Biossegurana em Biotrios de Criao e Experimentao Animal

Ktia Teixeira dos Reis Biotrio de Experimentao Animal do CPqRR Biossegurana o conjunto de aes voltadas para a preveno; minimizao ou eliminao de riscos inerentes s atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e prestao de servios, que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do meio ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos. H uma grande complexidade em relao s maneiras seguras no manejo com os animais, pois existe a possibilidade de riscos, tanto para o homem quanto para o animal. Animais de laboratrio representam um risco para quem os maneja, independentemente de estarem ou no infectados, pois podem carrear agentes patognicos, inclusive zoonticos. Todas as pessoas que esto envolvidas no trabalho com estes animais devem ter conscincia deste risco. Atualmente so conhecidas mais de duzentas Zoonoses. Zoonoses so infeces transmitidas naturalmente entre animais vertebrados e o homem por agentes biolgicos patognicos. Os animais devem ser considerados como fonte potencial de infeco, embora no apresentem sinais aparentes de doena. Classificao dos Animais quanto ao Status Sanitrio: O manejo na criao e manuteno de animais de laboratrio pode ser atravs de tcnicas que resultaro em animais livres de qualquer forma de vida associada (Vrus, Bactrias, Fungos, Protozorios, Helmintos, etc). De acordo com o status sanitrio que apresentam os animais de laboratrio podem ser: - Gnotobiticos Possuem uma microbiota associada conhecida. - Germ Free Animais totalmente isentos de germes. - Specific Patogen Free (SPF) Animais isentos de Agentes Patognicos Especficos. - Animais Convencionais Animais que possuem microbiota indefinida. A classificao dos animais em Gnotobiticos, Germ Free, SPF ou convencionais est relacionada com o padro sanitrio em que vivem nos biotrios. Quanto mais eficiente so as barreiras sanitrias dos biotrios, sejam estes de Criao ou Manuteno/Experimentao, menores as chances de contaminao dos animais. Barreiras Sanitrias: As Barreiras Sanitrias so imprescindveis nos Biotrios de Criao e Manuteno/Experimentao. So definidas como mecanismos fsicos, qumicos e biolgicos que dificultam ou minimizam os efeitos

da interao entre agentes biolgicos de risco com o homem e o animal e que so necessrias de acordo com o grau de risco do agente envolvido. Exemplos de Barreiras Sanitrias: Materiais utilizados na construo dos Biotrios, equipamentos para filtrao de ar, autoclaves, higiene pessoal da equipe de funcionrios do setor e dos usurios de animais, presso diferencial entre ambientes, compostos qumicos utilizados em desinfeco e esterelizao, etc. Nveis de Biossegurana recomendados no uso de animais infectados:
Nvel de biossegurana 1. Baixo risco individual e comunitrio. 2. Moderado risco individual e comunitrio podendo causar patologias ao homem ou ao animal. 3. Risco individual elevado, risco comunitrio baixo 4. Elevado risco individual e comunitrio Prticas e tcnicas Manejo padro para colnias convencionais Uso obrigatrio de jaleco e luvas, descontaminao dos dejetos infectados e das gaiolas dos animais antes da higienizao, acesso limitado e sinalizao para alerta de riscos. Prticas do nvel 2, mais: uniforme especial e acesso controlado Equipamentos de segurana _______ Bsicas Instalaes

Barreira parcial (guich de desinfeco), uso de EPIs (mscara, culos protetor, etc.) para a manipulao de agentes ou animais infectados que produzem aerossis. Os do nvel 2, porm, devem ser usados para todos os tipos de manipulaes com animais infectados. Prtica do nvel 3, mais: troca de Barreiras mximas, isto , classe roupa de rua por uniforme III de segurana biolgica ou especial em vestirio, ducha na barreira parcial em combinao sada, descontaminao de com: Proteo total do corpo com todos os dejetos antes de sua uma pea nica dotada de retirada do infectrio. ventilao e presso positiva, gaiolas dotadas de filtros, estantes com fluxo laminar, etc

