TEMA N 1 GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGA CLASIFICACIN. HISTORIA.

GENERALIDADES DE LA MICROBIOLOGA La Microbiologa se define como la ciencia que estudia los organismos y agentes que son muy pequeos para poder observarlos a simple vista. La Microbiologa es la rama de la biologa dedicada a estudiar los organismos que slo son visibles a travs del microscopio. Cules seres vivos son considerados microbios? Todos los seres vivos microscpicos constituidos por una sola clula Aquellos que forman agregados celulares en los cuales todas las clulas son equivalentes Cules tipos celulares se encuentran dentro de los microbios? Eucariotas (las clulas poseen ncleo) Procariotas (clulas carentes de ncleo) Debido a las diferencias entre los organismos microscpicos existentes, la Microbiologa se clasifica en: - Bacteriologa - Virologa - Parasitologa - Micologa - Inmunologa Divisiones de la Microbiologa:

Microbiologa mdica: estudia el papel de los microorganismos en las enfermedades humanas. Incluye el estudio de la patognesis microbiana y la epidemiologa y est relacionada con el estudio de la patologa de la enfermedad y con la inmunologa. Microbiologa veterinaria: estudia el papel de los microorganismos en las enfermedades de los animales. Microbiologa ambiental: estudia la funcin y diversidad de los microorganismos en sus entornos naturales. Microbiologa industrial: estudia la utilizacin de los microorganismos para uso en procesos industriales. Microbiologa de los alimentos: estudia los microorganismos que modifican los alimentos.

HISTORIA DE LA MICROBIOLOGA El descubrimiento de los microorganismos Antes de la observacin de los microorganismos, algunos investigadores sospecharon de su existencia y su responsabilidad en el desarrollo de algunas enfermedades. Lucrecio (98-55 a.C.) y Fracastoro (1478-1553) propusieron que las enfermedades estaban causadas por criaturas vivas invisibles.

La primera persona que observ y describi microorganismos fue el microscopista aficionado Antony van Leewenhoek en 1673.

La polmica sobre la generacin espontnea Desde tiempos primitivos la gente crea en la generacin espontnea, es decir, que los organismos vivos podan originarse a partir de materia no viva. Francesco Redi en 1688 publica su trabajo sobre la generacin espontnea de los gusanos de la carne. Lazzaro Spallanzani en (fecha) refuta la teora de la generacin espontnea.

Otros acontecimientos histricos 1798: Jenner prepara una vacuna contra la viruela humana a partir de viruela vacuna. 1857: Pasteur demuestra que la fermentacin del cido lctico se debe a un microorganismo. 1876: Koch demuestra que el carbunco es causado por Bacillus anthracis. 1882: Koch descubre el bacilo de la tuberculosis. 1884: Se publican por primera vez los postulados de Koch. 1885: Pasteur prepara la vacuna contra la rabia. 1906: Schaudinn y Hoffmann demuestran que Treponema pallidum causa la sfilis. 1923: Se publica la primera edicin del Manual de Bergey. 1929: Fleming descubre la penicilina. 1946: Lederberg y Tatum describen la conjugacin bacteriana. 1982: Se desarrolla la vacuna contra la hepatitis B. 1983-1984: Gallo y Montagnier aislan e identifican el virus de la inmunodeficiencia humana. BENEFICIOS DE LA MICROBIOLOGA A pesar de que los microbios son vistos en forma negativa a causa de su asociacin con muchas enfermedades humanas, debemos considerar que tambin son responsables de muchos procesos beneficiosos, entre ellos las fermentaciones industriales, la produccin de antibiticos o de otros productos de inters farmacutico o biotecnolgico. Cabe tambin destacar el papel esencial que los microorganismos juegan en los laboratorios de investigacin biolgica de todo el mundo como herramientas para la clonacin de genes y la produccin de protenas. CLASIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS VIVOS: Reino 1: Procariotas (Monera) son organismos unicelulares sin ncleo definido Rickettsias,Bacterias ,Algas cianofitas,Virus Reino 2: Eucariotas (Protista) son organismos de una sola clula pero con ncleo definido:Protozoarios,Algas Reino 3: Pseudo tejidos: Fungi, Adsorben sustancias producidas por otros seres vivos:Mixomicetos,Eumicetos Reino 4: Plantae, poseen clorofila: Plantas superiores

 Reino 5: Animalia, son organismos hetertrofos: Los animales superiores

Dos Suprareinos y Seis Reinos (Cavalier-Smith 1998) Superreino Prokaryota Superreino Eukaryota Reino Protozoa Reino Animalia Reino Fungi Reino Plantae Reino Chromista

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA: Utilidad para el medico. Diagnostico Tratamiento Control Componente de la clula Ncleo ADN Extracromosomico Organelos en el citoplasma Membrana Citoplasmtica Pared celular Esteroles Ribosomas Procariota Sin membrana un solo cromosoma En plasmidos Ninguno Contiene enzimas para la respiracin Capa rgida de peptidoglicanos Ausente 70S en el citoplasma Eucariota Recubierto de membrana En organelos Mitocondrias y cloroplastos Capa semipermeble No posee Presentes 80s en el RC

TEMA N 2 ESTRUCTURA Y GENTICA BACTERIANA

ESTRUCTURA

Bacterias: son los seres vivientes con vida independiente que existen, miden
entre 1 a 10 m y su caracterstica fundamental es que carece de ncleo definido Clasificacin de las Bacterias:

Cocos: pares, cadenas, racimos, ttradas

Bacilos: Cocobacilos Fusiforme Vibrios Espirilos y Espiroquetas Rickettsias Micoplasmas

CARACTERSTICAS GENERALES: NO poseen ncleo Poseen ARN y ADN Solo pueden observadas con microscopio Son por lo general de vida libre

