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a Lpez Villar. INFORME DE ANLISIS MICROBIOLGICO BLOQUE II N Ref: B022013 DATOS DE IDENTIFICACIN DEL SOLICITANTE DEL ANLISIS Nombre: Laboratorio de Ensayos Microbiolgicos Centro: IES A Sardieira Direccin: Avenida de Sardieira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Corua (A) Provincia: A Corua DATOS DE IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA Naturaleza: Turrn de almendra. Responsable del anlisis: Da. Nuria An Liares. Referencia de la muestra: analisisalimentos/LACC1/M3/001/21.04.13 Fecha de toma de muestra: 21.04.13 Fecha de recepcin de muestra: 22.04.13 Fecha de Anlisis de muestra: 22.04.13 Observaciones: Muestra entregada por Da. Rosa Lpez Villar. Envase de plstico steril. Conservacin de la muestra refrigerada a 4 C un mximo de 24h. PARMETROS Levaduras y Mohos (norma XF V 08-059) UNIDADES UFC de levaduras y mohos/g de muestra original VALOR R.D. 1167/901 Responsable: D. Carlos de Paz

3,80 105

103 UFC/g

R.D. R.D. 1167/90, Reglamentacin tcnico-sanitaria para elaboracin, circulacin y comercio de turrn y mazapn. (B.O.E 26/9/90).

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DATOS DE IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA Naturaleza: Agua estancada. Responsables del anlisis: D. Elas Rivera Triana y Da. Isabel Marfany Medn. Referencia de la muestra: analisisaguas/LACC1/M3/001/22.04.13 Fecha de toma de muestra: 22.04.13 Fecha de recepcin de muestra: 23.04.13 Fecha de anlisis de muestra: 23.04.13 Observaciones: Muestra tomada por Da. Isabel Marfany Medn. Envase de 2 L de plstico. Conservacin de la muestra refrigerada a 4 C un mximo de 24h. RD. 140/20032 Ausencia en 100 mL RD. 927/1988 Anexo I3 50 UFC en 100 mL

PARMETROS Coliformes Totales

UNIDADES Coliformes totales confirmados/mL

VALOR

2
2

Ausencia

RD. 140/2003, de 7 de febrero, por el que se establecen los criterios sanitarios de la calidad del agua de consumo humano. (BOE NM 45 DE 21 DE FEBRERO DE 2003). 3 RD. 927/1988, de 29 de julio, por el que se aprueba el reglamento de la administracin pblica del agua y de la planificacin hidrolgica, en desarrollo de los ttulos II y III de la Ley 29/1985, de 2 de agosto, de aguas. Anexo I, Calidad exigida a las aguas superficiales que sean destinadas a la produccin de agua potable (BOE NM 209, DE 3 DE AGOSTO DE 1988).

DATOS DE IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA Naturaleza: Superficie interior de una botella de plstico de 50 cL. Responsable del anlisis: Da. Rosa Lpez Villar Referencia de la muestra: analisissuperficies/LACC1/M3/001/24.04.13 Fecha de toma de muestra: 24.04.13 Fecha de recepcin de muestra: 24.04.13 Fecha de Anlisis de muestra: 24.04.13 Observaciones: Agua de peptona como solucin diluyente. PARMETROS UNIDADES VALOR Valor Lmite4 < 100 UFC/ Superficie muestreada

3
4

Coliformes totales

UFC/botella 50 cl

30.000

Gua Tcnica sobre criterios y procedimientos para el examen microbiolgico de superficies en relacin con alimentos y bebidas.

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ANEXO I: DIAGNSTICO DE CALIDAD MICROBIOLGICA.

MUESTRA DE TURRN: En base al resultado obtenido en el anlisis realizado, se declara la no conformidad de la muestra de turrn analizada (analisisalimentos/LACC1/M3/001/21.04.13) respecto al valor lmite establecido en el R.D. 1167/90, Reglamentacin tcnico-sanitaria para elaboracin, circulacin y comercio de turrn y mazapn. (B.O.E 26/9/90), para Levaduras y Mohos.

