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qwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyui opasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfgh jklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvb nmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwer Microbiologa Ambiental Universidad Nacional Daniel Alcides tyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopas Carrin dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzx cvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmq wertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuio

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Abril del 2013 Ing. Lucio Rojas Vitor

LA MICROBIOLOGA 1. Definicin de Microbiologa:


Es la ciencia que trata de los seres vivos muy pequeos que antiguamente se le denominaba microbios, concretamente de aquellos cuyo tamao se encuentra por debajo del poder resolutivo del ojo humano. La Microbiologa deriva de 3 palabras griegas: mikros (pequeo), bios (vida) y logos (ciencia) que conjuntamente significan el estudio de la vida microscpica. Son demasiado pequeos como para verlos a simple vista. En este grupo se incluyen las bacterias, hongos (levaduras y hongos filamentosos), virus, protozoos y algas microscpicas.

Segn las estimaciones ms habituales, slo un 10% de los microbios o microorganismos existentes en la biosfera han sido estudiados hasta el momento. Por lo tanto, a pesar de que han pasado ms de 300 aos desde el descubrimiento de los microorganismos, la ciencia de la microbiologa se halla todava en su infancia en comparacin con otras disciplinas biolgicas tales como la zoologa, la botnica.

Entre las ramas que estudia la microbiologa tenemos: Bacteriologa Micologa Virologa Parasitologa El medio para ser estudiado a los microorganismos est determinado por: Microscopio Tcnicas de cultivo puro en laboratorio

1.1 Microbiologa como ciencia


La Microbiologa como ciencia no se desarroll hasta la ltima parte del siglo XIX. Este largo retraso se debe a que adems del microscopio, fue necesario idear otras tcnicas bsicas para el estudio de los microorganismos. Durante el siglo XIX la investigacin en torno a dos preguntas inquietantes favoreci el desarrollo de estas tcnicas y estableci las bases de la ciencia microbiolgica: 1. Existe la generacin espontnea? 2. Cul es la causa de las enfermedades contagiosas? A fines de dicho siglo ambas preguntas fueron contestadas y la Microbiologa se estableci firmemente como una ciencia independiente en desarrollo.

1.2 Importancia de la microbiologa


La Microbiologa es una ciencia biolgica extraordinariamente relevante para la humanidad, dado que los microorganismos estn presentes en todos los hbitats y ecosistemas de la Tierra y sus actividades presentan una gran incidencia en numerossimos mbitos de inters: Los microorganismos han sido los primeros en aparecer en la evolucin, y constituyen seguramente la mayor parte de la biomasa de nuestro planeta. Se calcula que slo hemos descrito menos del 10% de los microorganismos existentes, por lo que tenemos una gran tarea por delante para estudiar esta parte de la biodiversidad. Las actividades microbianas sustentan los ciclos biogeoqumicos de la Tierra: los ciclos del carbono, del nitrgeno, del azufre o del fsforo dependen de modo fundamental de los microorganismos. El aspecto aplicado y la incidencia econmica y social de los microorganismos es ingente, y aqu daremos unas breves pinceladas:

Aspectos beneficiosos:
Produccin de alimentos y bebidas derivados de fermentaciones microbianas: vino, cerveza, pan, yogur. etc. Produccin de multitud de productos industriales: alcoholes, cidos orgnicos, antibiticos, enzimas, polmeros, etc.

La ingeniera gentica, desempeando un papel fundamental en la nueva generacin de medicamentos recombinantes y de terapias novedosas. La ingeniera ambiental en el uso de microorganismos en la extraccin de minerales.

Aspecto perjudicial:
Las enfermedades microbianas han sido causa de grandes males a nuestra especie. Baste recordar que la peste (muerte negra) caus a mediados del siglo XIV la muerte de la tercera parte de la poblacin europea y ya en la primera mitad del siglo XV lleg a afectar a ms del 75%. Desde la poca del descubrimiento de Amrica, las exploraciones han conllevado el intenso trasiego de agentes patgenos de un lugar a otro. La desaparicin de buena parte de la poblacin indgena se debi en buena parte a no tener defensas frente a la viruela europea, pero a su vez los descubridores importaron la sfilis a Europa. Aparte de todas estas actividades de los microorganismos sobre los humanos, hay que tener en cuenta que existen grmenes que afectan a animales, plantas, instalaciones industriales, que afectan a alimentos, etc., representando otras tantas reas de atencin para la Microbiologa.

2. Concepto de microorganismo
Los microorganismos o microbios son organismos de pequeo tamao, observables nicamente con la ayuda del microscopio. La microbiologa es la rama de la Biologa que se encarga del estudio de los microorganismos. El tamao se mide en micrmetros (m), para microorganismos ms pequeos se usa el nanmetro (nm). Los microorganismos suelen presentar un pequeo tamao, ejm: Escherichia coli (mide de 1 um a 5 um)1.

La Escherichia coli (pronunciado /eske'rikia 'koli/). Se encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en las aguas negras. E. coli junto con otras bacterias conforman lo que se conoce como la flora intestinal lo que mantiene el ecosistema del tubo digestivo, es decir, bacterias que viven normalmente dentro de nuestro intestino y, que lejos de hacernos dao nos ayudan a la digestin (absorcin de nutrientes). La E. coli es una bacteria que muta con mucha facilidad, se conocen cientos de variantes por ello se vuelve infecciosa.

Fuente: Curso de Microbiologa Bsica


http://www.livronline.com/servicos/gratuitos/mb1504/descricao.html

Dnde se encuentran los microorganismos?


Los microorganismos son ubicuos: se encuentran en el aire, en el agua, en el suelo, en los alimentos, sobre las superficies de los objetos y sobre el exteriory interior de todos los organismos.

2.1

Clasificacin de los Microorganismos


Los microorganismos se clasifican en:

CLASES DE MICROORGANISMOS
a) Microorganismos con organizacin celular Procariotas Eucariotas Bacterias Protozoos Algas microscpicas Hongos microscpicos Virus Viroides Priones
- Poseen membrana celular - Tienen como cidos nucleicos tanto ADN como ARN.

b) Microorganismos sin organizacin celular

- No poseen membranas - Nunca estn presentes los dos cidos nucleicos juntos (ADN o ARN).

