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Efeito de Saccharomyces cerevisiae na produtividade de sorgo e na severidade de doenas foliares no campo

Effect of Saccharomyces cerevisiae on sorghum productivity and on leaf disease s everity in the field

Everaldo Piccinin; Robson M. Di Piero; Srgio F. Pascholati Laboratrio de Fisiologia e Bioqumica Fitopatolgica, Departamento de Entomologia, Fi topatologia e Zoologia Agrcola, Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz", Cx. Postal 09, CEP 13418-900, Piracicaba, SP, Fax (019) 3434-4839, e-mail: sfpa scho@esalq.usp.br

RESUMO Saccharomyces cerevisiae uma levedura com potencial para o controle de doenas de plantas, pois apresenta a capacidade de sintetizar compostos antibiticos, habilid ade de competio por espao e nutrientes no filoplano de muitas espcies vegetais, alm d e possuir elicitores na parede celular. O presente trabalho teve como objetivos avaliar a produtividade de duas cultivares de sorgo (Sorghum bicolor) tratadas c om a levedura, e verificar o controle da antracnose, causada por Colletotrichum sublineolum e da mancha foliar, provocada por Exserohilum turcicum. Os experimen tos foram conduzidos em campo, em um delineamento de blocos ao acaso, com sete t ratamentos e quatro repeties. Aplicaes semanais de S. cerevisiae (Fermento Biolgico F leischmann 25 mg/ml) reduziram significativamente a antracnose em sorgo cv. Tx-3 98B e melhoraram a produtividade da mesma. Na cv. 910753, uma nica aplicao com a le vedura foi suficiente para reduzir o progresso da mancha foliar, porm a produtivi dade no foi elevada por qualquer um dos tratamentos. Conclui-se que S. cerevisiae apresenta um bom desempenho no campo para o controle de doenas foliares em sorgo , melhorando ou no comprometendo a produtividade da cultura, na dependncia da cult ivar utilizada. Palavras-chave adicionais: antracnose, mancha foliar, controle biolgico, induo de r esistncia. ABSTRACT Saccharomyces cerevisiae is a yeast with potential to control plant diseases by producing antibiotic compounds. It has shown, a great ability to compete at phyl oplane for space and nutrients and by having elicitors in the cell walls. The pr esent study was carried out to evaluate the productivity of sorghum (Sorghum bic olor) plants treated with the yeast and control of sorghum leaf diseases caused by Colletotrichum sublineolum and Exserohilum turcicum. The trials were conducte d in the field, in a randomized block design, with seven treatments and four rep licates. Weekly sprayings with commercial baker's yeast (Fermento Biolgico Fleisc hmann 25 mg/ml) significantly reduced the anthracnose on sorghum Tx-398B cultiva r and improved its production. On the other hand, for the 910753 cultivar, a sin gle yeast application was enough to reduce leaf spot progress, although producti on was not increased by any of the treatments. Thus, S. cerevisiae was able to c ontrol sorghum leaf diseases in the field, either improving or maintaining produ

ctivity, depending upon the cultivar used. Additional keywords: anthracnose, leaf spot, biological control, resistance.

