Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia de Alagoas Coordenadoria de Qumica Curso Tcnico Integrado em Qumica Industrial Emanuelle Ferreira

da silva N 22 713 A

COLORAO DE GRAM

Relatrio de aula prtica apresentado ao curso Tcnico de Qumica Industrial, da coordenao de Qumica, do Instituto Federal de Alagoas, como requisito para obteno parcial da nota da diciplina de Microbiologia.

Macei- Alagoas Dezembro, de 2012

Sumario
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Introduo ............................................................................................................................. 3 Objetivo ................................................................................................................................. 3 Materiais/ Equipamentos...................................................................................................... 4 Reagentes .............................................................................................................................. 4 Metodologia .......................................................................................................................... 5 Resultados e Discusses ........................................................................................................ 5 Concluso .............................................................................................................................. 8 Referencia bibliogrficas ....................................................................................................... 9

1. Introduo
A colorao de Gram uma tcnica que permite a separao e a identificao de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinao da morfologia e do tamanho das amostras analisadas atravs das cores . um dos mais importantes mtodos de colorao utilizados em laboratrios de microbiologia e de anlises clnicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterizao de amostras de bactrias. um mtodo de colorao de bactrias desenvolvido pelo mdico dinamarqus Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838), em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregao bacteriano, fixado pelo calor, com o reagente cristal violeta, lugol, lcool e fucsina bsica. A tcnica tem importncia clnica uma vez que muitas das bactrias associadas a infeces so prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas (roxas) ou Gram-negativas (vermelhas) em esfregaos de fluidos orgnicos. Essa informao permite ao clnico monitorar a infeco at que dados de cultura estejam disponveis. possvel a anlise de vrios esfregaos por lmina, o que facilita a comparao de espcimes clnicos. As lminas podem ser montadas de forma permanente e preservadas como documentao.

2. Objetivo
Essa Prtica tem como principal objetivo a utilizao da tcnica de colorao de gram para visualizar a morfologia e a identificao das bactrias da saliva microscpio ptico. no

3. Materiais/ Equipamentos
1. Lamina; 2. Swab tradicional esterelizado; 3. Bico de Bunsen; 4. Papel toalha; 5. Microscpico.

4. Reagentes
1. Saliva 2. Cristal Violeta, 3. Lugol, 4. lcool-70% 5. Fucsina;

5. Metodologia
1. Pegou-se um swab tradicional esterilizado e coletou-se a saliva nas partes da Lngua e das bochechas; 2. Logo o aps fez-se um esfregao com o swab que continha a amostra na lmina; 3. Em seguida passou-se a lmina com o esfregao na chama do bico de Busen at o mesmo ficar seco; 4. Cobriu-se o esfregao com a soluo de cristal de violeta por cerca de 1 minuto; 5. Em seguida lavou-se com gua destilada corrente com a pisseta ; 6. Depois Cobriu-se o esfregao com a soluo de lugol fraco por cerca de 1 minuto ; 7. Novamente lavou-se com gua destilada corrente por cerca de 10 a 15 segundos; 8. Em seguida lavou-se com lcool 70 % at que no sasse mais corante da lmina; 9. Lavou-se mais uma vez com gua destilada corrente at no restar mais lcool 70 %; 10. Logo aps cobriu-se o esfregao com fucsina por cerca de 30 segundos; 11. Lavou-se com gua destilada e secou-se com papel; 12. Em seguida levou-se a lmina ao microscpio e observou-se a mesma nas lentes objetivas de imerso 4x , 10x , 40x e 100x.

6. Resultados e Discusses
Foi observado e constatado diante das lentes objetivas de imerso a presena de cocos gram positivos e negativos e bacilos gram positivos, Gram (+) coram de roxo, gram (-)

coram de vermelho, portanto obteve-se o resultado esperado.

Lente Objetiva de Imerso (4 x)

Lente Objetiva de Imerso (10x)

Lente Objetiva de Imerso (40 x)

Lente objetiva de Imerso (100 x)

7. Concluso
A tcnica da colorao de Gram baseado na capacidade das paredes celulares de bactrias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com lcool-absoluto enquanto que as paredes celulares de bactrias Gram-negativas no o fazem.

Concluiu-se que as bactrias constatadas foram as do tipo Gram Positivas (+) coradas de Violeta escuro ou roxo e as do tipo Gram negativas (-) coradas de vermelho e em relao a sua forma foram encontradas cocos Gram positivos e negativos e bacilos Gram positivos. Durante o procedimento experimental efetuou-se vrios processos descritos na metodologia para que fosse facilitada a viso das bactrias, como fixar o esfregao a lmina atravs da chama, para que as clulas ficassem fixas (sem movimento) para que estas fossem bem visveis e tambm os corantes que so de suma importncia para a identificao das mesmas.

8. Referencia bibliogrficas
http://www.infoescola.com/bioquimica/coloracao-de-gram/ 9 de dezembro de 2012 s 15:30.