Tikus putih (Rattus novergicus) sangat baik sebagai hewan percobaan, lebih cepat menjadi dewasa, tidak memperlihatkan

perkawinan musiman, dan umumnya lebih mudah berkembang biak. Muridae Rattus Rattus novergicus Mus Mus musculus

1. Cara Memegang Hewan Percobaan Sehingga Siap untuk Diberi Sediaan Uji a. Mencit Ujung ekor mencit diangkat dengan tangan kanan, diletakkan pada suatu tempat yang permukaannya tidak licin (misal ram kawat pada penutup kandang), sehingga ketika ditarik, mencit akan mencengkram. Kulit tengkuk dijepit dengan telunjuk dan ibu jari tangan kiri, ekornya tetap dipegang dengan tangan kanan. Posisi tubuh mencit dibalikkan, sehingga permukaan perut menghadap kita dan ekor dijepitkan antara jari manis dan kelingking tangan kiri. b. Tikus Tikus dapat diperlakukan sama seperti mencit, tetapi bagian ekor yang dipegang pada bagian pangkal ekor dan pegangannya pada bagian tengkuk bukan dengan memegang kulitnya. Cara memegang tikus sebagai berikut: Tikus diangkat dengan memegang ekornya dari belakang kemudian diletakkan di atas permukaan kasar. Tangan kiri perlahan-lahan diluncurkan dari belakang tubuhnya menuju kepala. Ibu jari dan telunjuk diselipkan ke depan dan kaki kanan depan dijepit di antara kedua jari tersebut. c. Kelinci Kelinci harus diperlakukan dengan halus, tetapi sigap, karena kadang-kadang memberontak. Kelinci diperlakukan dengan cara memegang kulit lehrtnya dengan tangan kiri, kemudian pantatnya diangkat dengan tangan kanan dan didekapkan ke dekat tubuh. d. Marmot

Marmot diangkat dengan cara memegang bagian punggung atas dengan tangan kiri dan memegang bagian punggung bawah dengan tangan kanan.

2. Cara Memberikan Obat Pada Hewan Percobaan a.Mencit Oral: Cairan obat diberikan dengan mengginakan sonde oral. Sonde oral ditempelkan pada langit-langit mulut atas mencit, kemudian perlahan-lahan dimasukkan sampai ke esofagus dan cairan obat dimasukkan. Sub kutan: Kulit di daerah tengkuk diangkat dan ke bagian bawah kulit dimasukkan obat dengan menggunakan alat suntik 1 ml. Intra vena: Mencit dimasukkan ke dalam kandang restriksi mencit, dengan ekornya menjulur keluar. Ekornya dicelupkan ke dalam air hangat agar pembuluh vena ekor mengalami dilatasi, sehingga memudahkan pemberian obat ke dalam pembuluh vena. Pemberian obat dilakukan dengan menggunakan jarum suntik no. 24. Intramuskular: Obat disuntikkan pada paha posterior dengan jarum suntik no. 24. Intra peritonial: Pada saat penyuntikan, posisi kepala lebih rendah dari abdomen. Jarum disuntikkan dengan sudut sekitar 100 dari abdomen pada daerah yang sedikit menepi dari garis tengah, agar jarum suntik tidak mengenai kandung kemih. Penyuntikan tidak di daerah yang terlalu tingga untuk menghindari terjadinya penyuntikan pada hati. b. Tikus Pemberian secara oral, intra muskular dan intra peritonial dilakukan dengan cara yang sama seperti pada mencit. Pemberian secara sub kutan dilakukan di bawah kulit tengkuk atau kulit abdomen. Pemberian secara intra vena lebih mudah dilakukan pada vena penis dibandingkan dengan vena ekor. c. Kelinci Oral:

