7.

PRIMOINERVACIN
Aunque el sistema nervioso es objeto de cambios plsticos en su sinaptologa, no cabe duda de que la plasticidad neuronal adquiere un grado mximo de expresividad durante el desarrollo embrionario o, en el adulto, en la reparacin regenerativa de una lesin. Parece ser que en estas dos situaciones operan mecanismos celulares y moleculares similares y que estos tambin pueden operar como substrato de los fenmenos plsticos en el organismo adulto intacto. Durante el desarrollo, el proceso de establecimiento de contactos sinpticos, tanto entre clulas nerviosas como con las fibras musculares, puede ser separado conceptual y cronolgicamente en las siguientes etapas: 1. establecimiento de contactos sinpticos iniciales y redundantes por un proceso de reconocimiento intercelular; 2. eliminacin de los contactos redundantes asociado o no a la muerte neuronal fisiolgica; 3. estabilizacin sinptica, 4. remodelacin sinptica en el adulto. En las etapas 2, 3 y 4 es donde la plasticidad sinptica adquiere un particular relieve. En los periodos iniciales del desarrollo, la organizacin de la conectividad entre las clulas nerviosas y las fibras musculares no adopta una conformacin que se puede considerar como definitiva. Es caracterstica de las fases iniciales del desarrollo del sistema nervioso y neuromuscular, la redundancia en la produccin, tanto de elementos neuronales diferenciados como de conexiones. El nivel de actividad muscular juega un papel esencial en el proceso de remodelacin citolgica y sinptica que dar lugar al establecimiento del patrn de conectividad con la complejidad y precisin propias del organismo diferenciado. Por ejemplo, el incremento de actividad neuromuscular conlleva a una aceleracin del proceso de eliminacin de sinapsis redundantes. As, la actividad de una sinapsis en desarrollo itene un determinado significado crucial en su posterior determinismo. Tambin es bien manifiesta la importancia de la actividad en la regulacin de los cambios plsticos en el sistema adulto. Los cambios plsticos de las uniones neuromusculares pueden ser clasificados en 1. plasticidad inducida experimental o accidentalmente (por ejemplo por denervacin o mediante el uso de ciertos agentes paralizantes); 2. plasticidad durante el desarrollo normal, consistente en fenmenos que conducen a la primoinervacin de la fibra muscular, muerte de motoneuronas, multiinervacin y eliminacin sinptica; 3. plasticidad continuada que se produce en el adulto normal y bajo condiciones fisiolgicas. NAVEGACIN Paso del axn desde el tubo neural hasta el msculo (miocito). El crecimiento intramuscular del nervio est mediado por mltiples axones que se caracterizan por presentar unas especializaciones distales, de morfologa bulbosa, denominados conos de crecimiento. Tienen gran actividad anablica, por lo que reciben gran aporte de nuevos materiales por flujo axoplsmico antergrado. Este aporte masivo es el responsable de que incremente la presin intra-axonal de la porcin distal, lo que se traduce en la tpica bulbosidad comentada. De estos conos se forman filopodios exploratorios que van buscando hasta saber hacia dnde han de ir. La elongacin del axn se produce por incorporacin de nueva membrana al axolema del cono (se ha sugerido que para reducir la presin intra-axonal de la bulbosidad), y esto podra inducir la incorporacin de nuevo material al citoesqueleto de la terminacin nerviosa. La matriz extracelular es lo que les informa de hacia dnde deben dirigirse (los N-CAM). Los filopodios se hacen y se deshacen mediante actinas que se polimerizan y despolimerizan, buscan su MEC de manera arbitraria hasta que contactan con un substrato propicio para anclarse. La gla es la que marca el camino, y la [ ] de Ca++ axonal es necesaria para que se haga la polimerizacin. Los filopodios necesitan una cantidad muy precisa de Ca++ para

