Anda di halaman 1dari 7

Probiotik mempengaruhi parameter inflamasi klinis gingivitis eksperimental pada manusia

Author (s): J. Eberhard, S. Nicksch, R. Schilke, S. Slawik, I. Staufenbiel dan M. Stiesch Sumber: European Journal of Clinical Nutrition. 65,7 (Juli 2011): p857. Dari Gale Pendidikan, Agama dan Humaniora Paket Lite. Jenis Dokumen: Laporan Klinis DOI: http://dx.doi.org/10.1038/ejcn.2011.45 Abstrak: Tujuan: Untuk menentukan efek dari minum susu probiotik dikonsumsi selama periode 28 hari, mengenai ekspresi parameter inflamasi gingiva klinis oral selama berbagai tahapan plakinduced radang gusi. Metode: Dua puluh delapan orang dewasa dengan gingiva sehat mengambil bagian dalam studi prospektif dan klinis terkontrol. Kelompok uji disarankan untuk mengkonsumsi minum susu probiotik (Yacult) setiap hari selama periode 4 minggu, sedangkan kelompok kontrol tidak menerima makanan atau minuman probiotik. Setelah 2 minggu konsumsi minuman probiotik, peserta disarankan untuk tidak sikat gigi mereka selama 14 hari.Selanjutnya, pada awal serta pada hari 1, 3, 5, 7 dan 14, parameter klinis berikut dinilai: indeks plak (PI), indeks gingiva (GI), cairan sulkus gingiva (GCF) volume dan perdarahan saat probing ( BOP). Hasil: Pada awal, PI secara signifikan lebih tinggi pada kelompok uji dibandingkan dengan kontrol (0,44 [+ atau -] 0,50 vs 0,09 [+ atau -] PI 0,24, P = 0,0001).Penghentian peningkatan kebersihan mulut parameter inflamasi klinis pada kedua kelompok. Pada hari ke-14, parameter PI, GI, volume GCF dan BOP secara signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan nilai awal (P = 0,0001). Pada hari ke-14, BOP tingkat (18,75 [+ atau -] 12,32 vs 36,88 [+ atau -] 12,54%) dan volume GCF (18,78 [+ atau -] 16,7 vs 35,72 [+ atau -] 16,1 Periotron unit) secara signifikan lebih rendah pada kelompok uji dibandingkan dengan kelompok kontrol (P = 0,005). Kesimpulan: Hasil penelitian kami menunjukkan bahwa konsumsi harian minuman susu probiotik mengurangi efek plak-inflamasi yang diinduksi gingiva berhubungan dengan skor plak yang lebih tinggi karena kandungan karbohidrat tinggi dari minuman susu probiotik. European Journal of Clinical Nutrition, (2011) 65 857-863; DOI: 10.1038/ejcn.2011.45; dipublikasikan online 30 Maret 2011 Kata kunci: probiotik, gingivitis eksperimental; cairan cervicular gingiva; studi klinis; peradangan Probiotik adalah mikroorganisme hidup, yang mungkin manfaat kesehatan jika dikonsumsi dalam jumlah yang memadai (FAO / WHO, 2001). Konsep bahwa bakteri probiotik dapat mempengaruhi kesehatan manusia dihasilkan oleh Elie kelahiran Rusia Metchnikoff bakteriologi. Dia melaporkan bahwa Bulgaria hidup lebih lama daripada orang lain konon karena konsumsi produk susu fermentasi yang mengandung bakteri hidup (Lactobacillus bulgaricus, Metchnikoff, 1907). Beberapa penelitian menyarankan bahwa probiotik mungkin juga bermanfaat bagi kesehatan

mulut (Meurmann, 2005; Caglar et al, 2006;. Meurmann dan Stamatova, 2007).Beberapa studi klinis menunjukkan bahwa konsumsi rutin laktobasilus probiotik dan Bifidobacterium penurunan jumlah kariogenik Streptococcus dalam air liur dan plak gigi, sehingga resiko yang lebih rendah signifikan karies (Nase et al, 2001;. Ahola dkk, 2002;. Caglar dkk. , 2006; Caglar dkk, 2007;. Cildir et al, 2009).. Beberapa studi juga mengungkapkan bahwa strain probiotik Lactobacillus yang mengurangi inflamasi gingiva (Krasse et al, 2006;.. Twetman et al, 2009), meningkatkan kesehatan periodontal (Shimauchi et al, 2008.) Dan penurunan konsentrasi pigmen hitam batang termasuk