Tercer Cuatrimestre Divisin: Ciencias de la Salud, Biolgicas y Ambientales

Cuaderno de Prcticas Qumica Analtica Unidad 4. Mtodos espectrofotomtricos

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Qu es el cuaderno de prcticas y ejercicios? El cuaderno de prcticas simuladas de laboratorio y ejercicios es una herramienta de actividades formativas que contribuye a desarrollar los conocimientos tericos necesarios para comprender los anlisis qumicos y su realizacin. Los procedimientos a desarrollar que incluyan alguna medicin de sustancia con instrumental de laboratorio son en su totalidad simulados, es decir, se nombraran los pasos a seguir, sin embargo no se realizarn de forma presencial debido a que no se cuenta con el equipo de laboratorio, por lo tanto slo te enfocars en realizar los clculos necesarios para la cuantificacin de sustancias. El presente material se encuentra divido en dos apartados: Prcticas tericas de laboratorio y ejercicios. En el apartado de Prcticas tericas, encontrars los datos necesarios para simular tus prcticas de laboratorio, con base en ello describirs el desarrollo, anlisis de datos, resultados y conclusiones. Adems de realizar una pequea investigacin bibliogrfica sobre el tema de cada prctica, para sustentar el trabajo experimental. Los ejercicios que debes realizar son aplicaciones de los conocimientos adquiridos en los ejemplos, cambiando las variaciones de los reactivos para lograr el objetivo. Debido a que no se pueden realizar las prcticas de forma presencial, se ofrece la alternativa de visitar pginas en internet donde se encuentren videos de las realizaciones de las prcticas. En el apartado de ejercicios debers realizar las acciones sugeridas, de preferencia la totalidad de ellos para poder aplicar despus los conocimientos tericos. Recuerda que la qumica analtica es una ciencia pura que puede ser aplicada en asignaturas posteriores.

Cul es su propsito? El propsito del cuaderno de prcticas y de ejercicios es que reafirmes los conocimientos adquiridos, y que valores la importancia de la aplicacin de los mtodos analticos para las diferentes determinaciones en las diversas reas de la ciencia, de la industria, de servicios, etc.
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Cul es el alcance de las prcticas? Por medio de las prcticas simuladas puedes aplicar los conocimientos de los clculos de las concentraciones, el tipo de reaccin que se realiza, el mtodo que se aplica, la recopilacin de los datos, la forma de expresar los resultados, el anlisis de los resultados y las conclusiones; lo que te apoyar para alcanzar la competencia de la asignatura.

Cul es la estructura textual para reportar las prcticas? Al finalizar la realizacin de una prctica terica de laboratorio, se debe elaborar un reporte de la prctica que contenga los siguientes apartados: Informacin general del reporte de prctica Ttulo de la prctica Marco terico Establecida en la actividad Este apartado responde a las preguntas de qu trata?, por qu se ha realizado?, cmo se elabor? Se debe ofrecer una visin panormica de la prctica. Se especifica lo que se pretende obtener con la realizacin de la prctica. Se enumeran los materiales y reactivos a utilizar especificndose la cantidad requerida. De igual manera, se explican los pasos realizados con los que se logr cumplir con el objetivo de la prctica, as como la obtencin de los datos. Se ordenan los datos en tablas y se realizan las grficas o clculos necesarios, de acuerdo al tipo de prctica realizada. Se analizan los datos, as como las grficas o resultados de las operaciones realizadas. Datos numricos obtenidos del procedimiento realizado durante el desarrollo de la prctica. En este aparatado se debe responder a las siguientes preguntas:

Objetivos Desarrollo Materiales, reactivos y procedimiento Datos

Anlisis de datos

Resultados Conclusiones

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Referencias

a) Qu dicen los datos respecto a la prctica? b) Qu sucedi en la prctica? c) Qu se aprendi al completar esta prctica? Aquellas referencias que hayas consultado. Se debe utilizar el formato APA.

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Introduccin En esta cuarta unidad, analizaremos los mtodos espectrofotomtricos en la regin visible, uv, infrarroja y por absorcin atmica. As como, sus principales aplicaciones en el anlisis qumico. De igual manera, consolidaremos los trminos y procedimientos utilizados en las determinaciones espectrofotomtricas, mediante la resolucin de ejercicios tericos, enfocados principalmente al clculo de concentraciones de sustancias problema, utilizando un patrn mediante la construccin de curvas de calibracin. Finalmente, las prcticas planteadas te permitirn conocer y aplicar los procedimientos a seguir en un laboratorio de anlisis qumico, para caracterizar un analito. Los clculos matemticos basados en la estequiometria, te reforzarn la competencia de habilidad de pensamiento, que te ser de gran utilidad para tu formacin personal y profesional.