FORMAS ACELULARES

FORMAS CELULARES
Organismos unicelulares o pluricelulares de dimensiones microscpicas.

Fig. 1 1) Procariota (bacteria); 2, 3, 4 y 5) Protozoos; 6) Alga microscpica; 7) Hongo microscpico (levadura); 8 y 9) Virus. Cada organismo est a un aumento diferente.

3. Categoras taxonoma y nomenclatura de los microorganismos

Antes de mencionar las categoras taxonmicas es importante conocer al reino al que pertenecen los microorganismos: Tres reinos: Mnera, protista, fungi

Para poder comprender la gran diversidad de organismos existentes es preciso agruparlos y organizar en grupos. De eso se encarga la TAXONOMA, que es la ciencia de la clasificacin biolgica. La taxonoma en su sentido ms amplio se descompone en tres partes independientes pero interrelacionadas: Clasificacin Nomenclatura Identificacin La clasificacin es la estructuracin de los organismos en grupos o taxones en funcin desemejanzas mutuas o del parentesco evolutivo. La nomenclatura es la rama de la taxonoma que se ocupa de la asignacin de nombres a grupos taxonmicos de conformidad con normas publicadas. La identificacin constituye el lado prctico de la taxonoma que consiste en establecer que un organismo determinado pertenece a un taxn reconocido. La Taxonoma (facilitan el anlisis comparativo entre las especies) y la Filogenia (historia evolutiva de los taxones).

3. 1 Desarrollo de la Taxonoma Microbiana El creador de la Taxonoma fue el botnico sueco Carl von Linneo, su sistema de nomenclatura, el sistema binomial, se usa todava en la actualidad. Hasta mediados del siglo XIX se conocan slo dos reinos, animal y vegetal. Luego de comenzar a conocerse la existencia de microorganismos, en 1866, Ernst Haeckel cre un tercer reino que llam los Protistas. Con el desarrollo del microscopio fue posible el reconocimiento de las clulas eucariotas y procariotas y eso condujo a la ubicacin de las bacterias en un reino separado de microorganismos sin ncleo al que se le dio el nombre de Procariotae, tal como lo propuso Robert G. E. Murray en 1968.

Figura N. Clula procaritica.

Figura N.Clula eucariota

En 1969, R. H. Whittaker propuso un sistema de clasificacin en cinco reinos:

Monera, incluye a todos los microorganismos procariotas. Protista, incluye a todos los microorganismos eucariotas unicelulares u ocasionalmente multicelulares. Fungi, reino que incluye a los hongos en sus diversas formas. Plantae, corresponde al reino vegetal Animalia, corresponde al reino animal.

Posteriormente, nuevas tcnicas de biologa molecular se usaron para estudiar la composicin del ARN ribosmico2 y revelaron que hay realmente dos tipos de clulas procariotas (arqueas y bacterias) y un tipo de clulas eucariotas. En 1978, Carl R. Woese propuso elevar los tres tipos de clulas a un nivel por encima del reino, llamado dominio y de ah surgi el sistema de clasificacin de tres dominios que se conoce en la actualidad y que comprende:
2

En los ribosomas son macromolculas encargadas de producir o fabricas protenas al interior de la clulaa partir de la informacin gentica que les llega del ADN transcrita en forma de ARN mensajero (ARNm). Por ello se dice frecuentemente que los ribosomas son las fbricas de protenas de las clulas.Su funcin consiste nicamente en ser el orgnulo lector del ARN mensajero y segn a ello se ensamblara o producir el tipo de protena por lo tanto es el responsable de la traduccin del cdigo gentico.

Bacteria (procariotas unicelulares cuya pared celular peptidoglucano) Arquea (procariotas unicelulares cuya pared celular no peptidoglucano) Eukarya (todos los eucariotas)

contiene contiene

Para hacernos una idea, era como si en Zoologa o en Botnica todava clasificaran a los animales y las plantas en base a su aspecto exterior, descontando por completo tanto su anatoma interna, como sus relaciones evolutivas. Es decir, uno poda acabar diciendo que un murcilago era un ave porque tiene alas. Woese cambi. No es que lo descrito arriba no se siga utilizando, se usa, pero consigui que la taxonoma microbiana se basara en las relaciones filogenticas en lugar de en los parecidos fenotpicos.

Woese descubri que en este grupo estaban incluidos microorganismos que a nivel molecular eran diferentes tanto de las bacterias como de los eucariontes. En 1990, Woese plante la necesidad de definir un nuevo taxn i.e. un nuevo nivel jerrquico de clasificacin: el dominio, que estara por encima de reino, y propuso reagrupar a todas las formas de vida en un sistema de tres dominios:

Figura N. rbol

filogentico

Universal

Archea Llamado Arqueobacteria o Arquea son microorganimos similares a las bacterias que pueden crecer en condiciones extremas como los hielos antrticos psicrfilas, o en aguas muy hirvientes son las arqueas llamadas termfilas extremas, o las que habitan en medios anaerobios, con pH muy cido y las que se desarrollan en medios salinos o sea las halobacterias. Igual que los eucariotas, las paredes celulares de Archaea no contienenpeptidoglucano3(cido murmico); pero tiene pseudopeptidoglicano (pseudomureina), polisacrido, glicoprotena o protena en sus paredes celulares, mientras las paredes celulares de eucariotas se basan en celulosa o quitina.

Diferencia entre la estructura celular de Bacteria, Archaea y Eucarya

Propiedad Membrana nuclear Organelos Peptidoglicano en la pared

Bacteria Archaea Eucarya NO NO SI NO NO NO SI SI NO

En resumen, la clula de las ARCHAEA tiene las mismas estructuras que el resto de los organismos pero se construye con compuestos qumicos diferentes. Debido a estas diferencias, las archaea exhiben una ALTA RESISTENCIA contra los ANTIBITICOS y los agentes lticos.
3

El peptidoglucano o murena es un copolmero formado por una secuencia alternante de acetilglucosamina y el cido acetilmurmico (glucosamina, es un derivado de la glucosamina que, a su vez, es un derivado de la glucosa, un monosacrido de seis carbonos (aldohexosa) y el acetilmurnicoes un monosacrido con la unin de un ter.