Porphyromonas gingivalis dalam air liur dan plak subgingiva (Ishikawa et al, 2003;.. Matsuoka et al, 2006). Sebaliknya, Staab et al. (2009) menemukan tidak ada perubahan parameter inflamasi klinis. Studi-studi menunjukkan bahwa efek berpotensi menguntungkan dari probiotik tentang karies gigi dan proses inflamasi dalam rongga mulut, khususnya periodontitis, yang dibahas kontroversial. Gingivitis dan periodontitis adalah penyakit peradangan kronis pada jaringan pendukung gigi (periodonsium) akibat infeksi bakteri. Biofilm bakteri yang melekat erat pada permukaan gigi menyebabkan peradangan kronis, yang mungkin berbeda antara gingivitis ringan dan reversibel dan ireversibel periodontitis parah yang akhirnya dapat mengakibatkan hilangnya gigi (Pihlstrom et al., 2005). Prevalensi gingivitis di populasi barat adalah ~ 75%. Ini penyakit periodontal ini ditandai dengan kemerahan, pembengkakan dan perdarahan sering jaringan yang sakit. Sekitar 30% orang dewasa di Amerika Serikat mengungkapkan bentuk moderat periodontitis, sedangkan 10% dari penduduk AS dipengaruhi oleh berat jenis penyakit ini (Papapanou, 1999). Model gingivitis eksperimental menginduksi reaksi inflamasi di bawah parameter yang sangat terkendali dan direproduksi pada manusia. Oleh karena itu, ini setup eksperimental sangat berguna untuk menganalisis efek topikal atau sistemik diberikan antibakteri atau anti-inflamasi zat / obat (Eberhard et al., 2005). Oleh karena itu, tujuan dari calon studi kami, klinis terkontrol pada manusia untuk menganalisis jika konsumsi probiotik mempengaruhi radang gingiva. Muda, subyek sehat yang terkena model plak yang disebabkan radang gusi. Hipotesis yang ditetapkan adalah bahwa konsumsi produk probiotik dapat mengurangi resiko gingivitis. Bahan dan metode Reagen Produk diterapkan (Yacult, Neuss, Jerman) adalah minuman probiotik tersedia secara komersial dibuat melalui fermentasi dari campuran susu skim, yang berisi 6,5 miliar Lactobacillus casei strain Shirota hidup (konsentrasi 108 unit pembentuk koloni per ml) per 65 botol ml . Bahan lainnya adalah gula (sukrosa, dekstrosa), susu bubuk skim, rasa dan air. Peserta Penelitian ini dirancang sebagai percobaan, prospektif klinis terkontrol dan single-buta.Subjek tes dipilih berdasarkan kriteria inklusi sebagai berikut: (1) 20-35 tahun, (2) non-perokok, (3)

tidak ada tanda-tanda klinis dari inflamasi gingiva (kemerahan, pembengkakan, pendarahan), (4) tidak menyelidik saku kedalaman> 3mm di situs manapun, (5) tidak ada kehilangan perlekatan approximal> 2mm di situs manapun dan (6) Indeks gingiva (GI) = 0 pada awal (informasi rinci diberikan di bawah ini). Kriteria eksklusi adalah sebagai berikut: (1) penyakit sistemik, (2) kehamilan atau menyusui, (3) cacat fisik atau mental yang dapat mengganggu dengan kebersihan mulut yang memadai, (4) riwayat penyalahgunaan obat, (5) alergi, (6 ) penerapan nonsteroid atau steroid anti-inflamasi obat, analgesik atau antibiotik dalam waktu 6 minggu sebelum studi, (7) lesi karies yang tidak diobati, implan, mahkota atau peralatan ortodontik gigi rahang atas di kanan atas, (8) perawatan gigi yang belum selesai dan (9 ) mulut. Petunjuk rinci diberikan kepada para peserta termasuk brosur informasi dengan rincian dari desain studi. Semua subjek menandatangani formulir informed consent. Pra-dipilih peserta dijadwalkan untuk pemeriksaan gigi. Selain itu, semua permukaan gigi yang skala dan dipoles 14 hari sebelum memulai penelitian untuk menghilangkan plak supragingiva, noda dan kalkulus. Selanjutnya, tidak ada plak gigi (PI) atau peradangan