Noes Bsicas de Toxicologia

Paula F. G de S, PhD






2011

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INTRODUO

Atualmente, com a industrializao, estamos em contato contnuo com agentes txicos. Dados
da Organizao Mundial da Sade indicam que ocorrem diariamente, em nosso pas doze mil casos de
intoxicao todos os dias. Considerando que estima-se a ocorrncia de um bito para cada mil casos,
podemos concluir que doze brasileiros morrem intoxicados por medicamentos ou substncias qumicas
todos os dias. Dependendo das propriedades fsico-qumicas desses agentes, eles podero ser
absorvidos pelo trato gastrintestinal, pulmes e/ou pele. Contudo, considerando a capacidade do nosso
organismo em biotransformar e excretar tais compostos podero ser eliminados causando danos
fisiolgicos mnimos. Quando o nvel de absoro excede o nvel de eliminao, eles provavelmente se
acumularo em concentraes crticas em rgos alvos do organismo e ocasionar efeitos irreversveis.O
conhecimanto da disposio e do mecanismo de ao dos diversos agentes txicos de grande
importncia para que se proceda a avaliao do grau de toxicidade dos mesmos.
A Toxicologia , portanto, a cincia que auxilia a compreenso dos efeitos nocivos causados pela
interao de intoxicantes com os organismos vivos. Ela tem por objetivos: a avaliao do risco associado
aos processos de intoxicao, o estabelecimento de medidas de segurana na utilizao de substncias
qumicas e finalmente prevenir os processos de intoxicao (antes que ocorram alteraes da sade).

1 - CONCEITOS BSICOS.


1.1 - Toxicologia
Define-se como a cincia que estuda os efeitos nocivos (efeitos adversos no desejados)
causados pela interao das substncias qumicas sobre os organismos vivos. Sendo assim, ao se
conhecer tal efeito e as caractersticas do agente txico possvel estabelecer processos de preveno,
estabelecendo-se o uso seguro dassubstncias qumicas.


Trs elementos bsicos so considerados como fundamentais:
1) A entidade qumica (EQ) capaz de eliciar o efeito txico;
2) O sistema biolgico (SB) com o qual a EQ ir interagir para produzir o efeito;
3) A resposta nociva sobre o sistema.
Tambm imprescindvel a existncia de um meio adequado atravs do qual o SB e o EQ
possam interagir.

Assim:



SB EQ
2



Resposta Nociva (Efeito adverso ou txico)

Obs: Nos ltimos anos tem sido aceito que, efeitos adversos provocados por agentes fsicos,
sejam parte, tambm, da Toxicologia.

I.2 - Toxicologista
Trata-se do profissional, oriundo de qualquer rea de formao, capacitado para o estudo e a
determinao dos efeitos nocivos ocasionados por entidades qumicas diversas, sendo tambm,
potencialmente apto a avaliar a probabilidade do aparecimento destes efeitos. Suas principais
atividadades consistem em:
a) Avaliao do risco no uso de substncias qumicas.
b) Estabelecimento de limites de segurana para o uso das mesmas.
c) Realizao de anlises toxicolgicas que permitam a monitorizao e o controle dos limites de
segurana estabelecidos

I.3 - reas da Toxicologia
Apesar de j ter sido considerada como um apndice da Cincia Forense, ela abrange uma
vasta rea de conhecimentos, nos quais diversos profissionais atuam no intuito de prevenir, diagnosticar e
tratar os efeitos nocivos causados pelos agentes qumicos. Na rea Biomdica, tem como foco a
investigao dos efeitos adversos resultantes da exposio dos seres humanos s drogas/outras
substncias qumicas, bem como a caracterizao de efeitos relacionados segurana/ riscos
associados utilizao dessas.

Sendo assim so distinguidas vrias reas em sua totalidade, de acordo com a natureza do
agente ou a maneira como este alcana o organismo. Destacam-se entre outras:

Toxicologia Ambiental: estuda os efeitos nocivos produzidos por substncias qumicas presentes no
macro ambiente dos seres vivos (gua, ar e solo).
Toxicologia Ocupacional: estuda os efeitos nocivos causadas por substncias qumicas presentes no
ambiente de trabalho(micro ambiente). Nos ltimos tempos, a Toxicologia Ocupacional tem merecido
grande destaque, considerando os direitos trabalhista adquiridos ao longo da histria.
Toxicologia Forense: estuda os aspectos mdicos legais da intoxicao
Toxicologia de Alimentos: que estuda os efeitos adversos produzidos por agentes qumicos presentes
nos alimentos, sejam estes de origem biognica ou antropognica.
Toxicologia Clnica: estuda os efeitos adversos decorrentes do uso inaproriado de drogas ou
medicamentos, da interao medicamentosa ou da susceptibilidade individual.
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Toxicologia Social: estuda o efeito nocivo dos agentes qumicos usados pelo homem em sua vida de
sociedade, seja sob o aspecto individual, social (de relao) ou legal.

Todas estas reas podero ser estudadas sob trs aspectos distintos: o clnico, o analtico e o
experimental.

I.4 - Agente Txico (AT), Xenobitico, Toxicante
Define-se como agente txico qualquer substncia qumica (ou agente fsico, para alguns
cientisyas) que, ao interagir com um sistema vivo, capaz de produzir uma alterao funcional deletria,
sendo capaz at mesmo de causar a morte do organismo. Contudo, como de conhecimento popular, o
grande alquimista Paracelsus (1493-1591), apresentou na idade mdia a clebre frase: Todas as
substncias so venenos, no h uma que no seja. A dose correta que diferencia um veneno de um
remdio. Sendo assim, deve-se acrescentar ao conceito acima que um agente txico a entidade
qumica que tem a capacidade potencial de produzir um efeito deletrio num organismo, se presente em
dose ou concentrao suficientes no stio de ao especfico e por um perodo de tempo suficiente.
Assim, intimamente relacionado com o conceito de agente txico, existem dois outros conceitos
de extrema importncia: o de Toxicidade e o de Risco, que sero detalhados mais tarde.
Como a maioria das substncias qumicas consideradas como agentes txicos so substncias
exgenas aos organismos, o termo xenobitico, derivado do grego xeno que significa estranho, usado
para indicar uma substncia estranha ao organismo. Os xenobiticos podem produzir efeitos benficos,
como por exemplos os medicamentos, ou adversos (toxicante ou agente txico). Recentemente, surgiu no
glossrio toxicolgico da nossa lngua o termo Toxicante, resultante da traduo temo ingls, toxicant,
que se refere ao agente qumico j absorvido, apto a atuar em seu stio de ao.

I.4.1 - Classificao dos Agentes Txicos
Os AT podem ser classificados de diversas maneiras dependendo dos critrios utilizados. A
seguir so apresentadas algumas destas classificaes:
- Quanto natureza:
naturais (mineral, vegetal, animal).
sintticos
- Quanto ao rgo ou sistema onde atuam (mais freqente atualmente)
nefrotxicos
neurotxicos
hepatotxicos
genotxicos entre outros,
- Quanto s caractersticas fsicas:
Gases: so fludos, sem forma, que permanecem no estado gasoso em condies normais
de presso e temperatura. Ex.: CO, NO e NO
2
, O
3
etc.
4
Vapores: so as formas gasosas de substncias normalmente slidas ou lquidas nas
condies ambientais. Ex: vapores resultantes da volatilizao de solventes orgnicos como
benzeno, tolueno, xileno etc.
Partculas ou aerodispersides: partculas de tamanho microscpico, em estado slido ou
lquido. Ex: poeiras e fumos; neblinas e nvoas.

I.5 - Toxicidade
Refere-se capacidade que um determinado agente qumico em provocar uma leso, sendo a
propriedade potencial de um agente qumico de instalar um processo patolgico em consequncia da
sua introduo e interao com o organismo vivo (termo qualitativo. Uma substncia muito txica causar
dano a um organismo se for administrada em quantidades muito pequenas, enquanto que uma
substncia de baixa toxicidade somente produzir efeito quando a quantidade administrada for muito
grande.
O conhecimento da toxicidade das substncias qumicas se obtm atravs de experimentos em
laboratrio utilizando animais. Os mtodos so empregados tem como finalidade fornecer informaes
relativas aos efeitos txicos e consequentemente avaliar riscos destes que podem ser extrapolados ao
homem. Os parmetros geralmente utilizados so a DL
50
(dose necessria para matar 50% da populao
estudada) ou ento a provvel dose letal oral para homens.
De acordo com a classificao proposta por HODGES & HAGGARD, de acordo com a provvel
dose letal para humanos, os xenobiticos podem ser subdividdos em 6 classes de toxicidade,:

Classe Categoria de Toxicidade Provvel DL oral/ humanos
1 Praticamente no-txica > 16 g/Kg
2 Ligeiramente txica 5-15 g/Kg
3 Moderadamente txica 0,5-5 g/Kg
4 Muito txica 50-500 mg/Kg
5 Extremamente txica 5-50 mg/Kg
6 Super txica < 5 mg/Kg

Recentemente, a agncia regulatria europia, classificou as substncias qumicas em apenas 3
categorias, a saber:
- Muito Txica: substncias com DL
50
para ratos menor do que 25 mg/kg
- Txicas : substncias com DL
50
para ratos enrte 25 e 200 mg/kg
- Nociva : substncias com DL
50
para ratos enrte 200 e 2000 mg/kg
Em situaes prticas no se deve conhecer somente a toxicidade das substncias,
representadas geralmente pela DL
50
, pois to importante como conhec-la, conhecer e saber
avaliar o risco txico de tais substncias.
Sabe-se que a toxicidade intrnseca um parmetro extremamente varivel, influenciado por uma
srie de fatores como ser visto a seguir.
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I.5.1 - Fatores que influem na Toxicidade
- Fatores ligados ao agente qumico
propriedade fsico-qumica (solubilidade, grau de ionizao, coeficiente de partio leo/gua,
pKa, tamanho molecular, estado fsico, etc.);
impurezas e contaminantes;
fatores envolvidos na formulao (veculo, adjuvantes).
- Fatores relacionados com o organismo
espcie, linhagem, fatores genticos;
fatores imunolgicos, estado nutricional, dieta;
sexo, estado hormonal, idade, peso corpreo;
estado emocional, estado patolgico.
- Fatores relacionados com a exposio
via de introduo;
dose ou concentrao.
- Fatores relacionados com o ambiente
temperatura, presso;
radiaes;
outros (luz, umidade, etc.).

Assim, to importante como conhecer a Toxicidade dos agentes qumicos saber avaliar o Risco
Txico de uma substncia.

I.6 - Risco txico
Considera-se como risco txico a probabilidade de uma substncia produzir um efeito adverso,
um dano, em condies especficas de uso. Ressalta-se que nem sempre a substncia de maior
toxicidade a de maior risco, pois considerando as condies de uso, uma substncia classificada como
muito txica (elevada toxicidade intrnseca) pode ser menos perigosa do que uma classificada como
atxica.
Contudo, se existe um risco associado ao uso de uma substncia qumica, h sempre a
necessidade de estabelecer condies de segurana. Por conseguinte, temos que segurana a certeza
real de que o uso do agente no acarretar efeitos adversos ao indivduo exposto se essa for utilizada na
quantidade e na forma apropriada. Esta deciso considerada complexa e envolve o binmio Risco-
Benefcio, ou seja, altos riscos podem ser aceitveis no uso das chamadas Life Saving Drugs, ou seja, os
frmacos essenciais vida e no serem aceitveis no uso de aditivos de alimentos, por exemplo.
Alguns fatores a serem considerados na determinao de um Risco aceitvel so:
Necessidade do uso da substncia;
Disponibilidade e a adequao de outras substncias alternativas para o uso correspondente;
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Efeitos sobre a qualidade do ambiente;
Consideraes sobre o trabalho (no caso dela ser usada no meio ocupacional);
Avaliao antecipada de seu uso pblico (ou seja, o que ela poder causar sobre a populao em
geral, onde existe, por exemplo, crianas, velhos, doentes, etc.);
Consideraes econmicas.

I.8 - Intoxicao
Considera-se como o conjunto de efeitos adversos produzidos por um agente qumico (ou fsico),
em decorrncia de sua interao com o sistema biolgico. Sendo assim, muitas vezes referido como o
desequilbrio orgnico ou o estado patolgico provocado pela interao entre o agente qumico e o
organismo, sendo, via de regra, revelados clinicamente por um conjunto de sinais e sintomas txicos.
Para que uma intoxicao se estabelea existe uma srie de processos envolvidos, que envolve
desde o contato do agente txico com o organismo at o aparecimento dos sintomas clnicos que revelam
o fenmeno. Sendo assim, didaticamente a intoxicao divida em 4 fases distintas, a saber:
Fase de Exposio: corresponde ao contato do agente txico com o organismo.
Fase Toxicocintica: consiste no movimento do AT dentro do organismo. formada pelos processos
de Absoro, Distribuio e Eliminao (Bio-transformao e Excreo).
Fase Toxicodinmica: corresponde ao do AT no organismo.
Fase Clnica: corresponde manifestao clnica dos efeitos resultantes da ao txica.

I.9 - Classificao dos Efeitos Txicos
Inicialmente deve-se diferenciar efeito indesejvel de efeito adverso e txico.
- Efeitos indesejveis:
O espectro de efeitos indesejveis muito amplo. Por exemplo, na teraputica, cada droga pode
produzir vrios de efeitos, mas apenas um est relacionado com o papel teraputico procurado. Sendo
assim, os demais efeitos obseravdos so indesejveis. Um exemplo a secura na boca um efeito
indesejvel, quando a atropina usada no tratamento da lcera pptica, mas torna-se desejado se ela
usada como medicao pr-anestsica.
- Efeitos Adversos ou nocivos:
Os efeitos nocivos so aqueles que ocorrem com uma exposio intermitente ou continuada e
que do lugar diminuio da capacidade funcional (determinada por parmetros anatmicos, fisiolgicos
e bioqumicos ou de comportamento) ou a uma diminuio da capacidade para compensar tenses
adicionais. So reversveis durante a exposio ou logo cessada esta e evidenciam a suscetibilidade do
organismo aos fatores nocivos de outras influncias ambientais. Podem ser causados por fatores
qumicos, fsicos, biolgicos ou mecnicos.
- Efeitos Txicos:
So os efeitos adversos causados por substncias qumicas e so, na maioria das vezes, dose-
dependentes. Todo o efeito txico indesejvel e adverso, mas nem todo efeito adverso txico.

