El laberinto de Barnes Laberinto de Barnes es un instrumento usado en experimentos de psicologa realizados en el laboratorio, este nos permite mirar como

es la memoria espacial de una rata sometida a una situacin de estrs. El laberinto de Barnes es una tabla circular con 20 agujeros circulares alrededor de la circunferencia de la tabla. Bajo cada agujero est una ranura para una caja, llamada la caja meta. Lo que la rata debe hacer es encontrar la caja meta del laberinto, que es una caja que tiene una tapa abierta, y se puede alcanzar con uno de los agujeros en la tapa de la tabla. El nico lugar donde esta puede esconderse disponible en el laberinto es la caja de la meta. MTODO 1. SUJETO Se utiliza una rata de laboratorio que tenga un peso en gramos y aproximadamente debe poseer la misma edad, sexo, condicin de salud y deben provenir del mismo bioterio con otras ratas, donde se les proporciona el alimento necesario y se someten a un ciclo de luz de 12 horas de oscuridad con luces encendidas a las 7:00 am. Las sesiones experimentales en el laboratorio se realizaron durante el ciclo de luz y entre las 10:00 y las 14:00 horas. 2. APARATOS Laberinto Circular de Barnes Para analizar la memoria espacial de la rata despus que es sometida a una situacin de estrs. Utilizamos el laberinto circular de Barnes. Este instrumento consiste en una plataforma circular 1.22 cm de dimetro elevada 100 cm del piso elaborada en acrlico blanco. En la circunferencia de dicha plataforma se encuentran ubicados dieciocho agujeros circulares de 9 cm de dimetro espaciados entre s por 20 de arco. En la parte de de abajo del laberinto se puede poner una caja negra removible denominada caja de escape (Caja meta) de 24 cm. de largo x 10 cm. de altura y 10 cm. de ancho. En el centro de la plataforma ubicamos un tarro de forma circular (caja de inicio) al inicio de cada sesin cubriendo al animal y se retira cuando la rata va a comenzar a buscar la caja escape. En la sala experimental se localizan estmulos visuales que no cambian de posicin a lo largo del entrenamiento para que el roedor lo tome como pistas para su orientacin. CMARA DE VIDEO Y FOTOGRAFICA 3. FUNCIONAMIENTO El funcionamiento es medido tpicamente por el nmero de errores que el roedor hace, es decir. El nmero de pocas empuja su nariz en, o asoma su cabeza sobre un agujero circular que no contenga la caja de la gota. 4. MEMORIA ESPACIAL La memoria espacial es un tipo de memoria declarativa cuyo objetivo final es el almacenamiento de la representacin espacio-perceptual de los lugares a los que se expone un animal. Uno de los paradigmas utilizados en la evaluacin de la memoria espacial de roedores es el laberinto circular de Barnes (Barnes, 1979). ste consiste en una plataforma circular elevada a un metro del suelo, con orificios de escape en periferia. Slo uno de los orificios est comunicado con una caja de escape. El laberinto se encuentra ubicado en una

habitacin iluminada con luz brillante y est basado en la tendencia natural de los roedores a buscar espacios oscuros y cerrados. Los animales deben aprender, mediante claves espaciales externas al laberinto, una trayectoria determinada que los llevar a la caja de escape logrando huir del ambiente abierto e iluminado (McLay, 1998). La memoria espacial puede verse afectada por diferentes factores externos e internos, entre ellos el estrs. Se ha demostrado que el estrs puede mejorar o deteriorar la memoria relacionada con tareas diversas (p.ej.: reconocimiento de objetos, condicionamiento clsico o navegacin espacial). La direccin de estos efectos depende de la intensidad de la respuesta de estrs, del tipo de agente estresante utilizado, del tipo de memoria evaluada y de la fase de la memoria durante la cual se induce el estrs (Luine et l., 1996; Lupien y McEwen, 1997; De Quervain et l., 1998; Morrow et l., 2000; Kim y Diamond, 2002; Roozendaal, 2002; Bowman et l., 2003; Mello et l., 2008; Harrison et l., 2009; Walesiuk y Braszko, 2009). Por ejemplo, la exposicin a estrs crnico puede deteriorar o mejorar la memoria dependiendo del momento del desarrollo en que sea inducido, de la edad y del sexo del animal (Mueller y Bale, 2007). Asimismo, el estrs agudo puede tener un efecto positivo o negativo sobre la memoria espacial dependiendo del momento en que sea inducido. De esta forma, la induccin de estrs agudo por restriccin motora en ratas, antes de la adquisicin de una tarea espacial, evaluada en el laberinto radial de ocho brazos, mejora la ejecucin de dicha tarea (Luine et l., 1996). Por el contrario, si el estrs agudo ocurre despus de la consolidacin y antes de la recuperacin, deteriora la evocacin de la memoria. Ms an, estos efectos estn relacionados con el aumento de los niveles de corticosterona en sangre (De Quervain et l., 1998; Roozendaal, 2002). La intensidad del estrs y los niveles glucocorticoides tienen un efecto sobre la memoria que sigue un patrn de U invertida, as: el rendimiento de la memoria con estrs de intensidad media o niveles intermedios de glucocorticoides se asocian con mejor rendimiento de la memoria cuando se compara con niveles altos o bajos de estrs o glucocorticoides (Lupien y McEwen, 1997; Mello et l, 2008).

