CROMATOGRAFIA A GS

Gases ou substncias volatilizveis podem ser separados utilizando-se a tcnica

denominada "Cromatografia a Gs" (CG). A separao baseia-se na diferente
distribuio das substncias da amostra entre uma fase estacionria (slida ou lquida)
e uma fase mvel (gasosa).

A amostra, atravs de um sistema de injeo, introduzida em uma coluna
contendo a fase estacionria. O uso de temperaturas convenientes no local de injeo
da amostra e na coluna possibilita a vaporizao destas substncias que, de acordo
com suas propriedades e as da fase estacionria, so retidas por tempos determinados
e chegam sada da coluna em tempos diferentes. O uso de um detector adequado na
sada da coluna torna possvel a deteco e quantificao destas substncias.

Algumas tcnicas semelhantes cromatografia gasosa apareceram desde 1930,
no entanto, seu desenvolvimento s foi acelerado depois da introduo da
cromatografia gs-lquido, em 1952, por JAMES e MARTIN. O interesse pela
cromatografia gasosa fez com que houvesse um grande desenvolvimento de
equipamentos e mtodos e hoje ela tornou-se uma tcnica comum, presente na
maioria dos laboratrios que utilizam a anlise qumica.

A cromatografia gasosa uma tcnica com um poder de resoluo excelente,
tornando possvel, muitas vezes, a anlise de dezenas de substncias de uma mesma
amostra. Um dos principais motivos que tornam a cromatografia gasosa de uso
bastante acentuado a sua sensibilidade. Dependendo do tipo de substncia analisada
e do detector empregado, consegue-se detectar cerra de 10
-12
g. Essa sensibilidade faz
com que haja necessidade de apenas pequenas quantidades de amostra, o que em
certos casos, um fator crtico e limita a utilizao de outras tcnicas. importante
salientar ainda que a cromatografia gasosa excelente como tcnica quantitativa,
sendo possvel a obteno de resultados quantitativos em concentraes que variam
de picogramas a miligramas.

A cromatografia um mtodo fsico de separao, no qual os componentes a
serem separados so distribudos entre duas fases: a fase estacionria, e a fase mvel.
A amostra transportada por uma corrente de gs atravs de uma coluna empacotada
com um slido recoberta com uma pelcula de um lquido. Devido a sua simplicidade,
sensibilidade e efetividade para separar os componentes de misturas, a cromatografia
de gs uma das ferramentas mais importantes em qumica. amplamente usada
para anlises quantitativos e qualitativos de espcies qumicas e para a determinar
constantes termoqumicas tais como calores de soluo e vaporizao, presso de
vapor e coeficientes de atividade.

A cromatografia A gs tambm usada para monitorar os processos industriais
de forma automtica: analisam-se as correntes de gs periodicamente e realizam-se
reaes de forma manual ou automtica para compensar variaes no desejadas.
Muitas anlises de rotina so realizadas rapidamente no campo medicinal e
outros. Por exemplo, por meio do uso de apenas 0.1 centmetros cbicos (0.003
onas) de sangue, pode-se determinar as porcentagens de oxignio dissolvido,
nitrognio, dixido de carbono e monxido de carbono. A cromatografia de gs til
tambm na anlise de contaminantes do ar, lcool no sangue, leos essenciais e
produtos alimentcios.

TCNICAS USADAS EM CROMATOGRAFIA A GS

O mtodo consiste primeiramente na introduo da mistura de prova ou
amostra em uma corrente de gs inerte, normalmente hidrognio, hlio, nitrognio ou
argnio, que atuaro como gs de arraste. As amostras lquidas vaporizam-se antes da
injeo no gs de arraste. O fluxo de gs passa pela coluna empacotada atravs da
qual os componentes da amostra se deslocam a velocidades influenciadas pelo grau de
interao de cada componente com a fase estacionria no voltil. As substncias que
tm a maior interao com a fase estacionria so retidas por mais tempo e, por tanto,
separadas daquelas de menor interao. medida que as substncias eluem da
coluna, podem ser quantificadas por um detector e/ou tomadas para outra anlise
(Figura 1):

FIGURA 1: Sistema cromatogrfico
Existem dois tipos de cromatografia de gs: cromatografia Gs - Slido (CGS) e
cromatografia Gs - Lquida (CGL). A cromatografia Gs - Slida se baseia na base
slida estacionria, na qual a reteno das substncias analisveis a conseqncia da
absoro fsica.

A cromatografia Gs -Lquida til para separar ons ou molculas dissolvidas
em um solvente. Se a soluo de amostra estiver em contato com um segundo slido
ou fase lquida, os diferentes solutos interagem com a outra fase em diferentes graus,
devido a diferenas de adsoro, intercmbio de ons, partio, ou tamanho. Estas
diferenas permitem que os componentes da mistura se separem usando estas
diferenas para determinar o tempo de reteno dos solutos atravs da coluna.