 Infectan a las clulas eucariotas

Cuerpo nuclear o Nucleoide: Esta compuesto por un solo cromosoma circular

compuesto por 4.000 genes y mide aproximadamente 1 mm por lo que se encuentra superenrollado por la accin de las enzimas girasas. Plasmidos: son molculas pequeas de ADN circular extracromosomico, que tienen la propiedad de autoreplicarse RIBOSOMA: Son unidades de ribonucleoproteinas encargadas de la sntesis proteica divididas en dos subunidades (50S y 30S) GRANULOS METACROMATICOS: Son compuestos de Glicgeno o polimetafosfato que se encuentran en el citosol y sirve de reserva de energa a la bacteria. MEMBRANA CITOPLASMATICA: Es una bicapa de fosfolipidos y protenas que por lo general carece de esteroles y posee un sistema de trasporte de electrones parecido a la mitocondria Funciones: Respiracin celular, Transporte selectivo y activo de solutos, Secrecin de protenas, Actan en la divisin celular PARED CELULAR: Es una estructura rgida que da forma a la bacteria. Esta compuesta por peptidoglicanos, lipopolisacaridos y acido teicoico La coloracin de Gram permite diferenciar las bacterias en Gram positivas (azul-violeta) y Gram negativas (rojas). Funciones: Impide la lisis osmtica,Determina la forma,Protege contra las toxinas,Ayuda a la colonizacin Efectos biolgicos del lipopolisacarido: Fiebre, Hipotensin, Activacin de la coagulacin

Diferencias entre la Pared celular de la Bacteria Gram positiva y Gram negativa Gram. Positivo Peptidoglucano y acido teitinoico Azul o violeta Fina capa de lpidos Secretan sustancias toxicas Gram. Negativo Peptidoglucano y membrana externa Fucsia o rojo Capa gruesa de lpidos No secretan sustancias toxicas

Capsula: Estructura polisacrido que rodea a la bacteria y le brinda proteccin

contra la fagocitosis. En el Bacillus antracis es polipeptdica Las colonias de las bacteria capsuladas son lisas, las no capsuladas son rugosas

Funciones: Impiden la opsonisacon Promueven la adherencia y la colonizacin Flagelos: Son organelos moleculares de locomocin que se hallan en muchas especies de bacterias, estn compuestos de flagelina una protena con capacidad de girar

Clasificacin de las bacterias segn los flagelos. Pilis: Son proyecciones vellosas moleculares que se encuentran en la superficie de las clulas. Estn compuestas por una protena llamada pilina. rticas Monotricas Peritricas Lonfotricas

 Pilis comunes (fimbrias) Pilis sexuales

Funciones: Adherencia (adhesinas) Trasporte del material cromosmico o extracromosomico de una bacteria a otra. Esporas: Son formas de latencia deshidratadas y pequeas producidas por algunas bacterias en respuesta a la limitacin de nutrientes. Esta compuesto por dipicolinato de calcio Toleran condiciones extremas de pH y temperatura Ejemplo: Bacillus antracis, Ttano, Botulismo, Clostridium perfringes Esporulacin Germinacin

GENTICA BACTERIANA CONCEPTOS BSICOS

DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGA: es un concepto que ilustra los mecanismos de transmisin y expresin de la herencia gentica tras el descubrimiento de la codificacin de sta en la doble hlice del ADN. Propone que existe una unidireccionalidad en la expresin de la informacin contenida en los genes de una clula, es decir, que el ADN es transcrito a ARN mensajero y que ste es traducido a protena, elemento que finalmente realiza la accin celular. El dogma tambin postula que slo el ADN puede replicarse y, por tanto, reproducirse y transmitir la informacin gentica a la descendencia. GENTICA: es una rama de las ciencias biolgicas, cuyo objeto es el estudio de los patrones de herencia, del modo en que los rasgos y las caractersticas se transmiten de padres a hijos. Los genes se forman de segmentos de ADN (cido desoxirribonucleico), la molcula que codifica la informacin gentica en las clulas. El ADN controla la estructura, la funcin y el comportamiento de las clulas y puede crear copias casi o exactas de s mismo. GEN: es el conjunto de una secuencia determinada de nucletidos de uno de los lados de la escalera del cromosoma referenciado. La secuencia puede llegar a formar protenas, o sern inhibidas, dependiendo del programa asignado para la clula que aporte los cromosomas GENOMA: es todo el material gentico contenido en las clulas de un organismo en particular. Por lo general, al hablar de genoma en los seres eucariticos nos referimos slo al ADN contenido en el ncleo, organizado en cromosomas. Pero no debemos olvidar que tambin la mitocondria contiene genes

 HAPLOIDE: es aquella que contiene un solo juego de cromosomas o la mitad (n, haploide) del nmero normal de cromosomas en clulas diploides (2n, diploide) DIPLOIDE: son las que tienen un nmero doble de cromosomas, a diferencia de un gameto, es decir, poseen dos series de cromosomas. MUTACIN: s una alteracin o cambio en la informacin gentica (genotipo) de un ser vivo y que, por lo tanto, va a producir un cambio de caractersticas, que se presenta sbita y espontneamente, y que se puede transmitir o heredar a la descendencia. La unidad gentica capaz de mutar es el gen que es la unidad de informacin hereditaria que forma parte del ADN
GENOMA PROCARIOTA CARACTERSTICAS No presenta membrana nuclear (no existe compartamentalizacin celular). ADN circular, covalentemente cerrado, de doble cadena, est totalmente superenrollado negativamente. Hay participacin de Topoisomerasas que regulan ese superenrollamiento. Presenta un origen de replicacin, esencial para que la bacteria pueda replicar su genoma. Es un elemento dinmico, que va a sufrir un movimiento para ser expuesto en aquellas regiones que sea requerido. Muchos genes estn ubicados en Operones (caracterstica que slo se consigue en el genoma bacteriana). Los genes no son interrumpidos, slo hay exones.

OPERN: grupo de secuencias de ADN en donde se consigue un gen que codifica para la protena de regulacin, vamos a tener una secuencia promotora, una secuencia operadora y los genes estructurales REGULACIN DEL OPERN LAC EN E. COLI. Si no hay lactosa el represor est en su forma activa, y los genes estructurales no se transcribe, con lo que la clula no tendr los enzimas para metabolizarla. Regulacin del opern LAC en E. coli. Si hay lactosa, esta se une al represor y lo inactiva. El operador, al estar libre, desencadena la transcripcin de los genes estructurales, con lo que se sintetizarn las enzimas necesarias para metabolizar la lactosa. De qu tamao es el cromosoma bacteriano? Una bacteria tpica, como Escherichia coli posee un cromosoma con 4.700 pares de kilobases (kb). Pero los rangos de tamao oscilan entre las 700 kb de Mycoplasma genitalium (una bacteria carente de pared y parsita) y las ms de 12 000 kb de ciertas bacterias capaces de diferenciacin celular y fenmenos de multicelularidad (cianobacterias, actinomicetos). Cmo es la organizacin a gran escala de este cromosoma dentro de la clula? Si desplegamos el cromosoma de E. coli de modo lineal, medira 1 mm, es decir, 1000 veces ms de lo que mide la longitud de la bacteria. La doble hlice est superenrollada negativamente sobre s misma. Parte de este superenrollamiento se debe al equilibrio entre la actuacin de dos enzimas.

