GESTION DE CALIDAD EN BACTERIOLOGIA

CRITERIOS DE CALIDAD EN MICROBIOLOGIA

I Pertinencia I Fiabilidad I Reproducibilidad I Eficiencia

clinica

DRA. MARIA VIZCARRA CABREDO

PERTINENCIA CLINICA
I Grado

PERTINENCIA CLINICA
RECOMENDACIONES
I El laboratorio debe mantener

en que una prueba Microbiologica contribuye a prevenir o curar enfermedades infecciosas. prueba de buena calidad es aquella que informa con precisin y aporta resultados tiles para prevenir o curar la infeccin

I Una

una buena comunicacin con el clnico I No es necesario aislar e identificar todos los tipos de microorganismos presentes en la muestra

FIABILIDAD
correcto. I Ejemplo: - Identificacin de agentes patgenos - Pruebas de sensibilidad de grmenes aislados a los antibiticos mediante el mtodo de los discos
I Se mide determinando si el resultado es

FIABILIDAD
RECOMENDACIONES
I Usar terminologia uniforme para designar los

microorganismos . Debe utilizarse siempre la nomenclatura reconocida internacionalmente.

I Es imprescindible el empleo de mtodos

aprobados y uniformes .

REPRODUCIBILIDAD
I La

REPRODUCIBILIDAD
I Falta de homogeneidad:

reproducibilidad o precisin de una prueba microbiologica se ve menoscabada por dos factores : 1. Falta de homogeneidad 2. Falta de estabilidad

En una muestra nica puede haber ms de un microorganismo. En consecuencia , al repetir los cultivos pueden aislarse microorganismos diferentes

REPRODUCIBILIDAD
I Falta de estabilidad:

REPRODUCIBILIDAD
RECOMENDACIN
I Las muestras se deben someter a l examen

A medida que el tiempo transcurre, los microorganismos presentes en un especimen se multiplican o mueren en lapsos de tiempo variables. Por tanto, al repetirse los cultivos pueden aislar diferentes microorganismos.

lo antes posible despus de recogerlas.

EFICIENCIA
I La eficiencia de una prueba microbiolgica

EFICIENCIA
I El agar Mac conkey tiene poca sensibilidad

es la capacidad de sta para dar el diagnstico correcto de un agente patgeno o de un estado morboso. I Se mide por dos criterios: 1. Sensibilidad 2.Especificidad

para aislar Salmonella typhi en las heces. Este importante agente patgeno intestinal pasa a menudo inadvertido a consecuencia de la proliferacin de bacterias intestinales no patgenas.

EFICIENCIA
I La tincin de muestras de esputo por la

FASE PRE-ANALITICA
I Solicitud del anlisis legible y con datos

tcnica de Ziehl Neelsen es sumamente especifica para el diagnstico de tuberculosis, ya que da muy pocos resultados falsos positivos. I La tincin de muestras de orina mediante la tcnica de Ziehl - Neelsen es mucho menos especifica porque da muchos resultados falsos positivos.

completos I Toma de muestra adecuada, transporte y conservacion de la muestra adecuado I Control de calidad de discos, medios de medios de cultivo, reactivos y antisueros , sistemas de identificacin I Control de calidad de equipos I Control de calidad del personal

SOLICITUD DEL ANALISIS

I Nombres y apellidos completos, edad , sexo ,

SOLICITUD DEL ANALISIS

I Diagnostico Clnico (Es importante que en la

servicio, cama I Antecedentes importantes I Si es que el paciente ha recibido o no tratamiento antibiotico previo ( especificar cual) I Finalidad del estudio

solicitud figure si se sospecha de una infeccin intrahospitalaria o no) I Tipo de muestra I La investigacin que se solicita I El responsable de la toma de muestra I Fecha y hora de recoleccin de la muestra I Firma y sello del mdico solicitante

La calidad de la muestra microbiologica

I La efectividad de un laboratorio microbiolgico I

TOMA DE MUESTRAS
La muestra clnica debe ser material del sitio infeccin real y debe recogerse con un mnimo de contaminacin a partir de tejidos, rganos o secreciones adyacentes. I Debe establecerse el momento ptimo para la recoleccin de muestras I Debe obtenerse una cantidad suficiente de la muestra para efectuar las tcnicas de cultivo solicitadas.

y el xito de los procedimientos dependen en gran medida del modo de obtencin, transporte (adecuado y rapido), y de la conservacin hasta el momento el procesamiento .