A tcnica de desenvolvimento mais usada em cromatografia gasosa a
eluio. Uma corrente de gs passa continuamente pela coluna e quando a amostra
vaporizada introduzida rapidamente nesta corrente de gs, ela arrastada atravs
da coluna. As substncias presentes na amostra, depois de separadas, chegam ao
detector, que gera um sinal para o registrador (Figura 2).



FIGURA 2 - Cromatograma fornecido pelo registrador.


Em um cromatograma ideal, os picos apresentam-se separados e simtricos; na
prtica pode haver sobreposio parcial devido a uma separao deficiente na coluna,
ou a presena de picos com assimetria frontal ou caudas.

Durante a anlise, a temperatura da coluna pode permanecer constante
(cromatografia gasosa isotrmica) ou sofrer uma variao, linear ou no
(cromatografia gasosa com temperatura programada). A programao de temperatura
significativamente importante em cromatografia gasosa, j que melhora a separao
e diminui o tempo de anlise. Consiste em se comear a anlise com a coluna em uma
temperatura mais baixa, para que solutos de baixo ponto de ebulio possam eluir
como picos separados. Durante a anlise, a temperatura da coluna aumentada com o
objetivo de se diminuir a reteno de substncias de maior ponto de ebulio.

De acordo com o tipo de fase estacionria usada, a cromatografia gasosa pode
ser classificada em cromatografia gs-slido e cromatografia gs-lquido.

Na cromatografia gs-slido, a fase estacionria um slido com uma grande
rea superficial e a separao baseia-se em mecanismos de adsoro das substncias
neste slido. A cromatografia gs-slido usada principalmente na anlise de gases
permanentes e compostos apolares de baixa massa molecular.

Na cromatografia gs-lquido a fase estacionria um lquido pouco voltil,
recobrindo um suporte slido ou as paredes de colunas capilares. A separao baseia-
se em mecanismos de partio das substncias entre a fase lquida e a fase gasosa. A
utilizao da cromatografia gs-lquido corresponde a cerca de 95% do total de
aplicaes.




EFICINCIA

A eficincia de uma coluna medida em termos de nmero de pratos tericos.
Um prato terico corresponde a uma etapa de equilbrio da substncia entre a fase
estacionria e a fase mvel; portanto, quanto maior o nmero de pratos tericos maior
ser a eficincia (picos mais estreitos). O nmero de pratos tericos definido por:


2
16 |
.
|

\
|
=
wb
dR
n



onde:
n = nmero de pratos tericos
dR = distncia de reteno
wb = largura do pico na linha da base

Muitos fatores afetam a eficincia de uma coluna, tais como o comprimento,
dimetro interno, temperatura, vazo da fase mvel, volume da amostra, tcnica de
injeo, caractersticas das substncias, etc. A comparao entre colunas de
comprimentos diferentes pode ser feita utilizando a altura equivalente a um prato
terico (h), determinado pela equao:
h = L/n
onde L o comprimento da coluna cromatogrfica.

FASE ESTACIONRIA


Fase Estacionria Slida

Na cromatografia gs-slido, um slido finamente dividido funciona como fase
estacionria. A separao baseia-se na adsoro fsica e qumica das substncias
presentes na amostra neste slido nas suas volatilidades.

Substncias com a mesma capacidade de serem adsorvidas pela fase
estacionria podem ser separadas se apresentarem volatilidades diferentes. Este slido
deve ser constitudo de partculas com dimetros regulares, para que as colunas
resultantes apresentem uma maior eficincia. As granulometrias de partculas mais
comumente encontradas so: malhas de 40-60, 60-80, 100-120 e 120-140.

A cromatografia gs-slido tem aplicaes limitadas devido a alguns fatores
negativos. Entre eles pode-se destacar a no linearidade das isostermas de adsoro
mesmo com pequenas quantidades de amostra, resultando em picos com caudas,
tempos de reteno sujeitos a uma maior variao em funo do tamanho da amostra
e adsoro irreversvel. importante salientar ainda, a possibilidade de alteraes
catalticas da amostra, em presena dos adsorventes a altas temperaturas.