Pemberian obat dengan cara oral pada kelinci dilakukan dengan menggunakan alat penahan rahang dan pipa lambung. Sub kutan: Pemberian obat secara sub kutan dilakukan pada sisi sebelah pinggang atau tengkuk dengan cara kulit diangkat dan jarum (no. 15) ditusukkan dengan arah anterior. Intra vena: Penyuntikan dilakukan pada vena marginalis di daerah dekat ujung telinga. Sebelum penyuntikan, telinga dibasahi terlebih dahulu dengan alkohol atau air hangat. Intra muskular: Pemberian intramuskular dapat dilakukan pada otot kaki belakang. Intra peritoneal: Posisi diatur sedemikian rupa sehingga letak kepala lebih rendah daripada perut. Penyuntikan dilakukan pada garis tengah di muka kandung kencing. d. Marmot Oral: Pemberian obat secara oral dilakukan dengan menggunakan sonde oral. Intradermal: Bulu marmot pada daerah yang akan disuntik dicukur terlebih dahulu. Obat disuntikkan ke dalam kulit secara perlahan-lahan. Subkutan: Bagian kulit diangkat dengan cara dicubit, dan jarum suntik ditusukkan ke bawah kulit dengan arah paralel dengan otot di bawahnya. Intraperitoneal: Punggung marmot dipegang sehingga perutnya agak menjolok ke muka. Jarum suntik ditusukkan seperti pada cara subkutan, sesudah masuk ke dalam kulit, jarum ditegakkan sehingga menembus lapisan otot dan masuk ke dalam daerah peritonium. Intramuskular: Jarum ditusukkan pada jaringan otot. Daerah penyuntikan adalah otot paha bagian posterior-lateral.

3. Cara Menganestesi Hewan Percobaan a. Mencit

Senyawa-senyawa yang dapat digunakan untuk anestesi adalah: Eter Eter digunakan untuk anestesi singkat. Caranya adalah obat diletakkan dalam suatu wadah, kemudian hewan dimasukkan dan wadah ditutup. Hewan sudah kehilangan kesadaran, hewan dikeluarkan dan siap dibedah. Penambahan selanjutnya diberikan dengan bantuan kapas yang dibasahi dengan obat tersebut. Halotan: Obat ini digunakan untuk anestesi yang lebih lama. Pentobarbital natrium dan heksobarbital natrium Dosis pentobarbital natrium adalah 45-60 mg/kg untuk pemberian intraperitonial dan 35 mg/kg untuk cara pemberian intravena. Dosis heksobarbital natrium adalah 75 mg/kg untuk intraperitonial dan 47 mg/kg untuk pemberian intravena. Uretan (etil karabamat) Ureten diberikan pada dosis 1000-1250 mg/kg secara intraperitoneal dalam bentuk larutan 25% dalam air. b. Tikus Senyawa penganestesi yang digunakan dan cara melakukan anestesi pada tikus, umumnya sama seperti pada mencit. c. Kelinci Obat anestetika yang paling banyak digunakan untuk kelinci adalah penobarbital natrium, dengan disuntikkan secara perlahan-lahan. Dosis untuk anestesi umum, biasanya sekitar 22 mg/kg bobot badan. Untuk anestesi singkat dapat digunakan setengah dosis atas, dengan ditambah eter agar pembiusan terjadi sempurna. d. Marmot Anestesi marmot biasanya dilakukan dengan menggunakan eter atau pentobarbital natrium. Eter digunakan untuk anestesi singkat, setelah hewan dipuasakan selama 12 jam. Dosis pentobarbital natrium adalah 28 mg/ kg bobot badan.

4. Cara Mengorbankan Hewan Percobaan a.Mencit Cara kimia antara lain dengan menggunakan eter atau pentobarbital-Na pada dosis yang mematikan. Cara fisik dilakukan dengan dislokasi leher. Proses dislokasi dilakukan dengan cara: Ekor mencit dipegang dan kemudian ditempatkan pada permukaan yang bisa dijangkaunya.

