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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA Facultad de Ciencias Escuela Profesional de Qumica

TCNICAS ELECTROQUMICAS PARA LA REMOCINELIMINACIN DE MICROORGANISMOS PATGENOS DE LAS AGUAS


Adolfo La Rosa Toro Gmez toro@uni.edu.pe http://fc.uni.edu.pe

Grupo de Investigacin en Electroqumica Aplicada

ESTRUCTURA DE LA EXPOSICIN

PROPIEDADES DE LOS ORGANISMOS PATOGENOS

ELIMINACION DE BACTERIAS POR LA GENERACIN IN SITU DE SUSTANCIAS OXIDANTES

TECNICA DE ELECTROCOAGULACION CONCLUSIONES

PROPIEDADES DE LOS ORGANISMOS PATOGENOS

Bacterias Gram positiva y Gram negativa

Figura 1.-Diagrama de la estructura de la membrana citoplasmtica; la superficie interna se orienta hacia el citoplasma y la externa hacia el ambiente. Fuente: [68]

Bacterias tipo Gram (-) y Gram (+)


De acuerdo al tipo de membrana que presenten las Bacterias, y su respuesta a la tincin, se pueden dividir en 2 grupos: Bacteria Gram (-) : presenta una pared celular compuesta de lipoproteinas , lipopolisacaridos, y fosfolpidos las cuales son responsables de proporcionar la carga negativa neta.

Bacteria Gram (+): presenta en su pared delgada de


polisacridos y cidos teicoicos, (alchol y fosfato) siendo estas las responsables de la carga negativa neta de la superficie

Reproduccin
El Eschirichia Coli, es una bacteria procariota Gram - , se reproduce por divisin celular simple, tambin llamada fisin binaria. Una vez que se produce la replicacin del ADN, se forma la pared transversa, al multiplicarse se producen clones de clulas genticamente idnticas. Sin embargo, suelen ocurrir MUTACIONES y estas, combinadas con el rpido tiempo de generacin de los procariotas, son responsables de su extraordinaria adaptabilidad. bajo

condiciones ptimas, la E. Coli se puede dividir una vez cada 20 minutos, su crecimiento es exponencial

TAMAOS DE PARTICULAS EN LAS AGUAS: REMOCION FISICA

las fuerzas electrostticas y la hidratacin son favorables para la ESTABILIDAD DE LOS COLOIDES. Las fuerzas de atraccin, en cambio, cumplen un papel opuesto y lo DESESTABILIZAN.

TIPOS DE DESINFECCION

MECANISMO DE ACCION DEL CLORO y DERIVADOS


La capacidad germicida del cloro se basa en que puede penetrar la pared celular, alterar funciones especficas de las protenas e inhibir procesos metablicos de bacterias y virus. Algunos grupos de parsitos son resistentes al cloro, como los quistes de protozoarios Cryptosporidium parvum y Giardia lamblia, para los cuales se han aplicado dosis hasta de 80 mg/L por 120 min para lograr slo 3 unidades de inactivacin (US EPA, 1999 a).

TIPOS DE DESINFECCION

ORP
Potencial de oxidacin reduccin (ORP): El ORP se mide mediante un electrodo combinado en un voltmetro de alta impedancia, se reporta en unidades de milivoltios (mV) y los resultados representan la capacidad oxidante del agua.

FACTORES QUE AFECTAN LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE


1) Concentracin del agente y tiempo de actuacin 2) pH: El pH afecta a la carga superficial neta de la bacteria En general, las formas ionizadas de los agentes disociables pasan mejor a travs de las membranas biolgicas, y por lo tanto son ms efectivos. Los agentes aninicos suelen ser ms efectivos a pH cidos. Los agentes catinicos muestran ms eficacia a pH alcalinos.

FACTORES QUE AFECTAN LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE


3) Temperatura.

4) Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados a la poblacin microbiana 5) Presencia de materiales extraos:

Coagulacin y Floculacin
La coagulacin se refiere al proceso de desestabilizacin de las partculas suspendidas de modo que se reduzcan las fuerzas de separacin entre ellas. La desestabilizacin produce los flculos o flocs precipitando debido al mayor peso especifico comparado con el agua

(a)

(b)

(c) Figura 4.- Mecanismo de Coagulacin- Floculacin: a) Compresin de la doble capa difusa; b) Neutralizacin de carga; c) Formacin de puentes qumicos. Fuente: [49]

ESTRATEGIAS de ELIMINACION: - Eliminacion de bacterias por la generacin in situ de sustancias oxidantes en las aguas para dar un valor de ORP > 665 mV - Generacin de Flocs que mediante el mecanismo de atraccin electrosttica posibilite la captura de bacterias (pared celular de carga negativa) removindolos de las aguas. - Envenenamiento de las bacterias por metales pesados cobre, plata (trabajo iniciado: Filtros de nanoparticulas de plata disperso en perlas de Quitosano)

ELIMINACION DE BACTERIAS POR LA GENERACIN IN SITU DE SUSTANCIAS OXIDANTES

ELECTROOXIDACION POR INTERMEDIACION DE OXIDANTES GENERADOS IN SITU

Donde: C = Cl y C = ClO R = Bacterias

ELECTROOXIDACION POR INTERMEDIACION DE OXIDANTES GENERADOS IN SITU

ELECTROOXIDACION POR INTERMEDIACION DE OXIDANTES GENERADOS IN SITU

EQUILIBRIO QUIMICO DEL HIPOCLORITO EN FUNSION DEL pH

ELECTRODOS ENSAYADOS PARA LA GENERACION DE SUSTANCIAS OXIDANTES:

Figura 16. Oxidacin ex situ utilizando diferentes nodos en una solucin de NaCl 2% a pH 2 con una densidad de corriente de 2,5 mA/cm2.

Figura 1. ORP de aguas residuales a pH 2,0 utilizando electrodo de de Ti/Co 3O4 con una densidad de corriente de 2,5 mA/cm2. La lnea azul representa el instante a partir del 2 S2O 3 0,1 N.

ELECTRODOS ENSAYADOS PARA LA GENERACION DE SUSTANCIAS OXIDANTES:

Figura 2. Prdida de masa frente al tiempo para un electrodo de Ti/Co3O4 en NaCl 6 % durante 23 horas a 0,5 A/cm2.

Figura 4. Prdida de masa frente al tiempo para un electrodo de Ti/PbO2 en NaCl 6 % durante 460 horas a 0,5 A/cm2.

ELECTRODOS NANOESTRUCTURADOS PARA LA GENERACION DE INTERMEDIARIOS OXIDANTES

ELECTRODOS NANOESTRUCTURADOS

Fig. 21 SEM del electrodo Ti/Co 3O 4 obtenido por electrodeposicin a) 300X y b) 7500X

% Atmico Co 17 O 67 Ti 16

Fig. 22 Resultados del microanlisis qumico por EDX y DRX del electrodo Ti/Co3O 4

ELECTRODOS NANOESTRUCTURADOS

Fig. 20 Diagrama Nyquis del electrodo Ti/Co3O4 obtenido por electrodeposicin en solucin de NaOH 0,1 M a diferentes potenciales fijos 0.35 V (azul); 0.40 V (rojo); 0.45 (verde); 0.50 (negro)

Tabla 5 Asignacin de valores obtenidos del grfico de Nyquist del electrodo Ti/Co3O4 nanoestructurado a diferentes potenciales
E/V 0.5 0.45 0.40 1.10 1.12 1.28 0.96 1.01 1.11 9.7 10.8 19.9

ELECTRODOS NANOESTRUCTURADOS
(b)

Fig. 26 SEM del electrodo Ti/Co3O 4 -Ti/RuO2 obtenido por electrodeposicin a) 300X y b) 4000X

% Atmico Ru 36 O 41 Ti 23

Fig. 22 Resultados del microanlisis qumico por EDX del electrodo Ti/Co 3O 4

ELECTRODOS NANOESTRUCTURADOS

Fig. 26 SEM del electrodo Ti/Co3O 4 -Ti/RuO2 obtenido por electrodeposicin a) 300X y b) 4000X

% Atmico Co 23 Ru 4 O 71 T i 2

Fig. 22 Resultados del microanlisis qumico por EDX y DRX del electrodo Ti/Co3O 4-RuO2

Tiempo de vida util para electrodos de espinela Dopadas de RuO2- (DT)