INTRODUO O sorgo (Sorghum bicolor Moench) um dos principais cereais cultivados e consumid os no mundo, passando a ter destaque na economia agrria do Brasil a partir da dcad a de 80 (Roque & Guatimosim, 1985). Entre os graves problemas da cultura, a antracnose causada pelo fungo Colletotri chum sublineolum Ces (Wils) e a mancha foliar de Exserohilum turcicum (Pass.) se destacam em virtude da ampla ocorrncia nas regies produtoras e pelas altas perdas provocadas. So doenas favorecidas por temperaturas na faixa de 22 a 28 oC e alta umidade relativa do ar (Frederiksen, 1991). O controle dessas doenas se d principalmente pela utilizao de resistncia varietal. No entanto, o elevado nmero de raas desses fungos tem levado os pesquisadores a busc arem medidas alternativas de controle, nas quais se encaixam o controle biolgico e a induo de resistncia (Pascholati, 1998). Diversos trabalhos mostraram o potencial de Saccharomyces cerevisiae Meyen em co ntrolar doenas de plantas. A levedura, formulada como Fermento Biolgico Fleischman n, protegeu plantas de sorgo contra C. sublineolum na dose de 1 mg/ml do ferment o, em casa de vegetao. No campo, os melhores resultados foram obtidos com as doses de 15 a 25 mg/ml, em intervalos de tempo entre o tratamento com a levedura e a inoculao do fitopatgeno inferiores a sete dias (Lopez, 1991). A aplicao do filtrado de cultivo de S. cerevisiae em folhas de caf (Coffea arabica L.), 72 h antes da inoculao com Hemileia vastatrix Berk. et Br., agente causal da ferrugem, induziu resistncia ao patgeno (Martins et al., 1986). J no tratamento uti lizando o fermento comercial, Roveratti (1989) encontrou correlao entre a proteo das plantas de caf e efeitos diretos sobre H. vastatrix (reduo do nmero de uredosporos presentes na superfcie foliar e inibio da germinao dos que restaram nas folhas), sem evidenciar a induo de resistncia nas plantas. Segundo o mesmo autor, a maior reduo na severidade da ferrugem foi obtida quando o tratamento com a levedura foi efetua do at duas semanas antes da inoculao com H. vastatrix, utilizando-se concentraes igua is a ou maiores que 20 mg/ml do produto comercial. At o momento, poucos estudos foram conduzidos para se avaliar a produtividade das plantas tratadas com S. cerevisiae. Assim, tendo em vista os resultados j alcanad os com a levedura, e considerando a fcil disponibilidade para aquisio ou cultivo da mesma, o presente trabalho teve como objetivos avaliar a produtividade de duas cultivares de sorgo tratadas com o fermento biolgico comercial e verificar a prot eo dessas cultivares contra a antracnose e a mancha foliar, em campo.

MATERIAL E MTODOS Cultivares de sorgo utilizadas e instalao do campo experimental Foram utilizadas as cultivares de sorgo granfero Tx-398B (suscetvel a C. sublineol um) e 910753 (suscetvel a E. turcicum), plantadas no espaamento de 1 m entrelinhas e dez plantas/m, em campo experimental do Setor de Fitopatologia, ESALQ/USP. Se mentes de ambas as cultivares foram fornecidas pelo Centro Nacional de Milho e S

orgo/EMBRAPA, Sete Lagoas, MG. As cultivares foram semeadas em reas vizinhas, sep aradas por uma bordadura central de 2 m, constituda por cultivares de sorgo resis tentes aos patgenos. Para cada cultivar foram elaborados quatro blocos contendo s ete linhas de plantio, e uma linha de plantio com 5 m de comprimento constituiuse a unidade experimental. Tratamentos realizados Foram realizados sete tratamentos nos dois campos estudados: (A) testemunha no-in oculada; (B) testemunha inoculada; (C) levedura aplicada uma nica vez, 24 h antes da inoculao com o fitopatgeno; (D) levedura aplicada uma nica vez, 24 h aps a inocul ao; (E) levedura aplicada semanalmente; (F) fungicida aplicado semanalmente; (G) f ungicida aplicado uma nica vez, 24 h antes da inoculao. Cada tratamento contou com quatro repeties (uma repetio/bloco). A levedura empregada foi S. cerevisiae, formulada comercialmente (Fermento Biolgi co Fleischmann), adquirida no mercado na forma de tabletes de 15 g, e utilizada nas plantas em dosagem de 25 mg/ml. As pulverizaes das suspenses de levedura, prepa radas no momento de uso, foram realizadas aps as 17 h do dia e feitas de modo a c obrir toda a superfcie foliar at o ponto de escorrimento. O fungicida utilizado fo i o Propiconazole, na dose de 2,5 ml/litro de gua destilada. Produo de inculo e inoculao das plantas Colletotrichum sublineolum foi cultivado em meio de aveia, sob luz U.V. (340 nm) , a 23 oC durante 15 dias. No campo semeado com a cv. Tx-398B, cada planta foi i noculada com 10 ml de uma suspenso de esporos do fungo (4x105 esporos/ml), aplica da em todas as folhas das plantas, exceo feita para as plantas do tratamento (A). No caso de E. turcicum, o patgeno foi cultivado em gros de sorgo mantidos em frasc os erlenmeyers de 250 ml. Cada frasco recebeu 50 g de gros mais 40 ml de gua desti lada e foi autoclavado duas vezes, com um intervalo de 24 h entre as autoclavage ns. Foram repicados seis discos de meio de cultura BDA (0,5 mm dimetro) contendo crescimento micelial do fungo em cada frasco, e a incubao se deu a 25 oC, sob cond io de escuro, em estufa comum. Aps 40 dias, os gros estavam tomados pelo patgeno e fo ram utilizados para a inoculao das plantas da cultivar 9107053, realizada atravs da adio de trs gros colonizados no cartucho de cada uma das plantas, exceo feita para as plantas do tratamento (A). A inoculao em ambos os campos foi realizada aos 37-38 dias aps a semeadura, quando as plantas se encontravam no estgio fenolgico 15 (Frederiksen, 1991). Avaliao dos ensaios As avaliaes de severidade das doenas foram iniciadas cinco dias aps as inoculaes, send o realizadas avaliaes semanais em cada ensaio durante seis semanas. Foram amostrad as 20 plantas/tratamento (cinco plantas/unidade experimental).

