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MODULO: DESARROLLO ANALITCO PROYECTO: ANLISIS VA GRUPO FUNCIONAL METILDOPA TABLETAS


NDICE I. FUNDAMENTACIN 1. ANLISIS VA GRUPO FUNCIONAL.3 2. ESPECTROSCOPA ULTRAVIOLETA-VISIBLE.4 3. LEY DE LAMBERT-BEER5 4. ESPECTROFOTMETRO UV-VISIBLE.6 5. PROPIEDADES METILDOPA.........7 II. OBJETIVO GENERAL..9 2.1 OBJETIVOS ESPECFICOS..9 III. MATERIAL.9 IV. EQUIPOS.10 V. REACTIVOS.10 VI. PREPARACIN DE SOLUCIONES10 VII. PROPUESTA DE FORMULACIN TABLETAS METILDOPA.10 VIII. PREPARACIN DE PLACEBO....11 IX. SELECCIN DE MTODOS ANALTICOS A DESARROLLAR...11 X.METODOLOGA12 XI. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES...16 XII. RESULTADOS...17 XIII. ANLISIS DE RESULTADOS22 XIV. CONCLUSIONES....24

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XV. ANEXOS (CLCULOS).26 XVI. BIBLIOGRAFA..33

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I. FUNDAMENTACIN 1. ANLISIS VA GRUPO FUNCIONAL Un grupo funcional es un tomo o un grupo de tomos que manifiesta una reactividad qumica caracterstica. Todas las molculas (dentro de lmites bastante amplios) contienen un determinado grupo funcional que experimenta ciertas reacciones. Los mtodos de grupos funcionales constan de dos partes: primera, la reaccin qumica o reacciones a las que se somete el compuesto muestra, y el segundo, la medida final (la conclusin), que suele ser cuantitativa. Algunas veces estas dos partes se entremezclan como en una simple valoracin, pero por lo general son operaciones discretas. En el estudio de anlisis de grupos funcionales se parte de la consideracin de la reaccin general: Muestra + Reactivo Producto A + Producto B Dos fenmenos generales controlan la utilidad analtica de la reaccin. Uno de estos es el estado de equilibrio, o la amplitud en que los reactantes forman productos cuando se alcanza el estado de equilibrio. La constante de equilibrio es una medida de esto y obviamente es de desear que su valor sea alto. El segundo rasgo predominante es la velocidad de reaccin, que ha de ser lo suficientemente grande para tener los requerimientos de velocidad analtica. Cabe alterar varias condiciones (temperatura, catlisis, solvente) para incrementar la velocidad de reaccin. Si la reaccin analtica posee la velocidad satisfactoria y propiedades de equilibrio, puede usarse para determinar la muestra por adicin de un exceso de reactivo. Completada la reaccin (es decir, despus de haber conseguido el equilibrio) la conclusin cuantitativa del anlisis se hace por: (1) determinacin de la cantidad de reactivo que no ha reaccionado, que se sustrae del total del reactivo total aadido para obtener la cantidad de la muestra; (2) determinacin de la cantidad de producto A; o (3) determinacin de la cantidad de producto B.