Os principais adsorventes usados em cromatografia gs-slido so relacionados
na Tabela 1, a seguir:



TABELA 1: ADSORVENTES USADOS E APLICAO

FASE ESTACIONRIA APLICAO
Polmeros porosos
Gases permanentes e compostos apolares ou polares
de cadeia curta
Carvo grafitinizado Osmeros estruturais e geomtricos
Slica
Gases permanentes e hidrocarbonetos de baixo
ponto de ebulio
Alumina Hidrocarbonetos

FASE ESTACIONRIA LQUIDA


Um lquido pouco voltil, recobrindo um suporte slido, funciona como fase
estacionria. Este lquido deve solubilizar as substncias presentes na amostra de
maneira seletiva, para que no haja a eluio das mesmas sem a devida separao.
Alm disso, a fase estacionria deve ser termicamente estvel e quimicamente inerte
s substncias na temperatura de uso. A separao das substncias presentes na
amostra baseia-se nas suas diferentes solubilidades na fase estacionria e nas suas
diferentes volatilidades. As foras de interao molecular entre as substncias a serem
separadas e a fase estacionria podem ser classificadas em:

a. Foras de orientao: So foras resultantes da interao entre dois dipolos
permanentes e so reduzidas com o aumento da temperatura.

b. Dipolo induzido: A interao ocorre entre um dipolo permanente e um dipolo
induzido. Esta fora muito pequena, porm, um grande nmero de
separaes depende dela; de maneira geral, a ao desta fora diminuda
com o aumento da temperatura.

c. Disperso: So foras que ocorrem entre todas as molculas, devido
formao de dipolos instantneos. Estas foras so fracas e independentes da
temperatura.

d. Foras de interao especfica: So foras que resultam da ligao qumica,
formao de complexos, pontes de hidrognio, etc., entre molculas das
substncias e da fase estacionria.'

Um suporte ideal deve possuir uma rea superficial especfica suficientemente
grande para permitir que a fase estacionria se espalhe de maneira uniforme formando
um filme fino. Alm disso, as partculas deste suporte devem possuir dimetros
regulares e poros uniformes, bem como apresentarem rigidez mecnica para evitar
possveis quebras durante a sua utilizao. Idealmente, o suporte no deve interagir
com as molculas da amostra. Para atender a estas necessidades, os suportes sofrem
uma srie de tratamentos antes de serem utilizados:

a. Seleo de uma faixa de dimetro de partculas adequada, usando peneiras
especiais.

b. Remoo dos centros ativos por saturao com a fase estacionria ou por
reao com agentes silanizantes (diclorodimetilsilano, hexametildisilazano),
cidos (HCI e HNO
3
), ou bases (KOH, NaOH).

c. Recobrimento do suporte com materiais no polares, como, por exemplo, um
filme metlico (prata, ouro) ou plstico.

Os suportes mais usados atualmente so baseados em terras diatomceas. So
esqueletos silicosos de diatomceas aquticas transformadas geologicamente em um
material poroso. Este material essencialmente slica microamorfa, contendo
pequenas quantidades de alumina e xidos metlicos como impurezas. Este material
muito frgil para ser usado como suporte, sendo necessria a sua calcinao em
temperaturas maiores que 900C, de tal modo a se conseguir rigidez mecnica
adequada. Quando esta calcinao efetuada na presena de carbonato de sdio,o
suporte obtido branco, caso contrrio apresenta colorao rosa.

O exemplo mais comum de suportes baseados em terras diatomceas, so os
Chromosorb. Os suportes de cor rosa, como Chromosorb P e A, so mais duros,
possuem uma maior densidade de empacotamento, maior rea superficial e maior
capacidade. Podem ser usados com fins analticos ou preparativos. Os suportes
brancos, como o Chromosorb W e G, so mais frgeis, menos densos e possuem uma
menor rea superficial e capacidade, sendo utilizados principalmente em colunas
analticas.

O teflon tambm tem sido usado como suporte. Sendo bastante inerte, torna
possvel a anlise de compostos corrosivos e altamente polares; no entanto, as colunas
obtidas so menos eficientes devido dificuldade de adeso da fase lquida neste
suporte, e sua baixa resistncia mecnica.

FONTE DE ARRASTE DE GS


A fase mvel, sendo gasosa, torna possvel um equilbrio rpido entre ela e a
fase estacionria, fazendo da cromatografia gasosa um sistema altamente eficiente.
Um cilindo contendo o gs sob alta presso serve como fonte do gs de arraste (fase
mvel), que levar as substncias presentes na amostra para fora da coluna, quando
elas no estiverem interagindo com a fase estacionria. Os gases mais usados como
fase mvel so o nitrognio, hlio, hidrognio e argnio. O gs de arraste no deve
interagir com o recheio da coluna, deve ser barato, disponvel e compatvel com o
detector usado. Deve tambm apresentar alta pureza, sendo aconselhvel o uso de
filtros contendo slica gel ou peneira molecular, entre o cilindro e o instrumento, para
eliminar traos de gua e hidrocarbonetos.

A eliminao de oxignio mais difcil. No entanto, existem filtros especiais com
esta finalidade, disponveis comercialmente. A presena de impurezas no gs de
arraste no afeta a separao cromatogrfica de maneira significativa, mas sim a
estabilidade e reposta dos detectores.