Para a cultivar Tx-398B, inoculada com C. sublineolum, utilizou-se uma escala di agramtica como referncia para estimar a severidade da antracnose (Piccinin, 1995). Para a cultivar 9107053, a severidade foi estimada a partir da rea foliar lesion ada em relao rea foliar total. A frmula largura da leso x comprimento da leso x p/4 f i adotada para se calcular a rea de cada leso de E. turcicum (leses semelhantes a e lipse) (Kochman & Brown, 1975), enquanto a rea foliar foi determinada atravs da frm ula comprimento foliar x largura foliar x 0,75 (Francis et al., 1969). A medida utilizada para a anlise estatstica dos tratamentos foi a rea sob a curva de progres so da doena, calculada por interpolaes lineares entre os nveis de doena nas sucessiva s datas de avaliao da severidade. A colheita foi realizada aos 110 e 140 dias aps o plantio dos campos com TX-398B

e 9107053 respectivamente, e as panculas foram secas durante sete dias em estufa com circulao de ar forado a 45 oC. Os gros foram ento retirados e pesados para a comp arao da produtividade dos tratamentos em cada um dos ensaios.

RESULTADOS E DISCUSSO O clima chuvoso que predominou durante a conduo do experimento favoreceu a dissemi nao de C. sublineolum entre plantas, demonstrada pela elevada severidade da antrac nose no tratamento onde as plantas no foram artificialmente inoculadas (Figura 1) , bem como favoreceu as epidemias nas cultivares Tx-398B (suscetvel a C. sublineo lum) e 9107053 (suscetvel a E. turcicum).

Nesse ambiente, uma nica aplicao com a levedura S. cerevisiae no foi eficaz no contr ole da antracnose (Figura 1) e tambm no trouxe benefcios produo da cultivar Tx-398B ( Figura 2). Por outro lado, aplicaes semanais reduziram a velocidade de progresso d a doena, em magnitude semelhante ao tratamento com fungicida (Figura 1). Esse atr aso na evoluo da epidemia de antracnose pode ter contribudo para o aumento de produ tividade verificado em plantas de sorgo tratadas semanalmente com a levedura ou com fungicida em relao testemunha inoculada. Deve-se ressaltar que no houve diferena s estatsticas quanto produo entre os tratamentos quando comparados pelo teste de Tu key a 5% (Figura 2), entretanto, contrastando os quatro primeiros tratamentos co ntra os trs ltimos (levedura semanal, fungicida semanal e fungicida uma vez) encon trou-se um aumento significativo para a produo do segundo grupo, atravs do teste F.