3.2 Clasificacin Microbiolgica

Dominio: Filo: Clase: Orden: Familia: Gnero: Especie: En microbiologa la unidad taxonmica bsica es la especie. Una especie puede ser definida como una coleccin de cepas4 similares que difieren lo suficiente de otro grupo. El gnero est formado por un grupo de especies relacionadas. Un grupo de gneros estrechamente relacionados constituyen una familia. Orden. Especifica la categora o rango taxonmico del grupo, ms amplio que el de familia y menos amplio que el de clase, comprende un grupo de familias emparentadas Clase. Es un grupo taxonmico que comprende varios rdenes de microorganismos con muchos caracteres comunes. Divisin. Tambin conocido como tipo o filo. Dominio: superreino, es la categora taxonmica ms alta que se da en los sistemas de clasificacin biolgica. Actualmente el trmino ms usado es dominio y se le atribuye a cada una de los tres principales grupos en que se considera subdividida la diversidad de los seres vivos: arqueas (Archaea), bacterias (Bacteria) y eucariontes (Eukarya). 3.3 Identificacin de la Especie Las primeras clasificaciones bacterianas se basan en la ordenacin con fines prcticos de las diferentes especies creadas por la agrupacin de cepas caracterizadas por su igualdad o semejanza de algunas caractersticas bsicas: Propiedades visibles. forma, color, tamao, tincin, movilidad, presencia de cpsula y morfologa de las colonias. Formacin de productos qumicos caractersticos Nutricin Existe un cdigo internacional de nomenclatura de las bacterias que refleja la necesidad de que las bacterias reciban nombres fijos que eviten confusin error y se constituyan como nombres latinos o latinizados. Segn este cdigo el nombre de especie es una combinacin binaria que consta del nombre del gnero seguido de un nico epteto especfico.

Cepa: en microbiologa, conjunto de virus, bacterias u hongos que tienen el mismo patrimonio gentico.

Ejemplo: Bacillus subtilis Gnero Especie Dominio: Filo: Clase: Orden: Familia: Gnero: Especie: Dominio: Filo: Clase: Orden: Familia: Gnero: Especie: Bacteria Proteobacteria Gammaproteobacteria Enterobacteriales Enterobacteriaceae Escherichia Escherichia coli Archaea Euryarchaeota Halobacteria Halobacteriales Halobacteriaceae Halobacterium Halobacterium volcanii

Dominio: Filo: Clase: Orden: Familia: Gnero: Especie:

Bacteria Actinobacteria Actinobacteria Actinomycetales Corynebacteriaceae Corynebacterium Corynebacterium Bovis5

La mastitis es una patologa que se genera en animales domsticos de modo similar a como ocurre en las personas. Provoca inflamacin de las glndulas mamarias de primates y de la ubre en otros mamferos.

De acuerdo con la ltima revisin las bacterias Gram positivas tiene s dos grandes ramas que se subdividen en: Tipo: Firmicutes Tipo: Actinobacteria.

4.- MICROORGANISMOS CON ORGANIZACIN CELULAR

1. LAS BACTERIAS

Las bacterias, tambin se denominan Eubacterias son microorganismos unicelulares que presentan un tamao de unos pocos micrmetros generalmente se le encuentra (entre 0,5 y 5 m). Pero se ha descubierto una bacteria grande es Beggiatoa gigantea6. (40 mm).

Fig. Ejemplo de organismo procaritico (bacteria) muy aumentada.

Por ejemplo Escherichia coli. Se trata de microorganismos unicelulares procariotas, cuyo tamao oscila entre 1 y 5 micras, adaptados a vivir en cualquier ambiente, terrestre o acutico.

Fig. Ejemplo de una bacteria: Escherichia coli.

es un microorganismo que utiliza una sustancia inorgnica como fuente de energa, ya que o bien el uso de hidrgeno, nitrgeno, hierro, o azufre como fuente de energa. En condiciones normales, el sulfuro de hidrgeno pasa a sulfado. Si una deficiencia de este microorganismo en el sulfuro de hidrgeno se el azufre elemental se reduce en cido sulfrico. El sulfato es generalmente una sal de cido sulfrico resultante de la sustitucin de tomos de hidrgeno por tomos de oxigeno u otro.

Las bacterias son procariotas y por lo tanto, a diferencia de las clulas eucariotas (de animales, plantas, hongos, etc.), no tienen el ncleo definido ni presentan en general, orgnulos membranosos internos. Las bacterias representan la mayor parte (90%) de los procariontes conocidos.

Fig. Ejemplo de un organismo procarionte

1.1 Clasificacin bacteriana Las bacterias se clasifican segn a su: Morfologa, requerimiento de oxigeno, temperatura y ph.

a. Por su Morfologa (forma) y agrupacin.

1. Cocos, de aspecto redondeado y conservan su individualidad. o en grupos de dos cocos: diplococos. O tambin bacteria de forma redondeada que se agrupa en forma de cadena: estreptococos. Tambin se muestran como grupos arracimados: estafilococos, De forma de masas cbicas: sarcinas. Esta diversidad depende de que la divisin de las clulas se d a lo largo de uno, dos o tres ejes.

Fig. Asociaciones de cocos (bacterias esfricas).

Las bacterias con forma de cocos muy resistentes y se transmiten por el aire. Son pequeas y exigentes con el medio de cultivo. Suelen ser patgenas: Streptococos7, Stafilococos8, etc. 2. Bacilos, alargados y cilndricos, en forma de bastn, obtienen nutrientes con mucha mayor efectividad, por lo que pueden vivir en lugares pobres en nutrientes (vas urinarias, agua.). Por el contrario, son menos resistentes, susceptibles a los cambios ambientales y no pueden transmitirse por el aire, slo lo hacen por lquidos o superficies hmedas. Los ms grandes (Baccillus y Clostridium9) desarrollan endosporas para resistir los perodos de condiciones precarias.

Fig. Bacilos.

Parejas: Diplobacilos

Estreptobacilos: variedad de bacilos en forma de cadena de bastoncillos. Bacillus sp10.