Qu es el Superenrollamiento negativo ? Es un proceso de regulacin del empaquetamiento del ADN bacteriano, implica la ruptura y separacin de las dos cadenas de ADN y la participacin de la Topoisomerasa II (ADN girasa) El Superenrollamiento negativo permite que el ADN logre plegarse sin enredarse Por qu existe un mecanismo de regulacin para este proceso? Para que el ADN de la bacteria no quede demasiado compactado, existe una regulacin por la Topoisomerasa I que genera superenrollamientos positivos y que permite que la molcula se relaje y se mantenga activa Elementos Extracromosmicos Son todas las secuencias de ADN que no forman parte del genoma bacteriano y que no son indispensables para que la bacteria lleve a cabo sus procesos fisiolgicos. Le confieren a la bacteria determinadas caractersticas que le permiten adaptarse a determinadas condiciones en el medio ambiente. Son: Plsmidos Secuencias de insercin Transposones Integrones

Plsmidos: secuencias cortas de ADN circulares, de doble cadena, que no son

indispensables para la supervivencia de la bacteria. Varan de tamao. Codifican informacin para resistencia a antibiticos, degradacin de compuestos orgnicos, conjugacin bacteriana, produccin de toxinas, resistencia a metales pesados. Plsmidos R de resistencia Plsmidos F proceso de conjugacin

Secuencias de insercin: son cortas secuencias de ADN que estn presentes

dentro de plsmidos o dentro del cromosoma bacteriano. Slo llevan la informacin para una enzima que se llama TRANSPOSASA. Transposones: secuencias de ADN ms grandes que, adems de llevar la informacin para la enzima TRANSPOSASA, tambin llevan un gen que codifica para la resistencia a un antibitico dado. Integrones: Los integrones son un nuevo tipo de elementos transponibles dotados de terminales inversamente repetidos (y a menudo con marcadores de resistencia a antibiticos o a metales pesados) que se caracterizan por poseer un gen codificador de una integrasa. Se transponen como una IS o un Tn, pero adems, la integrasa les ha capacitado evolutivamente para realizar una recombinacin especfica de sitio por la que han incorporado a su estructura algn gen procedente de otro elemento gentico. Mecanismos de Transferencia Gentica

Caractersticas 1- Conjugacin: mediada por plsmidos conjugativos A travs de pili y gobernado por sexo transferencia de un fragmento de DNA del donante a un receptor 2- Transduccin: mediada por fagos que transmite segmentos de DNA del donante al receptor. 3- Transformacin : transferencia de DNA desnudo por clulas competentes. Ej. adquisicin de caracteres diversos en la naturaleza Ej. aumento de la fijacin de nitrgeno 4- Transposicin : mediada por transposones (c/s IS ) con recombinacin y sin homologa IMPORTANCIA DE LA INGENIERIA GENTICA

Una utilidad de la ingeniera gentica es el empleo de enzimas en lugares, y para propsitos, muy diferentes. As, un producto biolgico puede aparecer en un detergente, en un proceso industrial metalrgico, etc. Pero muchos de los enzimas tienen el inconveniente de desnaturalizarse en condiciones relativamente duras. La ingeniera gentica permitir modificarlos para lograr versiones ms resistentes, ms adecuadas a las condiciones qumicas, trmicas, de pH, etc, en las que va a actuar en la industria. Para conseguirlo, una de las tcnicas ms tiles es la mutagnesis puntual dirigida. Si bien es cierto que con ella todava no se ha conseguido mejorar significativamente ninguna enzima industrial, s que se han logrado claros xitos de laboratorio como mutar un gen en un punto especfico, de modo que la protena difiera ligeramente de su versin natural. Otra utilidad de la ingeniera gentica es la identificacin inequvoca de un individuo a partir de su patrn gentico.

TEMA N 3 MECANISMOS DE PATOGENICIDAD Y FLORA NORMAL MECANISMOS DE PATOGENICIDAD Definiciones: Patologa: son las enfermedades que produce un microorganismo: Ejemplo Neumona Patogenia: son los pasos o vas que utiliza el microorganismo para llegar al rgano blanco

Patogenicidad: es la capacidad que posee un microorganismo de producir una enfermedad (patgeno y no patgeno). Virulencia: es el grado de patogenicidad que posee un microorganismo. Inoculo: es la cantidad mnima de microorganismo capaz de producir patologa. Relacin: Husped Patgeno Factores de Virulencia: Exposicin endgena exgeno Vas de penetracin: Ingestin Inhalacin Penetracin Directa Traumatismo Puncin Picadura O Mordedura Sexual Transplacentaria Transfusin Colonizacin: Factores de adherencia: Capsula polisacarida Pilis o fimbrias Proteasa de IgA Adhesinas cidos Lipoproteicos Protenas De Membrana Externa Hemaglutininas Flagelos Unin a receptores especficos (Gal-Gal)-fimbria P Penetracin: Elastasas Colagenasa Hialuronidasa Nucleasas Estreptolisina (lisar los fagocitos) Protena A: inhiben la quimiotaxis Protena M: evita la muerte intracelular Capsula antifagocitica Capsula de acido hialuronico