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Prcticas

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Actividad 4. Prctica 1: Cuantificacin glucosa en mermeladas. Elaboren la prctica simulada de laboratorio desarrollando nicamente los procedimientos de cuantificacin de sustancias que se indican a continuacin. Antes de iniciar, investiguen cul es la funcin de la glucosa en las mermeladas y que complejo colorido se forma al hacer reaccionar glucosa con el cido 3,5-dinitrosaliclico (DNSA). Posteriormente: 1. Preparen el reactivo DNSA (cido 3,5-dinitrosaliclico): disuelvan 10 g de DNSA en 200 ml de NaOH 2.0M 2. Calienten la disolucin y mezclen perfectamente 3. Disuelvan 300 g de tratrato de sodio y potasio en 500 ml de agua (estabilizante de color) 4. Mezclen ambas disoluciones, agiten y enrasen a 1.0 l con agua destilada Cuantificacin de azcares totales: 1. Pesen 1.0 g de mermelada en un matraz Erlenmeyer y aadan 10 ml de H2SO4 2M 2. Calienten en bao de agua hirviendo durante 20 minutos 3. Dejen enfriar y aadan con mucho cuidado 12 ml de NaOH al 10% p/v 4. Agiten y filtren a un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada 5. Transfieraan 10 ml de la disolucin de la mermelada a otro matraz aforado de 100 ml y enrasar con agua destilada Cuantificacin de azcares reductores: 1. Pesen 3.0 g de mermelada en un matraz Erlenmeyer y aadan 50 ml de agua destilada 2. Calienten y agiten durante 10 minutos 3. Filtren a un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada 4. Transfieran 10 ml de la a otro matraz aforado de 100 ml y enrasar con agua destilada Obtencin de la curva de calibracin: 1. Preparen la solucin estndar de glucosa (15 mg/ml): pesen 1.5 g de glucosa en un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua destilada 2. Etiqueten 5 matraces aforados de 100 ml con las letras A, B, C, D y E 3. En cada matraz transfieran los volmenes de solucin estndar de glucosa y agua destilada de acuerdo a la siguiente tabla:

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Matraz Volumen de solucin estndar de glucosa (ml) Volumen de agua destilada (ml) Concentracin de glucosa (mg/ml)

A 2 98 0.3

B 3 97 0.45

C 6 94 0.9

D 8 92 1.2

E 10 90 1.5

4. Etiqueten y llenen seis tubos de muestra, tal y como se muestra en la siguiente tabla: Nmero de la muestra Solucin estndar de glucosa (matraz) Volumen de solucin estndar de glucosa (ml) Volumen de reactivo DNSA (ml) Volumen de agua destilada (ml) Blanco N/A 0 1 3 1 A 1 1 2 2 B 1 1 2 3 C 1 1 2 4 D 1 1 2 5 E 1 1 2

5. Calienten los tubos en agua hirviendo durante 5 minutos 6. Dejen enfriar los tubos y aadan 6 ml de agua destilada a cada tubo 7. Midan la transmitancia de cada uno de los tubos a 430 nm en el espectrofotmetro Concentracin de glucosa (mg/ml) Transmitancia (lectura del Spektra, T%) 27.54 23.44 20.04 18.21 15.13 14.45 Absorbancia (A) Absorbancia especfica de la glucosa (A Ablanco) 0 0.07 0.13 0.18 0.26 0.28

0 (Blanco) 0.30 0.45 0.90 1.20 1.50

0.56 0.63 0.69 0.74 0.82 0.84

8. Grafiquen los valores de absorbancia vs. Concentracin, para obtener la curva de calibracin

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Medidas de las muestras de mermelada: 1. Coloquen 1 ml de la disolucin de mermelada, 1 ml del reactivo de DNSA y 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo 2. Calienten los tubos en agua hirviendo, durante 5 minutos 3. Dejen enfriar los tubos y aadan 6 ml de agua destilada a cada tubo 4. Determinen la transmitancia de cada tobo en el espectrofotmetro a 430 nm. 5. Los valores obtenidos para las muestras fueron los siguientes: Muestra Transmitancia (lectura del Spektra, T%) 18.6 21.3 Absorbancia (A) Absorbancia especfica de la glucosa (A Ablanco) 0.17 0.11