MUESTRA DE AGUA: En base al resultado obtenido en el anlisis realizado, se declara la conformidad de la muestra de agua analizada (analisisaguas/LACC1/M3/001/22.04.13) respecto a los valores lmite establecidos en el RD. 140/2003, de 7 de febrero, por el que se establecen los criterios sanitarios de la calidad del agua de consumo humano. (BOE NM 45 DE 21 DE FEBRERO DE 2003) y RD. 927/1988, de 29 de julio, por el que se aprueba el reglamento de la administracin pblica del agua y de la planificacin hidrolgica, en desarrollo de los ttulos II y III de la Ley 29/1985, de 2 de agosto, de aguas. Anexo I, Calidad exigida a las aguas superficiales que sean destinadas a la produccin de agua potable (BOE NM 209, DE 3 DE AGOSTO DE 1988) , para Coliformes fecales. La muestra de agua analizada (analisisaguas/LACC1/M3/001/22.04.13), en base al criterio analizado (Coliformes fecales), sera apta para el consumo humano. (Consultar Anexo III).

MUESTRA DE SUPERFICIE: En base al resultado obtenido en el anlisis realizado, se declara la no conformidad de la muestra de superficie analizada (analisissuperficies/LACC1/M3/001/24.04.13) respecto al valor lmite establecido en la Gua Tcnica sobre criterios y procedimientos para el examen microbiolgico de superficies en relacin con alimentos y bebidas, para Coliformes. (Consultar Anexos III y V).

ANEXO II: ANLISIS REALIZADOS. Mtodo horizontal para el recuento de Levaduras y Mohos. Basado en la norma XF V 08059 de noviembre de 1995 (PNT-AL-006). Cuantificacin de coliformes fecales (Filtracin de Membrana). Mtodo del enjuague. Empleo de 150 mL de Agua de Peptona como solucin diluyente.

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EEMM LACC1 GRUPO MESA 3 Realizado por: Nuria An Liares, Isabel Marfany Medn, Elas Rivera Triana y Rosa Lpez Villar. ANEXO III: OBSERVACIONES. ANLISIS DE ALIMENTOS: Se retienen aquellas placas de diluciones consecutivas que contienen entre 15 y 150 UFC para tomarlas como resultado tal y como se indica en el procedimiento empleado. MUESTRA Solucin Madre (10-1) Dilucin 10-2 Dilucin 10-3 Dilucin 10-4 Dilucin 10-5 N de UFC 0 5 25 17 27

Retuvimos las placas de diluciones reseadas en color rojo, por considerarse las ms representativas, y calculamos el nmero de levaduras y mohos tal y como se establece en el procedimiento empleado.

N (nmero de Levaduras y Mohos por gramo o mL de muestra); C (suma de las UFC de las placas que contengan entre 15 y 150 UFC y que sean de diluciones consecutivas); d (nivel de dilucin correspondiente a la primera dilucin retenida). ANLISIS DE AGUAS: Para el diagnstico de potabilidad de la muestra de agua analizada, desde un punto de vista microbiolgico, sera necesario considerar la determinacin de otros parmetros microbiolgicos para su calificacin como apta para el consumo humano. ANLISIS DE SUPERFICIES: Se determina el parmetro coliformes totales para la comprobacin higinica de una botella de plstico de 50 cl y as verificar que puede ser un riesgo rellenarlas tras el vaciado del contenido de las mismas. No existe legislacin oficial aplicable. Se emplea la Gua Tcnica sobre criterios y procedimientos para el examen microbiolgico de superficies en relacin con alimentos y bebidas, por ser la nica referencia aplicable al anlisis realizado. MUESTRA Solucin Madre (100) Dilucin 10-1 Dilucin 10-2 Dilucin 10-3 N de UFC 0 0 0 3

Se sospecha de una posible contaminacin cruzada debido a la ausencia de crecimiento en la dilucin madre.

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EEMM LACC1 GRUPO MESA 3 Realizado por: Nuria An Liares, Isabel Marfany Medn, Elas Rivera Triana y Rosa Lpez Villar. ANEXO IV ESQUEMA DE TRABAJO. 1. MTODO HORIZONTAL PARA EL RECUENTO DE LEVADURAS Y MOHOS (PNT-AL-006).

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EEMM LACC1 Realizado por: Nuria An Liares, Isabel Marfany Medn, Elas Rivera Triana y Rosa Lpez Villar. 2. PRUEBA COLIFORMES FECALES (FILTRACIN DE MEMBRANA).

