SEP SEMS

CENTRO BACHILLERATO TECNOLOGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIO No. 12

MANUAL DE PRCTICAS

BIOQUMICA

NOMBRE DEL ALUMNO:

ELABORO: VERONICA MANRIQUEZ TORRES

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FUNDAMENTACION
DESPERTAR EL INTER EN EL ALUMNO EN ESTA MATERIA ES NECESARIO IMPLEMENTAR SUSTANCIAS O MUESTRAS DE USO COMN Y CON ELLO MOTIVAR A LA ALUMNO A INTEGRARSE AL ESTUDIO DE ESTA CIENCIA

OBJITIVO GENERAL

LA MATERIA DE BIOQUMICA LE PERMITIR AL TCNICO LABORATORISTA CLNICO TENER CONOCIMIENTOS PARA IDENTIFICAR Y CUANTIFICAR LOS COMPUESTOS DE IMPORTANCIA BILOGA QUE INTERVIENEN EN LOS PROCESOS METABLICOS DE LOS ORGANISMOS, AS COMO EL CONOCIMIENTO DE LAS PATOLOGAS EN LAS CUALES SE ENCUENTRAN ALTERADOS DICHOS METABOLITOS Y SUS RESPECTIVOS VALORES DE REFERENCIA.

DESARROLLO

LAS PRCTICAS INCLUIDAS EN ESTE MANUAL, ESTN RELACIONADAS CON TODOS LOS TEMAS INCLUIDOS EN EL PROGRAMA DE BIOQUMICA QUE SON LOS COMPUESTOS DE IMPORTANCIA BIOLGICA Y ESTOS SON LOS SIGUIENTES: AGUA CARBOHIDRATOS PROTENAS LPIDOS

CONCLUSIONES
EL DESARROLLO DE LAS PRACTICAS PROPICIAN AL ALUMNO MAYOR INTERS Y APLICACIN DE SU APRENDIZAJE POR LA CIENCIAS.

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OBJETIVO GENERAL

LA MATERIA DE BIOQUMICA LE PERMITIR AL TCNICO LABORATORISTA CLNICO TENER LOS CONOCIMIENTOS PARA IDENTIFICAR Y CUANTIFICAR LOS COMPUESTOS DE IMPORTANCIA BIOLGICA QUE INTERVIENEN EN LOS PROCESOS METABLICOS DE LOS ORGANISMOS, AS COMO EL CONOCIMIENTO DE LAS PATOLOGAS EN LAS CUALES SE ENCUENTRAN ALTERADOS DICHOS METABOLITOS Y SUS RESPECTIVOS VALORES DE REFERENCIA.

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INDICE

PRACTICA No. 1

PROPIEDADES FSICAS Y QUMICAS DEL AGUA

PRACTICA No.2 DETERMINACIN DEL CARCTER INICO DEL AGUA Y OTROS COMPUESTOS PRACTICA No. 3 DETERMINACION DEL PH URINARIA PRACTICA No. 4 PRACTICA No. 5 PRACTICA No. 6 RELACIN A/G PRACTICA No. 7 PRACTICA No. 8 PROTENAS TOTALES ALBUMINA DETERMINACIN DE LAS GLOBULINAS Y GLUCOSA EN ORINA LPIDOS TOTALES

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PRACTICA No. 1 PROPIEDADES FSICAS Y QUMICAS DEL AGUA

INTRODUCCIN
El agua es un cuerpo incoloro, inodoro, inspido, liquido a la temperatura normal, formado, desde e l punto de vista qumico, por la combinacin de dos tomos de hidrogeno con uno de oxigeno: el oxido de hidrogeno H2O. Adems es el principal constituyente de los organismos vivos.

OBJETIVO
Determinar las propiedades fsicas y qumicas del agua por mtodos sencillos y prcticos.

MATERIAL
Vaso de pp de 250ml Vaso pp de 100ml Pipeta graduada de 10ml Pipeta graduada de 5ml Termmetro Probeta graduada de 100ml Soporte con anillo Rejilla de asbesto Mechero bunsen

REACTIVOS
Agua potable Alcohol etlico Acido clorhdrico al 10%} Eter de petrleo

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Varilla de vidrio

METODOLOGIA Y DESARROLLO
1.- DETERMINACIN DIRECTA DE LA DENSIDAD DEL AGUA:
Coloque sobre una balanza granatara un vaso de pp. previamente tarado, que contenga 100 ml de agua y pese el contenido de lquido cuyo valor ser la relacin masa-volumen. Determine ahora la densidad con 40 ml de agua.