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Es posible que estas medidas requieran posteriores reacciones. La determinacin final puede hacerse por mtodos ya considerados tales como volumetra, espectrofotometra, refractometra, polarimetra, polarografa, fluorimetra o deteccin cromatogrfica. Algunas veces el anlisis de grupos funcionales orgnicos se realiza por mtodos fsicos, es decir sin que ocurra una reaccin qumica. En este sentido los mtodos espectrofotomtricos son detectores de grupos funcionales. Aunque esta tcnica no puede proporcionar la identificacin inequvoca de un compuesto orgnico el espectro de absorcin en las regiones ultravioleta y visible es til para detectar la presencia de ciertos grupos funcionales que actan como cromforos. 2. ESPECTROSCOPA ULTRAVOLETA-VISIBLE Se fundamenta en que la molcula a determinar debe presentar dobles enlaces o pares de electrones libres los cuales son promovidos de un estado basal a un estado excitado absorbiendo la radiacin electromagntica y liberando el exceso de energa en forma de calor. La regin del visible se extiende desde 350 a 800 nm. La regin ultravioleta abarca desde 100 a 200 nm y se divide en dos regiones diferentes: la regin de ultravioleta lejano, que se extiende desde 100 a 200 nm y la llamada regin del ultravioleta cercano que va desde 200 nm a 350 nm. Se debe tener en cuenta que la obtencin de un espectro UV supone en primer lugar disolver la sustancia en un disolvente adecuado que tambin absorber en el UV, por lo que en la prctica los espectros UV se ven limitados a longitudes de onda superiores a 200-220nm. Debido a ello como podemos imaginar, no son muchos los grupos funcionales que podemos identificar por espectroscopa UV, siendo de destacar que todos ellos deben poseer al menos un doble enlace. La existencia de un doble enlace ms conjugado con el anterior o la presencia de un grupo auxcromo hace que aumente la mxima de absorcin (efecto hipercrmico). En caso de producirse por cualquier circunstancia una disminucin

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de la mxima sera un efecto ipsocrmico o una disminucin de la absorbancia (efecto hipocrmico). La espectroscopa UV-VIS es una de las herramientas ms tiles con las que cuenta el cientfico para el anlisis cuantitativo ya que se puede determinar la concentracin de uno o varios elementos en los espectros y determinar el rea que ocupan cada uno de los mximos de esos espectros, siendo por medio de estos patrones fcil la determinacin de la concentracin qumica de sus constituyentes. Los datos espectrales de absorcin en el ultravioleta-visible se suelen presentar como grficas de absorbancia o logaritmo del coeficiente de extincin frente a longitud de onda. Entre las caractersticas importantes de los mtodos espectrofotomtricos estn: 1. Gran aplicabilidad tanto para sistemas orgnicos e inorgnicos. 2. Lmites de deteccin de 10-4 a 10-5 M. 3. Selectividad de moderada a alta. 4. Buena exactitud (por lo regular se encuentran incertidumbres relativas de 1 a 3%, aunque con precauciones especiales los errores se pueden reducir a algunas dcimas de porcentaje). 5. Adquisicin de datos fcil y adecuada. 3. LEY DE LAMBERT-BEER Cuando un haz de radiacin UV-VIS atraviesa una disolucin conteniendo un analito absorbente, la del haz Po es atenuada hasta Pt. Esta fraccin de la radiacin que no ha logrado traspasar la muestra es denominada transmitancia. T= Po/Pt Por aspectos prcticos se utiliza la absorbancia (A), en lugar de la transmitancia (A= -log T), por estar relacionada linealmente con la concentracin de la especia absorbente segn la ley de Lambert-Beer:

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A= log Po/Pt= b C En esta ecuacin A es la absorbancia de la disolucin que es una magnitud adimensional; es una constante llamada coeficiente de absortividad molar (se expresa en mol-1 L cm-1), su valor depende de la especie absorbente, de la longitud de onda y del disolvente considerado; C representa la concentracin molar de la sustancia absorbente y b la longitud de la celda que contiene la sustancia absorbente expresada en cm. En la obtencin de la ley de Lambert-Beer se considera que: 1. La radiacin incidente es monocromtica. 2. Las especies absorbentes son independientes en el proceso de absorcin. 3. El proceso de absorcin ocurre en un volumen de seccin transversal uniforme.

4. ESPECTROFOTMETRO UV-VISIBLE Actualmente existen espectrofotmetros de un solo haz y doble haz, siendo estos ltimos los ms utilizados. Un espectrofotmetro UV-VIS de doble haz contiene una fuente emisora de radiacin ultravioleta que pasa a travs de un monocromador que selecciona una longitud de onda determinada que. a continuacin, es dividida en dos haces. Una pasa a travs de una disolucin que contiene el compuesto orgnico (haz de la muestra) y la otra pasa a travs de la celda de referencia que contiene nicamente el disolvente (haz de referencia). El detector mide de forma continua la relacin de intensidad entre el haz de luz que atraviesa la celda de referencia y (IR) y el haz de luz que atraviesa la celda que contiene el compuesto orgnico (IM). Un registrador traza una grfica (espectro) de la absorbancia de la muestra frente a la longitud de onda y, por tanto, de un espectro UV se extrae directamente el valor de la longitud de onda mxima (max) y de la absorbancia.