TOMA DE MUESTRAS
Deben usarse dispositivos de recoleccin y envases adecuados I Toda vez que sea posible, deben obtenerse muestras antes de la administracin de antibioticos. I El envase con la muestra debe rotularse de forma correcta
I I

MEDIO DE TRANSPORTE

CULTIVO ESPUTO

CULTIVO SECRECION FARINGEA

UROCULTIVO TOMA DE MUESTRA

UROCULTIVO TOMA DE MUESTRA

UROCULTIVO TOMA DE MUESTRA

HEMOCULTIVO TOMA DE MUESTRA

HEMOCULTIVO TOMA DE MUESTRA

HEMOCULTIVO TOMA DE MUESTRA

CRITERIOS PARA RECHAZAR UNA MUESTRA

Debe controlarse cada hoja de pedido y etiqueta de la muestra para ver si se ha incluido toda la informacin esencial I Antes de rechazar una muestra debido a una informacin inapropiada o incompleta, se debe establecer contacto con la persona responsable para efectuar las correcciones necesarias para as poder completar la informacin
I

CRITERIOS PARA RECHAZAR UNA MUESTRA

I No indicar tipo de muestra o procedencia en la

orden

I No indicar tipo de examen en la orden I Demora en el envo al laboratorio I Medio de transporte inadecuado I Muestra sin rotular o mal rotulada I Muestra que tenga evidencias de haberse

derramado

CRITERIOS PARA RECHAZAR UNA MUESTRA

I Recipiente inadecuado I Muestra con contaminacin obvia I Muestra seca en el hisopo I Una sola muestra de hisopado con varias

CRITERIOS PARA RECHAZAR UNA MUESTRA

I En casos de muestras rechazadas el personal

ordenes

I Volumen inadecuado

de laboratorio debe explicar al mdico solicitante las razones y observaciones en la ficha de solicitud de diagnstico correspondiente. I En el caso de muestras que no pueden ser obtenidas nuevamente, la interpretacin de la coloracin Gram debe ser revisada cuidadosamente.

CRITERIOS PARA RECHAZAR UNA MUESTRA

I Es importante el examen microscopico del

material clnico, ya que permite conocer no slo la calidad de la muestra, sino tambin la presencia de microorganismos, lo que proporciona suficiente informacin para un diagnstico presuntivo inmediato.

CONTROL DE CALIDAD DE ANTISUEROS

CONTROL DE CALIDAD DE MEDIOS DE CULTIVO

CONTROL DE CALIDAD -MEDIOS DE CULTIVO

I Cada partida de medio de cultivo preparado en

CONTROL DE CALIDAD -MEDIOS DE CULTIVO

I Procedimiento de control de esterilidad

el laboratorio u obtenido comercialmente, debe ser controlado en el laboratorio para lo cual es necesario realizar: 1. Control de Esterilidad 2. Control de las propiedades de los medios de cultivo 3. Control del ph 4. Control de la fecha de expiracin

Una parte proporcional de cada lote de fabricacin (5%), se aparta para efectuar un control de esterilidad de esterilidad, que consiste en comprobar la ausencia de crecimiento despus de dos das de incubacin a 35C y 5 dias a temperatura ambiente para descartar hongos.

CONTROL DE CALIDAD -MEDIOS DE CULTIVO

I Interpretacin:

CONTROL DE CALIDAD -MEDIOS DE CULTIVO

I Procedimiento

Si no hay crecimiento en el grupo control, se mantiene el resto del lote en el refrigerador hasta su utilizacin (suponiendo que pase el segundo control).

de control de las propiedades de los medios: Una parte de cada lote de fabricacin de medios de cultivo se aparta para ser inoculado, por lo menos, con dos microorganismos control caracterstico del citado medio.