Enterococcus faecalis es una bacteria que habita el tracto gastrointestinal de humanos y otros mamferos. puede causar infecciones comprometidas en humanos, especialmente en ambiente de hospital.
8

Stafilococos aureus (pronunciacin: stafilo kokus awrews)conocido como estafilococo ureo, o comnmente estafilococo dorado, Puede producir una amplia gama de enfermedades, que van desde infecciones cutneas y de las mucosas relativamente benignas, tales como conjuntivitis.
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Clostridium es un gnero de bacterias anaerobias, bacilos grampositivas, parsitas y saprfitas. Las especies ms importante son el Clostridium novyi, Clostridium septicum, Clostridium perfringens productor de la gangrena gaseosa y Clostridium tetani productor del ttanos. 10 Bacillus es un gnero de bacterias Gram-positivas. Especies de Bacillus pueden ser obligados aerobios o anaerobios facultativos. Muchas especies de Bacillus son capaces de secretar grandes cantidades de enzimas. Parte de este gnero son flora normal de la vagina ayudan a la produccin de acido lctico necesario para que las bacterias malas no crezcan.

Empalizada: En forma de y o x Corynebacterium sp11.

3. Espirilos, con forma de hlice o espiral. Las formas espirales se mueven en medios viscosos avanzando en tornillo. Su dimetro es muy pequeo, lo hace que puedan atravesar las mucosas; por ejemplo: Treponema pallidum, causante de la sfilis12. Son ms sensibles a las condiciones ambientales que los bacilos, por eso cuando son patgenas se transmiten por contacto directo (va sexual) o mediante vectores, normalmente artrpodos hematfagos.

Dominio: Filo: Clase: Orden: Familia: Gnero: Especie:

Bacteria Spirochaete Spirochaetes Spirochaetales Spirochaetaceae Treponema T. pallidum

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Corynebacterium. Es uno de los gneros ms numerosos de actinobacterias con ms de 50 especies, la mayora no causa enfermedades, parte de este gnero son flora saprfita de la piel humana. 12 La sfilis es una infeccin de transmisin sexual crnica producida por la bacteria espiroqueta Treponema pallidum, subespecie pallidum (pronunciado pl lidum).

4. Vibrios, que son muy cortos y curvados, en forma de coma. Ejemplo: Vibrio cholerae13.

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Vibrio cholerae es una bacteria Gram negativa con forma de bastn (un bacilo) curvo que provoca el clera en humanos, pertenece a la subdivisin gamma de las Proteobacterias.

b. Por su requerimiento de oxigeno


Otro aspecto a tener en cuenta en la clasificacin de bacterias es la necesidad de oxigeno para poder vivir. La mayora de las bacterias son aerobias. Aerobias estrictas: Dependen de O2 para su crecimiento, necesitan una concentracin de alrededor del 21% de oxgeno para poder desarrollar. (Pseudomonas14) Anaerobias estrictas: se desarrollan en ausencia total de O2, son incapaces de sobrevivir en presencia de oxgeno, es decir requieren un 0% de oxgeno (Fusobacterium15, Clostridium). Anaerobias Facultativas: pueden desarrollarse en presencia o ausencia de O2, aunque predominan en medios anaerbicos. Escherichia coli: pueden vivir en ambientes con o sin oxgeno. Normalmente, habitan el intestino humano, sin causar enfermedad. Sin embargo, algunas variedades de estas bacterias son patgenas y causan diarreas infantiles e infecciones urinarias. Se las encuentra en aguas y suelos contaminados con materia fecal.

Fig. Escherichia coli: Microaerfilas: Slo se pueden desarrollar en presencia de bajas tensiones de O2 (menor del 12% en lugar del 21% que es la atmosfrica) y altas tensiones de CO2. . (Campylobacter16).

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Pseudomonas es un gnero de bacilos rectos o ligeramente curvados, Gram negativos, aerbicos estrictos. Las especies del gnero Pseudomonas son organismos presentes en microbiota predominante en la rizosfera y en la filosfera de plantas; del mismo modo, se han aislado de ambientes acuticos, tanto de agua dulce como de aguas marinas, tambin existen patgenos oportunistas como P.aeruginosa; patgenos de animales y patgenos de plantas como P.syringae. 15 Las fusobacterias (Fusobacteria) son un filo de bacterias que comprende nicamente el gnero Fusobacterium. Algunos de los organismos que la representan contribuyen a numerosas enfermedades, incluyendo enfermedades periodontales y lcera de piel tropical. En humanos, constituyen uno de los principales tipos de flora del aparato digestivo, y se encuentran en muchas partes del tracto gastrointestinal. 16 Campylobacter. Estas especies son bacilos gram negativo con forma de coma y mviles por la presencia de uno o dos flagelos. Las colonias poseen metabolismo respiratorio microaerfilo (3-5 % de O2) con un grado bajo de oxigeno 5%, dixido de carbono 10% y 85% en nitrgeno. Pertenece al filo Proteobacteria. Llas ms frecuentes. C. fetus es una causa de abortos espontneos en ganado y ovejas.

c. Por su ptimo de temperatura Las bacterias requieren diferentes temperaturas para desarrollar y sobrevivir.

En base a su temperatura ptima de desarrollo y sobrevida, las bacterias se clasifican en: Bacterias Psicrfilas: soportan bajas temperaturas, entre 0 - 20C (Pseudomonas) Bacterias Mesfilas: desarrollan mejor a temperaturas intermedias, entre 20 - 45C (Staphylococcus, Streptococcus) Bacterias Termfilas: son capaces de soportar altas temperaturas, de 55C o ms (Bacterias no patgenas)

Fig. Relacin de temperatura y la tasa de crecimiento

La temperatura presenta un estrecho rango de crecimiento ptimo. Delimita este rango una temperatura mnima de crecimiento y una mxima. Por debajo de la mnima temperatura tienden a deteriorarse. Por sobre la mxima temperatura tienden a la muerte.

d. Requerimientos de pH El crecimiento de la mayor parte de los microorganismos es mximo dentro de un intervalo de pH situado entre 5.5 y 8. La concentracin de iones hidrgeno en el medio condiciona el crecimiento de las bacterias. En funcin de su capacidad para desarrollar a diferentes pH, las bacterias pueden clasificarse en: Neutrfilas: entre 5,5 - 8,0 (Staphylococcus, enterobacterias17) Acidfilas: entre 0,0 - 5,5 (Lactobacillus18) Alcalfilas: entre 8,0 - 14 (Vibrio)

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Las enterobactericeas (Enterobacteriaceae) son una familia de bacterias Gram negativas que contiene ms de 30 gneros que pueden tener morfologa de bacilos o cocos. Los miembros de esta familia forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y de otros rganos del ser humano y de otras especies animales. Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuticos. Pertenece al filo Proteobacteria. 18 El gnero Lactobacillus tienen forma de bacilos largos y extendidos, aunque con frecuencia pueden observarse bacilos cortos o coco-bacilos. Son Gram positivos. Normalmente son benignas e incluso necesarias, habitan en el cuerpo humano y en el de otros animales, por ejemplo, estn presentes en el tracto gastrointestinal y en la vagina. Los lactobacilos crecen bien en medios ligeramente cidos, con pH inicial de 6,4 - 4,5 y con uno ptimo de desarrollo entre 5,5 y 6,2.