Bsicas

Alta segurana

Segurana mxima

Regras importantes para o trabalho seguro em Biotrios de Criao e experimentao animal: 1 - No somente os tcnicos devem ter conscincia dos perigos existentes, alguns dos quais especficos para cada rea, mas, tambm os pesquisadores e o pessoal de apoio que tem acesso ao biotrio. 2 - Em relao ao ambiente de trabalho, alguns odores animais so agressivos para seres humanos. Grande parte destes odores produzida pela decomposio bacteriana dos excrementos, porm no se deve usar produtos que os mascare, pois, podem ser extremamente nocivos aos animais. Esses odores devem ser controlados por procedimentos rotineiros de limpeza e ventilao adequados. As pessoas que trabalham nestes ambientes obrigatoriamente devem usar mscaras . O mais comum e mais srio dos contaminantes ambientais dos biotrios o amonaco (NH3), que se forma pela ao das bactrias (urease positiva) sobre os excrementos. A concentrao do amonaco influenciada por muitos fatores, como: ventilao, umidade relativa, nmero de animais por gaiola, alimentao, etc. 3 - Nas salas de infeco dos animais (Infectrios) comum o uso de ter. Este produto, alm de produzir sintomas como dor de cabea, cansao e irritabilidade, pode apresentar perxidos altamente explosivos que j foram responsveis por graves acidentes em laboratrios onde se realizava experimentos com animais. Substituir este mtodo de anestesia por outro. 4 - Todos os bioteristas ou estudantes/pesquisadores que trabalham com animais sejam estes infectados ou no, devem ter treinamentos especficos e serem informados sobre todos os riscos a que esto sujeitos, bem como as maneiras de se proteger e evit-los. 5 - Monitoramento cuidadoso da sade dos animais e dos tcnicos a fim de se evitar doenas que podem ser transmitidas do homem para os animais e vice-versa. 6 - A higiene pessoal constitui uma importante barreira contra infeces. O hbito lavar as mos antes e aps manipular qualquer animal, reduz o risco de disseminar doenas, bem como o de auto-infeco. 7 - obrigatrio o uso de luvas para qualquer procedimento nos biotrios (criao e experimentao). Ao manipular agentes patognicos, em biotrios experimentais, utilizar luva dupla. 8 - Uniforme completo (Jaleco de mangas compridas e longo, cala exclusiva para uso no biotrio, mscara, gorro, pantufas, etc) 9 - Fumar, comer ou beber no permitido dentro dos biotrios ou em qualquer outra rea em que existam microorganismos patognicos. 10 -Qualquer ferimento na pele do tcnico, ou estudante, ou pessoal de apoio, deve ser devidamente protegido antes de se iniciar a manipulao de animais e agentes patognicos. 11 - As roupas de laboratrio usadas em reas de risco devem ser autoclavadas antes de serem lavadas.

12 - Se agentes altamente infecciosos ou nocivos so usados, o animal deve ser isolado em unidade de fluxo laminar ou mesmo em isoladores, nos quais o ar que entra e sai convenientemente filtrado, atravs de filtros absolutos. 13 - Necrpsias de animais infectados com organismos altamente contagiosos devem ser feitas em gabinetes ventilados, que permitam a filtragem do ar. 14 - O material descartado (proveniente de necrpsia, carcaas de animais infectados, etc) deve ser identificado e autoclavado. Se possvel incinerado. 15 - Avaliao sorolgica peridica do pessoal, considerando o agente de risco. 16 - O pessoal deve receber, anualmente, reforo de treinamento ou treino adicional quando houver mudanas de procedimentos. 17 - Gaiolas devem ser apropriadamente descontaminadas, preferencialmente por autoclave, antes da limpeza e lavagem. 18 - Equipamentos e superfcies de trabalho devem ser descontaminadas com desinfetante apropriado, em uma rotina bsica, aps o trmino do trabalho com materiais infecciosos e especialmente aps derrame, gotejamento ou outra forma de contaminao com material infeccioso. 19 - Gabinetes de fluxo laminar, contenes fsicas e/ou equipamentos de proteo individual (respiradouros, mscaras faciais) devem ser usados sempre que procedimentos com alto potencial de formao de aerossis so realizados. 20 - Aventais, jalecos ou uniformes so vestimentas de proteo usadas nas reas de animais, devendo ser retiradas antes de sair. 21 - Os biotrios devem ter um programa de segurana que inclui equipamentos de combate a incndio, instrues para o uso correto de equipamentos e treinamento de primeiros socorros. 22 - Todo o pessoal que trabalha com animais deve saber manipular corretamente todas as espcies envolvidas, para a segurana e sade deles prprios, bem como dos animais. Acidentes que geralmente ocorrem em biotrios: A) Ferimentos causados por animais (arranho, mordedura, etc) A conteno do animal efetuada de maneira adequada evita este tipo de acidente. B) Cortes causados pelas gaiolas, tampas ou outro material; C) Quedas causadas por pisos escorregadios ou degraus; D) Tores causadas por objetos pesados, levantados incorretamente; E) Ferimentos nos olhos e pele, quando da utilizao incorreta de agentes qumicos.

 imprescindvel a notificao IMEDIATA de possveis acidentes que venham ocorrer nos biotrios.

