van der Walls entre as cadeias hidrogenocarbonadas longas

As protenas de membrana ou protenas membranares protenas intrinsecas ou integrais

Compem entre 20 e 80 % das membranas biolgicas
Protenas intrisecas esto embebidas na bicamada lipidica, podendo atravessar a bicamada, ou estar embebidas apenas numa camada. Caracterizam-se por terem na sua superfcie de interaco com os lpidos, resduos de aminocidos apolares. Residuos polares encontram-se nas regioes que saiem da bicamada Outras protenas, no integrais podem ainda estar associadas covalentemente a um lpido, ficando ancoradas na membrana

As protenas de membrana ou protenas membranares protenas extrinsecas

Protenas extrinsecas interagem com a regio polar dos lipidos membranares ou com as regies externas das portenas integrais

As protenas membranares tm uma orientao especfica na bicamada, distinguindo a regio interna da externa

Existe portanto uma assimetria de distribuio das protenas nas membranas, particularmente mais visvel nas membrans citoplasmticas, pois nestas, na face externa as protenas apresentam muitas vezes resduos glicdicos so glicoprotenas Tal como os glicolpidos, as glicoprotenas tm funo importante no reconhecimento intercelular.

As protenas de membrana ou protenas membranares propriedades estruturais

As protenas tambm difundem lateralmente na membrana, mas esto muitas vezes associadas a protenas tais como as do citoesqueleto, o que lhes confere um posicionamente especfico. Permite interaco entre determinados grupos de protenas cuja funo est relacionada.

No eritrcito o trocador bicarbonato-cloro (banda 3) est associado espectrina (protena do citoesqueleto) atravs da anquirina. A espectrina interage com a actina (tb do citosqueleto). Estas interaces levam forma dos eritrcitos. Quando h menos espectrina, as clulas ficam mais redondas e so retidas na microcirculao esplnica e eliminadas.

Sistema de Transporte membranar uma das principais funes das protenas membranares
A bicamada lipdica impermevel a solutos polares e ies, mas permevel agua, e a gases como o oxignio, o CO2 o xido ntrico (NO) e o metano (CH4) Assim, uma das principais funes das protenas integrais da membrana transportar atravs da bicamada estas pequenas molculas, fazendo-o de uma forma controlada devido especificidade para cada ligando, caracterstica das protenas. Glucose, nuclesidos, ATP, aminocidos, e os ies H+, Na+, K+, Cl-, Ca2+, HCO3-, etc Existem 3 grande tipos de tranporte: O transporte pode ser: Passivo sem gasto de energia Activo associado ao consumo de ATP

Co -tranporte

Transporte atravs das membranas Equilbrio de Donnan

Como em qualquer outro processo (bio)qumico, o transporte de molculas atravs das membranas rege-se pela energia de Gibbs associada ao processo. Os factores que influenciam a energia de Gibbs para a passagem de molculas so a presso osmtica e o balano de cargas entre os dois lados da membrana. Para um dado composto i, a energia de Gibbs exprime-se pela equao:

Concentrao de i no interior e exterior

carga de i
pode ser 0

Constante de Faraday

No estado de equilbrio (G=0), ou equilbrio de Donnan, no necessariamente o estado em que h igual concentrao de i no interiro e exterior.

Diferena de potencial elctrico global entre os dois lados da membrana

A clula contm inmeras biomolculas com carga, que so impermeveis mas que contribuem para o potencial electrico da membrana.

Transporte passivo ou difuso facilitada

O tranporte facilitado ou passivo de substncias atravs da bicamada lipdica feito atravs de protenas transmembranares que aumentam a velocidade de difuso atravs da membrana e no requerem energia Os tranportadores passivos, tais como as enzimas so especficos para a molcula que transportam. Esta especificidade estereoqumica deve-se a interaces fracas, no covalentes entre o transportador e a molcula a transportar. Porque os transportadores so protenas, a sua abertura ou fecho pode ser regulada por ligao alostrea. O transporte passivo faz-se sempre com um G negativo, no sentido de onde h Meio extracelular mais soluto para onde h menos Exemplo do receptor nicotnico de acetilcolina do tipo ionotrpico

Meio intracelular

Transporte passivo ou difuso facilitada Co-transporte simporte e antiporte

No caso de transportadores que efectuam co-transporte, o transporte de uma substncia est associado ao transporte de outra substncia, e este ltimo um transporte espontneo. Assim, consegue-se promover o transporte de A, associado ao de B, embora o de A no fosse energeticamente favoravel. Exemplo de simporte Exemplo de antiporte

Transporte activo transporte que requer energia

O transporte activo feito contra o gradiente de concentrao da molcula, o que quer dizer que com ele, a concentrao do soluto pode continuar a aumentar mesmo aps ter passado o ponto de equilibrio. Existem 2 tipos de transporte activo: 1. primrio, em que o transportador utiliza directamente energia (ATP) para promover o transporte. Na+/K+ ATPase
As bombas de Ca2+, do citoplasma e reticulo endoplasmtico que mantm uma baixa concentrao de clcio no citoplasma.

Bomba de Na+/K+ que mantm altas concentraes de K+ no interior da clula, e altas concentraes de Na+ no exterior.