Es importante mencionar que las bacterias est compuesto de alrededor de 95% de agua, y lo dems de biomoleculas.

1.2 Estructura de una bacteria tipo La ultraestructura y la actividad fisiolgica de las bacterias solo se pueden apreciar con el microscopio electrnico. Los componentes estructurales bsicos de las bacterias son:

Fig. Estructura de una Bacteria 1. Pared bacteriana: Estructura presente en todas las bacterias. Es una envoltura rgida exterior a la membrana. Da forma a la bacteria y sobre todo soporta las fuertes presiones osmticas de su interior y exterior. Los componentes fundamentales de la pared son los peptidoglucanos o murena los peptidogluccanos es el responsable de la rigidez de la pared, y proporciona resistencia frente a la lisis osmtica19. Adems contiene otros

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Osmtico, que implica el paso de disolventes, evitando el ingreso de soluto. La pared pues permite que pasen las molculas de disolvente pero impide el avance de las molculas del soluto.

elementos diferentes segn pertenezca al grupo de las Gram negativas o al de las Gram positivas:

Entre los constituyentes de la pared celular negativas existen importantes diferencias.

de

las

bacterias Gram (+) y Gram

BACTERIA GRAM NEGATIVA Tiene una capa delgada de Peptidoglicano (mureina) unida a una membrana exterior por lipoprotenas. La membrana exterior est hecha de protena, fosfolpido y lipopolisacrido. En el lipopolisacrido, la porcin de lpido est embebida en el fosfolpido y el polisacrido est en la superficie. El lpido se llama Lpido A y es txico, pero el lipopolisacrido entero se llama Endotoxina20. La pared de la clula tiene poros llamado Porines para el transporte de substancias de peso molecular bajo.

Fig. Estructura de la pared de una bacteria Gram negativa.

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Las endotoxinas tienen la capacidad de producir sntomas patolgicos desde escalofri, fiebre y la muerte son desde alta y casi no txicas dependiendo al tipo de bacteria. Asimismo ayuda a la bacteria a crean un escudo rgido en las bacterias que la portan, bloqueando la accin de muchos Antibioticos.

BACTERIA GRAM POSITIVA Tiene una capa gruesa de Peptidoglicano (mureina) y dos clases de cidos, el acido teicoicos y cido lipoteicoico, el cido lipoteicoico que est en la superficie, empotrado en la capa de peptidoglicano y unido a la membrana citoplsmica y cido teicoico se une slo a la capa de peptidoglicano.

Fig. Estructura de la pared de una bacteria Gram positiva. El cido Teicoico es el responsable del determinante antignico del organismo. Poder de comportarse como un antgeno, es decir de provocar la formacin de anticuerpos, evitando el ingreso de sustancia que pueda afectar. Tambin es evidente que proporciona a la envoltura celular un elevada densidad de carga y eso ha de afectar al paso de iones a travs de las capas superficiales ms externas. Informacin: Algunos antibiticos actan sobre los componentes moleculares de la pared como la penicilina, son antibiticos bacteriosttico porque inhiben la sntesis de los pptidoglucanos y, por ello, interrumpen el crecimiento bacteriano. 2. Cpsula bacteriana. En numerosas bacterias se forma en la parte externa de la pared una cpsula viscosa compuesta por sustancias glucdicas. Esta envoltura, que se presenta casi todas las bacterias patgenas, las protege de la desecacin y de la fagocitosis por los leucocitos del hospedador, as como del ataque de los anticuerpos, lo que aumenta la virulencia de las bacterias encapsuladas. 3. Membrana. Es una envoltura que rodea al citoplasma. Est constituida por una membrana de tipo unitario de 75 de espesor. Su estructura es idntica a la de las clulas eucariotas, variando slo en algunas de las molculas que la componen; por ejemplo, en la membrana bacteriana no hay esteroides. Una particularidad que presenta la membrana bacteriana es la existencia de unos repliegues internos que reciben el nombre de mesosomas. Las funciones de la membrana plasmtica bacteriana son las mismas que en la clula eucariota, es decir, limitan el paso de sustancia extraas y regulan el paso de sustancias nutritivas. y regulan el paso de sustancias nutritivas. Los mesosomas incrementan la superficie de la membrana plasmtica y adems tienen gran importancia en la fisiologa bacteriana. 4. Ribosomas. Los ribosomas son complejos macromoleculares de protenas y cido ribonucleico (ARN) que se encuentran en el citoplasma. Son un complejo molecular encargado de sintetizar protenas a partir de la informacin gentica que les llega del ADN transcrita en forma de ARN mensajero (ARNm). Slo son visibles al microscopio electrnico, debido a su reducido tamao (29 nm en clulas procariotas). Bajo el

microscopio electrnico se observan como estructuras redondeadas, densas a los electrones. 5. Cromosoma bacteriano o nucleoide. El ADN de la bacteria est constituido por una sola molcula en doble hlice (esta molcula es muy grande en comparacin con el tamao de la bacteria), circular, superenrollada y asociada a protenas. Suele estar unida a los mesosomas. En las clulas bacterianas puede haber tambin una o varias molculas de ADN circular extracromosmico de menor masa molecular que el cromosoma denominadas plsmidos. Estos plsmidos, en algunas bacterias, pueden tener genes que las protegen de los antibiticos o tambin genes que intervienen en los procesos de reproduccin (plsmido F). 6. CITOPLASMA Formado 85 % por agua y contiene los ribosomas y el cromosoma bacteriano. 7. Flagelos. Son apndices filiformes de mayor longitud que la bacteria que permiten su locomocin. Se presentan en nmero y disposicin variable y estn formados por fibrillas proteicas compuestas de una protena llamada flagelina21. La fuerza motriz de los flagelos que desarrolla se obtiene mediante un movimiento circular en ambos sentidos a partir de la energa obtenida de una bomba de protones. Se trata de apndices largos y finos, libres por un extremo y fijados a la clula por el otro en distintas posiciones: 1. 2. 3. 4. Un flagelo en posicin polar o subpolar: flagelacin montrica Un grupo de flagelos en posicin polar: loftrica grupos de flagelos en ambos extremos: anftrica Flagelos repartidos por toda la superficie: pertrica

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La flagelina es una protena que tiene la funcin de ser el principal componente del flagelo de las bacterias (ms y la responsable de la forma de hlice que tiene la estructura del flagelo.