1 2

0.73 0.67

6. Con la ayuda de la curva estndar, determinen la concentracin de glucosa en las muestras 7. Finalmente, determinen la concentracin de glucosa por gramo de mermelada, no olviden considerar las diluciones de cada una de las muestras 8. Realicen un reporte con los apartados sealadas a continuacin: a) Ttulo de la prctica b) Marco terico c) Objetivos d) Desarrollo (materiales, reactivos y procedimiento) e) Resultados f) Anlisis de resultados g) Conclusiones h) Referencias

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Actividad 6. Prctica 2: Cuantificacin de plomo en material de empaque y dulces de tamarindo Elaboren la prctica simulada de laboratorio desarrollando nicamente los procedimientos de cuantificacin de sustancias que se indican a continuacin. Antes de iniciar, investiguen por qu es importante dejar reposar el material en cido ntrico y enjuagarlo con agua desionizada. Adems, cul es la concentracin de plomo permitida en alimentos por la Secretaria de Salubridad y Asistencia. 1. Laven todo el material a utilizar con jabn libre de plomo, y enjuagenlo con agua de la llave 2. Sumerjan el material en un recipente con HNO3 al 30% 3. Dejenlo tapado y reposando durante 24 horas 4. Enjuaguen el material con agua desionizada. Dejen escurrir y secar pos s solo Preparacin de las muestras: 1. Pesen 200 mg del material de empaque (sin lavar) y coloquenlo en un matraz Kjeldhal con 10 ml de cido ntrico concentrado 2. Calienten en un digestor durante 3 horas, la muestra debe quedar traslcida, si queda mbar, adicionar perxido de hidrgeno gota a gota con agitacin continua 3. Dejen enfriar y filtren a un matraz aforado de 100 ml y enrasen con agua desionizada 4. Trabajen en las mismas condiciones un blanco de reactivo 5. Preparen el espectrofotmetro de absorcin atmica de flama, coloquen la lmpara de ctodo hueco para plomo, empleando la lnea de resonancia a 217 nm, en un sistema quemador de flujo laminar-nebulizador y una flama de aire-acetileno 6. Calibren el espectrofotmetro usando el blanco, ajustando el instrumento a cero 7. Determinen la absorbancia de las disoluciones estndar, de menor a mayor concentracin 8. Determinen la absorbancia de las muestras problema 9. Los resultados de la curva estndar y de las muestras problema son las siguientes: Curva estndar de plomo ppm 0.0 0.1 0.2 0.4 0.8

Blanco Estndar 1 Estndar 2 Estndar 3 Estndar 4

Absorbancia -0.0009 0.0050 0.0084 0.0172 0.0331

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Estndar 5 Estndar 6 Estndar 7

1.2 1.6 2.0

0.0506 0.0663 0.0821

Absorbancias de muestras problema Muestras Empaque (celofn) Empaque (plstico) Dulce + empaque (celofn) Absorbancia 0.0137 0.0075 0.0185

10. Tracen la curva estndar y determinen la concentracin de plomo en las muestras problema 11. Concluyan respecto a la concentracin de plomo encontrada en las muestras y los lmites que establece la Secretara de Salubridad y Asistencia 12. Realicen un reporte con los apartados sealadas a continuacin: a) Ttulo de la prctica b) Marco terico c) Objetivos d) Desarrollo (materiales, reactivos y procedimiento) e) Resultados f) Anlisis de resultados g) Conclusiones h) Referencias

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Ejercicios

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4.1 Espectrofotometra 1. Convertir los siguientes valores de absorbancia en tanto por ciento de transmitancia: a) 0.375 b) 1.325 c) 0.012 2. Convertir los siguientes valores de tanto por ciento de transmitancia en valores de absorbancias: a) 33.6 b) 92.1 c) 1.75 3. Del anlisis de los siguientes resultados experimentales, comprueba si hay o no cumplimiento de la ley de Beer: C (M) 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 %T 30 40 50 60 70