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5. PROPIEDADES METILDOPA Nombres: 3-Hidroxi-a-metil-L-tirosina sesquihidratada L-3 -(3 ,4-Dihidroxifenil)-2-metilalanina sesquihidratada Descripcin: Polvo fino, blanco o amarillo claro. Solubilidad: Soluble en cido clorhdrico diluido; poco soluble en agua y ligeramente soluble en alcohol, casi insoluble en ter dietlico. Reacciones adversas. Somnolencia, sequedad de boca, cefalea, edema de miembros inferiores por retencin de sodio y agua, fiebre (asociada, a veces, con disfuncin heptica severa) y anemia hemoltica (aparece en menos de 5% de los pacientes que dan positiva la prueba de Coombs directa). Precauciones y advertencias. La metildopa puede disminuir o inhibir el flujo de saliva contribuyendo al desarrollo de caries, enfermedad periodontal y candidiasis oral. Debe utilizarse con cuidado en presencia de insuficiencia coronaria, anemia hemoltica autoinmune, disfuncin heptica, depresin mental, enfermedad de Parkinson y disfuncin renal. Es aconsejable hacer determinaciones de la funcin heptica con intervalos peridicos durante las primeras seis a doce semanas de tratamiento o en cualquier momento en que aparezca fiebre por causa inexplicable. Interacciones. El uso simultneo con anticoagulantes derivados de la cumarina o indandiona puede aumentar el efecto anticoagulante de estos frmacos. La administracin con antidepresivos tricclicos, analgsicos o antiinflamatorios no esteroides (AINE) o estrgenos y anorxicos (excepto la fenfluramina) puede disminuir los efectos antihipertensivos de la metildopa. El uso junto con haloperidol puede dar lugar a efectos mentales indeseables (desorientacin, lentitud de los procesos mentales).

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El uso simultneo con levodopa puede alterar los efectos antiparkinsonianos de sta; la metildopa puede producir hiperexcitabilidad en pacientes tratados con inhibidores de la monoaminooxidasa (IMAO). La administracin junto con aminas vasopresoras simpaticomimticas puede disminuir el efecto hipotensor de la metildopa y potenciar el efecto vasopresor de estos medicamentos. La asociacin con alcohol o depresores del SNC puede potenciar los efectos depresores de ambos frmacos sobre aqul. Por ltimo, la metildopa puede aumentar las concentraciones sricas de prolactina e cinterferir con los efectos de la bromocriptina. Contraindicaciones. La metildopa est contraindicada cuando existen las siguientes entidades clnicas: Enfermedad heptica activa. Hepatitis. Cirrosis. Hipersensibilidad a cualquiera de los componentes de la frmula. Si la administracin previa de este frmaco fue asociada con enfermedad heptica.

Presentaciones Comerciales Metildopa Aldomet; Dopagrand; Dopatral; M. Finadiet; M. Fabra. Laboratorio Merck Costos: 1g U$S 13.40 , 5g U$S 42.90

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II. OBJETIVO GENERAL Realizar el estudio de anlisis va grupo funcional por espectroscopa ultravioleta para proponer un mtodo analtico para la cuantificacin de metildopa en tabletas de 100mg. 2.1 OBJETIVOS ESPECFICOS 1. Realizar los siguientes parmetros de validacin; especificidad, linealidad del sistema y mtodo, exactitud y precisin para poder confirmar que el mtodo propuesto es robusto.

III. MATERIAL Matraces aforados 50 ml. Pipetas volumtricas 1 ml. Soporte Universal. Embudo de vidrio talle corto. Anillo metlico. Vasos de precipitados 250 ml. Tubos de ensaye. Gradilla. Probeta 250 ml. Varilla de vidrio. Goteros.