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I.9.1 - Reaes Idiossincrticas ou Idiossincrasias Qumicas
So respostas quantitativamente anormais a certos agentes txicos provocados, geralmente, por
alteraes genticas. O indivduo pode ter uma resposta adversa com doses baixas (no-txicas) ou
ento ter uma resposta extremamente intensa com doses mais elevadas. Exemplo: sensibilidade anormal
aos nitritos e outros metemoglobinizantes, devido deficincia, de origem gentica, na NADH-
metemoglobina redutase.

I.9.2 - Reaes Alrgicas ou Alergia Qumica
So reaes adversas que ocorrem somente aps uma prvia sensibilidade do organismo ao AT,
ou a um produto quimicamente semelhante. Na primeira exposio, a substncia age como um hapteno e
promove a formao dos anticorpos, que em 2 ou 3 semanas esto em concentraes suficientes para
produzir reaes alrgicas em exposies subsequentes.
Alguns toxicologistas no concordam que as alergias qumicas sejam efeitos txicos, j que elas
no obedecem ou apresentam uma curva dose-resposta (elas no so dose dependente como a grande
maioria dos efeitos txicos). Entretanto, como a alergia qumica um efeito indesejvel e adverso ao
organismo, pode ser reconhecido como efeito txico.

I.9.3 - Efeito Imediato, Crnico e retardado
Efeitos ditos imediatos ou agudos so aqueles que aparecem imediatamente aps uma
exposio aguda, ou seja, exposio nica ou que ocorre, no mximo, em 24 horas.

Efeitos crnicos so aqueles resultantes de uma exposio crnica, ou seja, exposio a
pequenas doses, durante vrios meses ou anos. O efeito crnico pode advir de dois
mecanismos:
a) somatria ou acmulo do agente txico no organismo: a velocidade de eliminao
menor que a de absoro, assim ao longo da exposio o AT vai sendo acumulado no
organismo, at alcanar um nvel txico.
b) somatria de efeitos: ocorre quando o dano causado irreversvel e, portanto, vai
sendo aumentado a cada exposio, at atingir um nvel detectvel; ou, ento, quando o
dano reversvel, mas o tempo entre cada exposio insuficiente para que o organismo
se recupere totalmente.
Efeitos retardados so aqueles que s ocorrem aps um perodo de latncia, mesmo quando
j no mais existe a exposio. O exemplo mais conhecido o efeito carcinognico, sendo
que alguns deles podem ter um perodo de latncia entre 20-30 anos.

I.9.4 - Efeitos Reversveis e Irreversveis
A manifestao de um ou outro efeito vai depender, via de regra, da capacidade do tecido lesado
em se recuperar. Assim, leses hepticas so geralmente reversveis, j que este tecido tem grande
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capacidade de regenerao, enquanto as leses no sistema nervoso central (SNC) tendem a ser
irreversveis, uma vez que as clulas nervosas so pouco renovadas.

I.9.5 - Efeitos Locais e Sistmicos
O efeito local refere-se quele que ocorre no local do primeiro contato entre o AT e o organismo.
J o sistmico exige uma absoro e distribuio da substncia, de modo a atingir o stio de ao, onde
se encontra o receptor biolgico. Existem substncias que apresentam os dois tipos de efeitos. (Ex.:
benzeno, chumbo tetraetila, etc).
Algumas vezes uma leso local intensa pode levar ao aparecimento de um efeito sistmico. Ex.:
queimaduras intensas com cidos podem levar a uma leso renal, devido perda excessiva de lquidos.

I.9.6 - Efeitos Resultantes da Interao de Agentes Qumicos
O termo interao entre substncias qumicas utilizado todas as vezes que uma substncia
altera o efeito de outra. A interao pode ocorrer durante as fases de exposio, toxicocintica ou
toxicodinmica. Como conseqncia destas interaes podem resultar diferentes tipos de efeitos:

I.9.6.1 - Efeito Aditivo ou Adio
aquele produzido quando o efeito final dos dois agentes igual soma dos efeitos individuais,
que aparecem quando eles so administrados separadamente (1 + 1 = 2). Ex.: inseticidas
organofosforados.

I.9.6.2 - Efeito Sinrgico ou Sinergismo
Ocorre quando o efeito dos agentes qumicos combinados maior do que a soma dos efeitos
individuais (1 + 1 = 10).
Ex.: a hepatotoxicidade resultante da interao entre tetracloreto de carbono e lcool muito
maior do que aquela produzida pela soma das duas aes em separado, uma vez que o etanol inibe a
biotransformao do solvente clorado.

I.9.6.3 Potenciao
Ocorre quando um agente qumico, que no tem ao sobre um determinado rgo, aumenta a
ao de um outro agente sobre este rgo (0 + 1 = 10).
Ex.: o isopropanol, que no hepatotxico, aumenta excessivamente a hepatotoxicidade do
tetracloreto de carbono.

I.9.6.4 - Efeito Antagnico ou Antagonismo
Ocorre quando dois agentes qumicos interferem um com a ao do outro, diminuindo o efeito
final. , geralmente, um efeito desejvel em Toxicologia, j que o dano resultante (se houver) menor
que aquele causado pelas substncias separadamente. Existem vrios tipos de antagonismo:
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Antagonismo qumico, tambm chamado neutralizao: Ocorre quando o antagonista
reage quimicamente com o agonista, inativando-o. Este tipo de antagonismo tem um
papel muito importante no tratamento das intoxicaes. Ex.: agentes quelantes como o
EDTA, BAL e penicilamina, que seqestram metais (As, Hg, Pb, etc.) diminuindo suas
aes txicas.
Antagonismo funcional: Ocorre quando dois agentes produzem efeitos contrrios em
um mesmo sistema biolgico atuando em receptores diferentes. Ex.: barbitricos que
diminuem a presso sangnea, interagindo com a norepinefrina, que produz
hipertenso.
Antagonismo no-competitivo, metablico ou farmacocintico: quando um frmaco
altera a cintica do outro no organismo, de modo que menos AT alcance o stio de
ao ou permanea menos tempo agindo. Ex.: bicarbonato de sdio que aumenta a
secreo urinria dos barbitricos; fenobarbital que aumenta a biotransformao do
inseticida paraoxon, diminuindo sua ao txica.
Antagonismo competitivo, no-metablico ou farmacodinmico: Ocorre quando os dois
frmacos atuam sobre o mesmo receptor biolgico, um antagonizando o efeito do
outro. So os chamados bloqueadores e este conceito usado, com vantagens, no
tratamento clnico das intoxicaes. Ex.: Naloxone, no tratamento da intoxicao com
opiceos.


2 - TIPOS DE TESTES DE TOXICIDADE
Para estudar o potencial txico de uma substncia qumica preciso, alm de estabelecer uma
relao dose-resposta, proceder realizao de outros estudos toxicolgicos ou testes de toxicidade.
Uma das finalidades dos Testes de toxicidade fornecer dados que possam ser utilizados para avaliao
do risco do uso de substncias qumicas para o homem e estabelecer limites de segurana na exposio
aos agentes qumicos.
Aps o episdio da Talidomida (epidemia de m formao congnita, 1959-1961, em crianas
cujas respectivas mes haviam feito uso da talidomida no incio da gravidez), as Instituies
Governamentais, em diversos pases, exigiram um maior rigor na realizao dos testes toxicolgicos
objetivando acabar ou minimizar a ocorrncia das chamadas reaes adversas aos medicamentos.
No se tratando de medicamento, estes testes devem ser realizados para cada substncia
qumica produzida e comercializada, de acordo com os critrios j vistos anteriormente. Os tipos de testes
a serem realizados, podem variar de um pas para outro, no entanto devem considerar os principais
critrios de avaliao de toxicidade:
exame anatomo-patolgico (aspectos macro e microscpico)
peso dos rgos
crescimento do animal
exames fisiolgicos
10
exames bioqumicos
estudos do comportamento
efeito sobre a fertilidade e feto
DE
50
e DL
50

CE
50
e CL
50

No Brasil, a Resoluo 1/88 (D.O. 17/10/88) do Conselho Nacional de Sade, apesar de nos e
encontrar vigente estabelece 5 tipos de ensaios de toxicidade: Aguda, Sub-aguda, Crnica,
teratognicidade, embriotoxicidade e estudos especiais (estudos de comportamento, carcinognicidade e
outros). Atualmente, a ANVISA estabel paar cada classe de mediacmentos os ensaios a serem realizados

3.1- Teste de toxicidade aguda
Este estudo caracterizado pela administrao ou exposio da substncia qumica numa dose
nica (ou mltipla num espao de 24 horas), utilizando pelo menos duas espcies. A DL
50
(e CL
50
) a
prova mais comum de toxicidade aguda.
Os principais objetivos deste estudo so:
avaliar a toxicidade intrnseca do Agente Toxico ou Substncia Qumica.
avaliar a suscetibilidade das espcies
identificar rgos alvo
promover informaes para o delineamento e seleo dos nveis de dose para estudos mais
prolongados (toxicidade crnica)

3.2- Testes de toxicidade sub-crnica
O tempo de exposio deste estudo de 1 a 3 meses. So usadas 3 doses experimentais
(mnima, intermediria e mxima). Sendo que a dose mxima no deve produzir um ndice de letalidade
acima de 10% (para que no inviabilize as avaliaes histopatgicas e bioqumicas).
Os principais objetivos deste estudo so:
determinar a dose de nenhum efeito observado DNEO (que significa a dose mxima na qual no se
observa efeito).
estudar mais efetivamente rgos alvos e determinar aqueles com mais suscetibilidade.
prover dados sobre dosagens seletivas para estudo de toxicidade crnica.

3.3 -Testes de Toxicidade Crnica
Este estudo semelhante ao sub-crnico, porm o perodo de exposio de 2 anos ou quase
toda a vida do anima. Como no teste anterior, este tambm no procura letalidade e utiliza 3 nveis de
dose pela via de administrao segundo a via de uso prescrita.
O protocolo experimental compreende as observaes e alteraes especificadas no estudo de
toxicidade sub-crnica e outros parmetros bioqumicos que permitem uma melhor avaliao de todos os
rgos e funes, principalmente funo renal e heptica.
Os principais objetivos deste estudo so:
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Verificar as concentraes/doses mximas das substncias que no produzem efeitos discernveis de
doena, quando administradas durante a maior parte da vida do animal.
verificar os efeitos txicos que no so resultados dos estudos de toxicidade sub-crnica
procura-se determinar o mecanismo de ao txica das substncias qumicas.

3.4- Testes de Carcinogenicidade:
As evidncias primrias que podem apontar o potencial carcinognico das substncias qumicas
so de origem epidemiolgica ou experimental em roedores. Esses efeitos devem ser observados em
pelo menos, duas espcies de animais de laboratrio, com uma durao mxima de 130 semanas em
ratos, 120 semanas em camundongos e 130 semanas em hamsters. So utilizadas, no mnimo, 2 doses
da substncia. A maior dose a dose mxima tolerada (DMT), definida como sendo aquela que no
provoca no animal uma perda de peso superior a 10% e no induz mortalidade ou sinais clnicos de
toxicidade. A menor dose corresponde metade da DMT. Cada grupo experimental constitudo de, pelo
menos, 50 animais. Todos animais utilizados no experimento so submetidos necropsia completa.
A avaliao final do risco de carcinogenicidade para o homem, alm das evidncias primrias,
obtida pela execuo de testes de curta durao (evidncias secundrias). Estes testes podem ser
agrupados em 3 categorias gerais:
Testes que detectam leso do DNA, incluindo o estudo da formao de ligaes entre o DNA e os
produtos ativos formados na biotransformao do agente txico, quebra de fitas, induo de profagos
e reparo do DNA
Testes que evidenciam alteraes dos produtos gnicos ou das funes celulares
Testes que avaliam alteraes cromossmicas.
A evidncia de carcinogenicidade considerada limitada nas seguintes situaes:
- nmeros reduzidos de experimentos
- impropriedade de dose e vias de administrao
- emprego de uma nica espcie animal
- durao imprpria do experimento;
- nmero reduzido de animais e
- dificuldade em diferenciar as neoplasias malgnas e bengnas.
A evidncia inadequada indicada nas seguintes situaes:
- a no excluso do acaso nos estudos realizados;
- a existncia de vcios no delineamento experimental;
- a existncia de outros estudos que demonstrem a ausncia de carcinogenicidade.

3.5 - Testes de Mutagenicidade
Os efeitos mutagnicos das substncias qumicas podem ser avaliados atravs de ensaios como
microorganismos e em organismos superiores, inclusive o homem. Os ensaios com microorganismos,
realizados "in vitro", so indicados na triagem rotineira dos agentes txicos. Os ensaios com
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microorganismos avaliam basicamente o dano provocado ao DNA pela substncia qumica estudada ou
seu produto de biotransformao
No estudo do potencial mutagnico de um composto, os ensaios com animais de laboratrio
oferecem grandes vantagens, especialmente a de reproduzir as condies de exposio do homem.
Nestes ensaios, as alteraes cromossmicas so identificadas na medula ssea do fmur de ratos e
camundongos expostos experimentalmente ao agente txico.

3.6 - Testes de Teratogenicidade
A avaliao do efeito teratognico de um composto qumico, atravs de mtodos experimentais
em animais de laboratrio executada num complexo protocolo envolvendo 3 fases distintas.
A primeira fase tem por objetivo avaliar o potencial txico do composto qumico sobre a fertilidade
e o desempenho reprodutivo. Compreende o tratamento dos animais, machos e fmeas, durante um
perodo de no mnimo 60 dias antes do acasalamento e, depois, para as fmeas durante a gestao e
lactao. Ao meio termo da gravidez procede-se o sacrifcio da metade doas animais do grupo
experimental para a constatao de anormalidades uterinas. Ao final, so observados o nmero, sexo,
peso corpreo e anormalidades externas em todos os filhotes.
Na segunda fase, as informaes so obtidas a partir da administrao de doses dirias da
substncia qumica na dieta de animais fmeas grvidas no perodo da organognese. Neste estudo
feita uma avaliao minuciosa e detalhada da mo e filhotes.
Os estudos da terceira fase avaliam os efeitos as substncia sobre o desenvolvimento peri e ps
natal. A administrao da substncia qumica feita durante o perodo que compreende o ltimo tero da
gestao at o desmame. Neste estudo avaliado o desenvolvimento somtico, neromotor, sensorial e
comportamento da prole.