2.- DETERMINACIN DEL PUNTO DE EBULLICIN DEL AGUA:

Coloque un vaso de pp. de 250ml suficiente cantidad de lquido de manera que se alcance a cubrir el bulbo del termmetro caliente hasta ebullicin y observar la temperatura que alcanza cuando el liquido empieza a emitir vapores o burbujas constantes. Determine el punto de ebullicin del agua, alcohol y de una mezcla alcohol-agua 1:2

3.- DETERMINACIN DE LA SOLUBILIDAD DE UN COMPUESTO EN AGUA:

Coloque en un vaso de pp de 250ml, 100ml de agua y pselos, despus vaya agregando la sustancia a disolver completamente hasta que permanezca un pequeo residuo sin disolver en el fondo del vaso. Procurando realizar todo lo anterior sin quitar el material de la balanza para obtener la solubilidad en forma directa. Determine la solubilidad del cloruro de sodio (NaCl).

4.- DETERMINACIN DEL CARCTER SOLVENTE:

Coloque en un vaso pp de 100 ml cantidades de soluto y solvente, agite con una varilla de vidrio y observe si se disuelve en le solvente. Determine el carcter solvente del agua con 2 sustancias orgnicas y 2 inorgnicas

5.- OBSERVACIONES Y RESULTADOS OBTENIDOS:

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CUESTIONARIO

1.- Como se calcula la densidad de un liquido en base a su peso y volumen?

2.- Por qu no se disuelve alginas sustancias en otras, separando en capas?

3.- Por qu no se puede obtener el punto de ebullicin experimentalmente del agua en nuestra ciudad?

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PRACTICA No. 2

DETERMINACIN DEL CARCTER INICO DEL AGUA Y OTROS COMPUESTOS

INTRODUCCIN
El agua tiene como propiedades qumicas ms importantes a la solventacion y la hidrlisis. Cada una de ellas se define diferente y sin embargo se presentan asociadas en el fenmeno de una solucin y se manifiestan en formas diferentes. Sus propiedades fsicas son determinadas por su estructura, as como sus propiedades atmicas derivadas de la formacin de la molcula como son sus puentes de hidrgeno que se establecen entre ellos y otros compuestos.

OBJETIVO:
Determinar las propiedades disolventes del agua, carcter inico y su pH.

MATERIAL
5 vasos de pp de 100ml 2 pipetas graduadas de 10ml 1 agitar de vidrio Papel tornasol azul y rojo Agua potable Agua destilada

SUSTANCIAS

Jugo de naranja o frutas Jugo de tomate o verduras Vinagre Refrescos

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Papel indicar de ph Potencimetro

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Caldo de res Agua fresca (tang, be ligth)

METODOLOGA Y DESARROLLO
DETERMINACIN DEL CARCTER INICO DEL AGUA
Coloque en los vasos de pp, iguales cantidades de agua (10ml), posteriormente agregue jugo de frutas en la siguiente proporcin, al primero 1ml, al segundo 0.75ml, al tercero 0.5ml al cuarto 0.25 ml y al quinto 0.125 ml; mezcle perfectamente y determine el carcter inico (acido o bsico) con el papel tornasol, as como su pH con el papel indicador y el potencimetro. Repita lo anterior utilizando vinagre y refresco.

DETERMINACIN DE CARCTER INICO DE UNA SUSTANCIA A EN SOLUCIN:

Coloque en los vasos pp 10 ml de cinco diferentes sustancias una en cada vaso y determine el carcter inico y el pH. Anotando los resultado en cada caso y posteriormente repita lo anterior pero ahora la misma cantidad de agua a cada vaso para diluirla y de nuevo determine el carcter inico y pH.

ANOTE SUS RESULTADOS Y OBSERVACIONES

CUESTIONARIO
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1.- Por que disminuye o aumenta el pH de una solucin al variar la concentracin?

2.- Qu carcter inico predomina cuando se diluye la sustancia?

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PRACTICA No. 3

DETERMIANCION DEL PH URINARIO

INTRODUCCIN
El pH es un trmino que indica la concentracin de iones de hidrogen en una disolucin. Se trata de una medida de la acidez de la disolucin. El termino (del francs pouvoir hydrogene, poder de hidrogeno) se define como el logaritmo de la concentracin de iones hidrogeno, H , cambiando de signo: pH =-log [H ]

OBJETIVO
Determinar el pH de una muestra de orina

MATERIAL
1 tubo de ensaye de 13x100 1 pinzas para tubo de ensaye 1 gradilla 1 pipeta graduada de 5 ml Papel indicador de pH Muestra de orina

METODOLOGA
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1.- Con la pipeta graduada mida 5ml de orina, vacela en el tubo de ensaye y despus coloque lo en la gradilla. 2.- Saque una tira reactiva de pH y sumrjala en el tubo de ensaye que contiene la orina hasta que se impregne de orina por espacio de unos segundos, sin soltar la tira. 3.- saque la tira del tubo, escurra el exceso y comprela con la carta de colores del estuche haciendo coincidir con la que ms se asemeje y tome la lectura del ph.