EQUIPAMENTO PARA CROMATOGRAFIA A GS

A Figura 3 mostra o esquema de um cromatgrafo.



1. Fonte do gs de arraste;
2. Controlador da vazo e regulador de presso;
3. Sistema de injeo da amostra;
4. Coluna cromatogrfica;
5. Sistema de deteco;
6. Registrador;
7. Termostato para injetor (a), coluna (b) e detector (c).

FIGURA 3 - Esquema de um cromatgrafo a gs

CONTROLADORES DE VAZO E DE PRESSO


A vazo do gs de arraste deve ser constante durante a anlise,
independentemente de variveis operacionais tais como presso na entrada da coluna,
presso na sada do detector, temperatura, etc., para que haja reprodutibilidade nos
tempos de reteno; a anlise quantitativa tambm afetada por variaes de vazo,
devido mudana nas reas dos picos.

O controle da vazo efetuado por controladores de presso e/ou
controladores de fluxo. Os controladores de presso efetuam uma constrio manual
do fluxo de gs para manter constante a presso na entrada do sistema
cromatogrfico. O segundo estgio das vlvulas do cilindro de gs e vlvulas de agulha
so exemplos de controladores de presso. Quando a temperatura da coluna e presso
na sada da mesma ou do detector so mantidas constantes, este tipo de controlador
eficiente. Com a mudana da temperatura durante a anlise (programao de
temperatura), ou quando se deseja adaptar um sistema na sada da coluna ou detector
com a finalidade de coleta do efluente (fins preparativos), a presso de entrada
mantida constante, mas a vazo alterada. Nestes casos h necessidade de
controladores de fluxo para manter a vazo constante durante toda anlise.


SISTEMA DE INJEO DA AMOSTRA


A escolha do gs de arrastre depende do tipo de detector que utilizado e dos
componentes a determinar. Os gases de arrastre para cromatgrafos devem ser de
alta pureza e quimicamente inertes, por exemplo, hlio (He), argnio (Ar), nitrognio
(N
2
) e hidrognio (H
2
). O sistema de gs arrastre pode conter um filtro molecular para
a remoo de gua e outras impurezas. Os sistemas de injeo mais comuns para a
introduo de amostras de gs so vlvula amostradora e seringa.

INJEO DIRETA COM SERINGA

As amostras gasosas e lquidas podem ser injetadas com uma seringa. Na
forma mais simples a amostra injetada primeiro em uma cmara aquecida, onde se
evapora antes de ser transferida para a coluna. Quando so utilizadas colunas
empacotadas, a primeira parte da coluna, em geral, serve como cmara de injeo,
aquecida separadamente a uma temperatura adequada. Para colunas capilares utiliza-
se uma cmara de injeo separada onde somente uma pequena parte da amostra
vaporizada/ gasosa transferida coluna, este mtodo conhecido como split-
injecton. Isto necessrio para no sobrecarregar a coluna com volume de amostra.

Quando se encontram traos da amostra, a injeo chamada on-column-
injection pode ser usada para CG capilar. A amostra lquida injetada diretamente na
coluna com uma seringa. Deixa-se ento que o solvente se evapore para produzir a
concentrao dos componentes da amostra. Se a amostra for gasosa, a concentrao
efetuada por meio do mtodo criognico. Os componentes da amostra se concentram e
separam da matriz por condensao em uma cmara de esfriamento antes da
separao cromatogrfica (Vide Figura 4).


.
FIGURA 4: Injeo com seringa



INJEO COM VLVULA DE AMOSTRAGEM/ LOOP

A injeo com vlvulas de amostragem e Loop muitas vezes utilizada no
controle de processos, onde as amostras gasosas ou lquidas fluem continuamente
atravs de uma espiral. A espiral de amostra enche em posio off-line com uma
seringa ou uma bomba automtica. Portanto, o loop conectado em srie com a
coluna e a amostra transferida fase mvel. s vezes necessrio concentrar a
amostra.

A injeo da amostra deve ser feita de tal maneira que se obtenha uma banda
nica e estreita, sendo que falhas na tcnica de injeo podem causar assimetria nos
picos. A quantidade de amostra injetada no deve ultrapassar a capacidade da coluna,
determinada pela quantidade de fase estacionria. Deve tambm ser reprodutvel para
tornar possvel a anlise quantitativa. A eficincia de uma coluna influenciada pelo
volume de amostra injetada; uma diminuio no volume injetado provoca um aumento
na eficincia da coluna.

Quando os picos so assimtricos o volume da amostra influencia os tempos de
reteno. Assim, picos com assimetria frontal tero um maior tempo de reteno
medida em que o volume da amostra injetada aumenta; o inverso ocorre para picos
com caudas. O sistema de injeo deve ser aquecido em uma temperatura suficiente
para que ocorra a vaporizao total da amostra.