3.7 - Testes comportamentais
Devido uma maior preocupao da populao relacionada os efeitos neurocomportamentais e os
poluentes ambientais, o desenvolvimento de testes comportamentais em animais de laboratrios tm
alcanado maior relevncia.
Temos o exemplo do chumbo, que foi proibido sua adio na gasolina no pela incidncia de
encefalopatias e sim pelos estudos no comportamento.
Atualmente 25% dos limites de segurana para substncias qumicas derivam de estudos no
comportamento.

3 - EXTRAPOLAO DOS DADOS TOXICOLGICOS
Em muitos casos os estudos com animais permitem prognosticar os efeitos txicos das
substncias qumicas no homem. Portanto, a finalidade de realizao dos mesmos fornecer dados que
possam ser utilizados para avaliao do risco no uso da substncia qumica para o homem e estabelecer
Limites de Segurana para a exposio qumica.
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Contudo, importante compreender que os modelos de animais experimentais apresentam
limitaes e que a exatido e fidedignidade de uma predio quantitativa de toxicidade no homem
dependem de certas condies, como a espcie de animal escolhida, o desenho dos experimentos e os
mtodos de extrapolao dos dados de animais ao ser humano. Nesse aspecto, um dos problemas mais
difceis a extrapolao desses dados a converso de uma espcie a outra. Para a maior parte das
substncias qumicas a patognese da intoxicao idntica no homem e outros mamferos, razo pela
qual os sinais de intoxicao tambm so iguais. Consequentemente, so mais comuns as diferenas
quantitativas na resposta txica do que as qualitativas.
Embora o homem possa ser mais sensvel que certos animais de laboratrio, tambm h muitos
casos nos quais algumas espcies de animais so mais sensveis que o homem. Por exemplo, o rato
mais sensvel atropina, j o co tolera a atropina em dose 100 vezes superior a dose letal para o
homem. Entretanto o co mais sensvel que o homem ao cido ciandrico.
Para estabelecer um limite de exposio para as substncias qumicas a partir de dados
experimentais em animais utiliza-se um fator de segurana (FS), afim de resolver as incertezas da
extrapolao.

O qual estabelecido a partir da frmula:
LT = DNEO
FS

Em geral, a magnitude do fator de segurana depender:
natureza do efeito txico
tipo e tamanho da populao exposta
quantidade e qualidade dos dados toxicolgicos
Um fator de 2 a 5 ou meneos pode-se considerar suficiente quando o efeito contra o qual se protege
aos indivduos ou uma populao no se considera muito grave, quando somente um pequeno grupo de
trabalhadores est sujeito uma exposio provvel e quando a informao toxicolgica se deriva de
dados humanos. Por outro lado, pode ser necessrio recorrer a um fator de seguridade de 1000, ou mais
quando o possvel efeito muito grave, quando tem que proteger uma populao em geral e quando os
dados toxicolgicos se derivam de experimentos limitados com animais de laboratrio.
Em relao maior parte dos aditivos alimentares que no se consideram carcinognicos, aceita-
se dividir o DNEO em animais por 100, afim de determinar a Ingeto Diria Aceitvel (IDA) no homen.
Nos casos dos praguicidas e certas substncias qumicas ambientais se utilizam fatores de segurana
que vo de menos de 100 a mais de 1000. Nos casos de algumas exposies ocupacionais e certos
contaminantes ambientais so propostos fatores de segurana muito pequenos, como 2 a 5. Tambm
so propostos fatores de segurana para as substncias carcinognicas que vo de 100 a 5000.



14
4 - FASES DA INTOXICAO
As denominadas Fases da Intoxicao referem-se a uma serie de etapas metablicas que
ocoorem com o agente qumico, desde o momento que ele entra em contato com o sistema biolgico, at
o momento em que se estabelece o processo de intoxicao visualizada atravs dos sinais e sintomas
clnicos. Identificam-se quatro etapas:
- Fase de Exposio,
- Fase Toxicocintica
- Fase Toxicodinmica
- Fase Clnica
essencial lembrar que:
Mais do que da dose administrada, a resposta funo da concentrao do AT que interage
com o receptor biolgico; e que,
a concentrao do AQ no stio de ao dependente das duas primeiras fases da intoxicao.

4.1 - Fase de Exposio
Exposio a medida do contato entre o AQ e a superfcie corprea do organismo e sua
intensidade depende de fatores, tais como:

4.1.1 - Via ou local de exposio
As principais vias de exposio, atravs das quais os AT so introduzidos no organismo so:
- via gastrintestinal (ingesto)
- via pulmonar (inalao)
- via cutnea (contato)
A ordem decrescente de eficincia destas vias : via endovenosa > pulmonar > intraperitoneal >
sub-cutnea > intra muscular > intra-drmica > oral, cutnea.
Estas vias ganham maior ou menor importncia, de acordo com a rea da Toxicologia em estudo.
Assim, a via pulmonar e a cutnea so as mais importantes na Toxicologia Ambiental e Ocupacional, a
via gastrointestinal na Toxicologia de Alimentos, de Medicamentos, em casos de suicdios e homicdios, e
a via parenteral tem certa importncia na Toxicologia Social e de Medicamentos (Farmacotoxicologia).

4.1.2 - Durao e freqncia da exposio
A durao de uma exposio importante na determinao do efeito txico, assim como na
intensidade destes. Geralmente a exposio pode ser classificada, quanto durao em:
- exposio aguda: exposio nica ou mltipla que ocorra em um perodo mximo de 24 horas
- exposio sub-aguda: aquela que ocorre durante algumas semanas (1 ms ou mais)
- exposio sub-crnica: aquela que ocorre durante alguns meses (geralmente por 3 meses)
- exposio crnica: ocorre durante toda a vida.
Quanto freqncia da exposio observa-se que, geralmente, doses ou concentraes
fracionadas podem reduzem o efeito txico, caso a durao da exposio no seja aumentada. Assim,
15
uma dose nica de um agente que produz efeito imediato e severo, poder produzir menos do que a
metade ou nenhum efeito, quando dividida em duas ou mais doses, administradas durante um perodo de
vrias horas ou dias. No entanto, importante ressaltar que a reduo do efeito provocado pelo aumento
de freqncia (ou seja, do fracionamento da dose) s ocorrer quando:
- a velocidade de eliminao maior do que a de absoro, de modo que os processos de
biotransformao e/ou excreo ocorram no espao entre duas exposies;
- o efeito txico pela substncia parcial ou totalmente revertido antes da exposio seguinte.
Se nenhuma destas situaes ocorrerem, o aumento de freqncia resultar em efeitos txicos
crnicos.

4.2- Fase Toxicocintica
Nesta fase tem-se a ao do organismo sobre o agente txico, procurando diminuir ou impedir a
ao nociva da substncia sobre ele. de grande importncia, porque dela resulta a quantidade de AT
disponvel para reagir com o receptor biolgico e, consequentemente, exercer a ao txica.
A fase toxicocintica constituda dos seguintes processos:
- absoro
- distribuio
- eliminao: biotransformao e excreo

Pode-se notar que nesta fase o agente txico dever se movimentar pelo organismo e para tal
ter que, freqentemente, transpor membranas biolgicas. Assim, muito importante o conhecimento dos
fatores que influem no transporte das substncias qumicas pelas membranas.

4.2.1 - Fatores que influem no transporte por membranas
Estes fatores podem ser agrupados em duas classes distintas:
- Fatores relacionados com a membrana
- Estrutura da membrana
- Espessura da membrana
- rea da membrana
Destes 3 fatores, destaca-se a estrutura da membrana. Sabe-se que a membrana biolgica
constituda de camada lipdica bimolecular, contendo em ambos os lados, molculas de protenas que
penetram e s vezes transpem esta camada. Os cidos graxos presentes na camada lipdica no
possuem uma estrutura cristalina rgida, ao contrrio, na temperatura fisiolgica eles tem caractersticas
quase fludas. Portanto, o carter fludo das membranas (e portanto sua permeabilidade) determinado
principalmente pela estrutura e proporo relativa de cidos graxos insaturados presentes na regio. Este
modelo denominado de mosaico fludo, foi proposto por SINGER & NICOLSON em 1972 e o mais
aceito atualmente.

- Fatores relacionados com a substncia qumica
16
Lipossolubilidade
Devido constituio lipoprotica das membranas biolgicas, as substncias qumicas
lipossolveis, ou seja, apolares, tero capacidade de transpo-la facilmente, pelo processo de difuso
passiva. J as substncias hidrossolveis no transporo estas membranas, a no ser que tenham
pequeno tamanho molecular e possam ser filtradas, atravs dos poros aquosos.
Coeficiente de partio leo/gua
o parmetro que permite avaliar o grau de lipossolubilidade das substncias qumicas. Este
coeficiente obtido ao se agitar um agente qumico em uma mistura de solvente orgnico e gua (em
condies de pH e temperatura controladas). As substncias polares, hidrossolveis, se concentram na
fase aquosa e as apolares, lipossolveis, na fase orgnica. Quanto maior for a concentrao da
substncia na fase orgnica, maior ser a sua lipossolubilidade. Ex.: coeficiente de partio n-
octanol/gua a 37
o
C e pH 7,4 de algumas substncias:
- clorpromazina = 79,7;
- AAS = 11,7;
- paracetamol = 1,79.
Grau de ionizao ou de dissociao
Os agentes txicos so, em sua maioria, cidos fracos ou bases fracas que possuem um ou mais
grupos funcionais capazes de se ionizarem. A extenso desta ionizao depender do pH do meio em
que a substncia est presente e do seu prprio pKa. importante relembrar que a forma ionizada
polar, hidrossolvel e com pouca ou nenhuma capacidade de transpor membranas por difuso passiva. O
grau de ionizao das substncias, em diferentes pH, poder ser obtido atravs da aplicao da frmula
de Henderson-Hasselbach, para cidos fracos e bases fracas.






[HA]
HA H
+
+ A
-
pK
a
= pH + log assim,
|H
+
||A
-
|

|HA|
= 10
pKa-pH

|H
+
||A
-
|



Bases:
17
|RNH
2
||H+|
R - NH
3
+
RNH
2
+ H
+
pKa = pH + log assim,
|RNH
3
+
|


| RNH
2
] |H+|
--- = 10
pKa - pH

| RNH
3
+
|


Quando o pH do meio igual ao pKa de um composto, a metade deste estar na forma ionizada
e a outra metade na forma no-ionizada. Importante ressaltar que o pKa sozinho no indica se um
composto tem carter cido ou bsico, j que os cidos fracos tem pKa elevado, mas as bases fortes
tambm o tem. Da mesma maneira os cidos fortes tem pKa baixo assim como as bases fracas.

4.2.2 - Absoro
a passagem do AT do meio externo para o meio interno, atravessando membranas biolgicas.
O meio externo na absoro pode ser o estmago, os alvolos, o intestino, ou seja, dentro do organismo,
mas fora do sangue. Existem trs tipos de absoro mais importantes para a Toxicologia.

4.2.2.1 - Absoro pelo trato gastrintestinal (TGI) ou Oral
Uma vez no TGI, um agente txico poder sofrer absoro desde a boca at o reto, geralmente
pelo processo de difuso passiva. So poucas as substncias que sofrem a absoro na mucosa bucal,
principalmente porque o tempo de contato pequeno no local. Estudos feitos experimentalmente, no
entanto, mostram que cocana, estricnina, atropina e vrios opiides podem sofrer absoro na mucosa
bucal. Esta absoro dependente, principalmente, do coeficiente de partio leo/gua (quanto maior
este coeficiente mais fcil a absoro) e resulta em nveis sangneos elevados, j que as substncias
no sofrero a ao dos sucos gastrintestinais.
No sendo absorvido na mucosa bucal, o AT tender a sofrer absoro na parte do TGI onde
existir a maior quantidade de sua forma no-ionizada (lipossolvel). Para se conhecer a frao de AT no
ionizado, ou aquela apta a sofrer absoro por difuso passiva, importante a utilizao da frmula de
Handerson-Hasselbach. De maneira geral, os cidos fracos no se ionizam em meio cido, como o do
estmago, sendo assim absorvidos na mucosa gstrica, enquanto as bases fracas por no se ionizarem
no pH intestinal, sero absorvidas no local. Exemplo: salicilatos e barbitricos so absorvidos,
principalmente, no estmago e aminopirina, quinina, anilina, sero absorvidos no intestino.
Embora a grande maioria dos AT sofram absoro no TGI por difuso passiva, existem alguns
que sero absorvidos por processo especial, mais precisamente por transporte ativo. Exemplo: o chumbo
absorvido por transporte ativo e utiliza o sistema que transporta o clcio; o tlio transportado pelo
sistema carregador responsvel pela absoro de Fe, etc.
18

Fatores que influem na absoro pelo TGI
Alm das propriedades fsico-qumicas dos AT, outros fatores podero influir na absoro:
- administrao de EDTA: parece que este quelante altera a permeabilidade da membrana, por
seqestrar o clcio presente na sua estrutura, facilitando assim, de maneira inespecfica, a absoro
de cidos, bases e substncias neutras. Existe sempre entretanto, no caso da ingesto de minerais, a
possibilidade do EDTA quelar o AT, o que resultaria em uma menor absoro do mesmo
- contedo estomacal: a absoro ser favorecida se o estmago estiver vazio, devido ao maior contato
do AT com a mucosa.
- secrees gastrintestinais, sua concentrao enzimtica, e sua acidez: estes sucos digestivos, seja
por sua acidez inica, seja por ao enzimtica, podem provocar mudanas na atividade ou na
estrutura qumica do agente, alterando assim a velocidade de absoro. Ex.: sabe-se que o pH
estomacal das crianas no to cido como o dos adultos. Isto implica em um desenvolvimento
maior de microorganismos, principalmente Encherichia coli, microorganismo que reduz, no estmago,
o nitrato nitrito. Como as crianas possuem dietas ricas em nitratos, estes sero reduzidos a nitritos
que so rapidamente absorvidos pela mucosa estomacal, causando, ento, metemoglobinemia.
- mobilidade intestinal: o aumento da mobilidade intestinal diminuir o tempo de contato do agente
txico com a mucosa e, consequentemente, a absoro neste local.
- efeito de primeira passagem pelo fgado: as substncias absorvidas no TGI entram na circulao porta
e passam pelo fgado, podendo ser biotransformadas de maneira mais ou menos intensa. Atravs da
secreo biliar sero excretadas no intestino, donde sero reabsorvidas ou excretadas pelas fezes.
o tambm chamado de ciclo entero-heptico. Este efeito pode ser responsvel pela menor
biodisponibilidade de algumas substncias, quando estes so administradas por via oral.