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IV. EQUIPO Espectrofotmetro UV. Balanza analtica.

V. REACTIVOS Metildopa. Helmcell. Estearato de magnesio. cido clorhdrico concentrado. VI. PREPARACIN DE SOLUCIONES 1. cido clorhdrico 0.1 N 1L. Adicionar a un matraz aforado con agua destilada 8.5 ml de cido clorhdrico concentrado, aforar con agua destilada y agitar.

VII. PROPUESTA DE FORMULACIN METILDOPA TABLETAS Una tableta contiene: COMPONENTE Metildopa Helmcell Estereato de magnesio Total CANTIDAD 100 mg 99 mg 1 mg 200mg PORCENTAJE 50% 49.5% 0.5% 100%

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VIII. PREPARACIN DE PLACEBO 2.5g

Pesar 2.475g de Helmcel y 25mg de estearato de magnesio, pasarlos a una bolsa de polietileno chica y mezclar homogneamente de forma circular. IX. SELECCIN DE LOS MTODOS ANALTICOS A DESARROLLAR Primeramente la metildopa es un aminocido, por lo que se podra facilitar la cuantificacin por adicin de ninhidrina, que da una coloracin prpura en solucin en cual podra medirse en lo que refiere su intensidad por espectrofotometra visible en el cual la intensidad de coloracin de la solucin es directamente proporcional a la concentracin inicial de metildopa. La reaccin general entre la metildopa y la ninhidrina sera la siguiente:

Como segunda opcin se tiene al grupo amino de la metildopa, el cual puede hacerse reaccionar con cido perclrico en medio no acuoso, en el cual el cido le transfiere un protn de acuerdo a la siguiente reaccin:

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Finalmente se puede aprovechar la solubilidad de la metildopa con HCl diludo reportado en la FEUM (10 edicin) para poder determinar su concentracin en tabletas de metildopa 100mg por espectroscopa UV aprovechando los dobles enlaces y pares de electrones libres que posee este compuesto. De los posibles mtodos a realizar se escogi a la espectroscopa UV, ya que fue en el nico mtodo en el que no se presentaron inconvenientes, adems de su fcil realizacin y bajo costo al no necesitar ms reactivos que cido clorhdrico 0.1 N.

X. METODOLOGA En el transcurso de las realizacin de los parmetros de la validacin se encontr que no era tan fcil solubilizar a la metildopa en el HCl 0.1 N por lo que en el experimento #1 se agit cada muestra por 10 minutos con agitacin manual para solubilizar a le metildopa y en el experimento #2 se redujo el tiempo de agitacin a 5 minutos. Para cada experimento se sigui la misma metodologa, solo que en el experimento #2 no se realiz el parmetro de especificidad, ya que los que nos importaba en era ver que tanto afectaba el tiempo de agitacin en las absorbancias obtenidas de los parmetros realizados.

A) SISTEMA DE DILUCIONES Para cada uno de los parmetros de validacin realizados se seguir el siguiente sistema de diluciones.

)(

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1. Especificidad Se realiza en barrido de soluciones de placebo (100mg), API(metildopa) (100mg) y API(metildopa)+placebo (100mg de cada uno) tratada cada una de la misma manera siguiendo el sistema de diluciones. Se comparan los espectros de absorcin obtenidos para cada solucin y se selecciona la longitud de onda de la metildopa. El placebo no debe interferir en la lectura del API(metildopa) para que el mtodo sea especfico. Diagrama de flujo

Preparar las soluciones de placebo, API y API+placebo siguiendo el mismo tratamiento para cada uno

Realizar el barrido de cada muestra

Comparar los espectros obtenidos e identificar la longitud de onda mxima de absorcin de la metildopa.

2. Linealidad A. SISTEMA Construir la curva con tres niveles de a 80mg, 100mg y 120mg con tres repeticiones cada una y siguiendo el esquema de diluciones para cada nivel. Se lee la absorbancia de cada muestra a 279.5nm.

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Diagrama de flujo.

Preparar tres niveles de concentracin por triplicado

Para el primer nivel 80mg de metildopa.