gingiva (GI) terdeteksi. Protokol penelitian disetujui oleh Komite Etika Hanover Medical School (No 5253). Desain eksperimental Pada awal penelitian gingivitis eksperimental, peserta menerima pasta gigi tanpa fluoride untuk membersihkan gigi mereka, yang tidak diperiksa (Kinderzahngel, Weleda, Schwbisch Gmiind, Jerman). Subjek diinstruksikan untuk tidak menggunakan pasta gigi komersial lainnya dan / atau larutan kumur. Uji klinis mulai dengan 14-hari 'non-menyikat periode'. Selama periode ini, peserta (uji dan kelompok kontrol) tidak diizinkan untuk melakukan apapun kebersihan mulut di enam gigi dari sisi kanan rahang atas. Dua minggu sebelum awal studi serta selama masa percobaan, kelompok uji (n = 11) adalah disarankan untuk minum 65 ml minuman probiotik, yang terdiri dari periode total 4 minggu.Sebaliknya, kelompok kontrol (n = 17) tidak menerima minuman probiotik. Subjek klinis diperiksa pada awal dan pada hari 1, 3, 5, 7 dan 14. Pada akhir penelitian, kebersihan mulut profesional diikuti dengan aplikasi topikal fluoride dilakukan. Klinis pembacaan Parameter klinis berikut dievaluasi pada setiap kali penilaian untuk mendokumentasikan tingkat peradangan pada gingiva: * Akumulasi plak bakteri ditentukan dengan menggunakan indeks Silness-Loe plak dimodifikasi (PI; Silness dan Loe, 1964) pada permukaan bukal dan mulut pada gigi yang dipilih. Plak gigi dinilai secara visual tanpa pewarnaan dan dinilai oleh empat derajat: 0 = tidak ada plak, 1 = akumulasi plak kecil, hanya terlihat dengan kaca pembesar, 2 = akumulasi plak moderat, terlihat tanpa pembesaran, 3 = akumulasi plak lunak diucapkan mengisi sulkus antara margin gingiva dan permukaan gigi. PI rata-rata adalah dihitung dengan membagi jumlah tersebut dengan jumlah total permukaan dinilai. * Indeks gingiva (GI; Loe dan Silness, 1963) ditentukan dengan memeriksa daerah gingiva

dipilih sebagai berikut: 0 = normal gingiva, tanpa peradangan, perubahan warna atau perdarahan; 1 = ringan peradangan, perubahan warna sedikit, perubahan permukaan gingiva ringan struktur, tidak ada perdarahan pada tekanan; 2 = peradangan sedang, eritema dan pembengkakan, pendarahan pada tekanan, dan 3 = peradangan parah, eritema dan pembengkakan, kecenderungan untuk perdarahan spontan, ulserasi sesekali. GI rata-rata adalah dihitung dengan membagi jumlah semua nilai dengan jumlah total permukaan diperiksa. * Cairan sulkus gingiva (GCF) dikumpulkan dengan strip kertas (Periopaper, Pro Arus Incorporated, Amityville, NY, USA) setelah pengeringan lembut gigi selama 10 detik Strip dimasukkan selama 30 detik ke dalam sulkus gingiva di empat lokasi dari premolar pertama kanan atas mesio-dan disto-oral serta mesio-dan disto-lisan. GCF diukur dengan meteran dikalibrasi 6000 Periotron cairan gingiva (Pro Arus Incorporated) dan dinyatakan dalam satuan Periotron (PU). GCF adalah eksudat serum yang menembus sulkus gingiva antara margin gingiva dan permukaan gigi. * Frekuensi pendarahan gingiva tercatat di empat lokasi dari semua gigi dipilih setelah lembut menyelidik (perdarahan saat probing, BOP): mesio-dan disto-oral, mesio-dan distolisan. Gingiva meradang mulai berdarah saat probing dan karena itu merupakan indikator peradangan. Ada atau tidak adanya pendarahan tercatat setelah pengumpulan GCF. Untuk menyelidik, tekanan-dikalibrasi probe (TPS probe, Vivacare, Schaan, Liechtenstein) digunakan. Ujung probe memiliki diameter 0,5 mm dan kekuatan probing ditetapkan pada 20 g. BOP dihitung dengan membagi jumlah nilai positif dengan jumlah total permukaan diperiksa dan dinyatakan dalam persen.