Fig. Estructura del motor flagelar de una bacteria.( flagelo bacteriano es un apndice movido por un motor rotatorio. El rotor puede girar a 6.000-17.000 rpm) 8. Fimbrias o pili. Son filamentos huecos, delgados y rectos, situados en la superficie de determinadas bacterias y cuya funcin no est relacionada con la locomocin, sino con la adherencia a los substratos y el intercambio de fragmentos de ADN durante la conjugacin.

Fig. Fimbrias o pili en una bacteria.

1.3 fisiologa bacteriana. El estudio de las funciones realizadas por los microorganismos. La funcin fundamental de todo ser vivo es crecer, esto es: aumentar en forma ordenada el numero y la masa de todos sus componentes celulares y que estn compuestas fundamentalmente de: protenas, polisacridos, lpidos y cidos nucleicos.

En la bacteria se desencadenan una serie de procesos qumicos que en conjunto constituyen el Metabolismo Bacteriano.

1.3.1

FUNCIONES DE NUTRICIN EN LAS BACTERIAS La nutricin de todos los organismos implica el aprovisionamiento de energa para llevar a cabo las reacciones metablicas, y el suministro de materiales para la sntesis celular:

Segn la fuente de carbono, las bacterias se pueden clasificar como: Auttrofas, cuando el carbono celular se obtiene mediante la fijacin del dixido de carbono. Trofos=alimento. Son los seres vivos como ciertas bacterias (cianobacterias), bacterias verdes del azufre y algunas bacterias prpura. que elaboran su propia materia orgnica a partir de sustancias inorgnicas (CO2). Hetertrofas, cuando usan compuestos orgnicos como fuente de carbono. Son microorganismos hetertrofos, necesitan incorporar materia orgnica fabricada por otros microorganismos, ya que son incapaces de formarla a partir de sustancias inorgnicas sencillas.

Segn la fuente de energa, las bacterias pueden ser: Fototrofas, cuando emplean la luz a travs de la fotosntesis. Quimiotrofas, cuando obtienen energa a partir de sustancias qumicas que son oxidadas principalmente con el uso del oxgeno (respiracin aerobia) o de otros receptores alternativos (respiracin anaerobia). Segn los donadores de electrones, las bacterias tambin se pueden clasificar como: Litotrofas, si utilizan como donadores de electrones compuestos inorgnicos a partir del CO2.

Organotrofas, si utilizan como donadores de electrones compuestos orgnicos.

La mayor parte de las bacterias son hetertrofas y deben tomar el alimento orgnico sintetizado por otros organismos. La obtencin del alimento la hacen por diversos caminos: Las bacterias de vida libre suelen ser saprfitas o de putrefaccin, viven sobre materia orgnica muerta. Las saprofitas son importantes porque descomponen los cuerpos de las plantas y animales muertos en sus componentes esenciales, hacindolos accesibles para ser utilizados como alimento por las plantas. Econmicamente tambin tienen importancia porque son responsables de algunas alteraciones y deterioros que sufren los vegetales durante su almacenamiento y transporte, como la podredumbre, algunas manchas y marcas superficiales, el agrietado o el marchitado. Las bacterias saprofitos conocidos tenemos a las Clostridium. algunas son lactobacillus. parsitas (producen enfermedades). Ejemplo los

Otras son simbiontes (establecen relaciones con otros organismos con beneficio mutuo). La bacteria conocida como comensal es la Escherichia coli.

Otras bacterias son auttrofas y utilizan compuestos inorgnicos para su nutricin:

Las auttrofas fotosintticas o fotoauttrofas, Los auttrofos fotosintticos son todos aquellos organismos que poseen la facultad de transformar el CO2, el H2O, y los fotones de luz solar en alimentos orgnicos sintetizados por fotosntesis. Para ello cuentan con plastidios verdes o cloroplastos y clorofila o pigmento fotorreceptor que es el encargado de la transformacin primaria de la luz solar en energa qumica.

Como fabrican su propio alimento se los denomina Auttrofos (Auto= propio, Trofos=alimento).

Entre los Organismos Fotosintticos se encuentran: Las Algas unicelulares Procariotas (Cianobacterias o Algas verde-azules) Las auttrofas quimiosintticas o quimioauttrofas, Los organismos quimiosintticos se caracterizan porque obtienen la energa qumica a partir de CO2, y la "Oxidacin de sustancias Inorgnicas" como agua, sales minerales, xidos, anhdridos, bases, cidos utilizan compuestos inorgnicos como fuente de energa por ejemplo H2, NH3, NO2, H2S y el CO2 como fuente de carbono. . Entre ellas estn las bacterias del Azufre (Desulfovibrio sp, Beggiatoa22) que obtienen la energa qumica (ATP) a partir de la oxidacin de compuestos azufrados, se las encuentra formando colonias en aguas residuales. Asimismo tenemos a los gneros del filo proteobacterias, representativos: Nitrobacter, Thiobacillus23.

En conclusin diremos que: Las fotoauttrofas , utilizan la luz como fuente de energa y el CO2 (dixido de carbono) como fuente de carbono. Las cianobacterias, que realizan la fotosntesis y liberan oxgeno a partir de CO2 pertenecen a este grupo. A ellas se debe la transformacin de la atmsfera terrestre hostil, que contena altos niveles de CO2. Las bacterias quimioauttrofas utilizan compuestos inorgnicos como fuente de energa y el CO2 como fuente de carbono. Las fotohetertrofas utilizan la luz como fuente de energa y compuestos orgnicos como fuente de carbono. Las quimiohetertrofas utilizan compuestos inorgnicos como fuente de energa por ejemplo H2, NH3, NO2, H2S y el CO2 como fuente de carbono.