En la sala de experimentacin hay seales visuales (claves espaciales extralabernticas) que se mantuvieron fijas en las paredes durante todo el experimento (Fig. 1b). Adems, en el techo estn instaladas dos lmparas de luz blanca de 300 W (dirigidas al centro del laberinto), una fuente de ruido blanco de 90 dB y una lmpara de luz roja de 60 W, las cuales pueden ser controladas de forma alternativa por el experimentador. Antes de iniciar el entrenamiento, los animales fueron habituados a la sala de experimentacin iluminada con luz roja y a las cajas del laberinto (caja de salida y caja meta). Veinticuatro horas despus de la habituacin se realiz la sesin de adquisicin, que consisti de 8 ensayos (E1 a E8), separados por un intervalo entre ensayos (IEE) de 5 min. Antes de cada ensayo, estando iluminada la sala de experimentacin con la luz roja, el sujeto se introdujo en la caja de salida durante 30 segundos (Fig. 1B). Cada ensayo comenzaba cuando de manera simultnea se elevaba la caja de salida y se encendan las luces blancas y la fuente de sonido (Fig. 1C). En cada ensayo se permita al animal explorar el laberinto por un intervalo mximo de 4 minutos. El ensayo finalizaba cuando el animal se introduca en la caja meta, momento en el cual las luces blancas y la fuente de sonido se apagaban y se volva a encender la luz roja. Cuando, transcurridos 4 minutos, el animal no haba encontrado la caja meta, el experimentador lo introduca suavemente en ella a travs del agujero correspondiente, apagaba las luces blancas y la fuente de sonido y encenda la luz roja. En