 Sideroforos TOXINAS: Exotoxina: naturaleza proteica citolitica: Cl. perfinges bipartitita (A y B): Vibrio cholerae Endotoxina: naturaleza lipopolisacarida (LIPIDO A) Fiebre Hipotensin Trastornos de la Coagulacin TOXOIDE: toxina a la cual por medios fsicos o qumicos se le suprime sus propiedades patgenas persistiendo su actividad antigenica. Induccin de produccin de anticuerpos. FLORA NORMAL Definicin: son los microorganismos que con frecuencia se encuentran en diferentes sitios del cuerpo humano normal y saludable sin producir dao Flora normal residente: es la flora normal que persiste en un lugar luego de la administracin de antibiticos. Ejemp: St. viridans Flora normal transitoria: Es la flora normal que ocupa un lugar por breve tiempo y no se restituye luego de la anbioticoterapia Ejemp: St. pneumoniae Portador es el que posee bacterias potencialmente patgenos Ejemp: N. meningitidis Beneficios: Compite con las bacterias patgenas. Produccin de colimicina Activacin del sistema inmune. Produccin del pH acido de la vagina Absorcin y sntesis de Vitaminas como la B12, acido flico, biotina y vitamina K FOSAS NASALES: S. Aureus St. Pyogenes Haemophilus Neumococo Flora normal de la boca: 1011 Streptococcus alfa hemoliticos y no hemolitico St. Viridans

St. Mutans St. salivarium Candidas Anaerobios gram positivos Bacteroides melaninogenicus Treponemas Actinomices Neisserias no patogenas Moraxella Veillonella

Flora normal de la Faringe. St. viridans St. Alfa hemoliticos N. meningitidis E. coli Klebsiella Proteus Pseudomona

Flora normal de la Piel: 103 S. aureus S. epidermidis Enterobacterias Micrococcus Corynebacterium (difteroides) Propinibacterium Candidas

Flora normal de conjuntiva ocular: Staphylococcus aureus S. epidermidis Corynebacterium Haemophylus

Flora normal Intestino delgado: 103 Lactobacilos Estreptococos Candidas Enterococo Enterobacterias

Flora normal del Colon:1011 (90% anaerobios) Bacteroides Eubacterium Estreptococos Fusobacterium Bifidobacterium Clostridium Cl. difficile Lactobacillus bifidus Entrerococos Enterobacterias Klebsiella E. coli Proteus Levaduras

Vagina: Anaerobios Lactobacilos Bacilo de Doderlein Micrococos Enterobacterias Staphylococcus aureus S. epidermidis Estreptococos Gardnerella vaginalis St. agalactie Corynebacterium Micobacterium smegmatis

PAPEL DE LA FLORA NORMAL EN LA ENFERMEDAD Las bacterias de la flora normal cuando invaden zonas estriles producen enfermedad. Produccin de caries Formacin de la placa dentaria Endocarditis bacteriana Infecciones oportunistas Diarrea por antibiticos Flujo vaginal TEMA N 4 COCOS GRAM NEGATIVOS AEROBIOS ( NEISSERIA ) GNERO NEISSERIA : GENERALIDADES

 EST FORMADO POR APROXIMADAMENTE 10 ESPECIES. DOS ESPECIES, N. GONORRHOEAE Y N. MENINGITIDIS, SON PATGENOS HUMANOS ESTRICTOS. EL RESTO DE LAS ESPECIES SE ENCUENTRAN PRESENTES EN SUPERFICIES MUCOSAS (OROFARINGE Y GENITAL). PUEDEN SER PATGENOS OPORTUNISTAS. NEISSERIA GONORRHOEAE CARACTERSTICAS LOS MIEMBROS DE ESTE GNERO SON COCOS GRAM NEGATIVO, NO ESPORULADOS E INMVILES, QUE SE DISPONEN EN PARES (DIPLOCOCOS) CUYOS LADOS ADYACENTES ESTN APLANADOS. BACTERIAS AEROBIAS, OXIDASA POSITIVA Y CATALASA POSITIVA, REQUIEREN MEDIOS DE CULTIVO ENRIQUECIDOS, CO2 Y HUMEDAD PARA SU DESARROLLO. SENSIBLES A LAS CONDICIONES AMBIENTALES, SU TRANSMISIN ES DE PERSONA A PERSONA Y NO FORMA PARTE DE LA FLORA NORMAL. LOS COMPONENTES DE LA SUPERFICIE CELULAR SE HAN RELACIONADO CON LA ADHERENCIA, LA PENETRACIN TISULAR Y CELULAR, LA CITOTOXICIDAD Y LA EVASIN DE LAS DEFENSAS DEL HUSPED TANTO SISTMICAMENTE COMO A NIVEL DE LAS MUCOSAS. PRODUCEN CIDO POR LA OXIDACIN DE LOS HIDRATOS DE CARBONO. LA TEMPERATURA PTIMA DE CRECIMIENTO ES DE 35-37C. LA ESTRUCTURA DE ESTA BACTERIA ES LA TPICA DE LAS BACTERIAS GRAM NEGATIVO, CON UNA DELGADA CAPA DE PEPTIDOGLICANO ENTRE LAS MEMBRANA CITOPLASMTICAS INTERNA Y EXTERNA. DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD PILI INCREMENTA LA ADHERENCIA DEL GONOCOCO A LAS CLULAS DE LA MUCOSA DEL TRACTO GENITOURINARIO DEL HUSPED. ESTE CONTRIBUYE A LA RESISTENCIA A LA DESTRUCCIN POR LOS NEUTRFILOS. ANTIGNICAMENTE ES VARIABLE. PROTENA 1 (POR) Y PROTENA 2 (OPA) CONSTITUYENTES DE LA MEMBRANA EXTERNA PROTENA 1, ES UNA PORINA QUE FORMA POROS O CANALES EN LA MEMBRANA EXTERNA. DOS CLASES DE PROTENAS PORA Y