mantener su estabilidad, o bloquear la punta para que no se deshaga. Si encuentran un sustrato no afn, se despolimerizan. Los NGF (factor de crecimiento neuronal) son un factor de crecimiento y de supervivencia para el axn. Estos son captados por el axn y por va retrgrada. El axn los va a buscar porque los necesita para vivir. Puede vivir de muchos tipos de factores de crecimiento, pero nicamente tiene uno idneo, el que encontrar en el rea anatmica de destino. Hay un enlace entre el NGF y la MEC ya que sta es capaz de absorberlo. Durante el perodo embrionario los axones en crecimiento estn dotados de una elevada capacidad para moverse hacia las clulas musculares para establecer sinapsis. Sin embargo, el movimiento se detiene cuando el cono de crecimiento axonal ha alcanzado el lugar adecuado para realizar el contacto sinptico. Este cambio, obviamente es consecuencia de la inactivacin reversible de los mecanismos que gobiernan el movimiento del terminal; es decir, del ensamblaje local del citoesqueleto. FIN DEL CRECIMIENTO En este sentido, la actina y la familia de molculas derivadas ( actin binding) son partilcularmente relevantes en todos los procesos. Las protenas actin binding intervienen directamente en el control dinmico del estado de polimerizacin de los monmeros de actina y en la interaccin de las fibras de actina con estructuras citoplasmticas y de membrana, siendo, alguna de ellas, modulada por la fluctuacin de la concentracin de calcio intracelular. Asimismo se ha demostrado experimentalmente que los niveles de calcio intracelular en los conos de crecimiento se correlacionan con su capacidad para moverse; existiendo una concentracin ptima que promueve el crecimiento, mientras que concentraciones superiores o inferiores producen una detencin del mismo. Tomando en consideracin estos hechos experimentales, se puede relacionar las fluctuaciones intracelulares de calcio con la actividad elctrica en los terminales; una mayor actividad sinptica comportara un mayor acmulo de calcio intracelular por apertura repetitiva de los canales de calcio y la consiguiente inhibicin de la motilidad del terminal. Guas del axn: -Matriz extracelular: 1. N-CAM (velcro), poco especfico pero ms rpido. 2. Integrinas, lamininas (muy especficas, ms lento). -Factores de crecimiento y supervivencia (NGF). Conjunto de moles difundibles de naturaleza muy variada, secretado por miotubos/ miocitos (radio de accin 100 m). Accin altamente anabolizante. -Otros: gla (secreta MNGF, tiene Ng-CAM), fibroblastos (secretan FGF), campos electromagnticos. MNGF y N-CAM: el MNGF aumenta la adhesividad del N-CAM, y el N-CAM acta de esponja y reservorio de MNGF. Navegacin Muerte neuronal Sinaptognesis Eliminacin sinptica MUERTE NEURONAL Se da justo antes del contacto sinptico. Uno de los axones, el ms eficaz, coge ms NGF y crece ms, quedndose el otro sin NGF. El seleccionado hace el contacto sinptico y coge su propio NGF, el otro al quedarse sin l muere. Aproximadamente mueren la mitad. Competitividad entre motoneuronas Actividad

Competitividad: 1. Importancia de campo perifrico (miocitos diana) -Ablacin extremidades embrionarias: mayor muerte neuronal -Implantacin de extremidades embrionarias: menor muerte neuronal 2. Competitividad entre motoneuronas en navegacin por MNGF: Cuando el miocito est inervado, secreta una cantidad mucho ms limitada de MNGF, para que slo llegue al axn de esa neurona.

Actividad (muerte neuronal): -Parlisis neuromuscular embrionaria: no muerte motoneuronas -ACTIVIDAD MUSCULAR +MNGF -Estimulacin elctrica al msculo: masiva muerte de motoneuronas +ACTIVIDAD MUSCULAR -MNGF (al estar ya trabajando, el miotubo no secreta MNGF) ELIMINACIN SINPTICA Msculo sleo: -Adulto: 25 motoneuronas 1 motoneurona inerva el 4% de los miocitos 1 miocito est inervado por 1 sola motoneurona -Neonato: 25 motoneuronas

1 motoneurona inerva el 25% de los miocitos 1 miocito est inervado por 5 motoneuronas diferentes

Funcin de la eliminacin sinptica: -Funcin correctora (con la multiinervacin, el msculo no se puede llegar a contraer de forma eficaz).

-Unidades motoras homogneas en tipologa -Unidades motoras homogneas en nmero MECANISMOS Sistema competitivo El miocito produce un sustrato (MNGF?) por el que compiten los axones. El axn ms eficaz/ idneo/ operativo es el que se consolida y se eliminan los menos eficaces/ idneos/ operativos. La produccin del sustrato es actividad dependiente. Situaciones experimentales: -Parlisis muscular del neonato: no existe eliminacin sinptica. -Estimulacin elctrica en neonatos: acelerada eliminacin sinptica. Eliminacin axones menos activos Proteasas calciodependientes (CANP)

ACTIVIDAD/ INACTIVIDAD

Un aumento de la actividad presinptica o postsinptica aumenta la eliminacin sinptica. Si bloqueamos el pre o postsinptico se mantiene la multiinervacin.

INTERACCIN TRFICA La neurotransmisin libera unos receptores que informan al postsinptico y ste informa al presinptico. Cuanto mejor sea la neurotransmisin, mejor ser el postsinptico, y cuanto mejor sea el postsinptico, mejor ser el presinptico.

PROTEASAS CALCIODEPENDIENTES (CANP) CANP: normal en todo tipo de neuronas (neonatal/ adulta) ADULTO: NTT Entra Ca++ CANP Proteolisis citoesqueleto Sntesis nuevo citoesqueleto Cuanto ms trabaja la clula ms Ca++ tiene, que hace que se activen las CANP, que digieren fibras y renuevan el citoesqueleto.

NEONATO: NTT Entra Ca++ Repolarizacin postsinptica K+ Activacin VDCC

CANP Proteolisis citoesqueleto Sntesis

nuevo citoesqueleto

En la multiinervacin la formacin del nuevo citoesqueleto es lenta, de manera que el axn ms grande no ser eliminado por cuestin de tamao. Los ms pequeos se van eliminando antes porque las proteasas los digieren, y no se renuevan. A parte del tamao, tambin depende del n de proteasas, etc.

