PRCTICA No. 1 DESCRIPCIN Y MANTENIMIENTO DEL ESPECTROFOTMETRO.

Laboratorio de Qumica Analtica III (Anlisis Instrumental), 4 B, Programa Educativo de Qumico Farmacutico Bilogo, Unidad Acadmica de Ciencias Qumicas, rea Ciencias de la Salud, Universidad Autnoma de Zacatecas. Carretera Zacatecas Guadalajara Km 6. Ejido La Escondida, Zac. Zac. 14 de Febrero del 2012 20 de Febrero del 2012

RESUMEN: Los mtodos analticos se clasifican en: clsicos e instrumentales. Los instrumentales, son mtodos mas modernos para la separacin y determinacin de especies qumicas, que utilizan las medidas tales como: la conductividad, el potencial, la absorcin o emisin de la luz, la relacin masa/carga y la fluorescencia. De los equipos ms utilizados dentro de los mtodos instrumentales son los espectrofotmetros y fotmetros, estos contienen 3 componentes bsicos: una fuente de energa radiante, un filtro o monocromador y un detector. La diferencia fundamental entre un espectrofotmetro y un fotmetro, consiste en que el fotmetro trabaja nicamente en el espectro de la luz visible y selecciona una longitud de onda determinada mediante filtros fijos, en cambio un espectrofotmetro es capaz de trabajar, no solo con la luz visible sino que en otras regiones del espectro electromagntico (UV e IR) adems el monocromador le permite seleccionar la longitud de onda adecuada.

PALABRAS CLAVE: espectrofotmetros, fotmetros, electromagntica, longitud de onda

INTRODUCCION: Los mtodos analticos se suelen clasificar en: clsicos e instrumentales. Los mtodos clsicos utilizan procedimientos de anlisis cualitativos y cuantitativos, en los primeros el analito es identificado por su color, punto de ebullicin o fusin, solubilidad, olor, ndice de refraccin, entre otros. Y en el anlisis cuantitativo la cantidad analtica del analito se determina mediante medidas gravimtricas o volumtricas. Los mtodos instrumentales, son mtodos mas modernos para la separacin y determinacin de especies qumicas, que utilizan las medidas de las propiedades fsicas, tales como: la conductividad, el potencial, la absorcin o emisin de la luz, la relacin masa/carga y la fluorescencia. Adems en la separacin de mezclas complejas, tcnicas cromatografas y electroforticos. Cabe mencionar que dentro de las dos mtodos al realizar un anlisis de tipo cuantitativo, es pertinente seguir las siguientes etapas: 1) toma de muestra, es necesario que nuestra muestra tenga la misma composicin que el resto del material del cual se obtuvo; 2) preparacin de la muestra, pues debe convertirse en una forma que sea adecuada para el anlisis; 3) pesada, ya que este tipo de anlisis se expresa dando la cantidad de componente problema presente por unidad de pesado o volumen de muestra; 4) disolucin de la muestra, para disolver todos los componentes de la muestra y no solamente la especie ha determinar; 5) separacin o eliminacin de substancias interferentes; 6) calibracin y medida de la concentracin; 7) calculo de los resultados y 8) evaluacin de resultados por estimacin de su fiabilidad. Algunos de los equipos ms utilizados dentro de los mtodos instrumentales son los espectrofotmetros y fotmetros, estos contienen 3 componentes bsicos: una fuente de energa radiante, un filtro o monocromador (para aislar una banda estrecha de energa radiante) y un detector (para medir la energa radiante transmitida a travs de la muestra). Sin embargo, la diferencia fundamental entre un espectrofotmetro y un fotmetro, consiste en que el fotmetro trabaja nicamente en el espectro de la luz visible y selecciona una longitud de onda determinada mediante filtros fijos, en cambio un espectrofotmetro es capaz de trabajar, no solo con la luz visible sino que en otras regiones del espectro electromagntico (UV e IR) adems el monocromador le permite seleccionar la longitud de onda adecuada. El espectro electromagntico (REM) abarca un intervalo enorme de longitudes de onda y de frecuencias y sus divisiones se basan en los mtodos que se precisan para generar y detectar las diversas clases de radiacin. Pues cuando
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incide REM en una muestra puede ser absorbida por ella, transformndose, en muchas ocasiones en energa trmica.

OBJETIVO: Conocer el equipo con el cual cuenta el laboratorio de anlisis instrumental, los componentes de los diferentes espectrofotmetros, as como sus funciones y diversos usos. Y la diferencia de los espectrofotmetros y fotmetros.