Porcentaje (%) de prdida de masa 56.2 17.7 2.9 0.3

Electrodo Co3O 4 RuO 2+ Co3O 4 (2%) RuO2+ Co3O4 (4%) RuO2+ Co3O4 (6%)

Prdida de masa/ mg 0.1155 0.0500 0.0081 0.0008

MEDIDA DE LA CAPACIDAD OXIDANTE


Mediciones de ORP de la solucin electro-oxidada con los electrodos de Ti/Co3O4, Ti/Co3O4 - RuO2 , Ti/Cu0.5Ni0.5Co2O4 y BDD Tabla 8 Parmetros establecidos para el ensayo de obtencin de agua EO
Parmetro Densidad de corriente rea del nodo Material del ctodo rea del ctodo Volumen del electrolito Concentracin de la solucin Agitacin del electrolito Tiempo de electrlisis Temperatura Valores 25 mA.cm-2 1.5 cm2 Titanio 2 cm2 50 mL 2% en NaCl Si 20 minutos 25 oC

MEDIDA DE LA CAPACIDAD OXIDANTE


E1 : Electrodo de Espinela obtenida por descomposicin trmica (DT), Ti/Co3O4 E2 : Electrodo de Espinela dopada obtenida por descomposicin trmica (DT), Ti/ Cu0.5Ni0.5Co2O4 E3 : Electrodo de Espinela de Cobalto y Rutenio nanoestructurada, Ti/Co3O4 - RuO2 E4 : Electrodo de BDD.

Fig. 36 Relacin del valor de ORP con el aumento de agua EO ( l en la solucin buffer pH 6.3 (10 mL)

MEDIDA DE LA CAPACIDAD DESINFECTANTE


Anlisis bacteriolgico mediante el recuento de colonias Escherichia coli (E. Coli) ATCC 25922, despus del contacto con agua electro-oxidada, EO
Tabla 10 Relacin de dilucin, cantidad de agua EO Agua Electrooxidada (EO) (mL) 0.025 0.05 0.10 0.50 Agua destilada Estril (mL) 8.075 8.95 8.90 8.50 Bacterias (mL) Cultivo Madre Volumen final (mL)

Dilucin 1:400 1:200 1:100 1:20

10

MEDIDA DE LA CAPACIDAD DESINFECTANTE

Fig. 37 Placas Petri con el sembrado de bacterias E.Coli sobre agar-agar despus de 24 horas de cultivo a 37 oC, con relacin de dilucin 1:400 de a) Placa de control con agua EO a tiempo cero de electrlisis; b) Electrodo Ti/Co3O4 (DT); c) Ti/Cu0.5Ni0.5Co2O4; d) Electrodo de Ti/Co3O4-RuO2; e) Electrodo BDD

MEDIDA DE LA CAPACIDAD DESINFECTANTE

Fig. 38 Placas Petri con el sembrado de bacterias E.Coli sobre agar-agar despus de 24 horas de crecimiento a 37 oC, con relacin de dilucin 1:200 de a) Placa de control con agua EO a tiempo cero de electrlisis; b) Electrodo Ti/Co3O4 (DT); c) Ti/Cu0.5Ni0.5Co2O4; d) Electrodo de Ti/Co3O4-RuO2; e) Electrodo BDD

MEDIDA DE LA CAPACIDAD DESINFECTANTE

Fig.39 Placas Petri con el sembrado de bacterias E.Coli sobre agar-agar despus de 24 horas de crecimiento a 37 oC, con relacin de dilucin 1:100 de a) Placa de control con agua EO a tiempo cero de electrlisis; b) Electrodo Ti/Co3O4 (DT); c) Ti/Cu0.5Ni0.5Co2O4; d) Electrodo de Ti/Co3O4-RuO2; e) Electrodo BDD

MEDIDA DE LA CAPACIDAD DESINFECTANTE


Tabla 11 Recuento de bacterias del agua EO en la placa de control y las placas de los electrodos E1, E2, E3, E4

GENERACIN DE FLOCS QUE MEDIANTE EL MECANISMO DE ATRACCIN ELECTROSTTICA POSIBILITE LA CAPTURA DE BACTERIAS TECNICA DE ELECTROCOAGULACION

EVALUACION DEL MATERIAL PRECURSOR DEL Floc (Aluminio)