A injeo de gases comumente feita atravs de uma seringa ou de vlvulas.
s vezes, usa-se a injeo de gases em soluo. O emprego de vlvulas resulta em
excelente reprodutibilidade (0,5%). No entanto, h necessidade de balanceamento da
presso e vazo. Estas vlvulas so mais facilmente danificadas com o uso prolongado.
As seringas utilizadas para a injeo de gases so construdas de modo a evitar
vazamentos. A injeo feita introduzindo-se a agulha atravs de um septo. Esta
tcnica simples e utiliza o mesmo sistema empregado na injeo de lquidos. A
reprodutibilidade na injeo de gases por este sistema de 1%.

A injeo de amostras lquidas pode ser feita usando-se micros seringas e, mais
raramente, vlvulas. A injeo atravs de um septo, com o emprego de micros
seringas, bastante reprodutvel ( 1%). O septo, construdo de silicone e/ou teflon,
pode apresentar dois tipos de problemas: vazamentos, devido a injees repetidas, o
que faz com que haja a necessidade de trocas peridicas do mesmo e sangria,
causando instabilidades na linha de base e aparecimento de picos fantasmas, quando
se utiliza a programao de temperatura (Tabela 2).

Slidos so geralmente dissolvidos em um solvente adequado e analisados sob
a forma de soluo, porm, tambm existem dispositivos para a vaporizao e injeo
diretamente do slido.









TABELA 2: SISTEMAS DE INJEO DE AMOSTRAS

PARMETRO RECHEADA ANALTICA CAPILAR
Dimetro interno (mm) 1-4 0,15-0,75
Comprimento (m) 1-3 10-100
Pratos tericos por metro 2400 3000
Espessura do filme lquido
(m)
5 0,5-2
Granulometria das
partculas (malhas)
80-100 -
Vazo mdia (L/min) 20-60 1-5
Volume da amostra 0,2-20 0,001-0,5

COLUNA CROMATOGRFICA


A Coluna cromatogrfica um tubo longo, contendo a fase estacionria. Este
tubo pode ser de cobre, ao inox, alumnio, vidro, slica fundida, teflon, etc.
Idealmente, o material de construo da coluna no deve interagir com o recheio e
nem com as substncias presentes na amostra.
As colunas podem ser classificadas em recheadas (analticas e preparativas) e
capilares (tabela a seguir e Figura 5).



FIGURA 5 Tipos de coluna para cromatografia gasosa: (a) coluna recheada analtica;
(b) coluna capilar com parede recoberta; (c) coluna capilar com suporte recoberto;
(d) coluna capilar com camada porosa.








PREPARAO DE COLUNAS RECHEADAS

Primeiramente, a fase lquida, dissolvida em um solvente conveniente,
misturada ao suporte. O solvente removido por evaporao sob agitao lenta e
contnua, para evitar quebra das partculas e favorecer o recobrimento do suporte de
maneira homognea. Este procedimento satisfatrio para a preparao de recheios
com porcentagens de fase lquida variando entre 10 e 30%. Para menores
porcentagens de fase lquida mais conveniente a tcnica de filtrao. Esta tcnica
consiste na filtrao da suspenso formada pelo suporte, fase estacionria e solvente,
e evaporao do solvente remanescente, seguindo os mesmos cuidados citados
anteriormente.

Aps o recheio estar devidamente pronto, este pode ser introduzido dentro do
tubo de vidro ou ao inox de tamanho previamente definido. Os tubos, especialmente
os metlicos, necessitam de um processo prolongado de limpeza que envolve a
passagem sucessiva de uma srie de solventes e solues: diclorometano, acetona,
gua, cido ntrico ou cido clordrico concentrado, hidrxido de amnio, N-
metilpirrolidoria, acetona e, por ltimo, o solvente empregado no preparo do recheio.
Tubos de vidro so silanizados, aps o processo de limpeza, para recobrimento dos
stios ativos remanescentes.

O enchimento da coluna feito com o auxilio de uma bomba de vcuo ligada a
uma das extremidades do tubo, na qual foi colocado um tampo de l de vidro.
Durante o enchimento da coluna pode-se usar um vibrador para que este seja mais
homogneo. Aps a coluna ter sido completamente recheada, coloca-se um outro
tampo de l de vidro na outra extremidade do tubo.

Antes da utilizao da coluna, h necessidade de uma etapa de
condicionamento para retirar o restante do solvente utilizado no preparo da fase
estacionria e outras impurezas volteis. A coluna colocada no cromatgrafo com a
sada para o detector desligada do mesmo; com o gs de arraste passando pela
coluna, a sua temperatura aumentada lentamente, at uma temperatura 20C acima
da temperatura mxima em que a coluna dever ser utilizada.

