NMERO MAS PROBABLE (NMP)

NMERO MAS PROBABLE (NMP)

Mtodo Cuantitativo

Estimacin de concentraciones de bacterias presenten en el agua Inoculacin de una serie de tubos en concentraciones decimales decrecientes
Medio de cultivo adecuado

Incubacin en condiciones de tiempo y temperatura determinados

Se utiliza para determinar nmero de bacterias presentes en una muestra

Estimacin estadstica

Se basa en el hecho de que cuanto mayor sea el nmero de bacterias en una muestra, mayor ser la dilucin necesaria para reducir densidad hasta que no se desarrolle ninguna bacteria

FUNDAMENTO
Descrito por McCrady en 1915

Aislar grupo de Coliformes fecales

Seleccionando microorganismos por incubacin del inculo presente en caldo

Utilizando tcnica de tubos mltiples

NMP se utiliza para:

Microorganismos por contar no crecen en medios slidos Crecimiento en un medio lquido diferencial para identificar el microorganismo (bacterias coliformes)

NMP

Es un informe de que existe un 95% de probabilidades de que la poblacin bacteriana disminuya dentro de ciertos lmites y de que el NMP es el nmero estadsticamente ms probable.

Se fundamenta en la capacidad de los organismos coliformes en fermentar la lactosa con produccin de cido y gas

Incubacin a 35C 1 C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares

Esta determinacin consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase confirmativa

Prueba presuntiva
Caldo lauril sulfato de sodio el cual permite la recuperacin de los microorganismos daados que se encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como fuente de carbono

Prueba confirmativa
Medio de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el desarrollo de aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares como el verde brillante

La determinacin del nmero ms probable de microorganismos coliformes fecales se realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5 0.1 C por un periodo de 24 a 48 h.

Finalmente, la bsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos positivos de caldo EC, los cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos y diferenciales (Agar Mac Conkey, Agar eosina azul de metileno) y posteriormente realizando las pruebas bioqumicas bsicas (IMViC) a las colonias tpicas

CAMPO DE APLICACIN

Coliformes fecales

Coliformes totales

Escherichia coli

Productos que se encuentran en bajas concentraciones de microorganismos (<10 UFC/g o ml)

Agua
Leche

Coliformes fecales

Bacterias Gram-negativas Capaces de fermentar la lactosa Incubacin 48 h a 44.5 C

Familia Enterobacteriaceae

Existen en el intestino delgado de humanos y animales

Existen cepas de E. coli patgenas que provocan enfermedades diarreicas

Bacilo corto Gram negativo

TCNICA EMPLEADA

NORMAS MEXICANAS QUE REGULAN EL NUMERO MAS PROBABLE

NMX-F-187-1978. DETERMINACIN DEL NMERO MS PROBABLE DE GRMENES. METHOD OF TEST FOR GERMS MOST PROBABLE NUMBER. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIN GENERAL DE NORMAS. Objetivo: Esta Norma Mexicana establece el mtodo microbiolgico para determinar el nmero ms probable de grmenes.

 NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-112-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. DETERMINACIN DE BACTERIAS COLIFORMES. TCNICA DEL NMERO MS PROBABLE. Objetivo:

Esta Norma Oficial Mexicana establece el mtodo microbiolgico para estimar el nmero de coliformes presentes en productos alimenticios, por medio del clculo del nmero ms probable (NMP) despus de la incubacin a 35 C de la muestra diluida en un medio lquido.

VENTAJAS
La capacidad de estimar tamaos poblacionales basados en atributos relacionados a un proceso (selectividad) Provee una recuperacin uniforme de las poblaciones microbianas de suelos diversificados

Determina slo organismos vivos y activos metablicamente

Suele ser ms rpido e igual de confiable que los mtodos tradicionales de esparcimiento en platos de cultivo, entre otros

Bibliografa
Mendez, R. 2007. OP/PRODUCCION LIMPIA EN LA INDUSTRIA DEL CURTIEMBRE. Universidad Santiago de Compostela. 401 pp Tortora, G. Berdell, R. y Case, C. 2007. Introduccion a la microbiologa/ Microbiology An introduction. Ed. Mdica Panamericana. 959 pp Disponible en: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/P7_NMPcoliformes_19617.pdf consultado 12 de noviembre de 2012 Disponible en: http://www.uprm.edu/biology/profs/massol/manual/p4nmpenumeracion.pdf consultado 12 de noviembre de 2012 Disponible en: www.cofepris.gob.mx/TyS/Documents/.../ccayacm04.pdf consultado 12 de noviembre de 2012 Disponible en: http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/112ssa14.html consultado 12 de noviembre de 2012 Disponible en : http://www.colpos.mx/bancodenormas/nmexicanas/NMX-F-187-1978.PDF consultado 12 de noviembre de 2012