CROMATOGRAFIA EN PAPEL Es un mtodo sencillo y rpido, las fibras de celulosa del ppel filtro ordinario retiene agua, que

es vital para el proceso, ambos conforman la fase estacionaria . En la cromatografa de papel la muestra a separar es adsorbida sobre el punto de aplicacin del soporte: papel, el cual retiene el agua (fase estacionaria ), pero se puede saturar con otra fase estacionaria , por ejemplo, dejndolo equilibrar con esta en una cmara cerrada (cmara de cromatografa donde se va a desarrollar el cromatograma), antes de permitir el flujo del eluyente: fase mvil. En aquellos casos en los cuales la mustra se disuelve mucho mejor en solventes no polares que polares, el soporte se impregna con la fase organica (fase estacionaria ) y el cromatograma se desarrolla con la fase acuosa. Esta tcnica constituye una cromatografa en fase reversa. En este caso los primeros a eluir (los de mayor Rf) sern los componentes ms polares . el principio de cromatografa en fase reversa puede aplicarse a cualquier tcnica cromatograficas de particin. Los tipos mas comunes de papel que se emplean en esta tcnica son:

Tcnicas de elucin: 1. ascendente (lenta): el disolvente se encuentra en el fondo capilaridad 2. Descendente (ms rpida): el disolvente esta en un recipiente esta en un recipiente del que cuelga el papel, fluye por l hacia abajo por una combinacion de capilaridad y gravedad. 3. circular (muy lenta pero muy ntida) del

recipiente que sostiene al papel y va subiendo a traves de el por

4. bidimensional (especial para mezclas muy complejas puede emplearse en sentido ascendente o en el descendente). Se utilizan consecutivamente dos eluyentes distintos que fluyen en sentidos perpendiculares. Esta tcnica se utiliza cuando ninguno de los dos eluyentes es capaz de efectuar una separacin total de componentes de la muestra, separacin que se usa con su uso conjunto. Para ello se pone la muestra en un ngulo del papel y se desarrolla un primer cromatograma con uno de los eluyentes, a continuacin se gira el papel 90 y se desarrolla con el otro eluyente.

5. elucin continua (pude ser usada con las cuatro anteriores, se la conoce tambin sobre-elucion). Cuando el sentido del desarrollo es ascendente o circular puede ocurrir que los compuestos de mayor Rf se superpongan de nuevo al final del papel. En el desarrollo descendente los compuestos de mayor Rf saldrn primero del papel, como si se tratara de una columna cromatografica. Estas tcnica es aveces empleada con fines preparativos. 6. Elucion multiple(una vez desarrollado el cromatograma hasta el final del papel, este es sacado de la cmara y secado antes de introducirlo de nuevo en el solvente de elucin que puede ser o no ser el mismo). En cada caso hay que dejarlo equilibrar con los vapores de la fase estacionaria antes de la prxima corrida. De nuevo, para el caso de cromatografa ascendente o circular puede ocurrir la superposicin de los compuestos de mayor Rf. Revelado: Si los compuestos de la mezcla son coloreados, las manchas son visibles directamente. De lo contrario habr que revelarlas. Luz UV: si los compuestos absorben esta radiacin las manchas se vern con fluorescencia. Reactivos de color: especiales para cada compuesto. Se deber tener en cuenta que no se pueden usar reveladores que destruyan el papel como el cido sulfrico o el calor. Vapores de yodo sublimado: es un revelador universal.

En la cromatografa en dos dimensiones es preciso llevar a cabo una medida del desplazamiento del analito a lo largoa del papel o placa que se utiliza, se denomina factor de retencin y se define como: Rf=distancia recorrida por el analito / distancia recorrida por el frente del solvente debido a que los valores de factor de retencin Rf casi no pueden reproducirse con dos cifras significativas debido principalmente a que el valor de Rf es sensible a variables como el grosor de la fase estacionaria, la humedad que contiene la fase mvil, se acude a un valor que resulte a un valor mas representatico como factor de retencin relativo Rx. El Rx esta definido de la siguiente manera: Rf= distancia recorrida por el analito / distancia recorrida por una sustancia de referencia Una sustancia de referencia es por lo regular un patrion interno el cual se define como una sustancia de identidad conocida y de alta pureza empleada para fines comparativos . un Rx igual a 1, con lo cual se confirma la identidad de un analito conrespecto a la sustancia referencia.

Ventajas de la Cromatografia en Papel Barata (con frecuencia se lleva a cabo en papel filtro) Es til para sustancias muy polares Para separar pequeas cantidades de materiales solubles en agua como aminocidos, cidos nucleicos y azcares. Se utiliza ampliamente en anlisis biolgicos y mdicos

Desventajas de la cromatografa en Papel Los cromatogramas con frecuencia son lentos. - Otras caractersticas: en CP la celulosa se ha impregnado con una fase inmvil, generalmente agua y el compuesto problema se reparte entre ambas fases. Ventajas de la Cromatografia de Capa fina Puede emplearse analticamente para determinar las caractersticas de separacin en una mezcla antes de intentar una separacin cromatogrfica en gran escala.

La informacin obtenida en un experimento por este mtodo con frecuencia puede aplicarse a un cromatograma de columna.

Comparacion : - La cromatografa sobre papel es primordialmente un fenmeno de extraccin lquido lquidol, tambin la utiliza un poco la cromatografa en capa fina pero ms que todo utiliza la adsorcin ocmo medio principal de purificacin. - En CCF se emplea almina o gel de slice como fase estacionaria y una fase mvil orgnica. - En la CP para separar se emplea una especie de proceso de extraccin continuada en lugar de un proceso de adsorcin como en CCF - En la CCF se emplea el mismo tipo de adsorbente y es una ventaja sobre la CP. - La informacin obtenida en un experimento por este mtodo con frecuencia puede aplicarse a un cromatograma de columna, mientras en las condiciones que se emplean para CP no son directamente transferibles
Bibliografa F. Burriel, F Lucema, et.al. (2008). Qumica Analtica Cuantitativa. Espaa: Editorial Thomson . Pp. 319-320. D. Marcano , M Hasegawa.(2002). Fitoquimica Organica. Venezuela : Editorial Torino. Pp 66-68.