SISTEMA DE DETECO

As substncias presentes na amostra passam atravs da coluna, onde so
separadas, e chegam ao sistema de deteco. A seguir sero indicadas algumas
caractersticas importantes dos detectores. Na prtica, nem todas estas caractersticas
podem ser atendidas; ento, escolhe-se o detector que melhor se adapta ao tipo de
anlise a ser realizada.

a. Seletividade: Os detectores podem responder a todas as substncias,
geralmente medindo a variao da composio do gs de arraste que sai da
coluna, e, neste caso, so ditos de resposta universal. Detectores seletivos
respondem a apenas uma classe de substncias e so mais sensveis que os
universais. Alm desses dois tipos de detectores, existem tambm os
especficos, que respondem a um (ou a poucos) elemento (s), independente
das substncias que os contm.

b. A sensibilidade definida como a mudana na resposta do detector em funo
da quantidade detectada. Os detectores so classificados em duas categorias,
de acordo com seu princpio de operao. Os detectores cuja resposta
independente da vazo da fase mvel so ditos sensveis velocidade de fluxo
de massa. Nestes detectores a sensibilidade definida como a razo da rea
do pico pela massa injetada. Nos detectores sensveis concentrao, a
resposta varia em funo da vazo da fase mvel. Neste caso, a sensibilidade
definida como o produto da rea do pico pela vazo da fase mvel dividido pela
massa da amostra.

c. Rudo: So deflexes da linha de base num certo perodo de tempo,
representando efeitos eletrnicos do sistema de deteco. Este rudo pode ser
esttico, quando representa a instabilidade do detector isolado do
cromatgrafo, elou dinmico, observado em condies normais de operao.
Idealmente, os dois valores devem ser prximos.

d. Quantidade mnima detectvel: Alguns detectores conseguem detectar
quantidades de uma substncia na faixa de picogramas (10
-12
g) ou menos,
enquanto que outros detectam apenas 10
-8
g. O nvel de rudo do detector
determina esta quantidade mnima detectvel, definida como a quantidade de
amostra que gera uma resposta duas vezes maior que o nvel de rudo. A
quantidade mnima detectvel dependente de parmetros relacionados com a
coluna e pode ser usada para comparar detectores quanto a sua resposta
quantitativa.

e. Faixa linear: Uma anlise quantitativa depende da relao entre a concentrao
e resposta do detector, ou seja, intensidade do sinal gerado para uma
determinada quantidade de amostra. Faixa linear definida como a razo entre
a maior e menor concentrao da amostra, onde a resposta do detector
linear (desvio de 5%). O detector deve responder de maneira linear a uma
grande faixa de concentrao da substncia presente na amostra.

f. Outras caractersticas: Os detectores devem ser, quando possvel, insensveis a
alteraes de vazo e de temperatura e tambm devem ser resistentes s
condies de trabalho.

DETECTOR POR CONDUTIVIDADE TRMICA

So detectores de resposta universal, sensveis concentrao. Seu
funcionamento baseia-se no princpio de que um corpo quente perde calor a uma
velocidade que depende da composio dos gases que o circundam. Assim, a
velocidade de perda do calor pode ser usada como uma medida da composio do gs.
A Figura 6 mostra um esquema do detector por condutividade trmica.


FIGURA 6: Cromatogramas tpicos obtidos com detectores integrais (a) e diferenciais
(b). esquema de um detector por condutividade trmica: (a) corte do bloco do
detector; (b) ponte de Wheatstone.


Neste detector, o corpo quente um conjunto de filamentos de metal (platina,
tungstnio, nquel) dentro de um bloco metlico. A linha de gases montada de forma
que somente o gs de arraste passe por uma das celas contendo os filamentos,
enquanto que o efluente da coluna passa pela outra. Os filamentos aquecidos, ligados
formando uma ponte de Wheatstone, perdem calor de maneira constante quando
somente o gs de arraste passa pelas duas celas. Essa perda de calor gera um sinal
constante que registrado na forma de linha de base.

DETECTOR POR IONIZAO EM CHAMA

Este detector bastante popular devido a alta sensibilidade e resposta quase
universal, apesar de responder a propriedades do soluto; sensvel ao fluxo de massa
passando por ele em um determinado tempo. O gs de arraste chega ao detector e
uma chama produzida pela combusto de ar e hidrognio, queima e ioniza algumas
das molculas presentes nesta corrente gasosa (impurezas presentes no gs de
arraste, produtos originados das sangrias da coluna e septo). Quando molculas da
amostra presentes no gs de arraste chegam ao detector, elas so queimadas na
chama, ocorrendo a formao de ons, que so coletados por um eletrodo. A
quantidade de ons formados quando a amostra est presente no gs eluente muito
maior que a quantidade formada quando somente o gs de arraste est sendo
queimado.