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Una bacteria que vive oxidando cido sulfhdrico hasta azufre o sulfato. El azufre es acumulado en el citoplasma de esta bacteria filamentosa, formando los grnulos que se ven en la foto. 23 Thiobacillus son incoloros, en forma de varilla, las bacterias Gram-negativas con flagelos polares. Poseen una oxidasa de hierro, que les permite metabolizar los iones metlicos tales como hierro ferroso. Thiobacillus son bacterias estrictamente aerobias. Thiobacillus son organismos quimioauttrofos obligados, lo que significa que requieren molculas inorgnicas como un donador de electrones y el carbono inorgnico (tal como dixido de carbono) como una fuente. Obtienen nutrientes o energa qumica por oxidacin del hierro y el azufre con O2.

1.3.2

FUNCIONES DE REPRODUCCIN La reproduccin es la capacidad de un ser vivo de originar otro u otros semejantes a s mismo, con lo cual se perpetua la especie. En la naturaleza, existen diferentes estrategias que permiten lograr una mayor eficacia en el proceso reproductivo. Son dos las formas de reproduccin: la asexual y la sexual. La reproduccin asexual no intervienen en ella clulas sexuales o reproductoras, no hay dependencia del sexo del individuo y existe un solo progenitor. La reproduccin sexual tiene lugar mediante clulas especializadas, llamadas gametos. Las bacterias la reproduccin es asexual, por fisin binaria o gemacin.

Reproduccin por fisin binaria: Las bacterias se dividen por fisin binaria, a travs de la una cual clula madre al alcanzar un determinado volumen se divide dando dos clulas hijas. El proceso de fisin binaria consiste en la autoduplicacin del material hereditario (del nico cromosoma)24 seguido de la reparticin en las dos clulas hijas, las que se separan de la membrana celular y formacin de la pared celular. Asimismo se duplica los mesosomas. Los mesosomas ayudan incrementan la superficie de la membrana plasmtica y sirven para sujetar el cromosoma bacteriano.

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Los cromosomas se encuentran en el ncleo de todas las clulas y tienen como funcin contener la informacin gentica (ADN), del organismo.

Fig. Divisin binaria de clulas procariotas. 1 El cromosoma circular est unido a un punto de la membrana plasmtica 2 El cromosoma se duplica. Las dos copias estn fijas a la membrana en puntos cercanos 3 La clula se alarga, se agrega nueva membrana plasmtica entre los puntos de unin 4 La membrana plasmtica crece hacia el interior 5 La clula original se ha dividido en dos clulas hijas.

Reproduccin por Gemacin: Algunas bacterias como las especies del gnero Hyphomicrobium25 se reproducen por gemacin, lo cual consiste en que una clula madre emite un brote o yema. Cuando ha crecido lo suficiente, la yema se desprende y se hace independiente.

Fig. Ciclo de reproduccin asexual por biparticin de una bacteria.

Fig. A. Divisin celular B. Gemacin

Ahora bien, adems de este tipo de reproduccin asexual, las bacterias poseen tambin un conjunto de mecanismos, definidos como parasexuales26, mediante los cuales se intercambian fragmentos de ADN; esta transferencia de informacin gentica de una bacteria a otra puede realizarse por conjugacin, transformacin o transduccin:
25

Hyphomicrobium bacterias gram negativos (Proteobacteria) es una familia de bacterias. Incluye entre, un gnero de rizobio, y Rhodomicrobium. 26 Fenmeno por el que se obtienen nuevas combinaciones genticas sin los procesos sexuales habituales. mediante los cuales intercambian informacin gentica, de esta forma una bacteria pasa informacin a otra de la misma generacin.

Conjugacin. Es un mecanismo mediante el cual una bacteria donadora (bacteria F+ por tener un plsmido27 llamado plsmido F) transmite a travs de las fimbrias o pili, el plsmido F o tambin un fragmento de su ADN a otra bacteria receptora (a la que llamaremos F- por no tener el plsmido F).La bacteria F- se convertir as en F+ al tener el plsmido F e incluso podr adquirir genes de la bacteria F+ que hayan pasado junto con el plsmido F. Transformacin. Consiste en el intercambio gentico producido cuando una bacteria es capaz de captar fragmentos de ADN de otra bacteria que se encuentran dispersos en el medio donde vive. Slo algunas bacterias pueden ser transformadas. Las que pueden serlo se dice que son competentes. Transduccin. En este caso la transferencia de material gentico de una bacteria a otra, se realiza a travs de un virus bacterifago que por azar lleva un trozo de ADN bacteriano y se comporta como un vector intermediario entre las dos bacterias(ver ciclo ltico de un fago). El virus, al infectar a otra bacteria, le puede transmitir parte del genoma de la bacteria anteriormente infectada.

Fig. Proceso de transformacin

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Los plsmidos son molculas de ADN extracromosmico circular o lineal que se replican y transcriben independientes del ADN cromosmico. Las molculas de ADN plsmidico, adoptan una conformacin tipo doble hlice al igual que el ADN de los cromosomas, aunque, por definicin, se encuentran fuera de los mismos. Se han encontrado plsmidos en casi todas las bacterias. En la mayora de los casos se considera gentico dispensable. Sin embargo, posee informacin gentica importante para las bacterias. Por ejemplo los genes que codifican para las protenas que las hace resistentes a los antibiticos estn, frecuentemente, en los plsmidos.

Fig. Conjugacin entre una bacteria F+ y otra F-. El factor F (crculos pequeos) pasa a travs de un pili.

Fig. Transduccin: 1) Fijacin del fago a la bacteria; 2) Respuesta ltica; 3) Transduccin del fragmento de ADN a otra bacteria; 4) Integracin del ADN en el genoma.

Informacin: La transformacin bacteriana fue descrita en primer lugar por Griffith(1920) y ms tarde por Avery, McLeod y McCarty en 1944, y es responsable, por ejemplo, en el caso de Streptococcus pneumoniae, de la transformacin de cepas bacterianas no virulentas (cepas R) en virulentas (cepas S), cuando se cultivan en medios que contienen fragmentos bacterianos procedentes de la cepa S destruida previamente por el calor.