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FILTRACIN DE MEMBRANA

INCUBACIN 44C/24H

100 ml
MUESTRA 10-4
MEDIO FC AGAR

100 ml
MEDIO FC AGAR

MUESTRA 10

-5

MUESTRA ORIGINAL

100 ml
MEDIO FC AGAR

MUESTRA 10

-6

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EEMM LACC1 Realizado por: Nuria An Liares, Isabel Marfany Medn, Elas Rivera Triana y Rosa Lpez Villar. 3. PRUEBA DE COLIFORMES TOTALES EN SUPERFICIES (MTODO DEL ENJUAGUE).

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SIEMBRA EN PLACA CON ASA DE DRIGALSKI

INCUBACIN 37C/24H

ENJUAGUE INTERIOR DE LA BOTELLA DE PLASTICO DE 50 cL CON 150 mL DE AGUA DE PEPTONA (SOLUCIN DILUYENTE). MUESTRA ORIGINAL .

MUESTRA 10-1

MEDIO EMB 37C / 24H MEDIO CALDO LACTOSADO

MEDIO EMB

1. SIEMBRA EN PLACA AGAR EMB CON ASA DE DRIGALKI (37 C/ 24H) ---2. PRUEBA CONFIRMATIVA FORMACIN DE GAS EN CALDO LACTOSADO (37C / 24H).

MUESTRA 10-2

37C / 24H MEDIO CALDO LACTOSADO

MEDIO EMB

MUESTRA 10-3

37C / 24H MEDIO CALDO LACTOSADO

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EEMM LACC1 GRUPO MESA 3 Realizado por: Nuria An Liares, Isabel Marfany Medn, Elas Rivera Triana y Rosa Lpez Villar. ANEXO V: RESULTADOS GRFICOS. 1. ALIMENTOS: 1.1. Siembra (Medio CGA (Agar Glucosa y Cloranfenicol). No se dispone de informacin grfica.

2. AGUAS: 2.1. Siembra (Medio FC). Negativa.

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EEMM LACC1 GRUPO MESA 3 Realizado por: Nuria An Liares, Isabel Marfany Medn, Elas Rivera Triana y Rosa Lpez Villar.

3. SUPERFICIES: 3.1.1.Siembra en Agar EMB. En la placa madre (100) no hubo crecimiento alguno. En las diluciones sucesivas s se apreci crecimiento bacteriano. Es por ello que se sospecha una posible contaminacin cruzada o bien un fallo durante la siembra con el asa de Drigalski, como por ejemplo no dejar enfriar suficientemente el asa tras haberla flameado para el mantenimiento asptico del proceso de la siembra.

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3.1.2.Caldo lactosado como prueba confirmativa de coliformes totales debido a la formacin de gas. Se siembra todas los tipos de colonias que han crecido en todas las placas de las diluciones sucesivas. En las diluciones 10-1 y 10-2 las colonias eran de la misma morfologa y color (rosadas). En el caso de la placa sembrada con la dilucin 10-3, hubo crecimiento tambin de las colonias rosadas, pero adems, tres de ellas presentaban un punto negro en el centro. Dieron positivo a la prueba nicamente aquellas que presentaban el punto negro en el centro.

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EEMM LACC1 Realizado por: Nuria An Liares, Isabel Marfany Medn, Elas Rivera Triana y Rosa Lpez Villar. ANEXO VI: PLANIFICACIN.

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ANLISIS

Alimentos (PNT 6) (NURIA)

Aguas (Coliformes fecales) (ISABEL Y ELIAS)

LUNES 15 Tratamiento y preparacin de la muestra con agua de peptona como diluyente). Siembra en CGA. Preparacin del medio de cultivo Agar FC con cido roslico en NaOH 0,2N. Pedir material de vidrio estril para la realizacin de las diluciones.

MARTES 16

MIRCOLES 17

JUEVES 18

VIERNES 18

Lectura de resultados.

Preparacin de diluciones a partir de la muestra madre. Filtracin en membrana.

Lectura de resultados.

Superficies (Coliformes totales) (ROSA)

Preparacin de agua de peptona necesaria y de los medios de cultivo necesarios (EMB y caldo lactosado).

Pedir material de vidrio estril para la realizacin de diluciones.

Toma de muestra mediante el mtodo del enjuague. Preparacin de las diluciones. Siembra en EMB.

Lectura de resultados. Hacer las pruebas confirmativas a los positivos (Oxidasa y gas).

Lectura de resultados.

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