PORB. LAS CEPAS PORA SON RESISTENTES A LA ACCIN BACTERICIDA DEL SUERO. PROTENA 2, CUMPLE FUNCIN EN LA ADHERENCIA DE LOS GONOCOCOS DENTRO DE LAS COLONIAS Y LA ADHESIN DE ESTOS A LA CLULAS DEL HUSPED. PROTENA 3 RMP CONSTITUYENTE DE LA MEMBRANA EXTERNA PROTENA 3, ESTIMULA A LOS ANTICUERPOS QUE BLOQUEAN LA ACTIVIDAD BACTERICIDA DEL SUERO FRENTE A N. GONORRHOEAE LIPOOLIGOSACRIDO (LOS) PRESENTE EN LA MEMBRANA EXTERNA, COMPUESTO POR POR LPIDO A Y UN NCLEO DE OLIGOSACRIDO. POSEE ACTIVIDAD ENDOTXICA PROTEASA DE IGA DESTRUYE LA INMUNOGLOBULINA A PATOGENIA LA FIJACIN AL EPITELIO MUCOSO, MEDIADO POR PILI Y LA PROTENA II, ES SEGUIDA EN 24-48 H POR PENETRACIN DEL M.O. ENTRE LAS CLULAS EPITELIALES Y A TRAVS DE ESTAS HASTA EL TEJIDO SUBMUCOSO. RESPUESTA ENRGICA DE LOS NEUTRFILOS, DESPRENDIMIENTO DEL EPITELIO, DESARROLLO DE MICROABSCESOS SUBMUCOSOS Y EXUDACIN DE PUS. LOS GONOCOCOS ATACAN LAS MUCOSAS DEL APARATO GENITOURINARIO, OJO, RECTO Y FARINGE PATOLOGA EN LOS HOMBRES LA MANIFESTACIN MS COMN DE LA INFECCIN ES LA URETRITIS AGUDA, LOS SNTOMAS CLNICOS SON LA APARICIN DE DISURIA Y DESCARGA URETRAL PURULENTA. EL PROCESO SE PUEDE COMPLICAR Y PRODUCIR EPIDIDIMITIS AGUDA, PROSTATITIS Y OBSTRUCCIN URETRAL. EN LAS MUJERES EL PERIODO DE INCUBACIN ES MENOS DEFINIDO, EL TEJIDO AFECTADO ES EL ENDOCRVIX, DE DONDE PASA A LA URETRA Y VAGINA, DANDO LUGAR A UNA SECRECIN VAGINAL MUCOPURULENTA, DISURIA Y FRECUENCIA EN LA MICCIN.

 PUEDE PROGRESAR LA INFECCIN Y CAUSAR SALPINGITIS, EN CASOS GRAVES EVOLUCIONA A PERITONITIS Y A LA APARICIN DE ABSCESOS PLVICOS Y PERIHEPTICOS. ENTRE UN 20 Y 80% DE LAS MUJERES PUEDEN SER PORTADORAS ASINTOMTICAS DEL GONOCOCO. CONSECUENCIA DE ESTO LAS SECUELAS PARA LAS MUJERES SON EMBARAZOS ECTPICOS Y CAUSA DE INFERTILIDAD. BACTEREMIA GONOCCCICA ES BAJA, DA A LUGAR LA APARICIN DE LESIONES EN LA PIEL (PPULAS Y PSTULAS HEMORRGICAS), LOCALIZADAS EN LAS EXTREMIDADES, Y ARTRITIS SUPURATIVA EN ARTICULACIONES (RODILLAS, TOBILLOS Y MUECAS). NEONATOS PUEDEN ADQUIRIR INFECCIN OCULAR (OFTALMA GONOCCCICA) EN EL CANAL DEL PARTO DE MADRES INFECTADAS, EN AUSENCIA DE TRATAMIENTO PRODUCE CEGUERA. INFECCIN GONOCCICA DISEMINADA LA DISEMINACIN VA HEMATGENA OCURRE EN EL 1 A 3 % DE LOS CASOS, PRESENTA UN CUADRO DE FIEBRE ALTA, ESCALOFROS, POLIARTRALGIA, ARTRITIS Y LESIONES CUTNEAS PURPRICAS. DIAGNSTICO DE LABORATORIO TINCIN GRAM ES EL MTODO DE ELECCIN PARA EXAMEN DIRECTO DE LAS MUESTRAS, EN EL HOMBRE TIENE UNA SENSIBILIDAD DE UN 95%, EN LA MUJER ES MENOR E INESPECFICA. EN LA MUJER EL CULTIVO ES LA TCNICA DE DIAGNSTICO, MEDIO SELECTIVO THAYER MARTIN. OXIDA SLO LA GLUCOSA. TRATAMIENTO PENICILINA O AMPICILINA SI LAS CEPAS SON SENSIBLES, SI EXISTE RESISTENCIA SE DEBE UTILIZAR CEFTRAXIONA. SE RECOMIENDA ADMINISTRAR SIMULTNEAMENTE TETRACICLINA, O ERITROMICINA, DOXICICLINA POR CONCOMITANCIA DE INFECCIN POR CLAMIDIA. GONOCOCIA OCULAR DEL NEONATO, TRATAR CON TETRACICLINA, ERITOMICINA O NITRATO DE PLATA CONTROL DE LA INFECCIN EL CONTROL DE LA GONORREA EN ADULTOS SE LOGRA CON UN CORRECTO DIAGNSTICO Y TRATAMIENTO, CON UN SEGUIMIENTO DE LOS CONTACTOS SEXUALES EXPUESTOS Y CON ESTABLECIMIENTOS DE PROGRAMAS DE VIGILANCIA.

 SE RECOMIENDA EL USO DE PRESERVATIVOS NEISSERIA MENINGITIDIS CARACTERSTICAS CAUSA DIVERSOS TIPOS DE INFECCIN, LA SEPTICEMIA Y LA MENINGITIS SON LOS MS FRECUENTES. DIPLOCOCO GRAM NEGATIVO, INMVILES, ANAEROBIOS FACULTATIVOS, OXIDASA Y CATALASA POSITIVO, OXIDA MALTOSA Y GLUCOSA, CRECE A 35 C. LOS MENINGOCOCOS ESTN RODEADOS DE UNA CPSULA DE POLISACRIDOS, EXISTIENDO 13 SEROGRUPOS, LOS SEROTIPOS SON 20 (PROTENAS DE LA MEMBRANA EXTERNA). EL 99% DE LAS INFECCIONES LAS CAUSAN LOS SEROGRUPOS A, B, C, 29E, W135. SON PATGENOS MUY ESTRICTOS EN SU CRECIMIENTO, NO SON RESISTENTES A CONDICIONES AMBIENTALES ADVERSAS. EPIDEMIOLOGA LOS MENINGOCOCOS AFECTAN SOLO AL SER HUMANO. SE TRANSMITE DE PERSONA A PERSONA POR INHALACIN DE PEQUEAS GOTAS DE SECRECIN INFECTADAS, POR CONTACTO ORAL DIRECTO O INDIRECTO. LA MAYOR PARTE DE LAS INFECCIONES SE OBSERVAN EN MENORES DE 6 MESES A 3 AOS DE EDAD. COLONIZACIN ASINTOMTICA O PORTACIN DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR ES FRECUENTE. PATOGENIA INFECCIN SE INICIA EN NASOFARINGE. LOS MENINGOCOCOS SE ADHIEREN AL EPITELIO NASAL CON AYUDA DE LOS PILI, SE UNE A RECEPTORES ESPECFICOS PRESENTES EN LAS CLULAS COLUMNARES NO CILIADAS DE LA NASOFARINGE. PUEDEN FORMAR PARTE DE LA FLORA TRANSITORIA, O SER TRANSPORTADOS POR CLULAS EPITELIALES NO CILIADAS EN VACUOLAS DIGESTIVAS, ALCANZANDO LA CIRCULACIN SANGUNEA, LA DISEMINACIN SISTMICA ESTA MEDIADA POR LA PRESENCIA DE LA CPSULA POLISACRIDA QUE PROTEGE DE LA FAGOCITOSIS Y DE LA OPSONIZACIN. AL MULTIPLICARSE DA INICIO A LA BACTEREMIA. EFECTOS TXICOS PRODUCIDOS POR EL COMPONENTE OLIGOSACRIDO LOS (ENDOTOXINA). ANTECEDE A LA MENINGITIS, LOS SNTOMAS DE FIEBRE ELEVADA, ERUPCIN HEMORRGICA, COAGULACIN INTRAVASCULAR Y COLAPSO CIRCULATORIO.

