Daty Dasy Farmcia

Microbiologia Clnica Hemocultura e Tcnica de Hemocultura

1. Introduo - hemocultura ou cultura do sangue - sepse ou microflora normal em trnsito sem danos - febres, calafrios, infeces em diversas regies do corpo - infeco secundria em muitos casos de ITU, pneumonias, e outros - coleta com ateno especial, antes da antibioticoterapia, e de preferncia, na ascenso da temperatura (evitar coletar no pico febril) - quantidade de amostras e intervalo entre elas COM (Padro: 3 amostras em braos alternados com intervalos de 30 minutos) - microorganismos mais comuns: espcies de Staphylococcus, Streptococcus e BGN - bacteremia X septicemia - punes arteriais no aumentam a positividade de hemoculturas - frascos com potencial de crescimento inclusive para fastidiosos 2. Controle de Qualidade - meios de cultura slidos - frascos com caldo - kit comercial 3. Tcnica - ainda na sala de coleta inocular o sangue com agulha nova no frasco aps assepsia da tampa do frasco e prximo chama de lamparina - o volume de sangue indicado no frasco (10% do volume de sangue para o volume total do meio) - transportar em TA por 2h - homogeneizar e incubar em estufa 37C - observar presena de turvao e hemlise diariamente - semear em CHOC, AS e MC (TA por 30) nos tempos: 24h, 48h, 72h, 5d e 7d. A grande maioria dos microorganismos isolada nas primeiras 48h - para semeadura colocar agulha do sistema vacutainer na tampa emborrachada do frasco e gotejar prximo chama. Agulhas novas a cada semeadura??? - observar crescimento com 18-24h, caso negativo incubar mais 24h - se necessrio realizar um Gram para auxlio diagnstico - frascos negativos incubar at 7d, semear e descartar - frascos positivos devem ser relatados o mais rpido possvel, liberando laudo preliminar com morfologia do crescimento e observao que a identificao eantibiograma esto em andamento - realizar as PB e TSA - cuidado especial com S. epidermidis 4. Correlao Clnica - Hemato: hemograma - Micro: qualquer exame deve ser confrontado

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- Imuno: Reao de Widal 5. Como Reportar o Resultado Definitivo: Negativo: No houve crescimento de microorganismos na amostra analisada e reportar o nmero de amostras com intervalo de coleta na observao. Positivo: reportar o nmero de amostras, o microorganismo isolado (gnero e espcie) e o TSA. Preliminar: Ex: Presena de cocos Gram-positivos dispostos em cachos. Identificao e antibiograma em andamento - Emitir resultado preliminar de resultado negativo???

HEMOCULTURA
Embora o sangue normalmente seja estril, nmeros moderados de microorganismos podem penetrar na corrente sangnea sem causar danos. O sangue e a linfa contm numerosas clulas fagocticas defensoras. Alm disso, o sangue pobre em ferro (que se encontra abundante dentro das hemcias), que necessrio para o crescimento bacteriano. Porm, se o sistema imunolgico falhar, os germes podem sofrer uma proliferao exarcebada ocasionando a condio de septicemia. Se as bactrias causarem a lise das hemcias, o contedo hemoglobnico liberado resultando numa fonte de ferro para a acelerao do crescimento populacional bacteriano. Ocasiona febres, calafrios e linfangite. Um fato muito importante que a bacteremia pode ocorrer sem que seu stio de origem seja reconhecido, mais comum ocorrer como infeco secundria aps I.T.U., pneumonias bacterianas, infeces peritoneais, orais, biliares e em mucosas. As fontes mais comuns de bacteremia so os tratos genito-urinrio e respiratrio que representa cerca de 50% dos focos de origem. um dos exames mais importantes do laboratrio de microbiologia, porque a presena de um microorganismo bastante crtica e significativa. Devido ao fato de numerosos casos de invaso da corrente sangnea serem provocados por organismos da flora endgena do paciente, importante a diferenciao entre uma hemocultura positiva e uma contaminada. Para eliminar ou reduzir ao mnimo as possibilidades de contaminao, recomenda-se obter duas ou trs amostras de sangue dentro de um intervalo de tempo curto. Alm disso, de cada puno, o sangue deve ser administrado em dois frascos o que assegura o resultado. Em todos os casos o sangue deve ser obtido antes da administrao de antibiticos e de preferncia momentos antes do pico febril. A quantidade de amostras e o tempo de intervalo entre elas so determinados pelo mdico.

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Os organismos mais freqentes so os Staphylococcus sp, Streptococcus sp e BGN. Nas endocardites, a etiologia bacteriana mais freqente, porm tambm verificada a presena de isolados fngicos. Aps a coleta, o sangue deve ser imediatamente inoculado assepticamente em frascos (10% de sangue para o volume total do meio lquido). Homogeneizar e colocar em estufa 37C. Semear em placas de MC e AS nos tempos 24h, 48h, 72h, 5 dias e 7 dias; tempo necessrio para um bom crescimento. Para a semeadura colocar uma agulha do sistema vacutainer na tampa emborrachada do frasco e gotejar prximo chama. Semear e incubar cada placa por 48h em estufa 37C. Os frascos negativos so incubados durante 7 dias, homogeneizados e examinados diariamente, devem ser corados pelo mtodo de Gram quando houver evidncia de crescimento ou quando houver a suspeita de microorganismo na amostra pela turvao do meio e hemlise das hemcias. Os resultados positivos devem ser relatados o mais rapidamente possvel, os achados microbiolgicos so transmitidos ao clnico como resultado preliminar; os procedimentos culturais devero ser baseados na identificao inicial da morfologia e crescimento da bactria. Realizar as PB de acordo com o crescimento bacteriano e a colorao morfotintorial de Gram. Staphylococcus epidermidis, pelo fato de estar presente como flora normal da pele sugestivo de contaminao, porm deve-se atentar ao fato de que em muitos casos este germe pode causar septicemia. Quando positivo reportar o nmero de amostras e o microorganismo isolado, de preferncia gnero e espcie. Quando negativo informar que no houve crescimento de microorganismos na amostra analisada.

Ref.: Faculdade de Sto Antnio . Prof Manuel Jr.