ESTERILIZACIN EN AUTOCLAVE 1.

OBJETIVOS GENERAL:

Esterilizar por vapor a presin los materiales de vidrio utilizados en el laboratorio de qumica industrial.

OBJETIVOS ESPECFICOS:

El grupo revisar las medidas de seguridad ms importantes que se utilizan en un laboratorio de qumica para minimizar la posibilidad de accidentes. Aprender el correcto uso de la autoclave siguiendo instrucciones adecuadas. Revisar el funcionamiento de la autoclave. Aprender a envolver el material de vidrio para la esterilizacin del mismo en la autoclave. Esterilizar por vapor a presin en una autoclave siguiendo variables y parmetros en la operacin.

2. FUNDAMENTOS TERICOS:

Esterilizacin por vapor a presin La esterilizacin por vapor a presin se lleva a cabo en una autoclave. Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a una presin de 15 libras lo que permite que la cmara alcance una temperatura de 121C. El tiempo de esterilizacin usualmente es de 15 minutos, sin embargo, en algunas oportunidades, dadas las caractersticas del material, es necesario variar el tiempo de esterilizacin. Cuando se utiliza este mtodo es importante controlar en el autoclave la relacin entre la temperatura, la presin y el tiempo de exposicin, ya que stos son factores crticos en el proceso. Slo cuando el vapor se coloca bajo presin, es cuando su temperatura aumenta por encima de los 100C y esto permite alcanzar las temperaturas de esterilizacin (121C). Entre las ventajas de este mtodo de esterilizacin tenemos que no deja residuos, las autoclaves modernas son sencillas de manejar y es un mtodo rpido de esterilizacin. ste es el mtodo de eleccin para esterilizar materiales termoestables y no sensibles a la humedad como medios de cultivo, cultivos de microorganismos para descartar, lencera, uniformes, instrumentos quirrgicos, material de laboratorio, etc. Entre sus desventajas estn que no permite la esterilizacin de materiales sensibles al calor y materiales no miscibles con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas.

Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacutico, ya que existen muchos procesos que requieren la utilizacin de materiales estriles. Entre stos podemos destacar: La esterilizacin de equipos quirrgicos y otros materiales de uso mdico con el propsito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes. El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas, etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiologa. La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con diferentes propsitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente, equipos o personal, anlisis microbiolgico de medicamentos, cosmticos, alimentos, etc.) La descontaminacin de material utilizado.

3. MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS:

02 vasos de precipitado de 100 ml 01 caja Petri

02 tubos de ensayos Agua destilada 01 Autoclave Papel craft. Algodn Cinta de papel Alcohol

4. PRECAUCIONES Revisar la autoclave viendo que este en correcto estado de funcionamiento al igual que sus instrumentos de medicin. Antes de comenzar el proceso de esterilizacin es necesario remover todo el aire de la cmara de la autoclave, porque de lo contrario no se podrn alcanzar las condiciones de esterilizacin requeridas debido a que la cmara interna del equipo no podr ser saturada por el vapor de agua. Revisar que la tapa de la autoclave este bien sujeta. El tiempo de esterilizacin se debe comenzar a contar una vez que se han alcanzado los 121C en la cmara interna del autoclave. Si se van a esterilizar materiales tales como instrumentos quirrgicos, equipos, etc. no se deben cubrir con materiales impermeables al agua como por ejemplo el papel de aluminio, porque ste no permite que el vapor tenga acceso al material y por lo tanto no se lograr la esterilizacin. Cuando se coloca el material a esterilizar en el interior del equipo se debe garantizar la libre circulacin del vapor de agua alrededor de todo el material. Para controlar la esterilizacin por vapor a presin se emplean indicadores fsicos tales como medidores de presin, termmetros, o termgrafos. Aunque estos controles son ampliamente utilizados, actualmente se consideran mtodos secundarios para el control del proceso y son los indicadores biolgicos los que permiten determinar si realmente se llev a cabo en forma efectiva la esterilizacin.

5. PROCEDIMIENTO GENERAL PARA UNA ESTERILIZACIN Lavar correctamente los materiales y secar. Limpiar el rea de trabajo para la esterilizacin con alcohol. Coloca el papel craft sobre la mesa de laboratorio Envolver correctamente el material (en el caso de los tubos de ensayo se necesita un poco del algodn para la boquilla)

Se pone el papel craft sobre la mesa y comienza a envolverse la caja de petri, se dobla el papel por las dos mitades de tal forma que la cubra y dejando un pliegue en el centro, posteriormente se doblan las puntas hacia atrs y se pone cinta testigo. Para envolver el tubo de ensayo se corta un pedazo de papel craft a lo largo, se tapa el orificio superior con un tapn hecho de algodn y se comienza a envolver de forma circular hasta que cubra todo el tubo. Se deber de poner cinta testigo en las dos puntas dando unos dobles de tal forma que queden en la misma direccin. Sella con la cinta testigo

o o

Distribuir el material en forma ordenada en toda la superficie interna disponible. Evitar amontonar el material en un rea especfica. No colocar el material uno sobre otro.

Evitar que el material toque las paredes de la autoclave. Colocar agua destilada suficiente en el autoclave Cerrar bien tapa Abrir vlvula de desagote Encender fuente de calor Desagotar aire Cerrar vlvula Vigilar presin 15 lb computar tiempo cuando se alcancen los 121C tiempo de esterilizacin de 15 a 20 min. Cuando termine el tiempo de esterilizacin, apagar la autoclave. Esperar que bajen la presin y la temperatura del equipo para abrirlo Abrir vlvula luego de 20 min Esperar que el material alcance la temperatura ambiente antes de almacenarlo.

6. ALMACENAMIENTO DEL MATERIAL ESTRIL Una vez que un material est estril puede mantener esta condicin si est protegido en la forma apropiada. Es decir, la duracin de la esterilidad de un material no est relacionada directamente con el tiempo, sino con factores que comprometen su exposicin al medio ambiente.

Los materiales estriles pierden su esterilidad: Cuando se produce cualquier ruptura, accidental o no, del material que lo recubre durante su transporte o almacenamiento. Al humedecerse el material de empaque. Es importante no manipular los materiales estriles con las manos hmedas, ni colocarlos sobre superficies mojadas. Al almacenar los materiales estriles se deben tomar una serie de precauciones, tales como: Controlar el acceso a las reas de almacenamiento de materiales estriles. Mantener el rea de almacenamiento limpia, libre de polvo, sucio e insectos. Controlar la temperatura y la humedad de las reas de almacenamiento. La temperatura ideal debe estar por debajo de los 26C y la humedad relativa entre 30 y 60%. Los periodos prolongados de almacenamiento en lugares tibios y hmedos, pueden producir condensacin de humedad sobre el material de empaque. Utilizar preferiblemente, estantes cerrados para colocar el material.

Dejar que los materiales que salen del horno o el autoclave alcancen la temperatura ambiente antes de ser almacenados; de esta forma se evita la condensacin dentro del empaque.