SINAPTOGNESIS (DE NUEVO) Una vez que las fibras nerviosas se aproximan a las fibras musculares en desarrollo, se establecen frecuentes contactos entre grupos de axones (envueltos por la clula o las clulas de Schwann) y la fibra muscular. La diferenciacin de los conos de crecimiento de las terminaciones presinpticas est asociada con los cambios de composicin de las organelas axonales. As, en esta fase de la sinaptognesis, decrece el volumen de los tbulos del RE, desaparecen las formas multivesiculadas, tambin decrecen los neurotbulos y sin embargo aumentan los neurofilamentos, as como la presencia mitocondrial y de vesculas sinpticas. Es tambin en este momento cuando se desarrollan las zonas activas y sus partculas asociadas. Pese a que las zonas activas an no estn presentes, dado que no se ha establecido an contacto mioneural y, por tanto, no hay diferenciacin

postsinptica

de

estructuras

relacionadas con la neurotransmisin, los conos de crecimiento ya son capaces de liberar Ach de una forma cuntica. En las fases tempranas del contacto mioneural la superficie postsinptica es an muy inmadura. Las dimensiones del pliegue primario y hendidura sinptica son muy variables en esta fase y la lmina basal no est completamente desarrollada. El sarcolema postsinptico presenta intermitentes engrosamientos, cortos y convexos (similares a los habituales en las crestas maduras), sin ninguna de las especificidades del tipo de filamentos estructurales que se suelen ver asociados a estas densificaciones en el adulto normal. Tampoco se pueden apreciar pliegues secundarios. Las partculas de AChR y AChE estn presentes de forma muy precoz en el componente postsinptico embrionario, y se disponen de forma difusa por toda la superficie del miocito por lo que se les detecta en menor densidad que en las formas maduras y precisan de la presencia neural par su completa agregacin y distribucin.

Una vez establecido el contacto mioneural, el msculo o factores derivados de este, pueden regular la diferenciacin del componente presinptico, mientras que los factores neurales continan la induccin de la diferenciacin muscular. A nivel sinptico, la lmina basal se ve alterada tanto por la diferenciacin del componente pre- como postsinptico, sin embargo no parece jugar ningn papel determinante en las uniones mioneurales en su fase temprana, y s que puede colaborar directamente o dando soporte a la diferenciacin sinptica ms tarda. Se sugiere que la clula muscular embrionaria juega un papel trascendental en la configuracin de la sinapsis en el perodo de desarrollo. La lmina basal de las fibras musculares embrionarias (miotubos) es una condensacin de la matriz extracelular rica en glicoprotenas, especialmente laminina y fibronectina. Estas glicoprotenas estn relacionadas con el crecimiento axonal especfico y dirigido hacia las fibras musculares diana. Toda la superficie de los miotubos presenta idntica composicin de lmina basal antes del primer contacto sinptico, de manera que toda

la superficie de las fibras musculares embrionarias es potencialmente receptiva a los contactos sinpticos. Al establecerse el contacto neural (sinapsis) se fusiona la lmina basal del miotubo con la del cono de crecimiento, a partir de este momento se pueden diferenciar dos tipos de lmina basal: una lmina basal sinptica y otra extrasinptica. Ambas presentan diferentes caractersticas estructurales y funcionales. Por un lado, la lmina basal sinptica constituye el sostn estructural de macromolculas relacionadas con la neurotransmisin (por ejemplo AChE y AChR), y es rica en molculas de la familia de las agrinas (muy relacionadas con la distribucin de las molculas de AChR). Por otro lado, la lmina basal extrasinptica prcticamente no se modifica y sigue siendo rica en glicoprotenas del tipo laminina y fibronectina. No es hasta los ltimos das del perodo embrionario y primeros neonatales en que se desarrolla la consolidacin y

especializacin de la lmina basal. Por otro lado, la aparicin de las molculas de AchE viene determinada por la actividad muscular, de manera que de forma muy precoz se pueden detectar agrupaciones de molculas de colinesterasa en la lmina basal. En el momento del nacimiento, la morfologa de la unin mioneural ya est ms claramente definida, y slo algunos aspectos de su maduracin an estn por completar. Un importante conjunto de axones de pequeo calibre, cubiertos por procesos de la clula de Schwann, tienen mltiples contactos con la superficie de las clulas musculares. Esta regin en que varios axones, cubiertos de una masa glial comn, estn en contacto directo con un componente sinptico tambin comn se denomina convencionalmente complejo de unin mioneural. En este momento se da la circunstancia de que cada fibra muscular est multiinervada y posteriormente se proceder a la eliminacin de las sinapsis redundantes hasta llegar al estado de monoinervacin que caracteriza a las clulas musculares del animal adulto.

Feto: (intratero): complejo de unin Axn: neurofilamentos, mitocondrias, VS, v. coated, v. core +++. Postsinptico: densificaciones membrana difusas Plano

Lmina basal= mezcla de la glial + axonal + muscular Desde nacimiento (complejo de unin) Axn: AZ Postsinptico: plegamiento sarcolema (crestas) progresivo v. coated ++ Lmina basal: maduracin a LM sinptica progresivo (muy lento) CONCOMITANTEMENTE: ELIMINACIN SINPTICA