EN POCAS HORAS IRREVERSIBLE.

PUEDE

DERIVAR

EN

UN

SHOCK

PATOLOGA MENINGITIS FIEBRE, CEFALEA, VMITOS, SIGNOS MENNGEOS. MENINGOCOCCEMIA SEPSIS, SE CARACTERIZA POR INICIO BRUSCO DE FIEBRE, ESCALOFROS, MIALGIAS, COMPROMISO DEL ESTADO GENERAL, PRESENCIA DE LESIONES CUTNEAS (MACULAS, PETEQUIAS), CASO FULMINANTES OCURRE COAGULACIN INTRAVASCULAR DISEMINADA, SHOCK, COMA Y MUERTE EN POCAS HORAS. DIAGNSTICO DE LABORATORIO LCR, SANGRE, LIQUIDO ARTICULAR, LESIONES DE LA PIEL. TINCIN CON GRAM Y CULTIVO EN AGAR SANGRE Y AGAR CHOCOLATE. TRATAMIENTO SU OBJETIVO ES ERRADICAR LA INFECCIN Y PREVENIR, DETECTAR, TRATA LAS COMPLICACIONES MS FRECUENTES. PENICILINA G FRMACO DE ELECCIN. PERSONAS ALRGICAS, CEFALOSPORINAS GENERACIN: CEFOTAXIMA O CEFTRIAXONA. RIFAMPICINA, COMO QUIMIOPROFILAXIS. OTRAS ESPECIES DE NEISSERIA N. SICCA Y N. MUCOSA SE HAN ASOCIADO A CASOS DE MENINGITIS, OSTEOMIELITIS Y ENDOCARDITIS, AS COMO TAMBIN EN INFECCIONES BRONCOPULMONARES, OTITIS AGUDA. GENERALMENTE SENSIBLES A PENICILINA.

DE

TERCERA

TEMA N 5

BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES DE LA GLUCOSA HAEMOPHILUS Y BORDETELLA BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES DE LA GLUCOSA GENERO Pseudomonas: La especie ms importante es la Pseudomonas aeruginosa Son patgenos oportunistas Producen infecciones intrahospitalarias Pueden ser colonizantes Pseudomonas aeruginosa Son aerobios estrictos Produce pigmentos hidrosolubles Piocianina: azul Piorubina: rojo Fluorescena: amarillo Crece a 42 C Agar MacConkey y ASH Colonias mucosas (posee capsula) Oxidasa positivo: Prueba de la citocromo oxidasa Resplandor metlico Olor a frutas TSI alcalino/neutro ESTRUCTURA: Lipopolisacaridos Porinas Pilis Flagelo monopolar Capsula de mucopolisacridos Exotxina A: hemolisina (factor 2 de elongacin) Lecitinasa Exoenzima S: ribosilacin de ADP Elastasa Colagenasa EPIDEMIOLOGIA: Son habitantes de suelos, aguas y plantas Tasa de colonizacin 2 a 20 % Humidificadores Soluciones de limpieza de lentes Fregaderos y grifos

PATOGENIA: Entrada: piel o mucosa respiratoria Adherencia: pilis, flagelos, capsula Receptores de acido sialico y n- acetilglucosamina Disminucin de fibronectina Factores de virulencia: exotxina A, exotxina S y elastasa Necrosis local Quemaduras (exotxina S) Formacin de glicocaliz Destruccin hemorrgica de los vasos sanguneos PATOLOGIAS: infeccin de quemaduras Infeccin de heridas Infeccin de heridas quirrgicas Infeccin de ulceras Infeccin urinaria Septicemia (neutropenicos) Neumona Osteomielitis Otitis externa Conjuntivitis y ulceras corneales Enfermedad fibroquistica pulmonar Foliculitis cutnea Ectima gangrenoso (bacteriemia) DIAGNOSTICO: Cultivo Crecimiento a 42C MacConkey: lactosa negativa Piocinotipia Motilidad en gota pendiente Bioqumica TRATAMIENTO: Muy resistente Porinas Betalactamasas Antibiticos Penicilina antiPseudomonas Cefalosporina antiPseudomonas Aminoglicosidos Quinolonas Carbapenem PREVENCION: Vacunas en experimentacin