Para el segundo nivel 100mg de metildopa.

Se lee la absorbancia de cada muestra a 279.5 nm.

Para cada muestra se sigue ell sistema de diluciones.

Para el tercer nivel 120mg de metildopa.

B. METODO Preparar tres niveles de placebos cargados a 80%, 100% y 120% con 3 repeticiones para cada nivel. De tal modo que se prepara el primer nivel con 80mg de metildopa y 100mg de placebo, el segundo nivel con 100mg de metildopa y 100mg de placebo y el tercer nivel con 120mg de metildopa y 100mg de placebo. Se sigue el esquema de diluciones para cada nivel y se lee la absorbancia a 279.5nm. Diagrama de flujo.

Preparar tres niveles detres muestras de placebos cargados a 80%, 100% y120%.

Para el primer nivel se pesan 80mg de metildopa y 100mg de placebo.

Para el segundo nivel se pesan 100mg de metildopa y 100mg de placebo.

Se lee la absorbancia a 521.6nm.

Para cada muestra se sigue el procedimiento de valoracin.

Para el tercer nivel se pesan 120mg de metildopa y 100mg de placebo.

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3. Exactitud Preparar seis placebos cargados al 100%, de tal modo que se pesan 100mg de metildopa y 100mg de placebo para cada muestra. Para cada una se sigue el sistema de diluciones y se lee la absorbancia a 279.5 nm. Diagrama de flujo

Preparar seis muestras de 100mg de metildopa y 100mg de placebo.

Seguir el procedimiento de valoracin para cada muestra y leer la abosrbancia a 279.5 nm.

4. Repetibilidad Preparar seis muestras al 100%. De modo que cada muestra conste de 100mg de metildopa. Para cada muestra seguir el sistema de diluciones y leer a 279.5 nm. Diagrama de flujo

Preparar seis muestras con 100mg de metildopa.

Seguir el sistema de diluciones.

Leer cada muestra a 279.5 nm.

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XI. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES ACTIVIDAD Seleccin del mtodo a utilizar Titulacin en medio no acuoso Rx Ninhidrina 10-Oct X 17-Oct FECHA 24-Oct 31-Oct 7-Nov 14-Nov

X X

Espectroscopa UV Experimento #1* Especificidad Linealidad sistema Linealidad del mtodo Exactitud Repetibilidad Espectroscopa UV Experimento #2** Linealidad sistema Linealidad del mtodo Exactitud Repetibilidad * Agitacin de la muestra por 10 minutos * Agitacin de la muestra por 5 minutos.
X X X X X X X X X

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XII. RESULTADOS Experimento #1 * Agitacin de la muestra por 10 minutos. A. Especificidad ESPECTROS PLACEBOS

Placebo No 1

Placebo No 2

Placebo No 3

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ESPECTROS APIS

API No 1

API No 2

API No 3

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ESPECTROS API+PLACEBO

API+PLACEBO No 1

API+PLACEBO No 2

API+PLACEBO No 3 LONGITUD DE ONDA SELECCIONADA: 279.5 nm

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PARMETRO

ESTADGRAFO DE CONTRASTE

RESULTADO

MTODO LINEALIDAD r20.98 C.V.1.5% b0 m1 EXACTITUD C.V.2.0% =100 REPETIBILIDAD SISTEMA LINEALIDAD r20.98 C.V.1.5% b0 m1 r2=0.9984341 CV= b(0.5014<2.3646) m(5871>2.3646) 0.9984341 0.00824958% 0.0008 0.01125 C.V.2.0% r2= CV= b(1.1598<2.3646) m(07887<2.3646) CV= (1.689<2.5706) CV= 0.99354858 1.47412303 3.4763 0.97367661 0.01092104% =100 1.90787294%

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Experimento #2 * Agitacin de la muestra por 5 minutos. A. Linealidad del sistema CANTIDAD ADICIONADA 80,2 80,3 79,8 100,1 99,8 99,4 120,1 119,9 119,8 ABSORBANCIA 0,362 0,345 0,324 0,456 0,445 0,441 0,523 0,544 0,566

