______________________________________________________________________

Farmacología Renal

Monitoreo de la concentración osmótica de líquidos corporales en ratas

bajo condiciones de deshidratación y ausencia de alimento.
Reporte Práctico

Abdieel Esquivel Aguilar, M. Sc.

Sección Externa de Farmacología, Centro de Investigación y Estudios Avanzados del IPN, México, D.F.

1.- Introducción El riñón concentra y diluye la orina

en respuesta a necesidades hídricas del
El agua es el disolvente biológico
organismo. Sin embargo, dicha capacidad
por excelencia. En edad adulta representa el
de concentración varía de acuerdo con la
60% del peso corporal de un individuo y su
especie animal y por condiciones
volumen se encuentra distribuido en dos
ambientales en la que se encuentre.
espacios líquidos fundamentales: el líquido
Si un individuo se deshidrata por
intracelular y el extracelular. Éste último se
falta en la ingesta de agua o pérdidas
haya distribuido en dos subespacios
excesivas, los valores de osmolalidad se
básicos: el volumen plasmático y el líquido
elevan y viceversa, entonces, el organismo
intersticial.
responde a este tipo de variaciones por
Además de agua, los espacios
medio de mecanismo de osmorregulación,
líquidos contienen solutos (p. ej. Na+, K+
integrado por varios procesos, por ejemplo,
Ca+2, entre otros). Los espacios líquidos
por osmorreceptores sensibles a variaciones
intercambian solutos y agua de manera
de osmolalidad plasmática, ubicados en la
continua y bidireccional gracias a la
región hipotálamo-hipofisiaria en la base
existencia de mecanismos de transporte que
del cerebro e irrigados por ramificaciones
logran mantener el estado constante de
de la carótida interna o bien por
desigualdad en las concentraciones de los
mecanismos humorales dentro del mismo
diferentes espacios.
eje, donde se sintetiza la hormona
El riñón es el órgano que regula
antidiurética (HAD) que llega al riñón
fundamentalmente el contenido de iones y
desencadenando mecanismos intracelulares
agua, así como de otros compuestos y
que permeabiliza a la membrana apical de
contribuye también a la constancia del
células especiales y permite la reabsorción
medio interno eliminando compuestos que
de agua, y de esta manera, el riñón excreta
resultan de la degradación metabólica, y por
orina concentrada. Así el riñón puede
lo tanto, el balance en éste mecanismo,
excretar orina concentrada o diluida según
mantiene constante la osmolalidad del
la necesidad del organismo.
medio extracelular.

-1-
______________________________________________________________________

2.- Objetivo y se colocaron en viales. Después se

procedió a anestesiar a las ratas con 10 UI
Evaluar la función renal de ratas de pentobarbiturato sódico
sometidas a deshidratación y en ausencia de intraperitonealmente. Para el monitoreo de
alimento mediante monitoreo de las la concentración osmótica plasmática, una
concentraciones osmóticas plasmáticas y vez anestesiadas las ratas, se procedió a
urinarias. recolectar la sangre por punción cardiaca
(figura 2).

3.- Materiales y Métodos

Se dividieron las ratas en dos

grupos, cuyo pero oscilaba entre 226-238 g
(n=18) las cuales fueron colocadas su
respectiva caja metabólica a temperatura
ambiente y bajo condiciones de ausencia de
agua y alimento durante 24 horas (figura 1).
Dicha caja contiene recolectores de desecho
Figura 2: Punción cardiaca
sólidos y líquidos de manera separada lo
cual permite que las muestras de orina a
Se centrifugaron las muestras para
analizar no sean contaminadas, previamente
separar el plasma de los otros elementos y
el contenedor urinario se le adicionó aceite
se midieron las concentraciones osmóticas
vegetal para evitar la evaporación de la
de cada muestra, previa calibración del
orina.
aparato (figura 3) y se evaluaron los
resultados obtenidos.

Figura 1: Caja metabólica.

Figura 3: Osmómetro de presión a vapor.

Una vez transcurrido las 24 horas,
se midió la orina de cada rata, de la cual se
tomaron alícuotas de 1 ml por cada muestra

-2-
 ______________________________________________________________________

3.- Resultados
Donde D representa el valor de la
En la figura 4 se muestran los depuración, U es la concentración urinaria
resultados obtenidos en el flujo urinario de la sustancia depurada, F.U. es el flujo
(µl/min*100 g de peso corporal) de los dos urinario y P la concentración plasmática de
grupos de ratas. la sustancia depurada se puede monitorear
la depuración renal utilizando la
2.5 concentración osmótica como unidad. Es
Jv (µ l/min/100g bw)

2.0 así como se obtuvieron los resultados

1.5 mostrados en la figura 5 para los dos grupos
1.0 experimentales.