Resultado:

pH de orina=

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1.- Cul es el pH normal de la orina?

2.- Qu ocasiona o favorece el pH alcalino en una orina?

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PRACTICA No. 4

PROTENAS TOTALES
INTRODUCCIN
Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo. Actan como elementos estructurales y de transporte. Se dividen en dos fracciones, albumina y globulina. Su determinacin es til en la deteccin de: Hipoproteinemia producida por hemoconcentracin, deshidratacin o aumento, en la concentracin de protenas especificas. Hipoproteinemia por hemodilucin debida a un defecto en la sntesis proteica, perdida excesiva (hemorragias) o catabolismo proteico excesivo

OBJETIVO Identificar correctamente las protenas totales en una muestra de suero

MATERIAL
Espectrofotmetro Cubetas de 1 cmm d epaso de luz
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Pipetas automatizadas de 25 microlitros 3 tubos de ensaye 13x75 Kit para protenas totales Procedimiento

1.- condiciones de ensayo: Longitud de onda 54onm Cubeta de 1cmm de paso de luz Temperatura 37 grados C 2.- Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 3.- Pipetear en un tubo de ensaye: Blanco Reactivo (ml) Patrn (uL) Muestra (uL) --------------1.0 25 Patrn 1.0 ---25 Muestra 1.0

4.- Mezclar e incubar a 37 grados C o 10min a temperatura ambiente. 5.- Leer la absorbancia (A) del patrn y la muestra, frente al blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 30 min.

(A) muestra Clculos: __________________ totales (A) patrn x 7.0 (concentracin patrn)= g/dl protenas

RESULTADO:_________________________________ VALORES DE REFERENCIA: adultos: 6.6 8.3 g/dl

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RN: 5.2 9.1 g/dl

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES

CUESTIONARIO 1.- Qu es hiperproteinemia e Hipoproteinemia?

2.- Cmo se realiza el diagnostico clnico?

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PRACTICA No. 5 ALBUMINA

INTRODUCCIN
La albumina es una de las ms importantes protenas plasmticas producidas en el hgado. Entre sus mltiples funciones se incluye nutricin, mantenimiento de la presin osmtica y transporte de sustancias como el calcio, bilirrubinas, cidos grasos, drogas y esteroides. Alteraciones en los valores de la albumina indican enfermedades del hgado, desnutricin, lesiones de la piel como dermatitis, quemaduras severas o deshidratacin.

OBJETIVO
Identificar la albumina en una muestra de suero sanguneo

MATERIAL
Espectrofotmetro Cubetas de 1 cm de paso de luz Pipetas automatizadas de 25uL 3 tubos de ensaye 13x75 Kit para albumina
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PROCEDIMIENTO
1.- condiciones de ensayo: Longitud de onda 630nm Cubeta de 1cmm de paso de luz Temperatura 37 grados C 2.- Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 3.- Pipetear en un tubo de ensaye: Blanco Reactivo (ml) Patrn (uL) Muestra (uL) --------------1.0 5 Patrn 1.0 ---5 Muestra 1.0

4.- Mezclar e incubar a 37 grados C o 10min a temperatura ambiente. 5.- Leer la absorbancia (A) del patrn y la muestra, frente al blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 30 min.

(B) muestra Clculos: __________________ totales (B) patrn x 5.0 (concentracin patrn)= g/dl protenas

RESULTADO:_________________________________ VALORES DE REFERENCIA: 3.5 5.0 g/dl

CUESTIONARIO
1.- Diga algunas enfermedades ocasionadas por la alteracin de la albumina?

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2.- Defina las enfermedades escritas en la pregunta anterior?

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PRACTICA No. 6 DETERMINACIN DE LA GLOBULINAS Y LA RELACIN A/G

INTRODUCCIN
La globulinas son protenas globulares son esfricas y solubles. Desempean una funcin dinmica en el metabolismo corporal. Las globulinas son protenas solubles abundantes en las clulas animales (suero sanguino), son protenas de mayor peso molecular que las albuminas y de distintas propiedades elctricas

OBJETIVO
Obtencin del valor de las globulinas y de la relacin A/G

PROCEDIMIENTO
1.- Con los valores obtenidos en las determinacin de las protenas totales y dela albumina realizar la obtencin del valor de la globulinas. 2.- Con los valores obtenidos en las determinaciones de la globulina y la albumina realizar la obtencin del valor de la relacin A/G

Clculos:

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Globulinas = protenas totales albumina (g/dl) Resultado:____________________________________ Albumina Relacin A/G: __________________ Globulinas

RESULTADO: _________________________________

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1.- Qu nos indica una alteracin de la relacin A/G?