Semua pengukuran dilakukan di bawah kondisi yang sama oleh dua peneliti dikalibrasi yang buta tentang subjek uji atau kontrol pada awal serta pada hari 1, 3, 5, 7, dan 14 di empat lokasi per gigi, kecuali untuk GCF yang hanya diukur pada premolar pertama kanan atas. Analisis statistik Paket statistik untuk Ilmu Sosial 17,0 untuk Windows (SPSS Incorporated, Chicago, IL, USA) digunakan untuk analisis statistik. Unit statistik dari semua tes itu masing-masing individu; nilainilai median dan rentang dihitung untuk semua parameter. Perbedaan antara baseline dan hari ke-14 dihitung dan dinyatakan sebagai plot kotak. Uji Wilcoxon non-parametrik digunakan untuk perbandingan dalam kelompok-kelompok; uji Mann-Whitney diaplikasikan untuk menentukan perbedaan yang signifikan antara kelompok. P-nilai p0.05 dianggap signifikan secara statistik. Hasil

Dua puluh delapan peserta (16 perempuan dan 12 laki-laki) berusia antara 20 dan 33 tahun (rerata 24,5 [+ atau -] 3,41 tahun) diperiksa, semuanya menyelesaikan studi. Tidak ada efek buruk yang dilaporkan oleh peserta dari kelompok uji, yang mengkonsumsi probiotik Yacult

selama periode 28-hari penelitian. Data dari semua pengukuran (PI, GI, GCF dan BOP pada awal serta pada hari 1, 3, 5, 7 dan 14) disajikan pada Tabel 1 dan Angka 1-4. Pada awal, kelompok uji menunjukkan nilai yang lebih tinggi statistik signifikan untuk PI, GI, GCF (P = 0,0001) dibandingkan dengan kelompok kontrol. Sebaliknya, tidak ada perbedaan yang signifikan untuk BOP parameter yang dapat diamati antara kedua kelompok pada awal. Pada hari ke-14, para peserta dari kelompok uji menunjukkan nilai signifikan lebih tinggi untuk PI (P = 0,004) dan untuk GI (P = 0,024), sedangkan BOP secara signifikan lebih rendah (P = 0,002) pada kelompok uji dibandingkan dengan kelompok kontrol. Tidak ada perbedaan yang signifikan didokumentasikan bagi GCF. Skor PI meningkat secara signifikan antara baseline dan hari ke-14 (Gambar 1) dari 0,44 [+ atau -] 0,5-2,58 [+ atau -] 0,46 PI pada kelompok uji dan dari 0,09 [+ atau -] 0,24-2,29 [+ atau ] PI 0,59 pada kelompok kontrol (P <0,0001). Namun, lereng nilai PI dari kedua kelompok hampir sama dan tidak berbeda nyata (uji kelompok 2.14 [+ atau -] 0,56 PI, kelompok kontrol 2,2 [+ atau -] 0,32 PI). Tingkatan GI (Gambar 2) secara signifikan meningkat dari 0,15 [+ atau -] 0,19 pada awal menjadi 1,44 [+ atau -] 0,63 pada hari 14 dalam kelompok tes (P <0,0001) dan dari 0,01 [+ atau -] 0,03-1,17 [+ atau -] 0,64 pada kelompok kontrol (P <0,0001). Perbedaan nilai GI antara baseline dan hari ke-14 tidak berbeda secara bermakna antara kedua kelompok (kelompok uji 1,29 [+ atau -] 0,42 GI, kelompok kontrol 1,16 [+ atau -] 0,42 GI). Awalnya, pembacaan GCF secara signifikan lebih tinggi pada kelompok uji (23,0 [+ atau -] 17,3 vs 10,9 [+ atau -] 11,6 PU), tetapi pada hari ke-14 nilai yang sama didokumentasikan (uji kelompok 41,78 [+ atau -] 30,52 PU, kelompok kontrol 46,62 [+ atau -] 27,0 PU). Ini berarti bahwa peningkatan volume GCF pada kelompok uji secara signifikan lebih rendah (18,78 [+ atau -] 16,7 PU) dibandingkan dengan kelompok kontrol (35,72 [+ atau -] 16,1 PU, P = 0,005) selama periode gingivitis eksperimental ( Gambar 3). Pada awal, tidak ada perbedaan signifikan dari pembacaan BOP yang ditemukan antara tes dan kelompok kontrol, namun, pada hari 14 peserta dari kelompok uji menunjukkan nilai rendah signifikan (18,75 [+ atau -] 12,32%) dibandingkan subyek dari kelompok kontrol (36,88 [+ atau -] 12,54%, P = 0,002). Jadi, kenaikan BOP pada kelompok uji secara signifikan lebih rendah dibandingkan pada kelompok kontrol (P = 0,005, Gambar 4). Diskusi Kami studi prospektif klinis menunjukkan untuk pertama kalinya bahwa probiotik dapat mempengaruhi kesehatan mulut / periodontal pada manusia. Untuk menyelidiki efek, model gingivitis eksperimental dipilih. Secara keseluruhan, data kami dokumen yang (A) pembentukan plak diucapkan dapat dikaitkan dengan konsumsi harian probiotik dalam kombinasi dengan kebersihan mulut yang normal, dan (B) efek anti-inflamasi ditemukan selama periode gingivitis eksperimental dari 2 minggu. Oleh karena itu, hipotesis diuji dikonfirmasi.

