Citologa y morfologa bacteriana

Qu son los microorganismos?

No pueden verse a simple vista, al menos en parte de su ciclo Viven como clulas aisladas Algas, hongos, protozoarios, bacterias y virus.

Tamaos

Formas Bacterianas
Las bacterias se caracterizan por su forma y tamao. Organizacin: Sin agrupacin pares racimos cadenas ttradas

images copyright of Dennis Kunkel microscopy (http://www.pbrc.hawaii.edu/~kunkel/g)

cocos

bacilos

espirilos

FORMA DE LAS BACTERIAS

Area de superficie vs. volumen

Tamao pequeo intercambio ms eficiente, permite mayor velocidad metablica

Estructura celular

BACTERIAS

Componentes Esenciales Pared celular Peptidoglycan cido Teicoico en Gram positivos Membrana externa en Gram negativo Membrana Citoplasmtica Ribosomas Nucleoide Periplasma

Pared celular
Bacteria:
Gram positivo Gram negativo Sin pared

Archaea:
Diversas estructuras Sin pared

Funciones de la pared
Resistencia osmtica Forma Comunicacin Patogenicidad (Gram negativos-LPS) Barrera para algunas molculas. Espacio periplsmico

Por qu no se lisan las bacterias?

Baja concentracin de solutos

Alta concentracin de solutos

Lisozima -- protena que rompe el enlace glicosdico 1-4 en el peptidoglicano

TINCIN GRAM
1) 1 minuto con Violeta de Genciana 2) 1 minuto con Lugol 3) 30 segundos con Alcohol Etlico 4) 20 segundos con Safranina

TINSIN GRAM

Gram positivo

Gram negativo

Gram +

Bacteria

Gram-

Estructura de la pared celular de bacterias Gram positivas

Estructura de la pared celular de bacterias gram negativas

Constituyentes del Peptidoglican

Polisacrido compuesto de repeticiones alternadas de Nacetilglucosamina y cido acetilmuramico unidas a la capa adyacente por puentes de ppticos cortos

MURENA O PPTIDO-GLICANO
Compuesto qumico caracterstico de bacterias.

Transpeptidacin

Inhibido por la penicilina G.

Sntesis de la pared celular

La pared celular se abre por autolisinas y se deposita nuevo pptidoglicano

 Algunas bacterias no poseen pared

Micoplasma Membrana celular mas gruesa pueden tener esteroles y lipoglicanos. Son pleiomrficos

Pared celular de Archaea

No contiene peptidoglicano Puede ser de
pseudopeptidoglicano (pseudomureina) tie G+ pseudomureina cubierta de proteina,tie G+ monocapa superficial de proteina o glicoproteina, sin pseudomureina. tie G-

Existen Archaea sin pared

Pseudopeptidoglicano

Pared de Archaea
Capa S

Insensible a lisozima

Funciones de la pared
Resistencia osmtica Comunicacin Patogenicidad (LPS en Gram negativos) Barrera (porinas en Gram negativos). Espacio periplsmico

LIPOPOLISACARIDO (LPS)
LPS consiste de un azcar y una porcin lipdica

Antigeno O

La porcin de azcar tiene 2 partes: la cadena O y el core Core de polisacridos de polisacrido que contiene ketodeoxioctanato El Lpido A es la parte del LPS responsable de su toxicidad en animales

Molcula de Lpido A

Periplasma
Regin gelatinosa entre la superficie externa de la membrana citoplasmtica y la superficie interna de la capa de lipopolisacarido de las bacterias Gram negativas

Periplasma de E. coli
Protenas de periplasma de E.coli. Protenas de unin Enzimas de biosntesis Enzimas de degradacinde polmeros Enzimas detoxificantes

cido Teicoico
Polisacrido unido a la pared celular de Gram positivos. Polimero que contiene residuos de glicerofosfato o ribitol fosfato y estn unidos por D-alanina. El cido teicoico es responsable de la carga negativa de la superficie de la clula Tiene una funcin en el paso de iones a travs de la pared celular

La membrana celular
Estructura:
Bicapa fosfolipdica con protenas embebidas; puede contener tambin hopanoides de estructura similar al colesterol. En Archaea, teres de alcohol isoprenoide, algunas forman monocapas.

The Structure of the Cytoplasmic Membrane

Hydrophilic groups Phospholipid Hydrophobic groups

Phospholipid molecule Integral membrane Proteins

FOSFOLIPIDOS
Grupo core

Cadenas de cidos grasos

Los lpidos en Bacteria y Archaea tienen diferentes enlaces qumicos

Ester - Bacteria
R=Acidos grasos de cadena larga

Eter - Archea

R= alcoholes de cadenas de isopreno

Membrana citoplasmtica de E. coli Permeabilidad selectiva Ancla de Protenas

Generacin de fuerza protomotriz

(En fottrofas parte del aparato fotosinttico)

Sntesis de pared, y estructuras extracelulares.

