Fosforilao Oxidativa

Prof. Leonardo M. Cruz Dpto. De Bioqumica e Biologia Molecular Universidade Federal do Paran (UFPR)

 Em procariotos

Em eucariotos

Fosforilao Oxidativa Transferncia de eltrons = Reduo de O2 a gua = Sntese de ATP

De onde vm os eltrons?
Processos metablicos diversos, mas principalmente do Ciclo do cido Ctrico

Em que forma esto os eltrons?

Os eltrons no esto livres, e sim associados a molculas orgnicas, o que chamamos de equivalentes redutores

NADH

FADH2

Onde ocorre a formao de NADH e FADH2 na respirao?

Gliclise
Gliceraldeido 3-fosfato desidrogenase

Oxidao do piruvato e converso a acetil-CoA

Piruvato desidrogenase

Ciclo do cido Ctrico

Isocitrato desidrogenase Alfa-cetoglutarato desidrogenase Succinato desidrogenase Malato desidrogenase

Como os eltrons dos equivalentes redutores so transferidos pela cadeia respiratria?

Complexo I NADH-Q oxidoredutase Complexo II Succinato-Q redutase

Complexo III Q-citocromo c oxidoredutase Complexo IV Citocromo c oxidase

O que h em comum entre estas protenas?

Todas so protenas capazes de transportar eltrons

Como os eltrons so transportados?

- Ubquinona (UQ) ou Coenzima Q - Pode aceitar 1 e- (simiquinona UQH) ou 2 e- (ubquinol UQH2) - Pequena e hidrofbica, difundindo-se na membrana

citocromos

Protenas Fe-S

Citocromos
Protenas de transferncia de e- contendo Fe Contm o grupo prosttico heme Ocorrem 3 classes: Classe Citocromo a Citocromo b Citocromo c banda 600nm 560nm 550nm

Protenas Fe-S
O Fe pode estar associado a tomos inorgnicos de S e/ou tomos de S de resduos de Cys na protena Formam ncleos ou centros Fe-S

Ncleo Fe

Ncleo 2Fe-2S

Ncleo 4Fe-4S

Somente o S inorgnico considerado nos ncleos Participam da transferncia de 1eO Fe pode ser oxidado ou reduzido

Complexo I NADHQ oxidoredutase

Brao voltado matriz Brao membranar

FMN, centros Fe-S Domnio N-2 = protena ferro-enxofre

Complexo II Succinato desidrogenase

O grupo heme b tem a funo de proteger o complexo de estresse oxidativo.

Complexo III Citocromo bc1

Complexo III Ciclo Q

Transferncia de eltrons entre os complexos III e IV

Espao intermembranas Complexo do citocromo bc1 (Complexo III) Complexo da citocromo oxidase (Complexo IV) Citocromo C Aproximao entre o citocromo C e o complexo III no momento da transferncia de eltrons H2O
PDB 1OCO

Membrana Interna

Citocromo C

O2

PDB 1KYO

Matriz mitocondrial

Grupo Heme Complexo III

Complexo IV Citocromo c Oxidase

Bombeamento de prtons

Estabelecimento de um gradiente de prtons

Teoria Quimiosmtica

ATP Sintase

Complexo F1

Complexo F1

Viso do topo do complexo F1

Complexo F1Fo

Complexo F1Fo

Como o fluxo de prtons auxilia a sntese de ATP?

Modelo Cataltico da ATP Sintase

Como demonstrar a rotao do complexo Fo?

Yamada & Kinosita

Acoplamento da transferncia de eltrons a sntese de ATP

Cyanide (CN-) bloqueia a transferncia de eltrons entre a citocromo oxidase e o O2 Venturcidin ou oligomycin inibidores da ATP sintase Dinitrophenol (DNP) um desacoplador

Desacopladores
So altamente hidrofbicos Possuem prton capaz de se dissociar

Protenas desacopladoras
Tecido marrom em recm-nascidos

Alta concentrao de mitocndrias em clulas do tecido marrom

Produo de calor

Rendimento Final da Produo de ATP pela Oxidao de Glucose

Regulao conjunta da respirao

As vias envolvidas na respirao possuem mecanismos regulatrios que permitem o trabalho em conjunto de uma maneira econmica e auto-regulada para produzir ATP e precursores biossintticos. A concentrao relativa de ATP e ADP controla: 1. Gliclise 2. Oxidao do piruvato 3. Taxa do Ciclo do cido Ctrico 4. Taxa de transferncia de eltrons na fosforilao oxidativa

Clulas tumorais possuem defeitos nesta regulao, resultando em: - Altas taxas de gliclise + Alto consumo de glicose sangunea - Taxa do Ciclo do cido Ctrico mais baixa + Acmulo de piruvato + Fermentao do piruvato a lactato

Cadeia transportadora de eltrons em plantas