Tabla 1.- Composicin qumica de lminas de aluminio puro (Riedel-de Han) utilizadas para el estudio del comportamiento electroqumico.
Elemento Al Fe Cu Si Ti Zn Valor (%) 99.47% 0.20 % 0.02 % 0.20 % 0.03 % 0.08 %

Tabla 2.- Composicin qumica de lminas de aluminio comercial utilizadas para el estudio de eficiencia de remocin de microorganismos patgenos.
Elemento Al Cr Cu Fe Mg Mn Si Ti Valor (%) 98.365 0.0915 0.1600 0.5495 0.1455 0.2285 0.2865 0.0905

EVALUACION DEL MATERIAL PRECURSOR DEL FLOC (Aluminio)

(a) (b)

Figura 2.- Respuesta andica del Al (Riedelde Han) despus de ser electrolizados a tiempos diferentes (a) sin electrlisis previa, (b) 540 s de electrlisis, (c) 2160 s de electrlisis

Figura 3.- Curvas andicas comparativas de: (a) Al comercial de chatarra y (b) Al (Riedel-de Han); en solucin 0.1 M de Na2SO4 + 10 pm de cloruro

EVALUACION DEL MATERIAL PRECURSOR DEL FLOC (Aluminio) Mecanismo de corrosin qumica y electroqumica

Anodo: Al 3+ + 3eCtodo 2H2O + 2e-

Reaccin secundaria andica: + H2 2H2O


2+

4H+ + 4e-

* Experimentalmente Se ha obtenido eficiencias de corrosin > 100 %

EVALUACION DEL MATERIAL PRECURSOR DEL FLOC (Aluminio)

Figura 5.-Diagrama de solubilidad de especies de Al (III) en funcin del pH. [38]

ENSAYO DE REMOCIN DE BACTERIAS PATGENAS


- Pseudomona aeruginosa (Bacteria Gram (-) ) - Escherichia coli (Bacteria Gram (-) ) - Staphylococcus aureus (Bacteria Gram (+) )

Contenido de bacterias (UFC)/mililitro sembrado en placas Petri.


Alcuota Bacteriana Inoculada (mL) 1 3 5 V:150 mL (UFC/mL) (*) 1.2x10 7 3.6x10 7 6.0x10 7 Dilucin 1:1000 y sembrado de 1mL (UFC/mL) (**) 1.2x104 3.6x104 6.0x104

UFC/mL 1.8x10 9 1.8x10 9 1.8x10 9

* Dilucin contenida en la celda de electrlisis de 150 mL ** Dilucin para el sembrado en placas petri con caldo nutritivo agar

Remocin de Pseudomona aeruginosa

(a)

(b)

(c)

Figura - Electrocoagulacin (12min) de: a) 1.2 x107, b) 3.6x107; c) 6.0x107 UFC/mL de cepa Bacteriana de Pseudomona diluido en 150mL de solucin de cloruro de sodio 0.017M; Izquierda: Muestra (tiempo cero). Derecha: Cultivo de 1mL de muestra luego del tratamiento con 24 horas de reposo.

Remocin de Escherichia coli

(a)

(b)

(c)

Figura. Electrocoagulacin (12min) de: a) 1.2 x107 ; b) 3.6x107; c) 6.0x107 UFC/mL de cepa Bacteriana de E.Coli diluido en 150mL de solucin de cloruro de sodio 0.017M; Izquierda: Muestra (tiempo cero). Derecha: Cultivo de 1mL de muestra luego del tratamiento con 24 horas de reposo.

Remocin de Staphylococcus aureus

Figura. Electrocoagulacin (12min) de: a) 1.0 x107 ; b) 3.0 x107; c) 5.0x107 UFC/mL de cepa Bacteriana de E.Coli diluido en 150mL de solucin de cloruro de sodio 0.017M; Izquierda: Muestra (tiempo cero). Derecha: Cultivo de 1mL de muestra luego del tratamiento con 24 horas de reposo.