MODELOS DE ESPECTROFOTMETROS Y FOTMETROS EN EL LABORATORIO DE ANLISIS INSTRUMENTAL

Durante la realizacin de esta prctica, revisamos, analizamos y comparamos los diferentes aparatos con los que se cuentan en este laboratorio de anlisis instrumental: Espectrofotmetros y Fotmetros. Despus de revisar de manera breve el fundamento general de los fotmetros y de los espectrofotmetros, nos dispusimos a dar un breve recorrido por el laboratorio, con la finalidad de observar cada uno de los equipos. A continuacin una lista de algunos de los aparatos que nos fue posible observar, as como una muy breve descripcin de sus caractersticas destacadas:

1.-Colormetro fotoelctrico de 900-3 modelo de Klett Summerson Este colormetro fotoelctrico, ajusta manualmente el blanco y la muestra Utiliza un filtro ptico de paso bajo, el cual es adecuado para medidas de dispersin de avance a 0. Para estos filtros su lmite de longitud de onda superior es igual o menor que el dimetro medio de las partculas insolubilizadas en la suspensin de inters. Se produce una ptima sensibilidad de deteccin y medicin. 2.-Leitz Photometer, 20561 Una de las caractersticas peculiares que podemos observar en este fotmetro es la forma en la que los filtros se encuentran dispuestos, la cual es en posicin de
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carrusel. Para cambiar de filtro, simplemente se gira este para utilizar el filtro deseado. Este equipo, tambin hace uso de una pirmide cilndrica, la cual tiene la funcin de dispersar el haz de luz que se refleja en el. 3.-Espectrofotmetro Beckman ED 1204 Este espectrofotmetro utiliza luz blanca y hace uso de prismas para dispersar la luz. En este esquipo es posible seleccionar diferentes longitudes de onda.

4.-Perkin-Elmer Coleman Model 6|20 Junior II Spectrophotometer Para este espectrofotmetro, se hace uso de lmparas que nos permiten leer en VI, UV e incluso NIR. Para colocar el selector de filtro en la posicin apropiada segn la longitud de onda, se toma en cuenta la tabla siguiente:

Tabla No. 1 Tipos de filtros. POSICION UV VIS NIR RANGO 325 a 380 nm 380 a 650 nm 650 a 825 nm MARCA DE LONGITUD DE ONDA rea azul rea blanca rea roja

Para este aparato en especial, es conveniente hacer la lectura de la transmitancia y posteriormente realizar la conversin.

Datos Tcnicos o o o o o Longitud de onda- 325 a 825 nanometros (nm). Reproductibilidad de longitud de onda- +/- 0.5 nm, o menos. Reproductibilidad Fotomtrica- 0.5% transmitancia. Calibracin de longitud de onda- +/-1 nm at 585 nm. Requisitos de electricidad- 110 o 220 voltios (95 a 135 voltios, o 190 a 270 voltios) 50 a 60 ciclos individuales, 140 watts. o Paso de banda- 20 nm (nominal). 5.-Espectrofotmetro Perkin Elmer 1320 IR

Este espectrofotmetro nos permite seleccionar la longitud de onda de una forma bastante sencilla ya que este equipo es digital. Con este dispositivo, nos es posible medir la transmitancia y la absorbancia.

6.-Espectrofotmetro Perkin Elmer, Lambda 1 Con este dispositivo, es posible utilizar muestras solidas y gases. Este espectrofotmetro se utiliza la mayora de las veces para realizar anlisis cualitativos. Trabajo en el campo de la luz visible (VIS) y luz ultravioleta (UV).

7.-Espectrofotmetro Perkin Elmer Lambda XLS, Digital Este dispositivo es capaz de trabajar en el campo de luz ultravioleta (UV) y luz visible (VIS). Adems, es posible conectarlo a la computadora. Mediante este espectrofotmetro podemos calcular la concentracin del analito de manera directa.

8.-Espectrofotmetro Jenway 6305 Mediante este aparato, podemos obtener de forma digital la absorbancia, transmitancia y concentracin directa a travs de un factor. Trabaja en el campo de la luz ultravioleta y la luz visible y hace uso de una pirmide cuadrada de cuarzo como celda. Es posible conectarlo a una impresora con la finalidad de obtener valores impresos.