Alguns dos fatores que influem na absoro pelo TGI podem variar de acordo com o sexo e, no
sexo feminino, entre as gestantes e no gestantes. Este fato importante na avaliao da intensidade de
absoro de xenobiticos por essa via. A tabela 1 mostra as principais diferenas fisiolgicas existentes
entre homens e mulheres, gestantes e no gestantes, que podem influenciar a absoro pelo TGI.

Tabela 1: Diferenas fisiolgicas entre homens e mulheres que podem afetar a absoro de agentes
txicos pelo TGI
Parmetro

Diferena fisiolgica Diferena
na absoro

pH suco gstrico


gestante>mulher>homem

altera absoro oral

motilidade intestinal


< nas gestantes

> absoro
19

esvaziamento gstrico


prolongado nas gestantes

> absoro


4.2.2.2 - Absoro Cutnea
A pele ntegra uma barreira efetiva contra a penetrao de substncias qumicas exgenas. No
entanto, alguns xenobiticos podem sofrer absoro cutnea, dependendo de fatores tais como a
anatomia e as propriedades fisiolgicas da pele e propriedades fsico-qumicas dos agentes.
A pele formada por duas camadas, a saber: epiderme e derme. A epiderme, que a camada
mais externa da pele constituda por cinco regies distintas:
regio crnea: possui duas sub-camadas, o extrato crneo descontnuo (mais superficial) e o extrato
crneo contnuo. Esta regio constituda de clulas biologicamente inativas, que so continuamente
renovadas (geralmente a cada 2 semanas no adulto), sendo substitudas por clulas provenientes das
regies mais profundas da epiderme. Durante esta migrao para a superfcie, as clulas sofrem um
processo de desidratao e de polimerizao do material intracelular, que resulta na queratinizao
celular, ou seja, na formao de protena filamentosa denominada queratina.
regio gordurosa: constituda de lpides provenientes, principalmente, da ruptura de lipoprotenas
durante o processo de queratinizao.
regio lcida: constituda de clulas vivas em fase inicial de queratinizao.
regio germinativa: local onde ocorre a formao das clulas da epiderme e tambm da melanina.

Na derme, que formada por tecido conjuntivo, pode-se observar a presena de vasos
sangneos, nervos, folculos pilosos, glndulas sebceas e sudorparas. Estes trs ltimos elementos da
derme permitem o contato direto com o meio externo, embora no existem dados que demonstrem haver
absoro atravs das glndulas citadas.
As substncias qumicas podem ser absorvidas, principalmente, atravs das clulas epidrmicas
ou folculos pilosos:

- Absoro transepidrmica:
A absoro dos agentes qumicos pela pele tem sua velocidade limitada pela regio crnea da
epiderme, mais precisamente pelo extrato crneo contnuo. As substncias lipossolveis
penetram por difuso passiva atravs dos lpides existentes entre os filamentos de queratina,
sendo a velocidade desta absoro indiretamente proporcional viscosidade e volatilidade do
agente. J as substncias polares, de baixo peso molecular, penetram atravs da superfcie
externa do filamento de queratina, no extrato hidratado. A absoro transepidrmica o tipo de
absoro cutnea mais freqente, devido ao elevado nmero de clulas epidrmicas existente,
embora no seja uma penetrao muito fcil para os AT.
- Absoro transfolicular:
20
O nmero de folculos pilosos varia de 40 a 800 por cm
2
, o que representa apenas 0,1 a 1% da
superfcie total da pele. Sendo assim, esta absoro no to significativa quanto a
transepidrmica. Algumas substncias qumicas podem penetrar pelos folculos pilosos,
alcanando rapidamente a derme. uma penetrao fcil para os agentes qumicos, uma vez
que eles no necessitam cruzar a regio crnea. Qualquer tipo de substncia qumica, seja ela
lipo ou hidrossolvel, ionizada ou no, gs ou vapor, cida ou bsica, pode penetrar pelos
folculos. uma absoro tambm importante para alguns metais.

4.2.2.2.1 - Fatores que influem na absoro cutnea
So vrios os fatores que podem influir na absoro atravs da pele. Geralmente eles so
agrupados em quatro classes diferentes:

- Fatores ligados ao organismo:
Superfcie corprea: a superfcie corprea total no homem maior do que na mulher
(mdia de 1,70 a 1,77 m
2
no homem e de 1,64 a 1,73 m
2
na mulher). Este fato pode
aumentar a absoro transepidrmica no homem (maior superfcie de contato com o
xenobitico).
Volume total de gua corprea: Quanto maior o volume aquoso corpreo, maior a
hidratao da pele e consequentemente, a absoro pela pele. Quando comparado
mulher, o homem possui maior volume aquoso total, extra e intracelular o que
favoreceria a absoro cutnea. Este fato deve ser considerado, tambm, quando se
compara mulheres grvidas e no grvidas. As gestantes apresentam maior volume
aquoso corpreo e, em conseqncia, maior hidratao do extrato crneo. Isto
possibilita maior absoro cutnea de xenobiticos.
Abraso da pele: com a descontinuidade da pele, a penetrao torna-se fcil;
Fluxo sangneo atravs da peIe: estudos demonstram que, em mdia, 5% do sangue
bombeado pelo corao passa pela pele, em um fluxo em torno de 120 mL/kg/min.
Inflamao ou fatores que levam hiperemia aumentaro a absoro cutnea. Um
fato a ser considerado a gravidez. Durante a gestao ocorre alteraes
significativas no fluxo sangneo das mos (aumentam 6 vezes) e ps (aumentam 2
vezes). Esse aumento no fluxo sangneo poder influir na absoro cutnea de
xenobiticos nas gestantes expostas. No foi detectada diferena entre o fluxo
sangneo cutneo de homens e mulheres no gestantes. Um fator a ser considerado
a vascularizao das reas expostas, uma vez que, quanto mais vascularizada a
regio, maior o fluxo sangneo no local.
Queimaduras qumicas e/ou trmicas: apenas as leves ou moderadas, j que as
severas destroem totalmente o tecido, formando uma crosta de difcil penetrao;
Pilosidade: nas reas em que existem plos, a absoro cutnea pode ser 3,5 a 13
vezes maior do que nas regies glabras;
21

- Fatores ligados ao agente qumico:
Volatilidade e viscosidade;
Grau de ionizao;
Tamanho molecular.

- Fatores ligados presena de outras substncias na pele:
Vasoconstritores: estes vo reduzir a absoro cutnea, devido diminuio da
circulao sangnea.
Veculos: podem auxiliar na absoro, mas no promovem a penetrao de
substncias que, normalmente, no seriam absorvidas pela pele ntegra. Alguns
veculos podem, tambm, absorver o ar de dentro dos folculos e da mesma maneira
aumentar a absoro transfolicular.
gua: a pele tem normalmente 90 g de gua por grama de tecido seco. Isto faz com
que a sua permeabilidade seja 10 vezes maior do que aquela do extrato totalmente
seco. O contato prolongado com gua pode aumentar a hidratao da pele em 3 a 5
vezes, o que resultar em um aumento na permeabilidade cutnea em at 3 vezes.
Agentes tenso-ativos: os sabes e detergentes so substncias bastante nocivas para
a pele. Eles provocam alterao na permeabilidade cutnea, mesmo quando
presentes em pequenas concentraes. Alteram principalmente a absoro de
substncias hidrossolveis, devido a modificaes que provocam na estrutura do
filamento de queratina. Estes agentes tensoativos se ligam queratina e com isto
provocam a sua reverso de o para | hlice.
Solventes orgnicos: estes aumentam a absoro cutnea para qualquer tipo de
agente qumicos, pois removem lpides e lipoprotenas presentes no extrato crneo,
tornando-o poroso e menos seletivo. Os solventes mais nocivos so aqueles com
caractersticas hidro e lipossolveis. Destaca-se, como um dos mais nocivos, a
mistura clorofrmio: metanol (2:1).

- Fatores ligados s condies de trabalho (quando se tratar de exposio ocupacional):
tempo de exposio;
temperatura do local de trabalho: pode haver um aumento de 1,4 a 3 vezes na
velocidade de penetrao cutnea de agentes qumicos, para cada 10
o
C de aumento
na temperatura.

Como citado anteriormente, o sexo e o estado gestacional podem alterar parmetros fisiolgicos
importantes e, consequentemente, a intensidade da absoro cutnea (Tabela 2).

22
Tabela 2: Diferenas fisiolgicas entre homens e mulheres que podem afetar a absoro de agentes
txicos pela pele.
Parmetro Diferena fisiolgica

Diferena na
absoro
hidratao cutnea

> nas gestantes > absoro
rea drmica

> na superfcie corprea homem > absoro
espessura drmica

> no homem < absoro
fluxo de sangue/pele > nas gestantes > absoro


4.2.2.2.3 - Ao dos agentes txicos sobre a pele
No contato dos agentes qumicos com a pele podem ocorrer:
Efeito nocivo local sem ocorrer absoro cutnea. Ex.: cidos e bases fortes.
Efeito nocivo local e sistmico. Ex.: o arsnio, benzeno, etc.
Efeito nocivo sistmico, sem causar danos no local de absoro: o caso, por exemplo, dos
inseticidas carbamatos (exceo feita ao Temik que um carbamato com potente ao local).

4.2.2.3 - Absoro pelo trato pulmonar
A via respiratria a via de maior importncia para Toxicologia Ocupacional. A grande maioria
das intoxicaes ocupacionais decorrente da aspirao de substncias contidas no ar ambiental. A
superfcie pulmonar total de aproximadamente 90 m
2
, a superfcie alveolar de 50 a 100 m
2
e o total de
rea capilar cerca de 140 m
2
. O fluxo sangneo contnuo exerce uma ao de dissoluo muito boa e
muitos agentes qumicos podem ser absorvidos rapidamente a partir dos pulmes. Os agentes
passveis de sofrerem absoro pulmonar so os gases e vapores e os aerodispersides. Estas
substncias podero sofrer absoro, tanto nas vias areas superiores, quanto nos alvolos.

4.2.2.3.1 - Gases e Vapores
- Vias Areas Superiores (VAS)
Geralmente no dada muita ateno para a absoro destes compostos nas vias areas
superiores. Deve-se considerar, no entanto, que muitas vezes a substncia pode ser absorvida na
mucosa nasal, evitando sua penetrao at os alvolos. A reteno parcial ou total dos agentes no trato
respiratrio superior, est ligada hidrossolubilidade da substncia. Quanto maior a sua solubilidade em
gua, maior ser a tendncia de ser retido no local. Visto sob este ngulo, a umidade constante das
mucosas que revestem estas vias, constitui um fator favorvel. H, no entanto, a possibilidade da
ocorrncia de hidrlise qumica, originando compostos nocivos, tanto para as vias areas superiores
23
quanto para os alvolos. Ex.: tricloreto de fsforo + H
2
O HCl + CO
2
; dixido de enxofre (SO
2
) + H
2
O
cido sulfrico.
Isto importante porque estes produtos formados, alm dos efeitos irritantes, favorecem tambm
a absoro deles ou de outros agentes pela mucosa j lesada. Assim, nem sempre, a reteno de gases
e vapores nas vias areas superiores sinnimo de proteo contra eventuais efeitos txicos.

- Alvolos
Nos alvolos pulmonares duas fases esto em contato:
- uma gasosa formada pelo ar alveolar; e
- outra lquida representada pelo sangue.
As 2 fases so separadas por uma barreira dupla: o epitlio alveolar e o endotlio capilar. Diante
de um gs ou de um vapor, o sangue pode se comportar de duas maneiras diferentes: como um veculo
inerte, ou como meio reativo. Em outras palavras, o agente txico pode dissolver-se simplesmente por um
processo fsico ou, ao contrrio, combinar-se quimicamente com elementos do sangue. No primeiro caso
tem-se a dissoluo do AT no sangue e no segundo caso a reao qumica.
Dissoluo do AT no sangue
Deve-se, neste caso, considerar o agente qumico como o soluto e o sangue como solvente. Em
relao ao soluto, o fator que influi na absoro pulmonar a sua concentrao no ar alveolar (presso
parcial). Na verdade se estabelece uma troca de molculas entre o ar alveolar e o sangue, no sentido do
local onde a presso parcial menor. Assim, se a presso parcial no ar alveolar for maior que no sangue,
ocorrer absoro e se for maior no sangue do que no ar alveolar, haver excreo. evidente, portanto,
a importncia de fatores ambientais, tais como temperatura e presso, j que estes fatores vo influir na
presso parcial de gases e vapores.
Em relao ao solvente, deve-se considerar a constituio do sangue. Este tecido orgnico
apresenta tanto uma caracterstica aquosa (3/4 do sangue gua) quanto orgnica (protenas, lpides,
etc.). Sendo assim, mais do que a lipo ou hidrossolubilidade de um agente txico, deve-se aqui,
considerar a sua solubilidade no sangue. A importncia deste fator surge de maneira mais evidente,
quando se recorda que a durao do contato entre o ar alveolar e o sangue de uma frao de segundo
apenas. Ento, para os gases e vapores que no estabelecem combinaes qumicas, apenas suas
solubilidades no sangue asseguraro uma boa absoro pulmonar. Uma maneira prtica de se observar a
solubilidade de uma substncia no sangue determinar o chamado coeficiente de distribuio (K). O
coeficiente de distribuio (K) expresso pela relao entre a concentrao do agente txico no ar
alveolar/concentrao do AT no sangue, no momento em que se instala o equilbrio. Alguns autores
utilizam a correlao: concentrao do AT no sangue/concentrao do AT no ar alveolar, para avaliar a
solubilidade da substncia.
Ento um coeficiente baixo, ou seja denominador alto, implica em uma boa solubilidade no
sangue e isto conduz a uma concentrao elevada do agente neste meio. No entanto, justamente devido
a esta alta solubilidade, a saturao sangnea ser lenta, a reteno do agente neste local ser mais
longa e a transferncia aos tecidos tardia. Quando o coeficiente de distribuio alto, os fenmenos
24
inversos acontecem. Assim o K permite avaliar a concentrao do AT no sangue conhecendo-se sua
concentrao no ar alveolar.
Pode-se observar que dois fatores foram destacados at aqui: a presso parcial do gs ou vapor
e sua solubilidade no sangue. No foi considerada a presena das membranas alveolares e capilares
interpostas entre o ar e o sangue. Isto porque estas membranas tem espessura muito pequena (cerca de
1) e superfcie muito grande, no representando um obstculo absoro das substncias qumicas. Se
o agente txico tem pequeno tamanho molecular e boa solubilidade no sangue, poder ser absorvido
pelos pulmes.
importante considerar tambm fatores fisiolgicos, tais como a freqncia cardaca e
respiratria, que podem aumentar ou diminuir a saturao sangnea e consequentemente a absoro. A
influncia destes fatores difere de acordo com o tipo de substncia analisada. Assim, para substncia de
K baixo, ou seja, muito solveis em gua, o aumento da freqncia respiratria favorecer a absoro. J
para a substncia de K elevado (pouco solvel no sangue), a absoro ser favorecida pelo aumento na
freqncia cardaca. Importante ressaltar que, no caso do sexo feminino, o estado gestacional pode
alterar esses parmetros fisiolgicos e, em conseqncia, a intensidade da absoro pulmonar (Tabela
3).