4. A 575 nm (la longitud de onda de absorcin mxima del complejo) las disoluciones del quelato CuX22+ cumplen la ley de Lambert-Beer en una amplia gama de concentraciones. Ni el Cu2+ ni el ligando X absorben a esta longitud de onda. Una disolucin 3.4 x 10-5 M de CuX22+ en una celdilla de 1 cm de paso ptico tiene una transmitancia de 18.2 %. a) Calcular la absorbancia de esta disolucin. b) Calcular la absorbancia de una disolucin del quelato CuX22+ cuya transmitancia a esta longitud de onda es del 36.4%. 5. Se pesan 500 mg de una muestra que contiene un compuesto coloreado X, se disuelven y se diluyen a 500 ml. La transmitancia de una alcuota de esta solucin, medida a 400 nm y en cubetas de 1 cm de paso, es de 35.5%. Se pesan 10 mg de sustancia X pura, se disuelven en el mismo solvente y se diluyen a 1 litro; su transmitancia medida en las mismas condiciones es 50.2%. Cul es el porcentaje de X en la muestra original? 6. El anlisis del contenido de calcio en una suspensin oral se muestra a continuacin: 5.0 ml de la suspensin son tratados con 5.0 ml de HCl 6.0M y lla
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mezcla se lleva a ebullicin por 30 minutos. la solucin anterior se filtra y se afora a 25 ml con agua destilada. De la solucin anterior se toman 2.0 ml y se aforan a 100 ml con agua destilada, la absorbancia de esta solucin fue de 0.079. Cul ser la cantidad de calcio en la muestra original (mg/ml) si una solucin patrn de calcio de 2.0 ppm, reporta una absorbancia de 0.123 bajo las mismas condiciones. 7. Una alcuota de 25.0 ml de una disolucin problema de quinina se diluy a 50.0 ml y, al ser medida en un espectrofotmetro con b= 1 cm present una absorbancia de 0.416 a 348 nm. Una segunda alcuota de 25.0 ml se mezcl con 10.0 ml de una disolucin de quinina cuya concentracin es de 23.4 mg/l; luego de diluir esta mezcla a 50.0 ml present una absorbancia de 0.610 para b= 1cm. Calcula la concentracin de quinina en la muestra expresada en ppm. 8. El anlisis de oro puede llevarse a cabo por espectrofotometraextractiva (en forma del complejo bromoauratotri-octilfosfina). Para ello, una muestra de 0.500 g de mineral se trata con agua regia y se lleva a un volumen de 500 ml. A 25 ml de una disolucin que contena in bromuro y cido fosfrico en exceso se agrega 5 ml de la disolucin de la muestra y se agitan con 5 ml de disolucin clorofrmica de xido de trioctilfosfina. Suponiendo que se extrae el 90% del oro a la fase orgnica, la absorbancia del extracto orgnico fue de 0.780 unidades utilizando celdillas de 1.00 cm de paso ptico. Con un patrn de oro que contena 1000 g por cada 5 ml de fase orgnica se tomaron volmenes de 0, 0.5, 1.0, 2.0 y 2.5 ml y se llevaron a 10 ml con Cloroformo. Las absorbancias obtenidas fueron las siguientes: V ml Abs. 0 0.040 0.5 0.230 1.0 0.420 1.5 0.610 2.0 0.800 2.5 0.990

a) Calcular el porcentaje de oro en la muestra. 9. La determinacin de cobre, por absorcin atmica en llama, en muestras de suspensiones custicas producidas durante la fabricacin de sosa, se llevaron a cabo por el siguiente procedimiento: Una muestra de 200 ml de la disolucin custica, tras el tratamiento adecuado, se lleva a un volumen de 500ml. Utilizando absorcin atmica, y con patrones de Cu. Se obtienen los resultados que se representan en la tabla. Disolucin blanco Patrn 1 Patrn 2 Patrn 3 Patrn 4 ppm de cobre 0 0.20 0.50 1.00 2.00 Absorbancia 0.007 0.014 0.036 0.072 0.230

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Muestra

--

0.027

a) Determinar la concentracin de cobre en la suspensin custica. 10. Cuando una solucin de 8.50x10-5 del compuesto A es medida en una celda de 1.0 cm reporta una absorbancia de 0.129 y 0.764 a 475 y 700 nm, respectivamente. Una solucin de concentracin de 4.65x10-5 M del compuesto Bexhibe absorbancias de 0.567 y 0.083 bajo las mismas condiciones. Calcula la concentracin de A y B en una solucin que reporte las siguientes absorbancias en una celda de 1.25 cm: a) 0.502 a 475 y 0.912 a 700 nm 11. En qu posiciones aproximadas absorbern en el IR los siguientes compuestos?

12. La siguiente tabla contiene los valores de absorbancia de una curva estndar para determinar protenas totales en una muestra de plasma: Cantidad de protena (mg) 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 Absorbancia 0.100 0.188 0.272 0.392 0.430 0.496

Cul ser la cantidad de protenas en una muestra de plasma, cuyo valor de absorbancia fue de 0.406?

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