Mecanismos parasexuales de reproduccin bacteriana

1.3.3

Crecimiento bacteriano Es un incremento en el nmero de individuos. El crecimiento es un componente esencial de la funcin microbiana, ya que una clula individual tiene un perodo de vida determinado en la naturaleza y la especie se mantiene solamente como resultado del crecimiento continuo de la poblacin celular duplicndose. Una bacteria es una mquina capaz de duplicarse as misma. El crecimiento microbiano ocurre por fisin binaria, bajo las mejores condiciones de E. coli puede completar su ciclo y puede duplicarse en 2 en 20 minutos aproximadamente en condiciones ptimas. Los de duplicacin varan ampliamente entre los microorganismos, algunos crecen rpidamente y presentan tiempos de generacin de unos 30 minutos y otros tienen tiempos de generacin de varias horas o incluso das.

Eschericha coli (0.20min aprox.) Rhizobium meliloti (1 hr con 50 min aprox.) Nitrobacter 28sp aproximadamente 20 hs.

Tiempo de generacin (G), tiempo que tarda una clula en dividirse en dos y en el cual el nmero de clulas y biomasa se duplica depende del medio de cultivo (nutrientes) y condiciones de temperatura, presencia de oxigeno y nivel de pH. Basado en el concepto que una clula se divide dando dos clulas hijas, y stas a su vez se vuelven a dividir dando dos clulas cada una de ellas, se presenta en el siguiente cuadro la proliferacin de una poblacin de clulas a partir de una sola, con un tiempo de generacin de cada 30 minutos.

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Nitrobacter son bacterias "Gram-negativas", auttrofas y que igual requieren de oxgeno para oxidar y transformar sucesivamente Nitritos en nitratos. En un rango de pH que se sita entre 7.3 y 7.5.

Tiempo(horas) 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 . . 10

Nmero de Clulas 1 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 . . 1 048 576

a. Modelo matemtico de crecimiento bacteriano Las bacterias se duplican al cabo de un tiempo determinado denominado tiempo de generacin (G). Tiempo de generacin El tiempo de generacin G es el tiempo requerido para que una clula se divida o una poblacin se duplique.

G= T n
Donde: T: Tiempo transcurrido desde incubacin de un individuo hasta el crecimiento final n: Numero de generaciones. Por tanto, si se conocen el nmero de individuos al inicio y final de un perodo de tiempo, el nmero de generaciones o divisiones puede calcularse por medio de una formula geomtrica.

N = N0 2n

Si partimos de una clula al cabo de una generacin habr duplicado su nmero y as sucesivamente en cada generacin

1 generacin = 2 clulas 2 generaciones= 4 clulas 3 generaciones= 8 clulas 4 generaciones= 16 clulas 5 generaciones= 32 clulas Para calcula n: Usaremos la ecuacin siguiente:

N = N0 2n
N0 = Representa el nmero de clulas en el momento actual n = Es el nmero de generaciones N = Es el nmero final de bacterias

Para calcular n desplazaremos agregando Log.


Log N= log N0 + log 2 Log N= log N0 + n log 2 n= log N - log N0

log 2

Ejemplo: Se tienen 1000 bacterias en un medio de cultivo ptimo y despus de 4 horas de incubacin, creciendo exponencialmente, se obtienen 100 000 bacterias. Calcule el tiempo de generacin. N0 = 1000 N = 100 000 T = 4 horas G =?

G= T n
Pero primero calculamos:

n= logN- log N0 log 2 n= log 100000- log 1000 0.3010 n= 5 - 3 = 6.64 0.3010

G= T n G= 4 hr 6.64 G= 240 min/6.64 G= 36.14 min


Ejm: Eschericha coli:

b. Fases o curva del crecimiento bacteriano:


Las poblaciones microbianas raramente mantienen un crecimiento exponencial prolongado. Si ello ocurriera en poco tiempo la tierra estara tapada de una masa microbiana mayor que la de la tierra misma. El crecimiento est normalmente limitado por el agotamiento de nutrientes o por la acumulacin de productos del mismo metabolismo microbiano, que les son txicos a la poblacin. La consecuencia es que el crecimiento al cabo de un cierto tiempo llega a disminuir hasta detenerse. En la figura se ilustra una curva de crecimiento de una poblacin bacteriana. Esta curva se divide en cuatro fases denominadas fase de latencia, fase exponencial o fase logartmica, fase estacionaria y fase de muerte.

Fase de latencia o retraso: Las bacterias se adaptan al medio en el que se encuentran, en este perodo el nmero de clulas no vara no hay divisin por lo tanto el numero no aumenta. El tiempo de adaptacin es variable para las diferentes especies. Fase logar logartmica: Es aqu donde se inicia la multiplicacin bacteriana, el nmero de bacterias aumenta exponencialmente y es aqu donde se liberan las exotoxinas. o residuos que genera la bacteria.

Las diferente poblaciones bacterianas poseen una tasa de crecimiento caracterstica que depende de los nutrientes, T, presencia o no de oxigeno, pH.

Fase estacionaria: Llega un momento en que existe una competencia por los nutrientes ya que estos van disminuyendo en su concentracin y las bacterias dejan de crecer. Tambin existe acumulacin de desechos y exceso de exotoxinas.

Fase de muerte: Las bacterias dejan de multiplicarse y mueren con el tiempo. Hay trmino de nutrientes, acumulacin de material de desecho.

1.4 Ecologa Bacteriana Ecologa: La ciencia que explora las interrelaciones entre los organismos y su medio ambiente bitico y abitico Ecologa bacteriana La ecologa bacteriana estudia todos los aspectos de las bacterias en relacin con el medio en el cual habitan, incluyendo al hombre.

Bacterias de inters a la Ingeniera Ambiental El estudio de las bacterias en Ingeniera Ambiental tiene gran importancia debido a que: Son una de las principales fuentes de contaminacin de aire, agua y suelo, pudiendo ser algunos de ellos patgenos para el humano y otros organismos, as como causar dao a materiales. Algunos juegan un papel importante como indicadores de contaminacin, reflejan no solamente la presencia o ausencia de contaminacin, sino tambin los niveles de dicha contaminacin.

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