CONTROL DE CALIDAD -MEDIOS DE CULTIVO

Las cepas patrn se incuban en caldo durante una noche , y al da siguiente, se resiembra una asa de 3mm. Por agotamiento en estria , con el fin de conseguir un aislamiento. Existen tablas donde se exponen los posibles microorganismos control para los diferentes medios

Control de calidad de medios de cultivo

AGAR MAC CONKEY
violeta inhiben el crecimiento de las Gram positivas ILas colonias fermentadoras de lactosa producen una cada localizada del pH (degradan la lactosa y producen cidos que hace virar el indicador rojo neutro dando coloraciones rojizas) IControl de calidad IEscherichia coli crecimiento. Colonias rosadas IProteus mirabilis crecimiento. Colonias incoloras IStreptococcus faecalis no crece
ILas sales biliares y el cristal

CONTROL DE CALIDAD DE MEDIOS DE CULTIVO

CONTROL DE CALIDAD -MEDIOS DE CULTIVO

I Procedimiento del control de pH:
I

CONTROL DE CALIDAD -MEDIOS DE CULTIVO

Procedimiento de caducidad: En el momento de emplacar los agares es preciso rotular de forma visible sobre cada placa, el nombre del medio de cultivo y la fecha de su preparacin. De esta manera ser fcil en todo momento identificarlo y reconocer el tiempo de caducidad. Existen tablas donde se seala la caducidad de los medios preparados.

El pH de cada medio debe comprobarse con un pH metro despus que se ha dejado que el medio se enfrie a temperatura ambiente. El pH no puede determinarse con fiabilidad mientras el medio est caliente.

IDENTIFICACION BACTERIANA

IDENTIFICACION BACTERIANA API 20 E

IDENTIFICACION BACTERIANA EQUIPOS ANALIZADORES

CONTROL DE CALIDAD -REACTIVOS PARA COLORACIONES

I Procedimiento de control:

CONTROL DE CALIDAD -REACTIVOS PARA COLORACIONES

Se preparan portas de microscopio con una gota de una suspensin que contenga organismos Gram positivos y Gram negativos mezclados en diferentes proporciones. Una vez seco, estos portas de microscopio pueden almacenarse para su empleo posterior como controles de la tincin Gram.

CONTROL DE CALIDAD -REACTIVOS PARA COLORACIONES

Los porta que contienen microorganismos cido resistentes pueden prepararse de una manera similar I Frecuencia: Una vez por semana y cada vez que se prepara un reactivo nuevo.

CONTROL DE CALIDAD -CEPARIO

I Seleccin de cepas de

control I Mantenimiento de cultivo stock I Propagacin de cultivos stock para su uso

CONTROL DE CALIDAD -CEPARIO

CONTROL DE CALIDAD -CEPARIO

I Seleccin de cepas de control

Cepas ATCC ( American Type Culture Collection) Aislamientos debidamente documentados a partir de muestras clinicas Fabricantes comerciales Encuestas de evaluacin externa de la calidad Laboratorios de referencia

CONTROL DE CALIDAD -CEPARIO

I Mantenimiento del cultivo Stock

CONTROL DE CALIDAD -CEPARIO

La Cepa mantenida congelada y/o liofilizada, debe ser propagada por suspensin en leche descremada al 20% y alicuotadas (0.5 a 1ml) - Congelar a -20C : duracin 1 ao o - Congelar a -70C : duracin indefinida - Cultivo liofilizado, duracin indefinida Controlar viabilidad por lo menos una vez al ao.

Permiten efectuar resiembras a intervalos de meses o incluso aos. Los mejores mtodos son la liofilizacin o el almacenamiento a - 70C o menos.