0.5

0.0
A)

GRUPO I GRUPO II 12.5

Figura 4: Flujo urinario (µl/min*100 g de peso
10.0
Cosm (min/ml)

corporal) obtenido de los 2 grupos de ratas

7.5
después de 24 hrs en ausencia de líquidos y
5.0
alimentos. (grupo I: n=9, S.E.M.= 0.12,
σ=0.38, grupo II: n=9, S.E.M.=0.27, σ=0.83 2.5

0.0

Se observa claramente que al el GRUPO I GRUPO II

flujo urinario normalizado a 100 g de peso

corporal, no hay diferencias significativas B)
en los dos grupos.
-6
La concentración de partículas
CH2O (min/ml)

totales se denomina osmolalidad, ésta se -7

expresa en miliosmoles*Kg de H2O y la
osmolaridad se expresa también en -8

unidades de concentración solo que por litro

-9
de solución y sabiendo que la depuración
renal se define como el volumen de plasma GRUPO I GRUPO II

a la cual se le extrajo una sustancia Figura 5: A) Depuración renal (grupo I: n=9,

específica por unidad de tiempo a su paso S.E.M.= 0.72, σ=2.16, grupo II: n=9,
por el riñón y está dada por la expresión S.E.M.=1.28, σ=3.85). B) Depuración libre de
matemática: agua dada por la expresión matemática D-
H2O=.F.U. - Dosm.
D = ( U*F.U.)/P

-3-
______________________________________________________________________

Se observa que el segundo grupo de 5.- Referencias

ratas presentan valores ligeramente mayores
en depuración renal y libre de agua a Avendaño, C., Introducción a la Química
comparación con el primero grupo, lo que Farmacéutica, Mc Graw Hill, (2005).

indica que el segundo grupo presentaban Goodman & Gilman, The Pharmacology
menor deshidratación que las primeras, lo Basis of Therapeutics, Mc Graw Hill,
(2006).
cual se sustenta con los resultados de flujo
urinario y en la depuración libre de agua McPhee, S., Papadakis, M., Current
ligeramente mayor, es decir, el grupo II Medical Diagnosis & Treatment, Mc Graw
retuvo menos agua y más electrolitos Hill, (2007)
(orinaron más y su concentración osmótica
es mayor) a diferencia del grupo I. Aunque Muñoz-Martínez, E., García, X.,
dichos valores no son significativos Fisiología: células, órganos y sistemas,
estadísticamente sirven para fines de Tomo III Aparato renal, FCE, 1997.
compración dado el hecho de que estaban
en las mismas condiciones de evaluación.
Una posible explicación a estos resultados
es el peso de los animales pues si se
comparan éstos, los del grupo II eran
mayores.

4.- Conclusiones

Bajo condiciones en ausencia de

alimento y agua las ratas presentaron signos
característicos de deshidratación, retuvieron
agua y depuraron electrolitos que se
manifestó en el monitoreo de las
concentraciones osmóticas, depuración
renal y libre de agua, es decir, orinaron
menos y más concentrado como mecanismo
compensatorio para dicho desajuste.

-4-
______________________________________________________________________

Anexos

Grupo I

# RATA PESO (g) V Jv Posm Uosm Cosm CH2O

µl)
ORINA(µ µl/min/100g
(µ
bw)
1 226 8000 2.502 336.938 1673.774 12.427 -9.926
2 233 7500 2.228 348.863 1406.483 8.981 -6.753
3 228 5000 1.518 326.789 1754.897 8.150 -6.632
4 238 8000 2.359 315.626 1310.452 9.794 -7.435
5 224.5 6000 1.895 323.745 1554.169 9.099 -7.204
6 215 4500 1.453 328.819 1416.017 6.259 -4.806
7 228 5500 1.683 335.585 1322.933 6.636 -4.953
8 222 6500 2.019 313.342 1741.550 11.223 -9.204
9 224 5000 1.572 327.297 1338.274 6.427 -4.855

Grupo II

RATAS PESO (g) V Jv Posm Uosm Cosm CH2O

ORINA(ml) (ml/min/100g
bw)
1 245.4 6000 1.725 298.157 1441.187 8.340 -6.615
2 242 8000 2.340 292.988 2102.695 16.790 -14.451
3 247 6000 1.728 321.415 1540.352 8.280 -6.552
4 237 10000 2.974 311.724 1399.378 13.349 -10.375
5 242.2 10000 2.918 303.971 1293.906 12.421 -9.503
6 250.5 8000 2.281 323.030 1111.210 7.847 -5.566
7 226 2000 0.629 323.999 2494.521 4.846 -4.217
8 205.5 2500 0.853 299.772 2368.577 6.741 -5.888
9 250.3 5000 1.409 299.449 1437.939 6.765 -5.356

-5-