 Fibrosis quistica Quemados Inmunosuprimidos Pseudomonas otras especies Pseudomonas putida Pseudomonas fluorescens Pseudomonas stutzeri Pseudomonas acidovorans Pseudomonas denitrificans Pseudomonas marginalis BURKHOLDERIA Burkholderia pseudomallei Habitante de suelo y aguas estancadas Asia, Filipina e Indonesia Se trasmite por inoculacin directa o aerosoles Produce melioidosis (infeccin respiratoria aguda y posteriormente crnica) Tratamiento: Tetraciclina, Cloranfenicol, TMS y Sulfas Burkholderia mallei Produce el Muermo que se adquiere por contacto con equinos como caballo o burro El muermo es una infeccin bacteriana producida por Burkholderia (Pseudomonas) mallei tpica de caballos, asnos y mulos, aunque tambin afecta a ovejas, cabras, perros y gatos. Ocasionalmente se contagia a los cuidadores, por el moco nasal de animales enfermos. Se caracteriza por: neumona; necrosis de la piel y las mucosas y un cuadro linfoide ( agudo o crnico) con ndulos diseminados. Puede ocurrir una infeccin sistmica y septicemia. La distribucin geogrfica de la enfermedad es: frica, Sudamrica y parte de Asia siendo sumamente rara en los paises occidentales. La bacteria es sensible a: trimetropimsulfametaxol, cloranfenicol, kanamicina y tetraciclina. Burkholderia cepacia Contaminante de reactivos, soluciones instrumentos mdicos y desinfectantes Produce septicemia mortal Es oportunista Produce infecciones intrahospitalaria Es ms resistente que la Pseudomonas ACINETOBACTER Son cocobacilos gram negativos No motiles Aerobios estrictos No reduce nitratos Colonizante de piel y vas areas

 Es habitante de zonas hmedas Se asocia a ventilacin Mecnica y Catteres EV Saprofitos ubicuos, BGN de baja virulencia son causa de infeccin nosocomial y adquiridas en la comunidad Los avances en la inmunosupresin as como uso frecuente de tcnicas invasivas han permitido a esta, superar a bacterias GP como principales causantes de morbilidad nosocomial Estn ampliamente distribuidas en el agua y en el suelo, ocasionalmente pueden cultivarse de fuentes humanas: esputos, orina, heces, secreciones vaginales Es el microorganismo ms comn transportado por el personal intahospitalario Coloniza el 45% de sitios de traqueostoma de pacientes internados Caractersticas morfolgicas Tiene forma de cocobacilo durante crecimiento exponencial y forma cocoide en fase estacionaria Son microorganismos GN aerobios, inmviles y encapsulados, no fermentadores Tienen tendencia a retener el cristal violeta Colonias tienen 1 a 2 mm de dimetro, no pigmentadas, mucoides con hoyuelos en la superficie Oxidasa negativo, lo cual le permite ser diferenciad de Neisseria Patogenia Ausencia de factores de virulencia, reduce su papel a patgeno oportunista Crecimiento a pH cido con Temperatura ms bajas puede aumentar capacidad para invadir tejidos desvitalizados No produce citotxicas, salvo LPS Cpsula inhibe fagocitosis y ayuda a la adhesin local Produce bacteriocinas Globalmente, sin alteracin de las defensas normales del husped, su papal sera limitado Factores de Virulencia Cpsula LPS Produccin de sustancia extracelular Produccin de bacteriocinas y formacin de biopeliculas

Epidemiologa Localizacin ms frecuente en infecciones intrahospitalarias son respiratorias y bactermicas en UCI, heridas operatorias en Ciruga, escaras en Medicina y LCR

 Multiresistencia, particularmente a cefalosporinas de tercera generacin y cuarta generacin, mediado por accin de -lactamasas cromosomales y por impermeabilidad, presencia de carbapenemasas entre otras Manifestaciones clnicas Agente causantes de infecciones supurativas de cualquier rgano Genitourinarias : uretritis Infecciones intracraneales: meningitis, abscesos Aparato respiratorio: Traqueostoma Tejidos blandos: celulitis local asociada a catteres intravenosos Heridas traumticas, quemaduras, incisiones quirrgicas Bacteriemia Neumona

Tratamiento Combinacin efectiva de un -lactmico (piperacilina, ticarcilina, ceftazidima) y un aminoglucsido Antibitico -lactamico asociados a inhibidores: Ampicilina- Sulbactam Carbapenmicos: imipenem, meropenem Especies: A. calcoaceticus A. baumanii A. iwoffii PATOLOGIAS Neumonia Septicemia Infecccion urinaria Piel y tejidos blandos Tratamiento: Ms resistente que Pseudomonas y Burkholderia

STENOTROPHOMONA Stenotrophomona maltophilia La Stenotrophomonas maltophilia es una bacteria aerobia, gram negativa, difundida en el ambiente. Es un germen oportunista que se comporta como un patgeno nosocomial y afecta generalmente a pacientes inmunodeprimidos, adictos a drogas endovenosas, pacientes con fibrosis qustica, pacientes sometidos a tratamientos prolongados con antibiticos de amplio espectro o quimioterapia antineoplsica. Provoca infecciones a nivel respiratorio, celulitis, abscesos, infecciones del tracto urinario, meningitis, endocarditis infecciosa, infeccin de las heridas, colonizacin de catteres, bacteriemia y sepsis.

MORAXELLA Son cocobacilos Gram negativos agrupados en pares Requieren medios como ASH y GC para su crecimiento Son flora normal orofaringea El pico de colonizacin ocurre a los 2 aos de edad (75%) Colonizacin de adultos (5%) Enfermedades crnicas del pulmn Clase social baja Especie ms importante M. catharrhalis (Branhamella catharrhalis) Excepto la M. catharrhalis todas las Moraxellas son sensibles a penicilina

MORAXELLA catharrhalis PATOLOGIAS Bronquitis Sinusitis Otitis media Laringitis Neumona en ancianos Exacerbacin de bronquitis crnica Infeccin nosocomial

Diagnostico Diplococos gram negativos Colonias grises no hemolticas Oxidasa y catalasa positivas Reduce nitratos a nitritos No fermenta glucosa, maltosa, sacarosa y fructosa Hidrlisis de la tributirina

FACTORES DE VIRULENCIA: Lipooligosacaridos: (A, B y C) no expresan el antigeno O Peptidoglicano: se encuentra en su pared celular activacin de los macrfagos Protenas de Membrana externa (OPMs) Protena CD unin a la mucina del odo medio y la nasofaringe Protena E recaptacin de nutrientes UspA capacidad de adherencia alas clulas epiteliales y resistencia a la actividad bactericida del suero humano Fimbrias: unin a clulas epiteliales Capsula: previene la fagocitosis Protenas reguladoras del Hierro TbpA y TbpB