cualquiera de los casos anteriores, se dejaba al animal en la caja meta durante 1 minuto. En el tiempo entre ensayos el animal permaneca aislado en una caja idntica a su alojamiento habitual. Veinticuatro horas despus del entrenamiento, se evalu el aprendizaje. Para ello se realizaron dos ensayos: 1) en el primer ensayo, idntico a los ensayos de la sesin de adquisicin (prueba con caja, PCC, Fig. 1C), se evalu la ejecucin de la tarea espacial; en el segundo ensayo, semejante a los ensayos de adquisicin pero retirando la caja meta (prueba sin caja, PSC1, Fig. 1D), se evalu si el sujeto retena la ubicacin espacial de la caja (indicado por persistencia en la exploracin del agujero meta). Puesto que la exposicin al laberinto sin caja meta da inicio al proceso de extincin y dado que se pretenda evaluar tambin dicho proceso, en la misma sesin se llevaron a cabo otras seis pruebas sin caja (PSC2 a PSC7, Fig. 1D). En esta sesin de evaluacin y extincin el IEE fue de 5 minutos. Roedores estresados En la primera fase de estudio, las ratas fueron inducidas a instrucciones empleando una herramienta psicolgica denominada Laberinto de Barnes, que sirve para medir el aprendizaje espacial y la memoria. Se trata de un armazn redondo elevado a 90 centmetros del suelo, en el que se introduce el roedor. La idea es que el animal busque un refugio oculto que tiene este sistema. Para inducirlo a la exploracin, se somete a estmulos que lo hacen sentir vulnerable, como luz y niveles de ruido por encima de los 90 decibeles, afirma el investigador. A este proceso se sometieron dos grupos de ratas. Uno, antes de ingresar al laberinto, fue expuesto a periodos largos de estrs (entre 1 y 4 horas). Esta reaccin del organismo la logramos encerrndolas entre tubos de plstico. All solo podan respirar y mover sus patas. Sabemos que se tensionan, porque al medir en su sangre la corticosterona, hormona del estrs que se produce tanto en ratas como en humanos, los niveles se elevan: pasan de 80 nanogramos por mililitro, que es lo normal, a 250 300, agrega Mnera. Agilidad en el aprendizaje El Laberinto de Barnes cuenta con 18 orificios situados a su alrededor. Por 17 de ellos el animal puede asomar su cabeza pero no conducen a una va de escape, tan solo uno cuenta con una caja de salida, donde puede refugiarse para no sentir el ruido ni la luz. Al comienzo de la prueba, las ratas estresadas se demoraron casi cuatro minutos para encontrar el agujero con la caja de escape. Aquellas que no lo lograron fueron ayudadas por los investigadores. Esta prueba se repiti ocho veces, con intervalos de cinco minutos. A esta secuencia la denominamos sesin de aprendizaje, especifica el investigador. De esta manera, se detect que con cada repeticin disminua el tiempo que empleaban las ratas en buscar la caja y refugiarse all. Mientras en la primera secuencia tardaron 240 segundos en encontrarla, en la ltima emplearon 60 segundos nada ms. Adicionalmente, se redujo el nmero de errores (as se denomina cuando meten la cabeza en los agujeros que no las conducen a la salida); de 15 en promedio bajaron a 5 al final. Segn Mnera, al da siguiente se repiti la sesin con los dos grupos de roedores (los que haban sido estresados y los que no): Observamos que las ratas recordaban perfectamente cmo salir del laberinto y desalojaron el lugar en menos de un minuto, con menos de cinco errores. Lo que no es claro es si aprendieron realmente dnde quedaba el agujero correcto.

Para complicarles la prueba, le quitaron la caja al agujero refugio. As, todos los hoyos de la plataforma quedaron iguales. Luego pusieron a los dos grupos de roedores all ocho veces ms para completar la secuencia de aprendizaje, al tiempo que contaron el nmero de veces que metan la nariz en cada uno de los huecos. Observamos que las ratas que el da anterior no haban sido sometidas a estrs insistan en meter la nariz en el agujero que antes tena la caja. Esto indica que no olvidaron que estaba ah el hoyo de salida. Por el contrario, aunque las ratas estresadas aprendieron a salirse del laberinto, cuando les quitamos la caja buscaron la salida por igual en todos los hoyos. As, qued claro que los animales estresados no recordaban con claridad la salida, contrario al grupo control, que lo hizo con rapidez, afirma el investigador. No todo es negativo Aunque el estrs prolongado puede generar daos en sistemas y rganos como el cerebro, de este anlisis surge algo positivo. Segn el neurofisilogo, el estrs se convierte en una herramienta fundamental para modificar experiencias anteriores y aprender rpidamente nuevas. Cuando los animales adquirieron satisfactoriamente la tarea espacial fueron sometidos a estrs agudo 24 horas despus del entrenamiento y antes de evaluar su capacidad de recordar la tarea aprendida. Lo que observamos ac es que la extincin de esa memoria o recuerdo es ms rpida en los animales estresados que en los animales control. Estos resultados muestran que el estrs s interfiere parcialmente en la evocacin de memorias previamente adquiridas, y a la vez las hace mucho ms susceptibles de ser modificadas advierte Mnera. Pero en este punto el investigador aclara que esto no es malo, pues el estrs se convierte en una herramienta fundamental para modificar la experiencia anterior y aprender rpido en nuevas circunstancias. Entonces concluimos que el estrs dificulta la adquisicin de conocimiento y hace que este sea ms voltil, pero tambin hace que yo pueda cambiar ms rpido, lo que significa que genera en el individuo la capacidad de adaptarse en la vida, y eso es fundamental para sobrevivir, concluye el investigador.