Riscos Ambientais nos biotrios: Fsicos Rudos, Temperatura, luminosidade Qumicos Poeiras, gases, vapores Biolgicos Agentes patognicos (Bactrias, Fungos, Helmintos, Protozorios, etc). Mecnicos Equipamentos, ligaes eltricas e ferramentas Ergonmicos Trabalho exaustivo, postura incorreta, levantamento de pesos, etc. Homem x Animais de Experimentao Um grande engano que se comete entender que infeco sinnimo de doena. Infeco ocorre sempre que um agente vivo penetra no interior de um organismo hospedeiro causando ou no doena. A doena nem sempre visualizada. No caso dos animais de laboratrio, a maioria das doenas so subclnicas , aparecendo apenas em caso de desequilbrio extremo da relao bioterista/animal. Principais agentes biolgicos de risco cujo reservatrio so os roedores, lagomorfos e aves Doenas Virais: Febre Hemorrgica Coreana Agente: Hospedeiros: Sintomatologia: Vrus Hantaan camundongos e ratos Febre, Cefalia, hemorragias, insuficincia renal e choque.

Coriomeningite Linfoctica (LCM) Agente: Hospedeiros: Sintomatologia: Vrus da Coriomeningite Linfoctica camundongos, ratos, hamsters, Cobaias. Semelhante gripe

Doenas por riqutsias e clamdias: Psitacose (febre do papagaio, ornitose) Agente: Hospedeiros: Sintomatologia: Chlamydia psittaci. Hospedeiros: camundongos, coelhos, aves. Pneumonia.

Febre Maculosa das Montanhas Rochosas Agente: Hospedeiros: Vetor: Sintomatologia: Rickettsia rickettsia Roedores silvestres, ces , cavalos, etc carrapatos erupo cutnea, febre, cefalia, mal estar e hepatoesplenomegalia.

Tifo Murino Agente: Hospedeiros: Vetor: Sintomatologia: R. typhi Camundongos Pulgas erupo cutnea, febre, cefalia, mal estar e hepatoesplenomegalia.

Doenas Bacterianas: Leptospirose Agente: Hospedeiros: Sintomatologia: Leptospira interrogans roedores Febre, vmito, anorexia, urina amarelo-esverdeada e ictercia.

Campilobacteriose Agente: Hospedeiros: Sintomatologia: Preveno: Salmonelose Agente: Hospedeiros: Sintomatologia: Preveno: Salmonella spp Muitos animais e aves Febres entricas, enterocolites e septicemias. Medidas sanitrias e uso de E. P. I.s Campylobacter jejuni Muitos animais e aves Diarria medidas sanitrias

Doenas por fungos (micoses): Histoplasmose Agente: Hospedeiros: Sintomatologia: Preveno: Cryptococose Agente: Hospedeiros: Sintomatologia: Preveno: Cryptococcus neoformans Aves Meningite crnica Uso de EPIs Histoplasma capsulatum Aves (especialmente pombos) pneumonite Uso de EPIs

Doenas por protozorios: Toxoplasmose Agente: Hospedeiros: Toxoplasma gondii Roedores, gatos e aves

Amebases, Giardases Infeces e/ou infestaes por Helmintos: Cestodase Agente: Hospedeiros: Preveno: Hymenolepis nana Ratos, camundongos, hamsters. vermifugao e medidas sanitrias de controle.

Infestao por artrpodes: Os artrpodes de roedores como caros, pulgas e piolhos representam uma importante fonte de risco biolgico para o ser humano, principalmente no que se refere s reaes de hipersensibilidade. A caros: Camundongos Myobia musculi (mais patognico), Myocoptes musculinus. Ratos Radfordia ensifera Coelhos - Psoroptes, Sarcoptes B Piolhos: Camundongos e ratos Poliplax Coelhos Haemadipsus Mordidas e arranhaduras: A Febre da mordida do rato: Agente: Streptobacillus moniliformes, Spirillum minor Hospedeiro: Ratos

Bibliografia Biossegurana em Experimentao animal Um enfoque microbiolgico Jonas Borges da Silva. 1998. Procedimento Operacional N 340000.014 /CECAL/FIOCRUZ Biossegurana em Biotrio. Manual para experimentao animal Tnia Arajo Jorge e Solange Lisboa de Castro 2000 Ed.Fiocruz. Animais de Laboratrio Criao e Experimentao- Antenor Andrade et al, 2002 Ed Fiocruz