Tabela 3: Diferenas fisiolgicas entre mulheres gestantes e no gestantes, que podem afetar a absoro
pulmonar de agentes txicos.
Parmetro Diferena fisiolgica

Diferena
na absoro

funo pulmonar

> nas gestantes

> exposio
pulmonar

rendimento cardaco

> nas gestantes


> absoro

Combinao Qumica do Agente Qumico com o Sangue
Ao contrrio da dissoluo, que puramente fsica, ocorre aqui uma fixao entre o AT e o
sangue que depender da afinidade qumica entre estes dois elementos. No caso da combinao
qumica, no ocorrer um equilbrio entre o AT presente no ar alveolar e no sangue. So vrias as
substncias qumicas que se ligam quimicamente ao sangue so monxido de carbono (CO), chumbo,
mercrio, etc.

4.2.2.3.2 - Material particulado ou aerodispersides
Aerodispersides so partculas slidas ou lquidas de pequeno tamanho molecular, que ficam em
suspenso no ar, por um perodo longo de tempo. Geralmente, somente as partculas com dimetro
25
menor ou igual a 1 atingiro os alvolos e podero sofrer absoro. As partculas que possuem dimetro
maior ficaro retidas nas regies menos profundas do trato respiratrio.
A penetrao e reteno dos aerodispersides no trato pulmonar depende de fatores como:
Dimetro da partcula: o dimetro das partculas nem sempre indica o seu comportamento no aparelho
respiratrio. importante considerar o dimetro aerodinmico que funo do tamanho (dimetro
fsico) e da densidade da partcula. Quanto maior o dimetro aerodinmico, menor a penetrao ao
longo das vias areas superiores. Assim, se existem duas partculas com o mesmo dimetro fsico, a
de maior densidade ter o maior dimetro aerodinmico e penetrar menos ao longo das vias areas
superiores (VAS).
Hidrossolubilidade: devido umidade existente nas VAS, as partculas hidrossolveis tendero a ficar
retidas na parte superior do trato pulmonar, sem alcanar os alvolos.
Condensao: o tamanho das partculas no aparelho respiratrio pode ser alterado pela aglomerao
ou por adsorso de gua, originando partculas maiores. Influem na condensao a carga da partcula,
as propriedades fsico-qumicas da substncia, o tempo de reteno no trato respiratrio, etc.
Temperatura: ela pode aumentar o movimento browniano (movimento natural e ao acaso de partculas
coloidais pequenas), o que provocar maior coliso das partculas e, consequentemente, sua maior
condensao e maior reteno.


4.3.2.3 - Distribuio
Aps a entrada do AT na corrente sangnea, seja atravs da absoro ou por administrao
direta, ele estar disponvel para ser distribudo pelo organismo. Normalmente a distribuio ocorre
rapidamente e a velocidade e extenso desta depender principalmente do:
Fluxo sangneo atravs dos tecidos de um dado rgo;
Facilidade com que o txico atravessa a membrana celular e penetra nas clulas de um tecido.
Assim, aqueles fatores que influem no transporte por membranas, discutidos anteriormente, sero
importantes tambm na distribuio. Alguns agentes txicos no atravessam facilmente as membranas
celulares e por isto tem uma distribuio restrita enquanto outros, por atravess-las rapidamente, se
distribuem atravs de todo organismo. Durante a distribuio o agente alcanar o seu stio alvo, que o
rgo ou tecido onde exercer sua ao txica, mas poder, tambm, se ligar a outros constituintes do
organismo, concentrando-se em algumas partes do corpo.
Em alguns casos, estes locais de maior concentrao so tambm os stios de ao e disto
resulta efeitos altamente prejudiciais. o caso do monxido de carbono (CO), para o qual o sangue
representa, tanto o local de concentrao quanto o de ao txica. Felizmente para o homem, no entanto,
a grande maioria dos AT atingem seus maiores nveis em locais diferentes do stio alvo (exemplo: Pb
armazenado nos ossos e atua nos tecidos moles). Este acmulo do AT em outros locais que no o de
ao, funciona como uma proteo ao organismo, uma vez que previne uma elevada concentrao no
stio alvo. Os agentes txicos nos locais de concentrao esto em equilbrio com sua forma livre no
26
sangue e quando a concentrao sangnea decai, o txico que est concentrado em outro tecido
liberado para a circulao e da pode atingir o stio de ao.
A importncia do sangue no estudo da distribuio grande, no s porque o principal fludo de
distribuio dos AT, mas tambm por ser o nico tecido que pode ser colhido repetidamente sem
distrbios fisiolgicos, ou traumas orgnicos. Alm disto, como o sangue circula por todos os tecidos,
algum equilbrio pode ser esperado entre a concentrao do frmaco no sangue e nos tecidos, inclusive
no stio de ao. Assim, a concentrao plasmtica fornece melhor avaliao da ao txica do que a
dose (a no ser quando a concentrao plasmtica muito baixa em relao concentrao nos
tecidos).

A distribuio do AT, atravs do organismo ocorrer de maneira no uniforme, devido a uma srie
de fatores que podem ser reunidos em dois grupos:
- Afinidade por diferentes tecidos
Ligao s protenas plasmticas e elementos figurados do sangue;
Ligao celular, especialmente no fgado e rins;
Armazenamento.
- Presena de membranas
Barreira hemato-enceflica
Barreira placentria
O papel da ligao s protenas plasmticas e do armazenamento na distribuio desigual dos
xenobiticos so, dentre os supracitados, os mais estudados, atualmente

4.2.3.1 - Ligao s protenas plasmticas (PP)
Vrias protenas do plasma podem se ligar constituintes do corpo (ex.: cidos graxos, triptofano,
hormnios, bilirrubinas, etc.) e tambm aos xenobiticos. A principal protena, sob o ponto de vista da
ligao a xenobiticos, a albumina. Algumas globulinas tem tambm papel relevante na ligao aos
agentes estranhos, especialmente queles de carter bsico. Destaca-se aqui a o
1
glicoprotena cida.
Com exceo das substncias lipossolveis de carter neutro, que geralmente se solubilizam na
parte lipdica das lipoprotenas, a ligao de frmacos s protenas plasmticas feita, usualmente, pela
interao de grupos polares ou no polares dos AT com o(s) grupamento(s) protico(s). Ex.: os frmacos
de carter cido, se ligam em um nico stio de albumina, possivelmente ao nitrognio do aminocido
terminal, que no homem, o cido asprtico.
O elevado peso molecular das protenas plasmticas impede que o complexo AT-PP atravesse
pelas membranas dos capilares restringindo-o ao espao intravascular. Assim, enquanto ligado s
protenas plasmticas, o AT no estar disponvel para a distribuio no espao extravascular. Deve-se
observar, no entanto, que esta ligao reversvel (geralmente feita por pontes de hidrognio, foras de
van der Waals, ligao inica), e a medida que o agente livre se difunde atravs da membrana capilar, a
frao ligada se dissocia das protenas tornando-se apta para ser distribuda. Esta ligao atua, portanto,
graduando a distribuio dos xenobiticos e, consequentemente, a chegada ao stio de ao.
27
Efeitos txicos severos pode aparecer, quando h um deslocamento anormal dos xenobiticos de
seus stios de ligao protica. Alguns dos fatores que influem nesta ligao so:
Competio entre frmacos: as protenas plasmticas no possuem stios especficos de ligao e
duas ou mais substncias que se ligam ao mesmo stio protico, iro competir entre si por esta
ligao. Esta competio pode ocorrer entre dois ou mais xenobiticos ou entre xenobiticos e
substratos endgenos. Como conseqncia ocorrer um aumento na concentrao livre de um dos
frmacos e, portanto, o risco de intoxicao. Ex.: sulfonamidas e bilirrubina competem pelo mesmo
stio da albumina; o warfarin (anticoagulante) geralmente deslocado pelo AAS.
Condies patolgicas: algumas doenas alteram a conformao do stio de ligao na protena,
outras alteram o pH do plasma e podem provocar a ionizao do complexo agente-protena e outras,
ainda, modificam a quantidade de protenas plasmticas. Ex.: a sndrome nefrtica, que permite a
eliminao da albumina atravs da urina, causando hipoalbuminemia.
Concentrao do agente: quanto maior a concentrao do frmaco no plasma, maior a ligao
protica. Ex.: fenitona. Se a concentrao deste anticonvulsivante for muito elevada no plasma a
ligao protica aumenta mais do que o esperado e a frao livre disponvel para a distribuio e ao
pequena. Neste caso o efeito teraputico pode nem ser alcanado.
Concentrao protica: o aumento das protenas plasmticas resulta em maior ligao plasmtica dos
xenobiticos. Ex.: aumento de lipoprotena implica em maior ligao da imipramina.
pH: para alguns frmacos o pH do plasma altera a ligao s protenas. Ex.: a teofilina ter uma maior
ligao s protenas plasmticas quando o pH do sangue est aumentado.
Idade: a concentrao de algumas protenas plasmticas alterada com a idade. Ex.: as crianas tem
uma quantidade de albumina menor do que o adulto. Consequentemente, os frmacos que se ligam
essencialmente albumina estaro mais livres e podem ser mais rapidamente distribudos, causando
efeitos txicos mais severos, mesmo com doses no muito grandes.
Espcie e variedade

4.2.3.2 - Ligao Celular
Embora no to estudado como a ligao s protenas plasmticas, a ligao a outros tecidos
exerce um papel muito importante na distribuio desigual dos agentes pelo organismo. Sabe-se a
quantidade total de albumina plasmtica no homem de 70kg cerca de 120g e a albumina intersticial total
em torno de 156g, logo a quantidade de albumina total no corpo aproximadamente 276g, ou seja,
cerca de 0,4% do peso corpreo. A gua corprea total corresponde a 60% do peso corpreo, logo pode-
se deduzir que os restantes 40% do peso corpreo de tecido no hidratado.
Assim, a ligao de AT a componentes teciduais poder alterar significativamente a distribuio
dos xenobiticos, j que a frao de AT ligada aos tecidos ser inclusive maior do que a ligada s
protenas plasmticas. Sob o aspecto de ligao a xenobiticos, o tecido heptico e o renal tem um papel
especial. Eles possuem elevada capacidade de se ligarem aos agentes qumicos e apresentam as
maiores concentraes destes (e tambm de substncias endgenas), quando comparados com outros
rgos.
28
Os mecanismos atravs dos quais estes rgos removem os agentes do sangue no esto bem
estabelecidos, no entanto, sabe-se que as protenas intra-celulares so componentes fundamentais na
ligao dos frmacos ao tecido heptico e renal. Por ex.: a protena Y ou ligandina, presente no
citoplasma das clulas hepticas tem alta afinidade pela maioria dos cidos orgnicos e parece ter
importante papel na transferncia de nions orgnicos do plasma para o fgado.
A metalotineina, outra protena tecidual, tem sido encontrada no fgado e rins ligada ao cdmio,
cobre e zinco. A rapidez com que o fgado se liga a xenobiticos pode ser exemplificada pelo chumbo
que, 30 minutos aps a administrao tem sua concentrao heptica 50 vezes maior do que a
plasmtica.