B. Linealidad del mtodo CANTIDAD ADICIONADA 80,6 80,5 80,1 100,2 100,5 100,7 120,3 120,6 120,7 ABSORBANCIA 0,372 0,367 0,365 0,437 0,445 0,44 0,537 0,551 0,547

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C. Exactitud CANTIDAD ADICIONADA 99,7 99 99,4 99,7 100 100,2 D. Repetibilidad CANTIDAD ADICIONADA 100,2 99,3 99,5 100,1 99,5 99,6 ABSORBANCIA 0,47 0,459 0,431 0,44 0,465 0,443 ABSORBANCIA 0,45 0,454 0,46 0,453 0,437 0,441

XIII. ANLISIS DE RESULTADOS En un principio se quera realizar la cuantificacin de la metildopa con ninhidrina llevando a cabo esta reaccin colorimtrica y determinando su absorbancia en el espectrofotmetro visible, peor al momento de efectuarla determinacin a microescala se obtuvo que la coloracin prpura de la reaccin no era estable, regresando despus de unos segundos al color transparente inicial de la solucin, siendo este mtodo de anlisis incuantificable por espectroscopa visible. En el caso de la titulacin con cido perclrico en medio no acuoso segn la FEUM (10 edicin) se necesitaban 50 ml de acetonitrilo como disolvente neutro

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para solubilizar la muestra de metildopa, pero al disminuir la cantidad de este disolvente en la determinacin la cantidad de cido perclrico gastado para el vire del indicador cristal violeta era mucho menor a la cantidad terica calculada con base en la cantidad de metildopa pesada inicialmente. Entonces se procedi a cambiar de disolvente utilizndose dioxano, pero se tuvieron los mismos problemas de gastar menos cido perclrico en la determinacin. Por lo que se decidi no realizar este mtodo analtico por el gran gasto de disolvente requerido para realizar los parmetros de validacin deseados. El mtodo analtico propuesto en el que solo es necesario solubilizar la metildopa y realizar una dilucin para su cuantificacin posterior por espectroscopa ultravioleta fue ideal, fcil y ms barato, ya que solo se necesita cido clorhdrico 0.1N para realizar las diluciones y poder leer en el espectro gastndose muy poco tiempo, adems que este mtodo result ser especfico desde un inicio para las tabletas de metildopa no teniendo ningn tipo de interferencia con el placebo. Por otra parte el mtodo result ser lineal con una r2 de 0.99, un CV de 1.47, una ordenada al origen de 3.4763 y una pendiente de 0.97, por lo que se realizaron las respectivas pruebas de hiptesis obtenindose que la pendiente es casi 1 y que se puede decir que la ordenada al origen es 0, tambin se comprob que la absorbancia depende linealmente de la concentracin y comparndolo con el mtodo farmacopeico, se tiene un C.V menor al obtenido con el mtodo colorimtrico (1.8551). En cuanto a la exactitud y repetibilidad, el mtodo es exacto y con una media igual a 100% y el CV (0.0109) es menor al del mtodo farmacopeico (0.0142), as como tambin es repetible, sin embargo el coeficiente de variacin es muy cercano al 2%. En cuanto al sistema se obtuvo un coeficiente de correlacin del 0.998, una ordenada al origen de 0.0008 una pendiente de 0.011, por lo que al realizar las pruebas de hiptesis se puede decir que la ordenada al origen es 0, pero la pendiente no es igual a 1, sin embargo la absorbancia si depende linealmente de la concentracin y comparndolo con el mtodo farmacopeico, se puede decir que el sistema es mucho ms sensible ya con este mtodo se haba obtenido una pendiente de 0.0079. Por otra parte, aunque no se realiz la estabilidad, se piensa que al no ser una reaccin colorimtrica el mtodo puede ser ms estable. Tambin se realiz el calculo del coeficiente de absortividad molar en HCl 0.1N siendo este de 2817,4mMol-1mlcm-1. Se realizaron dichos parmetros, ya que son los que nos podran indicar que tan robusto es el mtodo, sin embargo habra que realizarse la validacin completa del mtodo para saber si el mtodo analtico propuesto cuantifica verdaderamente la metildopa en tabletas.