Funciones de la Membrana Citoplasmatica

Difusin pasiva y permeabilidad de la membrana: Porque la clula necesita transportadores

Rate of Transport

Facilitated Diffusion

Passive Diffusion

Concentration Gradient

Citoplasma
Protenas Ribosomas
70S: protenas + rRNA 5S, 16S, 23S

mRNA, tRNA Macromolculas, solutos No tienen citoesqueleto.

ARN Ribosomal en Procariotas Nombre 5S 16S 23S

16S rRNA

Tamao (n nucletidos) 120 1500 2900

Localizacin Subunidad Grande del ribosoma Subunidad pequea del ribosoma Subunidad Grande del ribosoma

30S 21 Proteins 1540 bp

23S rRNA

50S

5S rRNA

70S AssembledRi bosome

31 Proteins 2900 bp + 120 bp

Ribosomas

Estructura celular procariota - DNA

No tiene ncleo. El DNA est en el citoplasma: nucleoide : zona que ocupa el DNA. Es haploide. No contiene histonas (las Archaea tienen histonas). Puede contener otros elementos genticos no cromosmicos (plsmidos y genomas fgicos).

Procariotas
No tienen membrana nuclear.
No hay porcesamiento del ARNm La transcripcin est ligada a la traduccin.

DNA - organization

relaxed circular ------------------> supercoiled

NUCLEOIDE:
Estado agregado del cromosoma circular de celulas procariotas

Tamao del Genoma

BACTERIAS
No todos los microorganismos las tienen. Son caractersticas de gnero y especie (taxonoma)

Componentes no esenciales Cpsula Glicocalix Pili y fimbria Flagelo Espora

FIMBRIA
9Son considerablemente ms cortos que los flagelos y mas numerosos. 9Participan en la adhesin bacteriana a superficies

Fimbrias - Pili
Fimbria funciones de adhesin a superficies. Pili sexual unin durante la conjugacin.

PILI
9Es una estructura similar a las fimbrias, pero ms larga y de menor numero 9que participa en la conjugacin y en la adhesin.

Flagelo
El flagelo es el instrumento de la movilidad celular trico = Pelo en Griego El tipo de flagelacin es una caracterstica usada para clasificar las bacterias

polar o monotrico peritrico Amfitrico

lofotrico

Flagelo
Los Flagelos son helicales La distancia entre dos curvas es la longitud de onda del flagelo El flagelo consiste de subunidades compuestas de la protena flagelina El flagelo es conectado a la pared celular por un gancho (Hook) El motor que da el impulso al flagelo es el cuerpo basal anclado en la pared celular y la membrana citoplasmtica

ESTRUCTURA FLAGELAR

Flagelos-Movilidad

Anaerobaculum mobile sp. nov.

Flagelo insertado lateralmente

Barra 0,5 micras

Endosporas

Resistencia al calor, radiacin, desecacin. Producidas principalmente por los gneros Bacillus y

Clostridium

Luego de la activacin por stress, la disponibilidad de nutrientes dispara la germinacin y el crecimiento La localizacin es usada para la identificacin

Estructura de la espora
(protenas)

Cutcula

(protenas)

(peptidoglicano)

cido dipiconlico Ca++

Pared celular

Pequeas protenas solubles en cido (ssp)

Clulas Vegetativas-Endoesporas
Caracterstica Contenido de Calcio Ac. dipiconlico Pequeas protenas solubles en cido Contenido de agua pH citoplasma Actividad enzimtica Metabolismo Resistencia: calor, radiacin, compuestos qumicos Sensibilidad lisozima Clula vegetativa bajo ausente ausentes 80-90% 7 elevada elevado baja Endoespora alto presente presentes 10-25% 5.5-6 baja Bajo o ausente elevada

Sensible

Resistente

Inclusiones citoplasmticas
Algunas bacterias tienen estructuras internas grnulos de almacenamiento vesculas de gas flotacin Carboxisomas, clorosomas.

Poly--hydroxybutyrate (PHB)

Plsticos biodegradables

Vesculas de gas

Cianobacteria Microcystis

Cianobacteria Anabaena (heterocisto)

Bacterias acuticas

Estructuras extracelulares
Capa S
Subunidades proteicas o glicoproteicas. G+, G- y Archaea.

Glicocalix
Cpsula Capa mucilaginosa

Cpsula Bacteriana o Glicocalix

Es de polisacrido Protege contra la Fagocitosis Participa en la Adherencia

Glicocalix
Tincin negativa

Micrografa electrnica

Tincin negativa

Funciones glicoclix
Proteccin contra defensas del husped (fagocitosis) Proteccin contra desecacin Proteccin contra virus, toxinas Adhesin a superficies (clulas, objetos inanimados) formacin de biofilms.

CELULA BACTERIANA

Diferencia entre la estructura celular de Bacteria, Archaea y Eucarya

Propiedad Bacteria Eucarya Membrana NO SI nuclear Organelos NO SI Tamao 70S 80S ribosoma Peptidoglicano SI NO en la pared Esteroles en NO SI membrana (hopanoides) Lpidos de Ester unidos Ester unido a membrana a glicerol glicerol Archaea NO NO 70S NO SI Eter, ramificados