A. 1950’s
B. Rosalind Franklin – foto X-ray de DNA.
C. Watson and Crick – describieron la
molécula de DNA a partir de la data de
Franklin’s X-ray.
James Watson & Francis Crick James Watson & Francis Crick
Rosalyn Franklin
Acido Deoxiribonúcleico
Núcleotido de DNA
(DNA) Grupo
Fosfato
• Está hecho de nucleó
nucleótidos (molécula de
DNA) en DNA doble hélice.
lice. O 5
• Nucleó
Nucleótido:
tido: O=P-O CH2
1. Grupo fosfato O
O
2. Azú
Azúcar de cinco carbonos
N
3. Base nitrogenada Base Nitrogenada
C4 C1 (A, G, C, or T)
• ~2 nm ancho Azú
Azúcar
(deoxiribosa)
deoxiribosa)
C3 C2
Deoxiribosa
DNA Double Helix
“Escalones”
Escalones”
Bases Nitrogena-
Nitrogena-
das (A,T,G or C)
Patas de la
escalera
Fosfato y
esqueleto
de Ribosa
AoG AoG
ToCoU ToCoU
PAREO DE BASES PAREO DE BASES
Par de # de enlaces Enlaces de Hidrógeno
Purinas Pirimidinas Bases (H-Bonds)
Adenina (A) Timina (T) A=T 2
G C
Guanina (G) Citosina (C) C G 3
3 H-bonds
G C T A
Regla de Chargaff Pregunta:
• Adenina debe parear con Timina • Si en una muestra de DNA hay 30%
• Guanina debe parear con Citosina Adenina,
Adenina ¿cuánta Citosina está
presente?
• Sus cantidades en una molécula de DNA
deben ser más o menos la misma.
misma.
T A G C
Respuesta: Pregunta:
• Habrá 20% de Citosina.
Citosina • ¿Cuá
Cuándo y donde toma lugar el
proceso bioquí
bioquímico llamado
Adenina (30%) = Timina (30%) replicació
replicación del DNA ?
Guanina (20%) = Citosina (20%)
(50%) = (50%)
Pregunta:
• ¿Cuá
Cuándo y donde toma lugar el
proceso bioquí
bioquímico llamado
replicació
replicación del DNA ?
¿Se acuerdan del ciclo celular?
Synthesis Phase (S phase)
• Fase S en interfase del ciclo celular.
¿Qué etapas debe envolver el
• Nucleos de eucariotes
Fase proceso de replicación o
La replicació
replicación del DNA S
ocurre en la fase S. sintesis de DNA..?
G1 interfase G2
Mitosis
-profase
-metafase
-anafase
-telofase
Replicación de DNA
Un mecanismo debe
existir para que la
hélice sea
originalmente
desenrrollada y
estabilizada a una
forma abierta para que
la sintesis pueda
proceder a lo largo de
ambas hebras.
5’ Molé
Molécula Parental de DNA
Tenedor de
Replicació
Replicación
Ligasa de DNA 3’
5’
2. Single-
Single-Strand Binding Proteins (SSBP):
(SSBP)
proteínas que se enlazan y ayudan a
mantener las hebras separadas.
2. Primasa:
Primasa enzima que polimeriza
(sintetiza) el primer de RNA.
DNA
1. DNA Polymerase:
Polymerase con el primer de RNA en
sitio, la DNA Polimerasa (enzima) cataliza
la sintesis de una nueva hebra de DNA en
la direcció
dirección 5’ a 3’
3’.
5’ 3’
Primer
5’
DNA Polimerasa de RNA
Nucleó
Nucleótido
Recuerden!!!! 5 O Recuerden!!!!! 3
Grupo
Fosfato
3 O
O P 5 P
5 5
O=P-O CH2 O
1 G C 3
2
O 4 4
O 3
2 1
O 5
N P P
Bases Nitorgenadas 5
T A 3
C4 C1 (A, G, C, or T) O
Azú
Azúcar O
5
(deoxiribosa)
deoxiribosa) P
P 3
C3 C2
Semiconservativa
Conservativa
Dispersiva
Matthew.S. Meselson y
Replicación de DNA
Franklin.W. Stahl
• Semi-conservativa = cada hebra original de
DNA es un patrón para la nueva hebra
complementaria a la original
• Meselson y Stahl demostraron que la nueva
molecula de DNA sintetizada constaba de
una hebra original (no radioactiva) y de una
nueva hebra (radioactiva) cuando la sintesis
procedía en medio conteniendo nitrogeno
radioactivo.
El Experimento El Experimento
• Crecieron E. coli en un medio de • La diferencia en peso se detectaba al
amonio (NH4+) como fuente de centrifugar. La densidad del DNA
nitrógeno para el DNA y proteínas. determinaba la posición donde se acumulaba
• Hay dos isotopos: 14N y 15N. en el tubo.
• Crecieron E. coli por varias • Entonces transfirieron células vivas que
generaciones en 15NH4+. Este DNA era habián estado creciendo en 15NH4+ a un
medio conteniendo solo 14NH4+ y permitieron
m’as pesado que el normal debido a los
que crecieran por una sola geenración.
‘atomos de 15N.
El Experimento El Experimento
• El DNA en la nueva generación de • Se les permite a las células crecer por
células era exactamente intermediario otra generación.
en densidad entre la generación previa • Resultado: mitad del DNA era normal
y la normal. (14N) y la otra mitad era intermediario
• Conclusión: mitad de los átomos de entre 14N y 15N.
nitrógeno en el nuevo DNA eran 14N y la
otra mitad 15N.
Experimento de Messelson y Stahl
5’ 3’ 5’
DNA Polymerase RNA Primer
Primer
Nucleó
Nucleótidos Polimerasa de DNA de RNA 5’ 3’
3’ 5’
Lagging Strand
3’ 5’
Lagging Strand
3’ Lagging Strand
5’
Replicación Semiconservativa
Replicación de DNA
Molécula original de DNA
• Modelo Semiconservativo:
Semiconservativo:
1. Watson and Crick demostaron:
demostaron: dos hebras
de la molécula parental se separan, y cada una DNA luego de
una ronda de
funciona como un patrón o molde para la
replicación
síntesis de la nueva hebra complementaria.
DNA Template
Parental DNA
DNA luego de
New DNA otra ronda de
replicación
Reparación de DNA Pregunta:
repair:
• Excision repair: • ¿Cuál será la secuencia
1. El segmento dañado es excised por una complementaria de DNA para la
repair enzyme (hay más de 50 repair siguiente secuencia de DNA?
enzymes).
DNA Gyrase
• Una topoisomerasa de DNA que
funciona durante la replicación de DNA
para reducir la tensión molecular
causada por super-enrollamiento. La
girasa produce y luego sella pequeños
rompimientos en la doble hélice.
DNA Ligasa DNAase
• Una enzima que forma un enlace • Una deoxiribonucleasa: una enzima que
covalente entre el extremo 5’de la degrada o rompe DNA a fragmentos o
cadena polinucleótida y el 3’de otra nucleótidos constituyentes.
cadena polinucleótida.
Primasa Resumen
• Enzima que sintetiza el primer de RNA
Resumen
Próximo Tema:
Transcripción
(RNA)