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En lo que respecta a los resultados obtenidos en el experimento #2 en el que se agit por 5 minutos la muestra para solubilizar a la metildopa se puedo demostrar que s influye demasiado el tiempo de agitacin de la metildopa con el cido clorhdrico 0.1N, ya que las observancias obtenidas varan demasiado con respecto a las obtenidas solubilizando la muestra por 10 minutos, aunque despus del tiempo de agitacin a simple vista la solucin se encontraba homognea, no pudindose distinguir si an quedaba soluto sin solubilizar. Por lo expuesto anteriormente para posibles repeticiones de este mtodo analtico se recomienda agitar por 10 minutos mnimo la muestra manualmente, realizar la solubilizacin de la metildopa en cido clorhdrico 0.1N en sonicador o aumentar la concentracin del cido clorhdrico a 1 N para ver si los la muestra se solubiliza ms rpidamente o no hay ningn cambio significativo.

XIV. CONCLUSIN Se pudo proponer un mtodo analtico robusto para la cuantificacin de metildopa tabletas y metildopa como materia prima comprobando que el mtodo es especfico, presenta linealidad es preciso y repetible.

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XV. ANEXOS (CLCULOS) ESTNDAR PARA TODOS LOS CALCULOS Estndar mg Absorbancia 99.9 0.469

LINEALIDAD DEL MTODO


Cantidad adicionada L1-100 L2-100 L3-100 L1-80 L2-80 L3-80 L1-120 L2-120 L3-120 79.5 79.3 79.6 99.9 99.9 99.4 120 119.6 120.2 A Cantidad recuperada yi- 0.58018881 1.31859768 0.67755648 0.21842872 2.12464164 1.77029901 0.45712366 1.70948246 1.32742032 (xi-x)2 408.489012 416.613457 404.45679 0.03567901 0.03567901 0.09679012 411.639012 395.567901 419.794568 2456.72889

0.377 80.3837953 80.3034115 80.8836003 0.385 82.0895522 82.0074627 0.377 80.3837953 80.3034115 80.688865 80.980968

0.474 101.066098 100.965032 100.746603 0.463 98.7206823 98.6219616 100.746603 0.479 102.132196 102.030064 100.259765 0.567 120.895522 120.774627 120.317503 0.555 118.336887 118.21855 119.928033 0.572 121.96162 121.839659 120.512239

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LINEALIDAD DEL MTODO DE VALORACIN UV PARA METILDOPA


140 120 100 80 60 40 20 0 0 20 40 60 80 100 120 140 y = 0.9737x + 3.4763 R = 0.9935

CV

1.47412303% Calculo de Andeva H0: y no depende linealmente de x Ha : y depende linealmente de x F0.975,7 8.07 SC MC Fcalc

Fuente de variacin Regresin Error regresin

gl 1 7

2329.08378 2329.08378 1077.41762 15.1320957 2.16172795

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r r2 m b n Suma xy Error tipico Sy/x 0.996769073 0.993548585 0.973676614 3.4763 9 92637.01439 1.469864449 1.469864449 1.296666481 x 99.7111111 897.4 91937.48 17.5240153 307.091111 y 100.562687 905.064179 93359.9012 17.118031 293.026984

X x x2 Sx S2X

Y Y2 Sy S2y

Evaluacin ordenada al origen H0: B0=0 Ha: B00 tcalc 1.159827858 2.039137102 2.3646 1.15982786 2.0391371

Evaluacin de la pendiente H0:M0=1 Ha:M01 tcalc -0.8876527 t0.975, 7 2.3646 -0.8876527<2.3646 H0 se acepta Intervalo de confianza 0.90355428 m 1.04379895

t0.975, 7

1.1598<2.3646

H0 se acepta

Intervalo de confianza -3.61100949 b 10.5636095

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EXACTITUD Cantidad adicionada 99.9 99.7 99.8 99.7 100.6 99.4 A 0.476 0.474 0.473 0.472 0.479 0.46 101.492537 101.066098 100.852878 100.639659 102.132196 98.0810235 Cantidad recuperada 101.391045 100.9650320 100.752026 100.539019 102.030064 97.9829424 % recobro 101.4925373 101.2688385 100.9539335 100.8415438 101.4215348 98.57438876