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CONTROL DE CALIDAD -CEPARIO

I

FASE ANALITICA
I Es

Propagacin de cultivos stock para su uso Se recomienda realizar no ms de 4 sub cultivos Para trabajar viales congelados se colocan en agua tibia y se cultiva en medio apropiado. No recongelar. Sembrar en tendidos y placas las que serviran como cultivo primario. Esto puede ser mantenido por un periodo no superior a 4 semanas dependiendo de la bacteria.

necesario que en todo laboratorio de microbiologia exista un manual de Procedimientos

FASE ANALITICA
I Es importante el examen microscopico

FASE ANALITICA-Hemocultivos
I Procedimiento de control:

del material clnico, ya que permite conocer no slo la calidad de la muestra, sino tambin la presencia de microorganismos, lo que proporciona suficiente informacin para un diagnstico presuntivo inmediato.

Realizar subcultivos y Tincin de Gram simultaneamente. I Frecuencia: Cada vez que se realiza el subcultivo I Interpretacin: Si en la tincin Gram se observan bacterias y no se desarrollan en el cultivo se debe pensar en anaerobios o en bacterias fastidiosas.

FASE ANALITICA-Hemocultivos
I Procedimiento de control:

FASE ANALITICA-Urocultivos
I Procedimiento de control:

Revisin de resultados obtenidos I Frecuencia: Mensualmente I Interpretacin : Si aparecen con frecuencia Staphylococcus coagulasa negativa se debe pensar en contaminacin en la toma de muestra.

Gram de orina no centrifugada I Frecuencia: Cada vez que se realice I Interpretacin : La presencia de uno o varios elementos bacterianos por campo examinado por inmersin suele indicar que la muestra contiene 105 o mas bacterias por mililitro.

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FASE ANALITICA-Urocultivos
La presencia de uno o varios leucocitos por campo es un indicio ms de infeccin urinaria. En las mujeres la presencia de muchas celulas epiteliales escamosas , mezcladas o no con bacterias , es un fuerte indicio presuntivo de que la muestra est contaminada por flora vaginal y obligar a examinar otra muestra.

FASE ANALITICA-Urocultivos
Debe existir concordancia entre el gram y el cultivo. Un gram que muestra indicios de infeccin urinaria con cultivo negativo puede deberse a procesamiento de diferentes muestras o tambin puede ocurrir si el paciente est en tratamiento antimicrobiano antes de la toma de muestra.

FASE ANALITICA-Esputo
I Procedimiento de control:

FASE ANALITICA-Esputo
I Frecuencia:

Se clasifica a la muestra basada en la presencia de leucocitos y clulas epiteliales utilizando el Sistema de clasificacin en grados de Murray o el Sistema de clasificacin en grados de Barlett para evaluar la calidad de la muestra de esputo.

Cada vez que se realice I Interpretacin: Segn el sistema de Barlett un puntaje final de 0 o menos indica ausencia de respuesta inflamatoria o presencia de una contaminacin salival significativa, lo cual invalida la muestra

Control de calidad FASE ANALITICA-Esputo

Segn el sistema de Murray el gran nmero de clulas epiteliales en los grupos 1 a 4 indica contaminacin con secreciones orofaringeas e invalida la muestra. Solo las muestras del grupo 5 se considera de importancia clnica. CULTIVO DE ESPUTO (Sistema de clasificacin en grados de Murray) Gram con objetivo 10x CE/ campo leucocitos/ campo Grupo 1 25 <10 Grupo 2 25 10-25 Grupo 3 25 25 Grupo 4 10-25 25 Grupo 5 <10 25

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FASE ANALITICA-Antibiogramas
VARIABLES A CONTROLAR I Caractersticas del medio de cultivo I Inoculo I Agente antimicrobiano I Incubacin I Interpretacin del tamao de la zona de inhibicin

FASE POST-ANALITICA
I Al emitir un informe es importante que se

tenga en cuenta la poblacin de microorganismos que residen normalmente en el cuerpo humano I Debe utilizarse siempre la nomenclatura reconocida internacionalmente. I Todos resultados deben ser revisados por el encargado del rea antes de ser entregados.

FASE POST-ANALITICA
I Debe evaluarse el

porcentaje de exmenes discordantes con la clnica I Debe evaluarse el porcentaje de error de transcripcin al informe I Debe evaluarse la oportunidad

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