4.I.2.3.3 - Armazenamento
Os agentes txicos podem ser armazenados no organismo, especialmente em dois tecidos
distintos:
Tecido adiposo:
Como a lipossolubilidade uma caracterstica fundamental para o transporte por membranas,
lgico imaginar que os agentes txicos de uma maneira geral podero se concentrar no tecido adiposo.
Os xenobiticos so armazenados no local atravs da simples dissoluo fsica nas gorduras neutras do
tecido. Assim, um agente txico, com elevado coeficiente de partio leo/gua, pode ser armazenado no
tecido adiposo em grande extenso e isto diminuir a concentrao do AT disponvel para atingir o stio
alvo. O tecido adiposo constitui 50% do peso de um indivduo obeso e 20% de um magro. Sendo o
armazenamento um mecanismo de defesa lgico imaginar que a toxicidade de um AT no ser to
grande para a pessoa obesa como para uma pessoa magra. Mais real, no entanto, pensar na
possibilidade de um aumento sbito da concentrao do AT no sangue e stio de ao, devido a uma
rpida mobilizao das gorduras.
Tecido sseo:
Um tecido relativamente inerte como o sseo pode tambm servir como local de armazenamento
de agentes qumicos inorgnicos, tais como flor, chumbo e estrncio.
O fenmeno de captura dos xenobiticos pelos ossos pode ser considerado essencialmente um
fenmeno qumico, no qual as mudanas ocorrem entre a superfcie ssea e o lquido que est em
contato com ela. O lquido o fludo extracelular e a superfcie envolvida a matriz inorgnica do osso.
Recordando: a superfcie ssea possui uma matriz orgnica e outra inorgnica, esta sendo formada pelos
cristais de hidroxiapatita [3Ca
3
(PO
4
)
2
Ca(OH)
2
]. Aps ser trazido at o cristal sseo atravs do fludo
extracelular, o AT poder penetrar na superfcie do cristal, de acordo com o seu tamanho e sua carga
molecular. Assim, por exemplo, o fluoreto (F
-
) pode ser facilmente colocado no lugar da hidroxila (OH
-
) e o
Pb e Sr no lugar do Ca. O armazenamento de xenobiticos no tecido sseo poder, ou no, provocar
efeitos txicos no local. O Pb no nocivo para os ossos, mas o F pode provocar fluorose ssea e o Sr
radioativo, osteosarcoma e outras neoplasias.
Este armazenamento no irreversvel. O agente txico pode ser liberado dos ossos atravs de:
29
Dissoluo da hidroxiapatia atravs da atividade osteoclstica (destruio do tecido sseo provocado
pela ao dos osteoclastos, clulas do prprio tecido sseo que tem tal funo);
Aumento da atividade osteoltica (destruio do tecido sseo provocada por substncias qumicas,
enzimas, etc). Este tipo de ao pode ser observado atravs da ao do paratormnio, hormnio da
paratireide, que tem ao descalcificante ssea. Se no lugar do clcio o osso contiver um AT, este
ser deslocado para a corrente sangnea, aumentando a sua concentrao plasmtica.
Troca inica

4.2.3.4 - Barreira Hematenceflica
A chamada barreira hematenceflica, que protege o crebro da entrada de substncias qumicas,
um local menos permevel do que a maioria de outras reas do corpo.
Existem trs razes anatmicas e fisiolgicas principais que dificultam a entrada de agentes
txicos no crebro, formando a chamada barreira hematenceflica:
as clulas endoteliais dos capilares so muito finas com nenhum ou poucos poros entre elas;
os capilares do sistema nervoso central (SNC) so largamente circundados pelos astrcitos (tecido
conectivo glial);
a concentrao protica no fludo intersticial do SNC muito menor do que em qualquer outra parte do
corpo.
Assim, em contraste com outros tecidos, o AT tem dificuldade em se mover entre os capilares,
tendo de atravessar no somente o endotlio capilar, mas tambm a membrana das clulas gliais, para
alcanar o fludo intersticial. Uma vez que este fludo pobre em protenas, o AT no pode usar a ligao
protica para aumentar a distribuio dentro do SNC. Estes fatos juntos atuam como um mecanismo de
proteo, que diminui a distribuio e ao dos txicos no SNC, j que eles no entram no crebro em
quantidades significativas. A eficincia da barreira hematoenceflica varia de uma rea do crebro para
outra. Ex.: a crtex, o nucleopineal e o lbulo posterior da hipfise so mais permeveis do que outras
reas cerebrais. No est claro se a maior permeabilidade destas reas decorre de um suprimento
sangneo mais rico ou de uma permeabilidade mais adequada da barreira ou dos dois fatores juntos.
Os princpios que regem o transporte das substncias atravs de membranas so tambm os que
comandam a entrada de txicos no crebro. Assim, somente a forma livre estar apta para entrar no
crebro, desde que seja lipossolvel. A lipossolubilidade um fator preponderante na velocidade e
quantidade de AT que entra no SNC, ou seja, a velocidade de entrada no SNC proporcional ao
coeficiente de partio o/a da substncia.
A barreira hematenceflica no est totalmente desenvolvida por ocasio do nascimento e esta
seria uma explicao para a maior toxicidade dos AT nos recm-nascidos.

4.2.3.5 - Barreira Placentria
Durante anos, o termo barreira placentria demonstrou o conceito que a principal funo da
placenta era proteger o feto contra a passagem de substncias nocivas provenientes do organismo
materno. Sabe-se hoje que ela possui funes mais importantes, tais como a troca de nutrientes (O
2
,
30
CO
2
,etc.). Este material vital necessrio para o desenvolvimento do feto transportado por processo
ativo, com gasto de energia. J a maioria dos xenobiticos que se difundem atravs da placenta o fazem
por difuso passiva. Atualmente sabe-se que a placenta no representa uma barreira protetora efetiva
contra a entrada de substncias estranhas na circulao fetal.
Anatomicamente a placenta o resultado de vrias camadas celulares interpostas entre a
circulao fetal e materna. O nmero de camadas varia com a espcie e com o perodo de gestao e
isto provavelmente afeta a sua permeabilidade. Na espcie humana ela possui ao todo seis camadas, trs
de origem materna e trs de origem fetal.
Poderia se pensar que as espcies que apresentam placenta com maior nmero de camadas so
mais protegidas contra agentes txicos durante a gestao. Entretanto, a relao entre o nmero de
camadas e a permeabilidade placentria no est suficientemente estudada. Embora no totalmente
efetiva na proteo do feto contra a entrada de AT, existem alguns mecanismos de biotransformao de
frmacos, que podem prevenir a passagem placentria de alguns xenobiticos.

4.3.2.4 - ELIMINAO
Aceita-se, atualmente, que a eliminao composta de dois processos distintos: a
biotransformao e a excreo.

4.3.2.4.1 - Biotransformao
O organismo vivo apresenta mecanismos de defesa, que buscam terminar ou minimizar a ao
farmacolgica ou txica de um frmaco sobre ele, destacando-se o armazenamento, a biotransformao
e a excreo.
A intensidade e durao de uma ao txica determinada, principalmente, pela velocidade de
biotransformao do agente no organismo. Segundo alguns autores, se no existisse a biotransformao,
o organismo humano levaria cerca de 100 anos para eliminar uma simples dose teraputica de
pentobarbital, que um frmaco muito lipossolvel. Pode-se conceituar Biotransformao como
sendo o conjunto de alteraes maiores ou menores que um agente qumico sofre no organismo, visando
aumentar sua polaridade e facilitar sua excreo.

4.3.2.4.1.1 - Mecanismos da Biotransformao
A biotransformao pode ocorrer atravs de dois mecanismos:
o chamado Mecanismo de Ativao da Biotransformao, que produz metablitos com atividade igual
ou maior do que o precursor. Ex.: a piridina biotransformada ao on N-metil piridnico que tem
toxicidade cinco vezes maior que o precursor. O mesmo ocorre com o inseticida parathion que
biotransformado a paraoxon, composto responsvel pela ao txica do praguicida e
o Mecanismo de Desativao, quando o produto resultante menos ativo (txico) que o precursor. o
mais comum de ocorrer para os xenobiticos.
comum encontrar-se na literatura cientfica, os termos Metabolizao e Detoxificao, como
sinnimos de biotransformao. Hoje, no entanto, se guarda o termo metabolizao para os elementos
31
essenciais endgenos do organismo e sabe-se que detoxificao no sinnimo de Biotransformao.
Isto porque detoxificao significa diminuio de toxicidade e nem todas as reaes de biotransformao,
como citado acima, produziro metablitos menos txicos ou ativos que o seu precursor.
importante ressaltar que, na maioria das vezes:
Nenhum frmaco deixar de ser, no mnimo, parcialmente biotransformado;
Nenhum frmaco sofrer apenas um tipo de biotransformao;
Duas espcies animais no biotransformaro um frmaco de maneira idntica;
Nenhuma biotransformao permanecer inalterada com doses repetidas do frmaco.
A biotransformao pode ocorrer em qualquer rgo ou tecido orgnico como por exemplo no
intestino, rins, pulmes, pele, etc. No entanto, a grande maioria das substncias, sejam elas endgenas
ou exgenas sero biotransformadas no FGADO.
O fgado o maior rgo humano, tendo diversas e vitais funes, destacando-se entre elas, as
transformaes de xenobiticos e nutrientes. A biotransformao executada geralmente por enzimas,
principalmente aquelas existentes nos chamados microssomas hepticos, que so vesculas presentes
no sistema retculo endotelial liso (REL). Algumas reaes de biotransformao no so microssmicas,
embora sejam enzimticas e um nmero ainda menor pode ocorrer sem o envolvimento de enzimas.

4.2.4.1.2 - Fases da Biotransformao
As reaes envolvidas na biotransformao dos xenobiticos podem ser agrupadas em duas
fases distintas:
- Fase Pr-Sinttica ou Fase I, onde ocorrem reaes de oxidao, reduo e hidrlise.
- Fase Sinttica, de Conjugao ou Fase II, onde ocorrem reaes de conjugao.

- Fase Pr-Sinttica
Oxidao
A essncia bioqumica de vida animal a oxidao e qualquer xenobitico que possa ser
modificado por via idntica ou anloga ser facilmente biotransformado no organismo, embora nem
sempre o produto resultante seja menos txico. As oxidaes so, geralmente, catalisadas por uma
classe de enzima denominada oxidase de funo mista, que so enzimas complexas, inespecficas
(oxidam diferentes tipos de compostos) e que necessitam de NADPH e O
2
para agirem. Durante a
oxidao elas exigem uma molcula de oxignio para cada molcula de frmaco a ser oxidado (um
tomo de oxignio incorporado ao frmaco ocorrendo a oxidao e outro , geralmente, combinado com
H
2
, formando gua).
A enzima ou sistema enzimtico principal na oxidao de xenobiticos o chamado Citocromo
P
450
. Esta enzima um citocromo (complexo de protena e heme) chamado de P
450
porque em sua forma
reduzida ligado ao monxido de carbono, ter um pico (P) de absorbncia no comprimento de onda de
450nm. O cit P
450
parece estar localizado nas camadas profundas na membrana do retculo endotelial liso
(REL), mais especificamente, nos microssomas hepticos. Esta enzima a oxidase terminal do sistema
de oxidases mistas. Ela recebe os eltrons provenientes de outras fases da reao, se reduz e se liga ao
32
O
2
e ao frmaco, promovendo de fato a oxidao do composto. Isto demonstrado na Figura 4
apresentada a seguir:









NADPH CitP
450
redutase


e
-




NADPH




P
450
++


e
-


e
-


NADPH Cit b
5
Cit b
5
redutase
e
-


NADPH .oxignio super reativo

Figura 4: Oxidao dos xenobiticos atravs do sistema microssmico Citocromo P
450



Outras enzimas esto presentes nos microssomas hepticos e, embora menos conhecidas e
importantes que o Cit P
450
podem, tambm, biotransformar xenobiticos. o caso por exemplo do
citocromo b
5
, que est localizado fora das membranas do REL.
P
450
+++

RH
P
450
++


RH
O
2


P
450
+++
O
2
RH

O
2

RH
.
O
2
2-


P
450
+++


RH

H
2
O
ROH
33
O sistema enzimtico Cit P
450
influenciado por uma srie de substncias, que podem induzir ou
inibir a sua atividade, alterando a biotransformao de determinados compostos. Ex.: a) fenilbutazona
(antiinflamatrio e antireumtico) e o cloranfenicol podem inibir a biotransformao enzimtica da
tolbutamida, medicamento antidiabtico. Com isto, uma dose teraputica deste medicamento poder
causar crises de hipoglicemia srias, devido diminuio excessiva do acar no sangue; b) Fenobarbital
e lcool so exemplos de indutores enzimticos, que aumentam a biotransformao de outros frmacos
como a metadona, fenilbutazona, etc. Parece que nestes casos tanto o fenobarbital como o lcool,
aumentam a concentrao do Cit P
450
e, consequentemente, aumenta a biotransformao dos frmacos.
Outros fatores que influem na biotransformao sero discutidos posteriormente.

Reduo
A reduo de xenobiticos muito menos comum do que a oxidao uma vez que a mesma
contrria tendncia geral das reaes bioqumicas dos tecidos vivos, ou seja a oxidao. Deve-se
considerar que toda a reao enzimtica , fundamentalmente, reversvel sendo sua direo dependente
do equilbrio qumico. Assim, se a forma reduzida no equilbrio mais excretvel que a forma oxidada, a
lei de ao das massa tende a deslocar a reao no sentido da reduo. A reduo pode ser executada
enzimaticamente, envolvendo enzimas microssmicas ou no. J foi demonstrado a existncia do Cit P
450

redutase, enzima NADPH dependente, localizada fora da membrana do REL, que responsvel pela
reduo de uma srie de produtos.
Exemplos:
Reduo no-microssmica
- desaminao

NH
2
N
-
C
-
CH
3
O
anilina acetanilida


- Reduo dissulfdrica

C
2
H
5
-S -S - C
2
H
5
C
2
H
5
- SH
dietil dissulfeto etil mercaptan

Reduo microssmica
34

NH
2
NO
2
nitrobenzeno anilina


Hidrlise
Certos xenobiticos so lisados antes de sofrerem outras reaes de biotransformao. A mais
comum destas reaes a hidrlise de steres, embora amidas, nitrilas e hidrazidas, tambm possam
ser hidrolizadas.
A hidrlise de steres (R-COOR) feita pelas enzimas denominadas esterases, que podem ser
de origem microssmica ou no. Geralmente estas esterases no tem uma boa especificidade, ou seja,
uma esterase pode, alm de hidrolisar steres, provocar a quebra de acetanilidas, amidas e outros
derivados da anilina.

- Fase Sinttica ou de Conjugao
Um fator importante na toxicidade de um xenobitico a sua capacidade de ser excretado, e
parece que os rins dos vertebrados constitudo de maneira e excretar eletrlitos mais facilmente que
no eletrlitos. Assim, quanto mais ionizado estiver um cido orgnico no pH do meio, mais rapidamente
ele ser excretado pelos rins. A ionizao, por sua vez, depende do chamado momento dipolo (ou grau
de polaridade), ou seja, da distncia entre o centro geomtrico de todas as cargas positivas e de todas as
cargas negativas. claro que molculas com momento dipolo baixo (carga positiva perto da carga
negativa) tero uma simetria maior e, portanto, uma ionizao mais difcil. J molculas com grandes
dipolos (ou seja, molculas onde as cargas positivas e negativas esto distantes) tero uma menor
simetria e, consequentemente, maior ionizao.
Nas reaes de conjugao o xenobitico, provenientes ou no da fase pr-sinttica, se liga a
substratos endgenos do organismo formando metablitos com tamanho molecular elevado e,
consequentemente, mais excretveis e menos txicos. Ou seja, na conjugao observa-se: aumento do
tamanho maior polaridade maior ionizao maior excreo menor toxicidade.
Os principais compostos endgenos envolvidos na conjugao so:
Aminocidos e seus derivados, tais como a glicina, cisteina, etc.
Carboidratos e seus derivados, especialmente o cido glicurnico e glicose.
Conjugao com compostos simples, como por exemplo sulfato e acetato.
O composto endgeno envolvido na conjugao est, geralmente, na sua forma ativa, ou seja,
ligado a uma coenzima da qual transferido para o xenobitico.
As coenzimas envolvidas so:
Coenzima A (onde est ligado o acetato ou outros cidos graxos de cadeia curta).
Adenosina ou fosfoadenosina fosfato (PAP) onde est ligado o sulfato, metionina e etionina.
Uridina difosfato (UDP) onde se liga o cido glicurnico e a glicose.
35
As conjugaes mais freqentes so aquelas feitas com cido glicurnico e com o sulfato.