Ex 1 Ex 2 Ex 3 Ex 4 Ex 5 Ex 6

n S CV

6 1.10039112 100.758796 0.01092104%

H0: =100 tcalc t0.975, 5 Ha: 100 1.689093292 2.5706

1.6890<2.5706 H0 se acepta

Intervalo de confianza 99.60399828 101.913594

REPETIBILIDAD Cantidad adicionada 99.2 100 99.9 100.3 99.8 99.9 A 0.47 0.464 0.485 0.489 0.485 0.481 100.21322 98.9339019 103.411514 104.264392 103.411514 102.558635 Cantidad recuperada 100.113006 98.834968 103.308102 104.160128 103.308102 102.456077 % recobro 100.920369 98.834968 103.411514 103.848582 103.515133 102.558635

Rd1 Rd2 Rd3 Rd4 Rd5 Rd6

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n s 2 CV

6 102.181534 1.94949383 1.77963624 3.16710516 1.90787294%

H0: 0=2% Ha:0 2% calc 0.975,5 0.025,5 6 12.8325 0.8312 H0: se acepta

Intervalo de confianza 1.48082065 2 22.8616831 1.21688974 4.78138924

LINEALIDAD DEL SISTEMA

# 80% 1 2 3 1 2 3 1 2 3

100%

120%

Concentracin g/ml 32 32 32 40 40 40 48 48 48

A 0.377 0.381 0.384 0.469 0.467 0.474 0.557 0.564 0.561

CV

0.008249579%

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LINEALIDAD DEL SISTEMA PARA VALORACIN UV DE METILDOPA TABLETAS y = 0.0113x + 0.0204


0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 10 20 30 40 50 60 Linear (Series1) R = 0.9984 Series1

H0: y no depende linealmente de x Ha :y depende linealmente de X Fuente de variacin Regresin Error regresion F0.975,7 gl 1 SC MC Fcalc

0.03758542 0.03758542 3.16030543 7 0.0832508 0.01189297 8.07

3.1603<8.07 Ho: se acepta r r2 m b n 0.99921674 0.9984341 0.01125 0.0008 9

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x x x2 Sx s2x Suma xy Error tpico

x 40 360 14784 6.92820323 48 173.68 0.00329983

y y2 Sy s2y

Y 0.470444444 4.234 2.040538 0.078003383 0.006084528

Evaluacin ordenada al origen H0:B0=0 Ha:B00 tcalc 0.501426536 t0.975,7 2.3646 0.5014<2.3646 H0 se acepta Intervalo de confianza -0.015338 b 0.01693833

Evaluacin de la pendiente H0:M0=1 Ha:M01 Tcalc 5871.65224 t0.975,7 2.3646 5871.65>2.3649 H0 se rechaza Intervalo de confianza 0.01085182 m 0.011648184

COEFICIENTE DE ABSORTIVIDAD MOLAR En HCl 0.1 N a 279.5 nm = 2817.4mol-1ml cm-1

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XVI. BIBLIOGRAFA 1. 2. 3. 4. Farmacopea de los Estados Unido Mexicanos, 10 Ed. Mxico (2010). Connors, Kenneth A. 1981. Curso de anlisis farmacutico ensayo del medicamento. Ed. Reverte. Guideline for Industry: Tex on validation of Analytical Procedures. ICH-Q2A, March 1995. 5. Garca A, Soberon E, Cortes M. Gua de validacin de mtodos analticos. Colegio Nacional de Qumicos Farmacuticos Bilogos. Mxico, 2002. 6. Quintana C y Olvera E. Manual de Validacin de Mtodos Analticos. Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Facultad de Estudios Superiores Zaragoza. Mxico; 2004.

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