O resultado foi diferente no campo inoculado com E. turcicum. Houve reduo na quant idade de doena mesmo com uma nica aplicao da levedura, independente do tempo de pulv erizao (Figura 3). No entanto, tratamento algum propiciou aumento significativo na produtividade da cultivar 910753 (Figura 4), mostrando que essa cultivar aprese nta tolerncia mancha foliar.

A ao de S. cerevisiae no controle das doenas pode ocorrer diretamente sobre os fito patgenos atravs de mecanismos de antibiose e competio por espao e por nutrientes. Sil va & Pascholati (1992) demonstraram que, alm das suspenses de clulas de S. cerevisi ae, o filtrado de cultivo da levedura inibiu a germinao de esporos e a formao de apr essrios por Colletotrichum graminicola (Ces.) G.W. Wils. e protegeu plantas de mi lho (Zea mays L.) contra o fitopatgeno. Resultados semelhantes com preparaes da lev edura foram encontrados por Stangarlin & Pascholati (1994) na interao milho x E. t urcicum, os quais reforam a antibiose como um modo de ao importante de S. cerevisia e. Sabe-se, ainda, que espcies do gnero Colletotrichum precisam de fonte de energia e xterna ao condio para germinarem. Nesse sentido, as leveduras, constituindo efici entes competidoras por acar no filoplano da maioria das espcies cultivadas, represe ntam uma alternativa para o controle desse tipo de fitopatgeno (Windels & Lindow, 1985; Tokeshi, 1991). Outro aspecto a considerar a presena de elicitores nas clulas e preparaes de S. cere visiae (Hahn & Albersheim, 1978; Wullf & Pascholati, 1999), os quais ativam os m ecanismos de defesa da planta, contribuindo para o controle de doenas. Lopez (199 1) demonstrou que plantas de sorgo pr-tratadas com o fermento biolgico apresentara m aumento no acmulo de compostos fenlicos em resposta inoculao com C. sublineolum, s ugerindo que a levedura pode modificar o metabolismo da planta no sentido de ind uzir resistncia contra o patgeno. Uma desvantagem apontada para a induo de resistncia que a ativao dos mecanismos de de fesa desviaria parte da energia utilizada no metabolismo normal da planta, compr ometendo a produtividade. Essa desvantagem contestada por alguns que afirmam que o indutor leva a planta a um estado de alerta, a energia para defesa sendo gast a apenas quando do reconhecimento do fitopatgeno pela planta induzida (Piga et al ., 1997).

A relao custo-benefcio para a planta onde existe o envolvimento da induo de resistncia carece de maiores estudos. No presente trabalho, houve exposio constante das cult ivares de sorgo a elicitores de S. cerevisiae (nas parcelas onde houve aplicao sem anal da levedura), e o rendimento dessas parcelas foi vantajoso (cv Tx-398B) ou no foi comprometido (cv 910753), dando suporte hiptese da manuteno de um estado de a lerta na planta. No entanto, faz-se necessrio caracterizar melhor o quanto da pro teo conferida pela levedura ocorre por controle direto dos fitopatgenos e qual a re al participao da resistncia induzida nas interaes aqui estudadas. Alm disso, determina sobre as doses e freqncias de aplicao da levedura so fundamentais na tentativa de se deslocar a relao custo-benefcio a favor da melhor produtividade possvel da cultura de sorgo conduzida em clima favorvel a doenas foliares. Atualmente, existem produtos comerciais que contm elicitores derivados da parede celular de S. cerevisiae na sua composio. Alguns desses produtos esto registrados c omo biofertilizantes e tm mostrado efeitos positivos no controle de doenas em plan tas quando utilizados em conjunto com fungicidas tradicionais, embora publicaes ci entficas no estejam disponveis at o momento (Tosun, 2002). A utilizao de agentes de biocontrole/indutores de resistncia, tal como S. cerevisia e, dificilmente ir substituir por completo o uso de fungicidas tradicionais, mas pode contribuir em muito para o controle integrado de doenas de plantas, principa lmente nos casos onde pequena a disponibilidade de materiais de interesse agronmi co resistentes e em reas propensas seleo de linhagens patognicas insensveis a fungici das.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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Aceito para publicao em 30/11/2004

Autor para correspondncia: Srgio Florentino Pascholati