Eficiencia de remocin de Microorganismos patgenos


El tiempo de electrlisis para el tratamiento de todas las muestras es de 12 minutos, a una densidad de corriente de 2.5A/dm2 y el pH se mantuvo en el rango de 6-8.
Tipo de Bacteria ID Pseudomona Bacteria Gram (-) E.coli Bacteria Gram (+) UFC/mL Inicial 1.2x107 3.6x107 6.0x10 7 1.2x107 3.6x107 6.0x10 7 1.0x107 3.0x107 5.0x107 UFC/mL Final 0 0 9 0 0 0 0 0 70 % Remocin 100% 100% 99.99% 100% 100% 100% 100% 100% 99.86%

S. aureus

Relacin Aluminio generado -Bacteria :


Tipo de Bacteria E.coli Pseudomona S.areus Aluminio (ppm) 103.34 107.28 110.36 UFC/mL 6.0x10 7 6.0x10 7 5.0x107 Relacin Al(g)/UFC 1.722 1.788 2.207

Aplicacin en aguas servidas de la provincia de Huamanga Ayacucho

Foto 1.1. Vista de la Planta de Tratamiento de Aguas residuales PTAR La Totora - Ayacucho

Caracterizacin de Aguas servidas de la PTAR - Ayacucho


20/01/10* 30/06/09 02/05/09 02/02/10 02/03/10

Parmetros

17/05/10

ENCAA Categora 3
Riego -6,5 -8,5 < 2000 ----100-700 15 5 000 5 0,05 0,005 -0,05 Bebida de Animales -6,5 -8,4 < 5000 -----< = 15 5 000 5 0,1 0,01 -0,05

Hora pH Conductividad (S/cm) Turbidez (NTU) Slidos Totales Alcalinidad (mg CaCO 3 /L) Dureza Total (mg CaCO 3/ L) Cloruros (mg NaCl/L) DBO 5 mg/L** Coliformes Fecales** Aluminio *** Arsnico *** Cadmio*** Cromo *** Plomo ***

11:10 a.m. 7,71 675 22,4 442 226 160,1 152,1 -2x106 ------

10:30 a.m. 7,61 795 23,2 456 214 154 140 38 5 x105 --0,000 6 0,021 0,005 8

5 :00 p.m. 8,09 665 23,7 461 159,1 112,5 109,4 44 3 x105 0,045 0,027 ----

2:00 p.m. 7,86 678 22,4 432 180,5 133,3 119,7 45 7x105

3:00 p.m. 7,75 683 28,8 454 161,2 118,9 127 40 1,4x105 0,139 -----

2:30 p.m. 7,80 759 30,05 551 153,5 112,9 142,6 40 1,53x105 0,25 < 0,02 < 0,003 < 0,01 < 0,01

----

Tratamiento de Aguas servidas de la PTAR - Ayacucho

Tratamiento de Aguas servidas de la PTAR - Ayacucho


Evaluacin de % remocin de turbidez y coliformes fecales y % de disminucin de DBO5

Tratamiento de Aguas servidas de la PTAR - Ayacucho

Grafico: % de remocin turbiedad vs tiempo de electrocoagulacin (min)

Grafico: % de disminucin de DBO5 vs tiempo de electrocoagulacin (min)

Grafico: % de remocin de coliformes fecales vs tiempo de electrocoagulacin (min)

Tratamiento de Aguas servidas de la PTAR - Ayacucho


Evaluacin de aluminio residual

CONCLUSIONES
Es posible la desinfeccin de aguas empleando electrodos de bajo costo Para uso como agua potable, o solucin de desinfeccin de acuerdo a la dilucin emppleada. De acuerdo a los resultados, la tcnica de la electrocoagulacin con nodos de aluminio comercial presenta alto grado de eficiencia de remocin de microorganismos patgenos tipo Gram(+) y Gram(-). Tcnica atractiva y eficiente en el tratamiento de aguas infectadas para so posterior como aguas de riego

AGRADECIMIENTOS
Concejo Nacional de Ciencia y Tecnologa

Instituto de Investigacin De la Facultad de Ciencias

Grupo de Electrocatlisis y Electroqumica de Polmeros

Tesistas de la Licenciatura de Qumica


Lic. Miguel Ponce Vargas Lic. Daniel Alonso Gamero Q.

Tesistas de la Maestra
Ing. Gloria Barboza Palomino.

Colaboradores
Biol. Pilar Amalia Garcia Bach. Lucy Coria Oriundo

GRACIAS POR LA ATENCION

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