A corrente gerada convertida em voltagem, amplificada e captada pelo
registrador.Um detector de ionizao de chama (FID ou DIC) consiste em uma chama
de hidrognio (H
2
)/ ar e um prato coletor. O efluente passa da coluna do CG atravs
da chama, a qual divide em molculas orgnicas e produz ons. Os ons so recolhidos
em um eletrodo negativo e produzem um sinal eltrico. O FID extremamente
sensvel com uma faixa dinmica grande. Sua nica desvantagem que destri a
amostra. Os detectores por ionizao de chama so usados para detectar
hidrocarbonetos (HC) como o metano (CH
4
), etano (C
2
H
6
), acetileno (C
2
H
2
), etc (Figura
7).




FIGURA 7: Ionizador de chama


A amostra a ser analisada mistura-se com hidrognio (H
2
), hidrognio mais
hlio (He) ou hidrognio mais nitrognio (N
2
). Os ons e eltrons que se formaram na
chama ficam presos em um eletrodo coletor permitem que uma corrente flua no
circuito externo. A corrente proporcional aos ons formados, o que depende da
concentrao de hidrocarbonetos nos gases e detectada por um eletrmetro e
mostrada na sada anloga. O FID oferece uma leitura rpida, precisa e contnua da
concentrao total de HC para nveis to baixos como ppb.

DETECTOR FOTOMTRICO DE CHAMA


Normalmente utiliza-se (N
2
) como gs de arraste. O detector fotomtrico de
chama (FPD) permite medies sensveis e seletivas de enxofre voltil, e compostos
de fsforo. O princpio de deteco a formao de espcies de enxofre excitado (S
2
*)
e HOP* em uma chama. Um tubo fotomultiplicador mede a emisso de
quimiluminescncia caracterstica dessas espcies. O filtro ptico pode ser trocado
para permitir ao fotomultiplicador visualizar luz de 394 nm para a medio de enxofre
ou 526 nm para fsforo.




FIGURA 8: Detector fotomtrico de chama


A resposta do detector ao fsforo linear, ao passo que a resposta ao enxofre
depende da concentrao.


DETECTOR POR CAPTURA DE ELTRONS

Este detector seletivo, respondendo muito bem a halogenetos orgnicos,
aldedos conjugados, nitrilas, nitratos e organometlicos. praticamente insensvel a
hidrocarbonetos, lcoois e cetonas. A sensibilidade seletiva a haletos faz com este
detector seja particularmente til na anlise de pesticidas clorados.

Quando o gs de arraste (N
2
) passa pelo detector, ionizado por partculas beta
emitidas por fontes de
3
H ou
63
Ni. Os eltrons produzidos neste processo so coletados
em um anodo, gerando uma corrente que amplificada por um eletrmetro,
resultando a linha de base. Molculas eluindo da coluna, capazes de capturar eltrons,
diminuem esta corrente, gerando um sinal proporcional a sua concentrao.


DETECTOR TERMINICO

Os detectores terminicos so detectores por ionizao, onde utilizam-se sais
de metais alcalinos em um plasma gerado pela aplicao de um potencial eltrico
adequado em um fluxo de ar e hidrognio.

Nestes detectores existe uma prola de um sal de metal alcalino (brometo de
csio ou sulfato de rubdio), eletricamente aquecida e colocada entre o queimador e o
eletrodo coletor. A fonte mantida em um potencial negativo para evitar a perda dos
ons do metal alcalino, e para anular a resposta do detector no modo de ionizao de
chama. Na regio da prola existe a chama ou um plasma suportados pelo fluxo de ar
e hidrognio. A ao cataltica do metal alcalino em compostos contendo nitrognio ou
fsforo forma ons com carga negativa, que so coletados no nodo (eletrodo coletor)
para produzir uma corrente.

REGISTRADOR

O sinal gerado pelo detector, quando a amostra passa por ele aps eluir da
coluna, registrado graficamente. Os registradores usados em cromatografia gasosa
so do tipo potenciomtrico e operam na escala de 1 mV, com um tempo de resposta
de um segundo ou menos.
TERMOSTATO

Durante uma anlise, as temperaturas do injetor, coluna e detector necessitam
ser controladas. O injetor deve ser aquecido a uma temperatura alta para que haja
vaporizao total da amostra, porm, suficientemente baixa para que no haja
decomposio trmica da amostra injetada. O aquecimento da coluna deve manter a
sua temperatura constante durante a anlise, no caso de cromatografia gasosa
isotrmica, ou fornecer uma variao da temperatura, de maneira reprodutvel no caso
de programaes.

Assim, a cromatografia gasosa est sendo usada nas mais diversas reas, como
na anlise ambiental, nas indstrias qumicas e farmacuticas, na anlise de alimentos
e de produtos petroqumicos, na medicina, na pesquisa e outras.