Conjugaes com cido glicurnico
O cido glicurnico um derivado 6-carboxil da glicose, formado durante o metabolismo deste
acar. A forma ativa deste composto, o cido uridino difosfato glicurnico (UDPGA) formado
enzimaticamente na frao solvel do fgado. Esta forma ativa doa o cido glicurnico para se conjugar
com o xenobitico e esta reao catalisada pela transglicuronilase ou glicuroniltransfe-rase, presente na
frao microssmica heptica.
O cido glicurnico que est em configurao o no UDPGA, sofre inverso de Walden e se
conjuga com o xenobitico em configurao |.
Os conjugados glicurnicos ou glicurondeos so muito polares e, portanto, facilmente excretados
do organismo. Em relao s substncias endgenas, so poucas aquelas capazes de sofrerem
conjugao glicurnica. Exemplo: tiroxina e bilirrubina. como se o organismo tivesse guardado este
tipo de conjugao para a biotransformao de xenobiticos.

Conjugao com Sulfato
Este tipo de conjugao quase to comum quanto a anterior. Os produtos da conjugao com
sulfatos so sais de sulfatos cidos (SO
3
) ou de sulfamatos (NHSO
3
), que, no pH fisiolgico so
totalmente ionizados e rapidamente excretados pelos rins. Os ons sulfatos presentes no organismo
tambm tero que ser ativados para se conjugarem com os xenobiticos. Esta ativao envolve o uso de
ATP e feita pelas enzimas ATP-sulfato-adenil-transferase e ATP-adenil-sulfato-3-fosfotransferase.
Forma-se, ento, o PAPS, que a forma ativa do sulfato, presente na frao microssmica heptica e
que sob ao da sulfoquinase cede o sulfato ao xenobitico, formando o conjugado.

4.2.4.1.3 - Fatores que influem na Biotransformao
Alm da induo e inibio enzimtica estudada anteriormente, outros fatores podem alterar a
biotransformao dos xenobiticos. So eles:
Dose e Freqncia: A dose geralmente altera a via de biotransformao. Certas enzimas possuem
elevada afinidade, mas baixa capacidade para biotransformar substncias exgenas. Por isto, sero
rapidamente saturadas, quando doses elevadas do txico so administradas e outras vias secundrias
passam a ter um papel mais importante. Exemplo: o acetaminofem em doses baixas (15 mg/Kg)
90% biotransformado atravs da conjugao com sulfato. Em doses elevadas (300 mg/kg) apenas
43% ser excretado como tal, passando a ser significativa, as excrees como glicurondeo e cido
mercaptrico (conjugao com glutation).
Em relao freqncia, ela pode levar a uma sensibilizao ou induo de receptores
enzimticos, aumentando a biotransformao.
Dieta e estado nutricional: O estado nutricional bastante importante para a biotransformao;
podendo alterar a atividade do Cit P
450
(oxidase ou redutase). As deficincias em vitaminas,
especialmente a C, E e do complexo B, reduzem a velocidade de biotransformao. Elas esto direta
36
ou indiretamente envolvidas na regulao do Cit P
450
. Alm disto, suas deficincias podem alterar a
energia e o estado redox das clulas, diminuindo a produo de cofatores, necessrios para a fase de
conjugao. Uma dieta rica em lpides diminui, geralmente, a biotransformao, uma vez que estes
podem aumentar a suscetibilidade peroxidao lipdica. Esta maior suscetibilidade pode se estender
aos lpides das membranas biolgicas, e com isto destruir os sistemas enzimticos intracelulares
levando a um aumento da toxicidade dos frmacos. Este papel desenvolvido, tambm, pelas dietas
pobres em protenas, visto que a menor concentrao protica diminuir a sntese enzimtica e,
consequentemente, a biotransformao.
Algumas substncias naturalmente presentes nos alimentos podem aumentar a biotransformao
dos xenobiticos. o caso dos compostos indlicos e dos hidrocarbonetos policclicos aromticos; estes
ltimos presentes em carnes assadas, que induzem Fase I da biotransformao.
Sexo, Idade, Peso: J foi demonstrado que, para algumas substncias, existem diferenas entre as
respostas txicas de animais macho e fmea. Estudos feitos em ratos demonstraram que as fmeas
so mais suscetveis a uma dose de hexobarbital do que os machos (elas dormem por um tempo
maior). Este fato explicado pela menor capacidade do fgado das fmeas em biotransformar
xenobiticos tornando-as mais suscetveis ao da maioria dos agentes txicos. A menor atividade
heptica destes animais fmeas no entanto, ir diminuir a ao de frmacos que so biotransformados
pelo mecanismo de ativao (ex.: o tetracloreto de carbono e halotano). Acredita-se que estas
diferenas entre sexo sejam causadas pelos hormnios sexuais, posto que, ao se administrar
testosterona s fmeas, houve aumento na capacidade de biotransformao e com a castrao de
machos ocorreu diminuio desta capacidade. A influncia do sexo sobre a biotransformao ocorre
tambm em processos que ocorrem em outros rgos como por exemplo nos rins. Ex.: animais
machos so mais suscetveis ao txica do clorofrmio, provavelmente, por biotransformar mais
rapidamente este solvente, originando o fosgnio, metablito intermedirio ativo. Embora as diferenas
entre sexo sejam mais pronunciadas em ratos, outras espcies entre elas o homem, tambm
apresentam estas modificaes (ex.: nicotina, cido acetilsaliclico, heparina, etc.).
Idade: tanto os animais jovens, quanto os velhos, apresentam menor capacidade de biotransformar
xenobiticos e, consequentemente, so mais suscetveis aos seus efeitos txicos. Geralmente, o Cit
P
450
dos recm-nascidos tem apenas 20% a 50% da atividade observada em adultos. Em relao aos
idosos, no s a atividade diminuda do Cit P
450
, mas tambm outros fatores, tais como menor fluxo
sangneo, menor eficincia no sistema da excreo renal e biliar, contribuem para a menor
biotransformao dos xenobiticos.

4.2.4.1.4 - Importncia da Biotransformao para as Anlises Toxicolgicas
Esta reside no fato de que a forma mais comum de se encontrar o agente txico em material
biolgico como produto biotransformado. Assim, conhecendo a biotransformao do AT, sabe-se o que
procurar na amostra enviada ao laboratrio. Alm disto, conhecendo-se a biotransformao e os
metablitos formados, fica mais fcil saber que tipo de amostra a mais indicada para ser requisitada.
Exemplo: a metanfetamina, um anorexgeno do grupo anfetamnicos usado como bolinha
37
biotransformada no organismo, produzindo anfetamina, que excretada pelos rins. Assim, quando da
ingesto ou intoxicao com a metanfetamina, o produto principal a ser pesquisado na urina dever ser a
anfetamina. Os solventes clorados do tipo CHCl
3
e CCl
4
so muito pouco biotransformados no organismo
e quando isto ocorre o produto formado geralmente o CO
2
, que ser, assim como os precursores,
eliminados pelo ar expirado. Logo no adianta solicitar ou receber amostras de urina para serem
analisadas.
J um outro solvente clorado, o tricloretileno, muito biotransformado no organismo produzindo
principalmente cido tricloactico (TCA) e tricloetanol (TCE), eliminados na urina. Para este xenobitico a
urina amostra biolgica adequada.

4.2.4.2 - Excreo
Este processo , muitas vezes, denominado Eliminao, embora pelo conceito atual a eliminao
tambm o processo de biotransformao. A excreo pode ser vista como um processo inverso ao da
absoro, uma vez que os fatores que influem na entrada do xenobitico no organismo, podem dificultar a
sua sada. Basicamente existem trs classes de excreo:
- eliminao atravs das secrees, tais como a biliar, sudorpara, lacrimal, gstrica, salivar, lctea.
- eliminao atravs das excrees, tais como urina, fezes e catarro.
- eliminao pelo ar expirado.
O processo mais importante para a Toxicologia e a excreo urinria.

4.2.4.2.1 - Excreo Urinria
Sabe-se que a capacidade de um rgo em realizar uma determinada funo est intimamente
relacionada com sua anatomia e que os rins possuem um elevado desenvolvimento anatmico, voltado
para a excreo de substncias qumicas.
Os glomrulos renais filtram cerca de 20% do fluxo cardaco (os rins recebem 25% deste fluxo) e
apresentam poros bastantes largos (cerca de 40 A enquanto o de outros tecidos medem cerca de 4 A).
Assim, os glomrulos filtram substncias lipossolveis ou hidrossolveis, cidas ou bsicas, desde que
tenham PM menor do que 60.000. A filtrao glomerular um dos principais processos de eliminao
renal e est intimamente ligado a um outro processo que a reabsoro tubular. As substncias, aps
serem filtradas pelos glomrulos, podem permanecer no lmem do tbulo e ser eliminada, ou ento
podem sofrer reabsoro passiva atravs da membrana tubular. Isto vai depender de alguns fatores, tais
como o coeficiente de partio leo/gua; o pKa da substncia e pH do meio. De modo geral, as
substncias de carter alcalino so eliminadas na urina cida e as substncias cidas na urina alcalina.
Isto porque nestas condies as substncias se ionizaro, tornando-se hidrossolveis e a urina , em sua
maior parte, formada de gua.
Outro processo de excreo renal a difuso tubular passiva. Substncias lipossolveis, cidas
ou bsicas, que estejam presentes nos capilares que circundam os tbulos renais, podem atravessar a
membrana por difuso passiva e carem no lmem tubular. Dependendo do seu pKa e do pH do meio,
elas podem, ou no, se ionizarem e, consequentemente, serem excretadas ou reabsorvidas.
38
O terceiro processo de excreo renal a secreo tubular ativa. Existem dois processos de
secreo tubular renal, um para substncias cidas e outro para as bsicas estando estes sistemas
localizados, provavelmente, no tbulo proximal. A secreo tubular tem as caractersticas do transporte
ativo, ou seja, exige um carregador qumico, gasta energia, um mecanismo competitivo e pode ocorrer
contra um gradiente de concentrao. Algumas substncias endgenas, tais como o cido rico, so
excretadas por este mecanismo e a presena de xenobiticos excretados ativamente, pode interferir com
a eliminao de substratos endgenos. A Penicilina um exemplo de xenobitico secretado ativamente
pelos tbulos. O uso de Probenecid (frmaco excretado pelo mesmo sistema) evita que este antibitico
seja secretado muito rapidamente do organismo. Geralmente, o que ocorre no organismo uma
combinao dos trs processos de excreo renal, para permitir uma maior eficcia na eliminao dos
xenobiticos.

4.2.4.2.2 - Excreo Fecal e Catarral
No so processos muito importantes para a Toxicologia. Os AT encontrados nas fezes
correspondem frao ingerida e no absorvida ou ento ao AT que sofreu secreo salivar, biliar ou
gstrica. As partculas que penetram pelo trato pulmonar podem ser eliminadas pela expectorao no TGI
e, se no forem reabsorvidas, sero, tambm, excretadas pelas fezes.


4.2.4.2.3 - Secreo Biliar
Dentre as secrees orgnicas, a mais significativa para a excreo de xenobiticos a biliar. O
fgado tem uma posio vantajosa na remoo de substncias exgenas do sangue, principalmente
daquelas absorvidas pelo trato gastrintestinal. Isto porque, o sangue proveniente do TGI, atravs da
circulao porta, passa inicialmente pelo fgado, e somente depois entra na circulao sistmica. No
fgado parte do xenobitico pode ser biotransformado e os metablitos ou mesmo o produto inalterado
podem ser secretados pela bile no intestino.
Existem, sabidamente, trs sistemas de transporte ativo para a secreo de substncias
orgnicas na bile, a saber, para substncias cidas, bsicas e neutras. quase certa a existncia de um
outro sistema para os metais. Uma vez secretado no intestino, os xenobiticos podem sofrer reabsoro
ou excreo pelas fezes. No se conhece o mecanismo que determina se a excreo ser urinria ou
biliar. Esquematicamente temos:
estmago fgado circulao sistmica
| +
intestino bile

o chamado ciclo entero heptico e a morfina um exemplo tpico de xenobitico que apresenta tal ciclo.
Ela conjugada com cido glicurnico no fgado e o glicurondeo de morfina secretado pela bile no
intestino. Neste local, pela ao da enzima |-glicuronidase, a morfina liberada e reabsorvida. O
glicorondeo que no for lisado ser excretado pelas fezes.
39

4..2.4.2.4 - Outras secrees
A eliminao atravs da secreo sudorpara j conhecida h alguns anos. Desde 1911 sabe-se
que substncias tais como iodo, bromo, cido benzico, cido saliclico, chumbo, arsnio, lcool, etc., so
excretadas pelo suor. O processo parece ser o de difuso passiva e pode ocorrer dermatites em
indivduos suscetveis, especialmente quando se promove a sudorese para aumentar a excreo pela
pele.
A secreo salivar significativa para alguns xenobiticos. Os lipossolveis podem atingir a saliva
por difuso passiva e os no lipossolveis podem ser eliminados na saliva, em velocidade proporcional ao
seu peso molecular, atravs de filtrao. Geralmente as substncias secretadas com a saliva sofrem
reabsoro no TGI.
Existe um interesse em relao secreo de xenobiticos no leite, pois este acaba sendo
ingerido por recm-nascidos. Geralmente as substncias apolares sofrem difuso passiva do sangue para
o leite e como esta secreo mais cida do que o sangue (ela tem pH = 6,5), os compostos bsicos
tendem a se concentrarem mais a. J os compostos cidos tem uma concentrao lctea menor que a
sangnea. Vrias substncias so, sabidamente, eliminadas pelo leite: DDT, PCB (difenil policlorados),
Pb, Hg, As, morfina, lcool, etc.