 Mencit akan meregangkan badannya. Saat mencit meregangkan badannya, pada tengkuk ditempatkan suatu penahan, misalnya pensil atau batang logam yang dipegang dengan tangan kiri. Ekornya ditarik dengan tangan kanan dengan keras, sehingga lehernya akan terdislokasi dan mencit akan terbunuh. b.Tikus Cara kimia dengan menggunakan eter atau pentobarbital-Na pada dosis yang mematikan. Cara fisik dilakukan dengan proses sebagai berikut: Tikus diletakkan diatass sehelai kain, kemudian badan tikus dibungkus termasuk kedua kaki depannya dengan kain tersebut. Tikus selanjutnya dibunuh dengan cara memukul bagian belakang telinganya dengan tongkat. Tokus dipegang dengan perutnya menghadap ke atas, kemudian bagian belakang kepalanya dipukulkan dengan keras pada permukaan yang keras seperti meja. Ekor tikus dipegang, kemudian diayunkan sampai tengkuknya tepat mengenai permukaan benda keras seprti bagian pinggir meja. c.Kelinci Cara kimia dengan menggunakan eter atau pentobarbital-Na pada dosis yang mematikan. Cara fisik dilakukan dengan proses: Kaki belakang kelinci dipegang dengan tangan kiri sehingga badan dan kepalanya tergantung ke bawah menghadap ke kiri. Sisi telapak tangan kanan dipukulkan dengan keras pada tengkuk kelinci. Pemukulan pada tengkuk kelinci dapat dilakukan dengan menggunakan alat, mislanya tongkat. d. Marmot Cara kimia dengan menggunakan eter atau pentobarbital-Na pada dosis yang mematikan. Cara fisik dilakukan dengan: Tengkuk marmot dipukul dengan keras dengan menggunakan alat atau dengan memukulkan bagian belakang kepalanya pada permukaan keras. Dilakukan dislokasi leher dengan tangan.

Ada beberapa faktor yang dapat mempengaruhi hasil percobaan diantaranya: 1. Faktor internal

Meliputi variasi biologik, yaitu usia (berpengaruh pada dosis yang harus diberikan) dan jenis kelamin (ada obat-obat yang lebih peka untuk jantan dan untuk betina). Kemudian ras dan sifat genetic, faktor-faktor tersebut sangat berpengaruh terhadap hewan yang akan di jadikan percobaan karena akan memepengaruhi hasil dari percobaan disebabkan oleh pengaruh dosis dan cairan tubuh hewan tersebut sehingga hasil dari pengamatan akan berbeda-beda, sehingga memepengaruhi efek farmakologinya. Selain itu, status kesehatan dan nutrisi, bobot tubuh serta luas permukaan tubuh akan berpengaruh pada dosis yang harus diberikan. 2. Faktor eksternal Meliputi suplai oksigen, pemeliharaan lingkungan fisiologik (keadaan kandang, suasana asing atau baru, pengalaman hewan dalam penerimaan obat, keadaan ruangan tempat hidup seperti suhu, kelembaban, ventilasai, cahaya, kebisingan serta penempatan hewan), pemilihan keutuhan struktur ketika menyiapkan jaringan atau organ untuk percobaan. Faktor-faktor tersebut dapat mempengaruhi hasil percobaan, dan mempengaruhi efek farmakologinya, apabila hewan yang sudah biasa di beri obat maka akan terlihat lebih rilex dan santai berbeda dengan hewan percobaan yang masih baru dan masih asing makan akan lebih berontak dan agresif, sehingga kita membutuhkan penelitian dan perawatan yang baik terhadap hewan percobaan sebelum melakukan percobaan

Kandang dan Peralatan Kandang yang digunakan untuk memelihara mencit selama penelitian sebanyak 15 kandang mencit dengan ukuran 28x18x22 cm dan 15 kandang tikus dengan ukuran 35x27x12 cm. Setiap kandang dilengkapi dengan tempat pakan plastik, botol air minum kapasitas 265 ml, sekam padi sebagai alas kandang dan kawat kasa penutup. Peralatan lain yang digunakan terdiri dari timbangan elektrik dengan tingkat ketelitian 0,1 g, termometer, higrometer, gelas ukur, alkohol 70%, sikat botol, sarung tangan, pengaduk, kertas label dan alat tulis.