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PRACTICA No. 7 GLUCOSA EN ORINA

INTRODUCCIN
El sulfato de cobre reacciona con las sustancias contenidas en la orina reduciendo el sulfato cprico a oxido cuproso. El color resultante, el cual vara con la cantidad de sustancia presente reducida, va desde azul verdoso a naranja. El hidrxido de sodio proporciona el medio alcalino necesario para que se lleve a cabo la reaccin. OBJETIVO Determinacin cuantitativa de glucosa en orina por medio del mtodo de Benedict.

MATERIAL
Tubo de ensaye 2 goteros Carta de colores

SUSTANCIAS
Orina Tableta clinitest Agua destilada

METODOLOGA Y DESARROLLO

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1.- Recolecte orina en un recipiente limpio. Con un gotero en posicin vertical coloque 5 gotas de orina en el tubo de prueba. 2.- Con otro gotero adicionar 10 gotas de agua al tubo. 3.- Coloque una tableta en el tubo. Permita que se lleve a cabo completamente la reaccin. No agite el tubo durante la reaccin o por lo menos 15 segundos despus de haber terminado la reaccin. 4.- Al final del periodo de 15 segundos, agite el tubo suavemente para mezclar el contenido. Con la carta de color compare el color lquido contenido en el tubo. Ignore el sedimento que pueda estar presente en el tubo. Ignore los cambios de color despus del periodo de 15 segundos. Anote el resultado de acuerdo a l valor asignado al bloque de color con el que ms se acerque al color del lquido.

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1.- Para qu nos sirve la determinacin de glucosa en orina?

2.- Qu medicamentos en altas concentraciones pueden interferir con la prueba?

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3.- Qu otro tipo de azucares reductores reaccionan positivamente con este mtodo?

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PRACTICA No. 9 LPIDOS TOTALES

INTRODUCCIN
Los lpidos son grupos heterogneos de sustancias orgnicas que se encuentran en los organismos vivos. Los lpidos estn formados por carbono, hidrogeno y oxigeno, aunque en proporciones distintas como estos componentes aparecen en los azucares. ntrelos lpidos ms importantes se hallan los fosfolipidos, componentes mayoritarios de la membrana de la clula. Los fosfolipidos limitan el paso de agua y compuestos hidrosolubles a travs de la membrana celular, permitiendo a si a la clula mantener un reparto desigual de sustancias en ter ele exterior y el interior. OBJETIVO Determinar los lpidos totales en una muestra de suero.

MATERIAL

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Espectrofotmetro Cubetas de 1 cm de paso de luz Pipetas automatizadas 3 tubos de ensaye 15x150 3 tubos de ensaye de 13x100 Kit para lpidos totales Procedimiento

PROCEDIMIENTO
1.- condiciones de ensayo: Longitud de onda 520nm Cubeta de 1cmm de paso de luz Temperatura 37 grados C 2.- Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 3.- Pipetear en un tubo de ensaye: Blanco Patrn (uL) Muestra (uL) Ac. sulfurico (ml) ---------2.5 -----2.5 2.5 100 Patrn ---100 Muestra

Agitar los tubos y llevarlos al bao maria a 100 grados C durante 10 mkin. Enfriar y dosificar. Sobrenadante (uL) -----200 4.0 4.0 200

Reactivo fosfovainilla (ml) 4.0

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4.- Mezclar enrgicamente e incubar 15 min a 37 grados C o 10min a temperatura ambiente. 5.- Leer la absorbancia (A) del patrn y la muestra, frente al blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 1 hrs.

(A)muestra Clculos: __________________ totales (C) patrn x 750 (concentracin patrn)= g/dl lipidos

RESULTADO:_________________________________ VALORES DE REFERENCIA: 450 800 mg/dl

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1.- En qu enfermedades se alteran los lpidos totales?

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BIBLIOGRAFIA
BIOQUMICA EXPERIMENTAL ED. ZAETA MADRID ESPAA F.J. CABEZAS BIOQUMICA EXPERIMENTAL ED. LIMUSA 3ERA MEXICO D.F. J.M. CLARK BIOQUMICA FUNDAMENTAL ED. LIMUSA 3 ERA CON-STUMPF BIOQUMICA ED. OMEGA S.A.
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BARCELONA. ESPAA A.L. LEHNINGER MANUAL DE BIOQUMICA ED. MARIN S.A. DR. P. KARLSON BIOQUMICA PRACTICA ED. MCGRAW-HILL LATINOAMERICANA PLUMMER TCNICAS DE BIOQUMICA APLICADA ED. INTERAMERICANA MXICO D.F. RENDINA G.

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