9.-Espectrofotmetro Perkin Eimer- Lambda 2S Este dispositivo es utilizado normalmente en varias industrias; prueba de ello es el carrusel que posee, el cual le permite depositar varias muestras a la vez a fin de trabajar con ellas en el menor tiempo posible. 10.-Espectrofotmetro Fisher En este equipo es necesario el uso de celdas ms grandes en comparacin con las que se utilizan en otros equipos.
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Otra particularidad que encontramos en esta unidad es el hecho de que utiliza dos haces de luz en lugar de solo uno. 11.-Espectrofotmetro Jenway 7315 Haciendo uso de este aparato, podemos obtener el espectro y la concentracin directa de la muestra analizada. Con este espectrofotmetro es posible adquirir el porcentaje de transmitancia y el porcentaje de absorbancia.

12.-Fotmetro de flama. Corning 400 Este dispositivo es el nico en su tipo dentro del laboratorio de anlisis instrumental. Su mecanismo se basa en encender una chispa que luego enciende una flama. Esta ltima acta directamente con la muestra problema y el aparato de encarga de medir la emisin que emana de esta muestra. Para que este fotmetro funcione, es indispensable que la muestra posea litio, potasio y sodio, y la lectura se puede realizar nicamente una vez por cada muestra. Como ya se mencion, la peculiaridad de este aparato, radica principalmente en que utiliza la emisin para obtener los valores necesarios, a diferencia de los dems equipos que pudimos apreciar, los cuales se basaban en la lectura de la absorcin.

DISCUSIN Dentro del laboratorio de anlisis instrumental, los equipos ms utilizados son los espectrofotmetros y fotmetros, los cuales pudimos conocer ms ntimamente, ya que era necesario familiarizarnos con estos antes de iniciar cualquier tipo de anlisis en ellos. Se nos mostraron algunos de sus componentes tales como: las celdas, el transductor de salida, el filtro (en el caso de los fotmetros), sin embargo solo uno de los espectrofotmetros daba la oportunidad de observar su interior. La exposicin de los equipos fue en base a su antigedad, iniciando desde los fotmetros a los que era necesario calibrarlos manualmente y para cada muestra, asimismo el resultado de nuestro anlisis se mostraba con una aguja que forma parte del transductor de salida, en un rango de % de transmitancia; despus pasamos a los espectrofotmetros que aunque algunos se calibraban aun manualmente ya trabajaban con otras regiones del espectro electromagntico, siendo la mas frecuente regin ultravioleta. Luego llegamos a espectrofotmetros que ya se autocalibraban, que trabajaban tambin con la regin del infrarrojo cercano e incluso que daban la representacin grafica de la seal de las ondas de radiacin. Adems de que el resultado ya no solo se mostraba en trminos de transmitanscia sino tambin de la absorbancia. Y en particular en uno de ellos era posible poner nuestra muestra de manera liquida o solida o gas. Posteriormente llegamos a los equipos que daban ya el resultado de forma digital, que se podan conectar a una impresora o equipo de computo y la concentracin del analito se puede saber en distintas unidades de concentracin, facilitando el trabajo. Es importante sealar que los equipos que nos haban mostrado hasta entonces son de absorcin. Finalmente nos fue posible apreciar un fotmetro de flama, el cual a diferencia de los dems mide la emisin y se emplea para determinar iones litio, potasio y sodio, haciendo la relacin de que entre mas concentracin del tomo o ion, habr mas emisin por parte del fotmetro. Y hasta ahora aunque es un poco difcil el comprender como estos equipos pueden realizar tan sorprendente trabajo, esperamos pronto poder manejarlos.

CONCLUSIN Se pudieron identificar varios modelos de espectrofotmetros y fotmetros, los cuales poseen tres elementos bsicos y generales (una fuente de energa radiante, un filtro o monocromador y un detector). Adems de que siguen un mismo orden de funcionamiento: generador de seal, selector de longitud de onda, celda, detector, amplificador y medidor de transductor de salida. Observamos, que a pesar de que con el paso de los aos estos han ido perfeccionndose, haciendo actualmente ms sencilla la obtencin de los resultados y el anlisis de la muestra, no siempre van ha ser mejores que los espectrofotmetros y fotmetros mas antiguos. Finalmente se logro dejar en claro la diferencia entre estos instrumentos, el fotmetro trabaja nicamente en el espectro de la luz visible y selecciona una longitud de onda determinada mediante filtros fijos, en cambio un espectrofotmetro es capaz de trabajar, no solo con la luz visible sino que en otras regiones del espectro electromagntico (UV e IR) adems el monocromador le permite seleccionar la longitud de onda adecuada.

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