Resistencia al complemento: Protena CopB interfiere la formacin del complejo de ataque a la membrana Tratamiento: Eritromicina Ciprofloxacina Gentamicina OTRAS ESPECIES DE MORAXELLA: M. lacunata M. bovis M. nonliquefaciens M. osloensis M. phenylpyruvica OTROS BGNNFG Alcaligenes (A. faecalis) patgeno oportunista Chromobacterium violaceum: inflamacin cutnea, sepsis, absceso heptico e infeccin ocular (flora del suelo) Cardiobacterium hominis: Flora normal de la boca Endocarditis Bacteriana subaguda (EBS) Eikenella (E. corrodens) (EBS) Kingella (K. kingae) (EBS) Actinobacillus actinomycetemcomitans (EBS) Endocarditis HACEK (Haemophilus aphrophilus) Endocarditis Bacteriana subaguda (EBS) Ocurre en pacientes con dao previo de las vlvulas cardiacas y manipulacin dentaria Eikenella corrodens: Flora normal de la orofaringe Celulitis facial Absceso cerebral Infeccin de heridas Artritis sptica Periodontitis

FACTORES DE VIRULENCIA: Adhesina Slime Endotxina Pili tipo 4 TRATAMIENTO Ampicilina Cefalosporina

Kingella kingae Flora normal oral PATOLOGIAS: Estomatititis Osteomielitis Artritis sptica Crece en ASH Tratamiento: Ampicilina Haemophilus y Bordetella Genero Haemophilus Son bacilos Gram negativos pequeos No son mviles No esporulados Tienen necesidades nutricionales complejas como la sangre Requieren de atmsfera rica en Co2 Presentan fenmeno de satelitismo Coco bacilos Gram negativos. Son pleomrficos Son inmviles. Tamao: 0.4 mm de ancho x 1 mm de largo. Se agrupan a menudo en cadenas cortas y bacilos aislados o bien filamentosos No forman esporas. No pose cilios. Algunas especies son capsuladas. Es una bacteria anaerobia facultativa Temperatura ptima de crecimiento a 37 C Haemophilus influenzae Factores de virulencia: Capsula El LPS (endotxina) Proteasas de Ig A: que son enzimas capaces de hidrolizar la cadena pesada de Ig A1 humana. Patologas: Cepas Capsuladas Meningitis (secundaria a otitis media o sinusitis) Epiglotitis Celulitis y Artritis (tumefaccin azul rojizo) Neumona

Cepas No Capsuladas Sinusitis Otitis media bronquitis aguda o crnica Neumona

DIAGNOSTICO: Frotis Cultivo en GC con isovitalex Prueba de los Factores Pruebas bioqumicas Prueba de Quellung (Hinchamiento de la cpsula)

TRATAMIENTO Ampicilina o cefalosporina de 1ra Generacin Cepas productoras de Betalactamasas 5-50% Cefalosporina de 3ra Generacin Inhibidores de la Betalactamasa

PREVENCION: Vacuna PRP conjugada (tox dif o PME de N. meningitidis) Se debe vacunar a partir de los 2 meses Haemophilus ducreyi Produce una enfermedad de trasmisin sexual llamado el Chancro blando o chancroide similar a la sifilis en Asia, frica, la India y Amrica latina. Se complica con linfaadenitis regional Aumenta la trasmisin heterosexual del SIDA Diagnostico: solo requiere del factor X Tratamiento: Eritromicina, Azitromicina, Ceftriazone, Otros Haemophilus: Haemophilus aegyptius conjuntivitis y fiebre hemorrgica brasilea Haemophilus haemolyticus Haemophilus parahaemolyticus. Haemophilus aphrophilus (EBS) Haemophilus paraphrophilus BORDETELLA B. Pertussi B. Parapertussi B. bronchiseptica

BORDETELLA PERTUSSIS Es un bacilo gram negativo minsculo parecido al haemophilus Necesita para su crecimientos muchos nutrientes como nicotinamida y carbn Tarda en crecer de 3 a 7 das Muy susceptible a los cambios ambientales Posee en su superficie una protena hemaglutinina filamentosa que le permite adherirse EPIDEMIOLOGIA Se trasmite por gotitas de saliva suspendidas en el aire durante la etapa temprana de la enfermedad Es bastante transmisible (80%) Es mas frecuente en los nios Familia, escuela, hospitales Epidemias espordicas Raro portadores asintomtico Fuente adultos vacunados Mortalidad en lactantes 70% Descenso en los aos 40 (vacunacin) Aumento a partir de los aos 80 PATOGENIA: Es un patgeno humano estricto Se adquiere por va inhalatoria Tropismo por el epitelio ciliar respiratorio Se adhiere a los cilios (Fha), pertactina y subunidades de fijacin de la toxina pertussi. Inmovilizacin de los cilios Destruccin celular ciliar Expulsin por el borde epitelial Tos persistente No invade tejidos profundos

FACTORESA DE VIRULENCIA Toxina Pertussi Linfocitosis 40.000/cc Parlisis de los macrofagos Hiperinsulinismo Sensibilidad a la histamina Destruccin celular (protena G) Adenilciclasa (hemoltica) Citotxica traqueal

 Fha Pilis de adherencia Regulacin gentica BvgS (membrana) y BvgA (citoplasma) TOSFERINA: Periodo de incubacin 10 das Etapa catarral (rinorrea) Etapa paroxstica (tos paroxstica) Etapa de convalecencia

Complicaciones Convulsiones Hemorragias Hernias Neumona por neumococo Atelectasia Apnea

DIAGNOSTICO: Aislamiento a partir de secreciones nasofaringeas Cultivo en el medio de Bordet-Gengou (carbn y cefalosporina) Tarda de 3 a 7 das Se confirma por inmunofluorescencia (anticuerpos marcados) DFA: inmunofluorecencia del hisopado nasofaringeo TRATAMIENTO Eritromicina Claritromicina PREVENCION Vacuna suspensin de clulas muertas de Bordetella pertussi se aplica en combinacin con el toxoide tetnico y difterico DTP a los 2 meses de edad luego cada 2 meses y refuerzo a los 18 meses Complicaciones: convulsiones febriles Vacunas acelulares (toxoide PT, Fha, pertactina, o pilis) Quimioprofilaxis de los contactos domsticos con eritromicina 250 mg cada 6 hs por 7 das