Na anlise ambiental pode-se citar, como exemplo, a utilizao da
cromatografia gasosa no controle da poluio de ar, gua, solos, etc. A poluio do ar
vem contribuindo, cada vez mais, com aumento da incidncia de doenas crnicas tais
como cncer de pulmo, bronquite e asma. Assim, o controle da poluio atmosfrica,
quer seja nas grandes cidades, em centros industriais, ou mesmo no ambiente de
trabalho, tem merecido ateno especial por parte de autoridades. A cromatografia
gasosa pode ser usada para a determinao de vrios poluentes como aldedos,
cetonas, hidrocarbonetos, compostos policclicos aromticos, etc.

BIBLIOGRAFIA UTILIZADA
COLLINS, Carol et al. Introduo a Mtodos Cromatogrficos. 7
a
edio,
Campinas: Universidade de Campinas (SP), 1997.
Sites, artigos, textos.






EXERCCIOS


1) Conceitue cromatografia a gs (CG).
2) Qual o poder de resoluo da CG?
3) Em que consiste a tcnica de CG?
4) Quais os tipos de CG? Comente-as.
5) Qual a tcnica em desenvolvimento mais usada em CG? Explique-a.
6) Como medida a eficincia de uma coluna?
7) Quais os fatores que afetam a eficincia de uma coluna?
8) Fale de forma resumida, porm explicativa, sobre a fase estacionria slida e a
lquida.
9) Como deve ser um suporte ideal?
10) Fonte de arraste de gs: fale sobre a fase mvel gasosa.
11) Como deve ser a vazo do gs de arraste?
12) Como podem ser injetadas as amostras gasosas e lquidas?
13) Como feita a preparao de colunas recheadas?
14) Sistema de deteco: fale sobre a seletividade, sensibilidade, rudo e faixa linear.
15) Fale corretamente sobre o FID, o FPD e Detector por Captura de Eltrons.
16) De que forma pode ser utilizado CG na Anlise Ambiental?


































EXPERIMENTO SOBRE CROMATOGRAFIA GASOSA

Experimento: Determinao de benzeno, xileno e tolueno em gua.

Introduo

A cromatografia gasosa uma tcnica com um poder de resoluo excelente,
tornando possvel, muitas vezes, a anlise de dezenas de substncias de uma mesma
amostra. Um dos principais motivos que tornam a cromatografia gasosa de uso
bastante acentuado a sua sensibilidade. Dependendo do tipo de substncia analisada
e do detector empregado, consegue-se detectar cerra de 10
-12
g. Essa sensibilidade faz
com que haja necessidade de apenas pequenas quantidades de amostra, o que em
certos casos, um fator crtico e limita a utilizao de outras tcnicas. importante
salientar ainda que a cromatografia gasosa excelente como tcnica quantitativa,
sendo possvel a obteno de resultados quantitativos em concentraes que variam
de picogramas a miligramas.

A cromatografia um mtodo fsico de separao, no qual os componentes a
serem separados so distribudos entre duas fases: a fase estacionria, e a fase mvel.
A amostra transportada por uma corrente de gs atravs de uma coluna empacotada
com um slido recoberta com uma pelcula de um lquido. Devido a sua simplicidade,
sensibilidade e efetividade para separar os componentes de misturas, a cromatografia
de gs uma das ferramentas mais importantes em qumica. amplamente usada
para anlises quantitativos e qualitativos de espcies qumicas e para a determinar
constantes termoqumicas tais como calores de soluo e vaporizao, presso de
vapor e coeficientes de atividade.

Objetivo

Realizar um experimento simples que ensine o aluno a determinar solventes
orgnicos com a tcnica de cromatografia gasosa.

Condies de trabalho

1. Preparo de Solues

+ 1 g/mL de uma soluo de benzeno em gua.
+ 1 g/mL de uma soluo de xileno em gua.
+ 1 g/mL de uma soluo de tolueno em gua.

2. Condies Cromatogrficas

+ Coluna: 30x0,25 mm x 0,25 m (95% de polidemilsiloxano e 5% de fenil).
+ Detector: ionizao em chama (FID)
+ Temperatura do detector: 300
0
C
+ Temperatura do injetor: 250
0
C

3. Programao da temperatura do forno

+ 50
0
C (1 min)???
+ 2
0
C/min----80
0
C ??


OBS: Considerar a temperatura definida por seu professor (a).

Procedimento

+ Inicialmente acondicione a coluna;
+ A seguir injete cada uma das solues separadamente;
+ Determine o tempo de reteno para cada componente;
+ Aps essa etapa injete a mistura;
+ Otimize a separao dos componentes na mistura. Imprima o cromatograma.

Tratamento de dados

Calcular:

+ o nmero de pratos tericos para a coluna,
+ o fator de capacidade;
+ a altura do prato terico;
+ a reteno relativa.