Efek dari terapi probiotik pada penyakit sistemik telah dipelajari untuk berbagai gangguan (Broekaert dan Walker, 2006). Sebagian besar manfaat didokumentasikan probiotik yang berhubungan dengan gangguan pencernaan, termasuk yang disebabkan oleh Clostridium difficile dan obat antibiotik menyebabkan diare (Vanderhoof et al, 1999;. Szajewska dan Mrukowicz, 2001; Cremonini et al, 2002;. D'Souza et al ., 2002) diare, infeksi akut dan sindrom iritasi usus (Camilleri, 2006; Quigley, 2007; Kligler dan Cohrssen, 2008). Efek positif dari probiotik juga diamati untuk karies terkait faktor risiko (Nase et al, 2001;. Ahola et al, 2002;. Caglar et al, 2006;.. Cildir et al, 2009) dan kolonisasi dari rongga mulut oleh Candida spp. (Hatakka et al., 2007). Namun, hanya ada sedikit penelitian yang menyelidiki pengaruh probiotik terhadap gingivitis atau periodontitis. Twetman et al. (2009) melaporkan pengurangan gejala klinis yang disebabkan oleh radang gusi setelah penggunaan permen karet yang mengandung Lactobacillus reuteri selama 2 minggu. Krasse et al. (2006) mendokumentasikan efek probiotik pada sedang sampai parah gingivitis pada 59 pasien. Mereka menunjukkan bahwa setelah pemberian probiotik L. reuteri mikroorganisme untuk jangka waktu 2 minggu, inflamasi gingiva secara signifikan berkurang. Berbeda dengan penelitian kami, perubahan klinis yang dikaitkan dengan penurunan yang signifikan dari indeks plak di kelompok uji. Ini mungkin berspekulasi bahwa perbedaan ini merupakan konsekuensi dari tingginya kandungan gula dari produk komersial yang digunakan dalam penelitian kami, sedangkan Krasse et al. (2006) diberikan semata-mata bakteri yang diisolasi. Baru-baru ini, Staab et al. (2009) meneliti efek dari pemberian oral L-casei Shirota selama periode 8 minggu sebelum periode 96jam tanpa kebersihan mulut. Mereka melaporkan tidak ada perubahan dari parameter diselidiki inflamasi klinis, tetapi peningkatan yang signifikan akumulasi plak pada kelompok uji, mengkonfirmasikan hasil penelitian kami. Investigasi kami menunjukkan akumulasi plak meningkat awal selama kebersihan mulut normal sebelum awal, yang dikaitkan dengan tandatanda meningkat secara signifikan inflamasi gingiva. Diduga bahwa efek ini disebabkan oleh peningkatan ketersediaan karbohidrat bagi mikroorganisme mulut dengan minuman susu probiotik diuji, mungkin diikuti dengan pergeseran komposisi mikroflora oral pada bagian percobaan penelitian kami. Selain efek potensial terhadap peradangan setelah penerapan probiotik, beberapa studi meneliti efek dari komposisi biofilm bakteri setelah penggunaan topikal probiotik. Itu menunjukkan pada pasien, yang menderita periodontitis atau gingivitis, bahwa bakteri probiotik terakumulasi dalam biofilm mikroba sehingga menggantikan atau mengurangi bakteri patogen (Grudianov et al, 2002;.. Tsubura et al, 2009). Ishikawa et al. (2003), dan Matsuoka et al. (2006) menunjukkan bahwa aplikasi oral pil probiotik yang mengandung L. salivarius secara signifikan mengurangi konsentrasi bakteri P. gingivalis periopathogenic dalam air liur dan plak subgingiva pada sukarelawan sehat. Shimauchi et al. (2008) mendokumentasikan berkurangnya konsentrasi bakteri periodontopathogenic setelah pemberian probiotik Lactobacillus selama 8 minggu, yang dikaitkan dengan kondisi periodontal ditingkatkan. Meskipun karakterisasi mikroflora oral bukan tujuan dari penelitian ini, mungkin berspekulasi bahwa akumulasi dari biofilm bakteri non-patogen pada permukaan gigi adalah penyebab yang sangat mungkin untuk mengurangi peradangan pada kelompok uji.

