Utilidad del ADN como marcador genético

en el diagnostico de Hemoglobina “S”.

Salvador Contreras Huerta*, Armando Méndez Pérez*, Yaneth Mabel Rivera

Velásquez.**

* Laboratorio de Patología Experimental , Facultad de Medicina Zona Xalapa. Universidad

veracruzana.

** Laboratorio Clinico. IMSS Clinica 11.

La anemia de células falciformes (ACF) es una enfermedad hereditaria,

producida por la presencia de la hemoglobina S (Hb S), la cual es una variante
de la hemoglobina normal a causa de una alteración de la estructura de la
globina beta localizado en el cromosoma 11, debido a un cambio en el codón
GAC normal, que pasa a GTG dando como resultado la sustitución del
aminoácido Acido glutámico por Valina, en la posición 6 (β6 Glu→Val) el
intercambio es consecuencia de una mutación puntual.2,5,6

Fig.1. Representación esquemática del gen loci de la globina, mostrando el locus del gen de la
beta globina en el cromosoma 11. (Genética, características de la Hemoglobina S, Anemia
Falciforme Y Haplotipos. 2002.)

La presencia de Hb S surge hace miles de años en el África como una medida

de protección que confiere una ventaja de supervivencia frente al paludismo o
malaria el cual es un padecimiento causado por un parasito del genero
Plasmodium que tiene como hábitat los glóbulos rojos.1, 2, 6, 10
La Hb S tiene una alta frecuencia en personas de raza negra y su mestizaje,
hoy en día este padecimiento no es único en regiones del África sino que se
presenta a nivel mundial, debido al desplazamiento de antepasados a manera
de esclavos en los distintos continentes.1, 3,4, 7

Como es citado por muchos autores la Hb S tiene una solubilidad baja y

precipita generando filamentos largos que serán responsables de la
deformación de los eritrocitos característicos en la enfermedad. El
padecimiento es exclusivo de individuos homocigóticos para el gen de la Hb S.

Los glóbulos rojos normales son redondos y flexibles, no así los glóbulos
rojos de personas afectadas con la enfermedad (homocigóticos de Hb S)
pues estos se tornan duros y deformes cuando liberan el oxígeno, adoptando a
menudo la forma de una letra C o de hoz (falciformes). Los glóbulos
falciformes quedan atrapados y son destruidos en el hígado y en el bazo.
Como consecuencia, se produce una falta de glóbulos rojos, o anemia, la cual,
en casos graves, puede provocar palidez, dificultades respiratorias y
cansancio. 8,9, 10
Los estudios clínicos para este padecimiento regularmente se realizan
mediante técnicas electroforeticas o de inducción empleando el paquete
eritrocitario o su contenido (hemoglobina), pero muy pocos utilizan el ADN
como marcador genético para identificar la presencia de este, mostrando la
importancia que tiene esta metodología no solo para diagnosticar la Hb S, sino
para hacer evidente su genotipo mediante el polimorfismo del gen de la beta
globina.

El diagnóstico por esta metodología se fundamenta en el aislamiento del ADN

codificador de cadenas beta de la hemoglobina y la detección de alguna
mutación empleando la enzima de restricción Bsu36I, que fragmenta la
hemoglobina normal pero no la Hb S por la mutación.

Para ejemplificarlo mejor realizamos un estudio en 20 pacientes sospechosos

de Hb S y 10 personas aparentemente sanas, para ello se siguió el protocolo
descrito a continuación.
Fig.2 Protocolo para identificación de HbS mediante el Gen de Beta globina. Fuente Trabajo
Recepcional en modalidad de Tesis:Identificación del polimorfismo del gen de Beta
globina en pacientes con Hb S.
Los resultados obtenidos son los siguientes:

AMPLIFICACION DEL GEN DE B-GLOBINA

PM L1 L2 L3 L4 L5 L6 C-

262pb

Imagen 1.- Amplificación del gen de B-Globina por

PCR, se obtiene un fragmento de 262pb. PM.
Marcador de peso molecular, L1-3. Pacientes HbS,
L4-6. Grupo Control y C-. Control negativo.

POLIMORFISMO DEL GEN DE B-GLOBINA

POR RFLP EN PACIENTES CON HbS

PM L1 L2 L3 L4 L5 L6 L7 L8 C-

262pb

162pb

100pb

Imagen 2.- Genotipificación del Gen de B-Globina

con la enzima Bsu361. PM. Marcador de peso
molecular, L1, 3,6-8. Heterocigotos a HbS, L2, 4 y
5. Homocigotos a HbS y C-. Control negativo
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