4.2.4.2.5 - Excreo pelo ar expirado
Gases e vapores inalados ou produzidos no organismo so parcialmente eliminados pelo ar
expirado. O processo envolvido a difuso pelas membranas que, para substncias que no se ligam
quimicamente ao sangue, depender da solubilidade no sangue e da presso de vapor. Estes
xenobiticos so eliminados em velocidade inversamente proporcional reteno no sangue, assim,
gases e vapores com K elevado (pouco solveis no sangue) so rapidamente eliminados, enquanto os de
K baixo (muito solvel no sangue) so lentamente excretados pelo ar expirado. A freqncia cardaca e
respiratria influem na excreo destes agentes: a primeira nos de K alto e a segunda nos de K baixo. Em
relao presso de vapor, os lquidos mais volteis sero, quase exclusivamente, excretados pelo ar
expirado.

4.2.4.2.6 - Fatores que influem na velocidade e via de excreo
Via de Introduo: a via de introduo influi na velocidade de absoro, de biotransformao e,
tambm, na excreo.
Afinidade por elementos do sangue e outros tecidos: geralmente o agente txico na sua forma livre
est disponvel eliminao.
Facilidade de ser biotransformada: com o aumento da polaridade a secreo urinria est facilitada.
Freqncia respiratria: em se tratando de excreo pulmonar, uma vez que, aumentando-se a
freqncia respiratria, as trocas gasosas ocorrero mais rapidamente.
- Funo renal: sendo a via renal a principal via de excreo dos xenobiticos, quaisquer
disfuno destes rgos interferir na velocidade e proporo de excreo.
40

5 - TOXICODINMICA
Esta a terceira fase da intoxicao e envolve a ao do agente txico sobre o organismo. O AT
interage com os receptores biolgicos no stio de ao e desta interao resulta o efeito txico. O rgo
onde se efetua a interao agente txico-receptor (stio de ao) no , necessariamente, o rgo onde
se manifestar o efeito. Alm disto, de um AT apresentar elevadas concentraes em um rgo, no
significa obrigatoriamente, que ocorrer a uma ao txica. Geralmente os AT se concentram no fgado e
rins (locais de eliminao) e no tecido adiposo (local de armazenamento), sem que haja uma ao ou
efeito txico detectvel.
Quando se considera a complexidade dos sistemas biolgicos (do ponto de vista qumico e
biolgico), pode-se imaginar o elevado nmero de mecanismos de ao existentes para os agentes
txicos. Alguns destes mecanismos, os principais em Toxicologia, so resumidos a seguir:

5.3.1 - Interferncia com o funcionamento de sistemas biolgicos

5.3.1.1 - Inibio irreversvel de enzimas
O exemplo clssico deste mecanismo so os inseticidas organo-fosforados, que inibem
irreversivelmente a acetilcolinesterase (AChE). Estes inseticidas impedem, assim, que a acetilcolina
(Ach), um dos mais importantes neurotransmissores do organismo, seja degradada em colina e cido
actico, aps transmitir o impulso nervoso atravs da sinapse. Ocorrer acmulo de Ach e,
consequentemente, os efeitos txicos decorrentes deste acmulo.

5.3.1.2 - Inibio reversvel de enzimas
Geralmente, os AT que atuam atravs deste mecanismo so anti-metablitos, ou seja,
quimicamente semelhantes ao substrato normal de uma enzima. Assim, o agente txico captado pela
enzima, mas no consegue ser transformado por ela, interrompendo assim reaes metablicas
essenciais para o organismo. uma inibio reversvel porque o prprio organismo ao final da exposio
capaz de revert-la, em velocidade no muito lenta. O exemplo clssico a dos inseticidas carbamatos,
que inibem tambm a AChE s que reversivelmente. Outro exemplo so os antagonistas do cido flico
(usados no tratamento de tumores malignos e como herbicidas). Estas substncias inibem enzimas
envolvidas na sntese das bases purnicas e pirimidnicas, impedindo, consequentemente, que haja
sntese de DNA e proliferao celular. Como estes frmacos no tem ao seletiva, podem causar efeitos
txicos em uma srie de tecidos e rgos.

5.3.1.3 - Sntese letal
Neste tipo de mecanismo de ao, o agente txico , tambm, um antimetablito. Ele
incorporado enzima e sofre transformaes metablicas entrando em um processo bioqumico, dando
como resultado um produto anormal, no funcional e muitas vezes txico. Em outras palavras, h a
sntese de substncias que no so farmacologicamente teis e, dependendo da concentrao deste
41
produto anormal, pode haver morte celular, tecidual ou de sistemas biolgicos. Tem-se como exemplo, o
cido fluoractico (CH
2
-F-COOH), usado como rodenticida e que atua no organismo tomando o lugar do
cido actico no ciclo do cido ctrico. Os processos metablicos desenvolvem-se at formao de
cido fluoroctrico (no lugar do cido ctrico). Este produto anormal vai inibir a aconitase, enzima
responsvel pela etapa seguinte do ciclo. Assim, h formao de um substrato anormal, txico, que
impede o desenvolvimento do ciclo do cido ctrico, indispensvel para o suprimento de energia de quase
todos os organismos vivos.

5.3.1.4 - Seqestro de metais essenciais
Vrios metais atuam como cofatores em vrios sistemas enzimticos, como por exemplo os
citocromos, envolvidos nos processos de oxi-reduo. Destacam-se o Fe, Cu, Zn, Mn e Co. Alguns
agentes txicos podem atuar como quelantes, ou seja, se ligam ou seqestram os metais, impedindo que
eles atuem como cofatores enzimticos. Desta maneira, o processo biolgico, no qual estas enzimas
atuam, ficar prejudicado ou mesmo interrompido. o caso dos ditiocarbomatos. Eles se complexam
com metais, formando complexos lipossolveis e impedindo a ao enzimtica. Este o mecanismo de
ao do Antabuse, medicamento usado, por muitos, no tratamento do alcoolismo.

5.3.2 - Interferncia com o transporte de oxignio
A hemoglobina (Hb), pigmento responsvel pelo transporte de O
2
dos alvolos para os tecidos e
da retirada de CO
2
dos tecidos para os pulmes, constituda de uma parte protica (globina) e outra no
protica (heme). No heme tem-se basicamente, uma molcula de Fe
2+
ligada a quatro molculas de
protoporfirina. Este complexo ferroprotoporfirnico o responsvel pela colorao vermelha da Hb.
Quimicamente o ferro possui 6 valncias de coordenaes, portanto no heme restam ainda 2
coordenaes livres. Uma delas ligada globina formando a hemoglobina e a outra (a 6
a
) ligada ao
O
2
, dando origem a oxemoglobina (HbO
2
), que o pigmento normal do sangue.
Existem alguns agentes txicos que alteram a hemoglobina e, consequentemente, impedem o
transporte de oxignio. So trs os pigmentos anormais do sangue, ou seja, formas de Hb que so
incapazes de transportar O
2
.
-Carboxemoglobina (HbCO) que pode ser causada pelo CO, diclorometano, etc)
- Metemoglobina (MeHb) resultante, por exemplo da exposio a anilina, acetaminofeno,
nitritos,etc;
- Sulfemoglobina (SHb), a droga oxidante metaclorpramida exemplo de um agente
sulfemoglobinizante.
No caso de carboxemoglobina, o monxido de carbono, que tem 210 vezes mais afinidade pela
Hb do que o O
2
, liga-se sexta coordenao do Fe
2+
, deslocando o O
2
. Esquematicamente, tem-se:

HbO
2
+ CO HbCO + O
2


42
A HbCO incapaz de exercer a funo respiratria e efeitos decorrentes desta hipoxia vo
aparecer no indivduo exposto.
Existem vrios xenobiticos tais como os nitritos, anilina e acetaminofem, que uma vez no
sangue, oxidam os ons Fe
2+
da hemoglobina, formando a chamada metemoglobina. O Fe
3+
da MeHb
perde a capacidade de se ligar na 6
a
coordenao com o O
2
e, assim, este pigmento no cumprir,
tambm, a funo respiratria. Dentro deste grupo de agentes txicos, que agem interferindo com o
transporte de O
2
, esto, ainda, os agentes que provocam a lise das hemcias. Com a hemlise, a
hemoglobina extravasada para o meio extracelular, onde desnaturada. Haver assim menor
quantidade de Hb e logicamente menor transporte de O
2
para os tecidos.

5.3.3 - Interferncia com o sistema gentico

5.3.3.1 - Ao citosttica
Alguns agentes txicos impedem a diviso celular e, consequentemente, o crescimento do tecido.
Esta ao pode ser desenvolvida atravs de distintos mecanismos, tais como a inibio enzimtica (j
estudada) ou o encaixe entre as duplas hlices do DNA. Neste ltimo caso esto as substncias
denominadas de Alquilantes, que ao se intercalarem entre as base de cada hlice, inibem o crescimento
celular. So usadas no tratamento do cncer, mas no tem ao seletiva.

5.3.3.2 - Ao mutagnica e carcinognica
Certas substncias qumicas tm a capacidade de alterarem o cdigo gentico, ou seja, de
produzirem um erro no cdigo gentico. Se esta alterao ocorrer nos genes de clulas germinativas, ou
seja, que sero enviadas prxima gerao (clulas hereditrias), pode ocorrer um efeito mutagnico.
Este efeito possui um perodo de latncia relativamente grande, se manifestando apenas algumas
geraes aps a ao. Isto porque, geralmente, a mutao ocorre em genes recessivos e s ser
manifestada se houver o cruzamento com outro gen recessivo que tenha a mesma mutao.
Logicamente, os estudos que comprovam esse efeito (e no a ao, que relativamente frequente) so
bastante difceis de serem realizados e avaliados, o que faz com que, atualmente, poucas substncias
provoquem, comprovadamente, o efeito mutagnico. O mais comum existir substncias com ao
mutagnica mas incapazes de provocarem o aparecimento de mutaes.
A ao carcinognica vem sendo mais intensamente estudada nos ltimos anos. Nesta ao os
xenobiticos provocam alteraes cromossmicas que fazem com que as clulas se reproduzam de
maneira acelerada. Esta reproduo incontrolvel no produzem clulas harmnicas e perfeitas. Embora
o mecanismo exato de desenvolvimento do cncer no seja totalmente conhecido, aceita-se que esta
ao ocorra em duas fases distintas: a converso neoclssica ou fase de iniciao e o desenvolvimento
neoclssico ou promoo. Na fase de iniciao, um xenobitico ou produto de biotransformao promove
a alterao a nvel do DNA. Esta leso origina a chamada clula neoplstica, que atravs da interferncia
de outras substncias qumicas e/ou fatores, muitas vezes desconhecidos, sofre processo de
43
crescimento, originando o neoplasma e o cncer instalado. Entre as duas fases do processo
carcinognico existe, geralmente, um perodo de latncia que pode variar de meses a anos.
A teratognese resulta de uma ao txica de xenobiticos sobre o sistema gentico de clulas
somticas do embrio/feto, levando ao desenvolvimento defeituoso ou incompleto da anatomia fetal.
(NOTA: neoplasma: massa ou colnia anormal de clulas. A neoplasia pode ser benigna (tumor no
invasivo) ou maligna).

5.3.4 - Interferncia com as funes gerais das clulas

5.3.4.1 - Ao anestsica
Um dentre os vrios mecanismos que podem resultar em efeito anestsico, a
interferncia com o transporte de oxignio e nutrientes para as clulas biolgicas. O xenobitico se
acumula na membrana de certas clulas, impedindo que haja a passagem destes nutrientes. As clulas
mais sensveis essa deficincia so as do SNC, por necessitarem de maior quantidade destes
compostos essenciais.

5.3.4.2- Interferncia com a neurotransmisso
Na realidade, muitos dos mecanismos agrupados aqui podem decorrer de inibio enzimtica, ou
seja poderiam ser classificados no primeiro grupo de ao txica citadas no item 3.3.1.
Vrios agentes txicos atuam alterando a transmisso neurolgica atravs da interferncia com
os neurotransmissores envolvidos. esta interferncia pode ocorrer a nvel pr-sinptico, sinptico e/ou
ps-sinptico. Exemplos:
bloqueio dos receptores de diferentes sinapses (curare);
inibio do metabolismo dos neurotransmissores (praguicidas organofosforados);
bloqueio na sntese ou metabolismo de neurotransmissores (mercrio);
inibio da liberao da liberao pr-sinptica dos neurotransmissores (toxina botulnica -
Clostridium botulinum);
estimulao da liberao de neurotransmissores (anfetamina)
bloqueio da recaptura dos neurotransmissores para as clulas pr-sinpticas (imipramina,
anfetamina).

5.3.5 - Irritao direta dos tecidos
Os xenobiticos que tem ao irritante direta sobre os tecidos, reagem quimicamente, no local de
contato, com componentes destes tecidos. Dependendo da intensidade da ao pode ocorrer irritao,
efeitos custicos ou necrosantes. Os sistemas mais afetados so pele e mucosas do nariz, boca, olhos,
garganta e trato pulmonar. Destaca-se neste grupo, a ao dos gases irritantes (fosgnio, gs mustarda,
NO
2
, Cl) e lacrimognicos (acrolena, Br, Cl). Outra ao irritante de tecidos a dermatite qumica. Os
xenobiticos que apresentam esta ao txica (substncias vesicantes como as mustardas nitrogenadas
44
ou agentes queratolticos como o fenol), lesam a pele e facilitam a penetrao subsequente de outras
substncias qumicas.


IV - BIBLIOGRAFIA

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poison. 4 ed.,New York:Pergamon Press, 1991.
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Mxico, 1978
LARINI, L. - Toxicologia - 2 Ed., Editora Manole, 1993.
FREDDY HAMBURGUER; JOHN A. HAYES; EDWARD W. PELIKAN - A guide to general Toxicology.,
Karger Continuing Education series, V.5, 1983
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OGA, S. (Ed.) - Fundamentos de Toxicologia. Atheneu:So Paulo, 2
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