Ca2+ ATPases

Transporte activo transporte que requer energia

Transporte activo secundrio Neste segundo tipo, um transportador activo est acoplado a um cotransportador. O primeiro consome ATP para bombear contra gradiente um soluto (ex. H+) que ir facilitar o transporte doutro soluto (ex. Sacarose/ sucrose)

Neste exemplo de diversos transportadores membranares, indicar quais so activos e passivos, uniporte, simporte ou antiporte

Utilizao contrria de bombas ATPases para produzir energia a ATP sintase

A ATP sintase da cadeia respiratria muito semelhante a transportadores ATPase. Mas em vez de catalizar a degradao de ATP, faz a reaco inversa, sntese de ATP a partir de ADP e Pi e para promover esta reaco usa a energia resultante do transporte de H+, criado por um potencial de membrana

Conceito de potencial de membrana

O potencial de membrana corresponde diferena de cargas entre os dois lados da membrana
Num caso simples, em que se coloca duas solues de NaCl de concentrao diferente de cada lado de uma membrana permevel apenas ao io Na+. Ocorre a passagem de ies Na+ atravs da membrana para atingir um equilbrio de concentrao... Mas ao mesmo comea a haver mais cargas negativas de um lado e mais positivas do outro ou seja, forma-se um potencial electrico.

[NaCl] = 140mM

[NaCl] = 4mM

Equilibrio de Donnan

Permeabilidade inica membranar importncia dos canais inicos para o potencial de membrana
Nas clulas a passagem de ies atravs da membrana est fortemente regulada, de modo a manter diferenas de concentrao entre o interior e o exterior.
[Cl-] = 140 mM [Na+]= 145 mM [Ca2+]= 1,5 mM [K+]= 4 mM

O potencial de membrana est associado s diferenas de concentraes de cada io e sua permeabilidade atravs da membrana. Como o Cl, Na, K so os ies que

[Cl-] = 4 mM apresentam maior permeabilidade, [Na+]= 12 mM [Ca2+]= 0,0001 mM o potencial de membrana pode ser descrito por [K+]= 140 mM

Para cada io, num estado de equilbrio:

O seu potencial de membrana dado pela equao de Nernst Ou a T=20C

Uma diferena de 10x na concentrao leva a potencial -58mV

Permeabilidade inica membranar importncia dos canais inicos para o potencial de membrana
Nas clulas a passagem de ies atravs da membrana est fortemente regulada, de modo a manter diferenas de concentrao entre o interior e o exterior. [Cl-] = 140 mM [Na+]= 145 mM [Ca2+]= 1,5 mM [K+]= 4 mM
A abertura de canais de Ca sensiveis a voltagem est na base de sinalizao intracelular. O Ca activa muitas enzimas

[Cl-] = 4 mM [Na+]= 12 mM [Ca2+]= 0,0001 mM [K+]= 140 mM Para alm disso alguns canais de ies so sensiveis a voltagem, ou seja, uma pequena alterao do potencial de membrana f-los abrir.

Funo dos transportadores inicos membranares na conduo do impulso nervoso

Nos neurnios (tal como nas outras clulas) mantido uma elevada concentrao de ies potssio e muita baixa conc. de Na+ no interior da clula. custa de ATP pela aco da bomba Na+/K+ ATPase Quando ocorre a despolarizao da membrana (reduo do potencial de -70mV a -55mV) os canais de sdio abrem. Este efeito rpido e ao fim de 1-2 ms eles tornam a fechar. A membrana repolarizada com a abertura de canais de K+, que se fecham ao fim de 5 -10 ms

Potencial de aco Potencial de repouso

Propagao do sinal no neurnio

A despolarizao da membrana criada pela aberura dos canais de Na+ leva despolarizao da membrana adjacente, o que despoleta a abertura dos canais de sdio nessa regio contigua propagao do sinal As bainhas de mielina servem de isolamento da membrana, evitando a perda de potencial, o que ajuda a menter a velocidade de propagao.

De que so feitas as bainhas de mielina?

bibliografia
Captulo 31

Questes
1. Justifique a seguinte afirmao: Triglicridos e colesterol esterificado no fazem parte da bicamada lipdica. 2. As membranas biolgicas constituem uma barreira hidrfoba que impede a passagem de substncias hidrfilas. Refira como possvel o transporte destas substncias atravs das membranas biolgicas, muitas vezes contra o seu gradiente de concentrao. 3. Relativamente s protenas da membrana do eritrcito, indique se verdadeiro ou falso (justifique se falso): a) O trocador aninico bicarbonato-cloreto uma protena extrnseca da membrana, enquanto a espectrina uma protena intrnseca. b) A espectrina ajuda a manter a forma e a integridade dos eritrcitos.

c) A espectrina liga-se aos componentes da membrana plasmtica atravs da actina.

d) O trocador aninico (protena da banda 3) permite a troca entre o sdio e o cloro.

Questes
4. Aps um potencial de aco (PA) ocorre a repolarizao da membrana. Qual dos seguintes eventos explica esta observao? a) Abertura de canais de clcio sensveis voltagem. b) Abertura de canais de potssio. c) Abertura de canais de sdio. d) Inactivao dos canais de potssio. e) A membrana torna-se impermevel a todos os ies.