Berbeda dengan investigasi lain, model mapan gingivitis eksperimental digunakan dalam penelitian ini untuk menyelidiki efek anti-inflamasi dari probiotik. Penghentian prosedur kebersihan mulut menyebabkan akumulasi deposito bakteri pada permukaan gigi dan jaringan lunak dengan peningkatan berikutnya frekuensi perdarahan dan sulkus gingiva volume cairan. Kedua parameter adalah indikasi untuk respon inflamasi host lokal.Bertentangan dengan studi klinis yang menyelidiki efek atau probiotik pada parameter lisan inflamasi pada pasien yang menderita gingivitis atau sudah dari periodontitis, gingivitis eksperimental model memiliki beberapa keunggulan (Loae et al., 1965). Secara khusus, adalah mungkin untuk mengendalikan faktor risiko yang dapat mempengaruhi pembentukan plak atau respon host inflamasi. Selanjutnya, adalah mungkin untuk mendokumentasikan hubungan antara biofilm bakteri dan reaksi inflamasi klinis secara rinci menganalisis parameter klinis yang sesuai dan sensitif (Heasman et al, 1993;.. Eberhard et al, 2002; Jepsen et al, 2003.). Dalam studi ini, tidak ada perokok dimasukkan. Reaksi inflamasi yang jelas konsekuensi dari kebersihan mulut kurang, yang ditunjukkan oleh beberapa parameter klinis. Tidak ada data yang tersedia untuk menjelaskan dasar-dasar biologi molekuler untuk efek klinis probiotik dalam rongga mulut. Beberapa mekanisme yang dianggap bertanggung jawab atas efek klinis yang menguntungkan dari probiotik, termasuk interaksi dengan bakteri patogen (Michail dan Abernathy, 2002;. Patzer et al, 2003)., Peningkatan respon kekebalan host '(Schultz et al, Zhang et al, 2006;;. Daz-Ropero et al, 2007;. Schlee et al, 2008) dan produksi zat antimikroba seperti asam organik, hidrogen peroksida dan bakteriosin (Reid et al, 2003)... 2002 Efek klinis yang diamati sangat mungkin merupakan kombinasi dari 'persaingan langsung' antara bakteri patogen dan probiotik serta berbagai efek menguntungkan respon kekebalan host '(Kligler dan Cohrssen, 2008). Secara keseluruhan, data kami berdasarkan pada pengaturan percobaan dikontrol menunjukkan efek anti-inflamasi dari minum susu probiotik diuji. Perbedaan antara hari ke-14 dan baseline untuk BOP parameter inflamasi dan GCF secara signifikan lebih rendah pada kelompok uji dibandingkan dengan kelompok kontrol setelah periode 28 hari dari asupan oral Lcasei Shirota. Perubahan ini dikaitkan dengan peningkatan akumulasi biofilm bakteri yang sangat mungkin disebabkan oleh kandungan karbohidrat tinggi dari minuman probiotik. Potensi kariogenik dari Lactobacillus (Haukioja et al., 2008) dan tingginya kandungan gula dari minuman susu berbasis diuji probiotik harus diselidiki di masa depan studi jangka panjang.