NTC 4566
2009-08-19
E:
CORRESPONDENCIA:
DESCRIPTORES:
productos crnicos; derivados crnicos; contenido de almidn; mtodo gravimtrico; mtodo espectrofotomtrico.
I.C.S.: 67.120.10
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC) Apartado 14237 Bogot, D.C. - Tel. (571) 6078888 - Fax (571) 2221435
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PRLOGO
El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993. ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo caracterizado por la participacin del pblico en general. La NTC 4566 (Primera actualizacin) fue ratificada por el Consejo Directivo de 2009-08-19. Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales. A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a travs de su participacin en el Comit Tcnico 44 Productos crnicos. ALIMENTOS CRNICOS S.A. PLANTA SUIZO BOGOT ALIMENTOS LA CALI S.A. ASOCIACIN COLOMBIANA DE HELICICULTORES ASOCIACIN COLOMBIANA DE PORCICULTORES -FONDO NACIONAL DE LA PORCICULTURACARULLA VIVERO S.A. CONSEJO NACIONAL CADENA CRNICA BOVINA DALBERT INTERNACIONAL COLOMBIA FEDERACIN NACIONAL DE COMERCIANTES -FENALCOFRIGORFICOS SAN MARTN DE PORRAS LTDA. FUNDACIN UNIVERSIDAD DE LA SABANA INDUNARDI S.A. INDUSTRIA SALSAMENTARA EL BOHEMIO LTDA. INDUSTRIAS DE ALIMENTOS ZEN S.A. LABORATORIO ASBIOQUIM LTDA. NULAB LTDA. PORTLAND COMERCIAL E.U. POZO ANTIGUO LTDA. PURIFICACIN Y ANLISIS DE FLUIDOS LTDA. SCARCOL E.C. TECNIAGRO S.A. UNIVERSIDAD DE LOS ANDES UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA VILASECA LTDA.
Adems de las anteriores, en Consulta Pblica el Proyecto se puso a consideracin de las siguientes empresas: ALICO S.A. ALIMENTOS FRIKO S.A. ALMACANES XITO S.A. ASINAL LTDA. ASOCIACIN COLOMBIANA INDUSTRIALES DE LA CARNE ASOCIACIN COLOMBIANA DE MICROBIOLOGA ASOCIACIN NACIONAL DE EMPRESAS CRNICAS ASOCIACIN NACIONAL DE INDUSTRIALES -ANDI-
DE
AVESCO S.A. AVIDESA MC POLLO S.A. BGC ALIMENTOS ESPECIALES BIANLISIS BIOQUILAB LTDA. BIOTRENDS LABORATORIO LTDA. CARNES CASABLANCA CARNES LOS SAUCES LTDA. CRNICOS DEL PACIFICO S.A. CHR-HANSEN COLOMBIA S.A. COMESTIBLES DAN S.A. CONGELADOS AGRCOLAS S.A. DISPROALQUMICOS S.A. ECOLAB COLOMBIA S.A. FABRICA DE ESPECIAS Y PRODUCTOS EL REY S.A. FEDERACIN NACIONAL DE AVICULTORES -FENAVIFEDERACIN NACIONAL DE GANADEROS -FEDEGANFRIGORIFICO LA PARISIENNE FRIGORIFICO SAN MARTIN DE PORRA LTDA. FRIGORFICOS COLOMBIANOS S.A. FRIGORFICOS GUADALUPE S.A. FUNDACIN INTAL FUNDACIN UNIVERSIDAD JORGE TADEO LOZANO FUNDACIN UNIVERSITARIA AGRARIA DE COLOMBIA GIVAUDAN COLOMBIA S.A. GRIFFITH COLOMBIA S.A. IMS CONSUKTING LTDA. INDUSTRIAS ALIMENTICIAS MOSELA LTDA. INDUSTRIAS ALIMENTICIAS SALSAMENTARA SAN JUAN
INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO -ICAINSTITUTO NACIONAL DE VIGILANCIA DE MEDICAMENTOS Y ALIMENTOS -INVIMAINTERNATIONAL LIFE SCIENCES INSTITUTE ILSI NOR ANDINO IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA. JHONSON DIVERSEY COLOMBIA LTDA. KOYOMAD PRODUCTOS CRNICOS S.A. LABORATORIO BIOCONTROL LTDA. LESNIAK E.U. LUCTA GRANCOLOMBIANA LTDA. MINISTERIO DE LA PROTECCIN SOCIAL OLMPICA S.A. POLLO ANDINO LTDA. POLLO FIESTA LTDA. POLLO SAVICOL LTDA. POLLOS VENCEDOR PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA PRODUCTORA DE CONCENTRADOS CAMPEN LTDA. PRODUCTOS CRNICOS WALKER PROMOTORAS UNIDAS LTDA. PROVEEDORES S.A. QUIOS LTDA. SALSAMENTARIA INDUCOLCARNES LTDA. SALSAMENTARIA LA BRASILEA LTDA. SECRETARA DISTRITAL SALUD DE BOGOT SECRETARIA TCNICA CONSEJO NACIONAL DE LA CADENA CRNICA SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE -SENATECNAS S.A.
ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados. DIRECCIN DE NORMALIZACIN
CONTENIDO
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1.
OBJETO .......................................................................................................................1
2.
3.
4.
DEFINICIN .................................................................................................................1
5.
PRINCIPIO....................................................................................................................2
METODO GRAVIMETRICO .........................................................................................2 REACTIVOS .................................................................................................................2 EQUIPOS Y MATERIALES ..........................................................................................4 MUESTRA ....................................................................................................................5 PROCEDIMIENTO........................................................................................................5 EXPRESIN DE LOS RESULTADOS .........................................................................6 INFORME DE ENSAYO ...............................................................................................9
MTODO ESPECTROFOTOMTRICO .......................................................................9 EQUIPOS Y MATERIALES ..........................................................................................9 REACTIVOS .................................................................................................................9 PROCEDIMIENTO......................................................................................................10 EXTRACCIN DE ALMIDONES................................................................................10 DETERMINACIN DEL ALMIDN............................................................................10
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7.6 7.7
FIGURA Figura 1. Grfica para conversin de mililitros de solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N a miligramos de glucosa ..............................................................................8
TABLA Tabla 1. Conversin de mililitros de solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N a miligramos de glucosa........................................................................................................7
BIBLIOGRAFA......................................................................................................................12
1.
OBJETO
Esta norma especifica dos mtodos de referencia para la determinacin del contenido de almidn en productos crnicos.
2.
CAMPO DE APLICACIN
La presente norma se aplica solamente a productos que no contienen sustancias agregadas diferentes del almidn, que produzcan azcares reductores por hidrlisis.
3.
REFERENCIAS NORMATIVAS
Los siguientes documentos normativos referenciados son indispensables para la aplicacin de este documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica nicamente la edicin citada. Para referencias no fechadas, se aplica la ltima edicin del documento normativo referenciado (incluida cualquier correccin). NTC 2175, Metrologa. Material de vidrio para laboratorio. Buretas. Requisitos generales (ISO 385-1). NTC 5554, Carne y productos crnicos. Preparacin de la muestra (AOAC 938.18). ISO 385-1, Laboratory Glassware, Burettes.
4.
DEFINICIN
Para los propsitos de este documento normativo, se aplica la siguiente definicin. Contenido de almidn en los productos crnicos. El contenido de almidn determinado de acuerdo con los procedimientos descritos en la presente norma y expresado como un porcentaje en masa.
1 de 12
Se calienta la porcin de ensayo con solucin etanlica de hidrxido de potasio hasta disolver totalmente los componentes de la carne. Se decanta, y lava el residuo con etanol caliente, filtrado, se disuelve en cido clorhdrico y se hidroliza. Se determina por titulacin la glucosa formada.
6. 6.1
Todos los reactivos deben ser de calidad analtica reconocida. El agua usada debe ser destilada o al menos de pureza equivalente. 6.1.1 Solucin etanlica de hidrxido de potasio,
Disuelva 50 g de hidrxido de potasio en 800 ml de etanol al 95 % (V/V), y diluya hasta 1 000 ml con el mismo etanol. 6.1.2 Etanol
Solucin de 300 g/L. 6.1.6 Soluciones para precipitacin de protenas Solucin I Disuelva 106 g de hexacianoferrato de potasio (II) trihidratado [K4 Fe(CN)6 3H2O] en agua, en un matraz volumtrico de 1 000 ml (vase el numeral 6.2.6), y diluya hasta la marca. Solucin II Disuelva 220 g de acetato de zinc dihidratado, [Zn(CH3COO)2 2H2O], en agua, en un matraz volumtrico de 1 000 ml (vase el numeral 6.2.6). Agregue 30 ml de cido actico glacial, y diluya hasta la marca con agua. 6.1.7 Reactivo de cobre
25 g de sulfato de cobre (II) pentahidratado (CuSO4 .5H2O) en 100 ml de agua. 144 g de carbonato de sodio (Na2 CO3) en 300 ml a 400 ml de agua a 50 C. 50 g de cido ctrico monohidratado (C6H8O7 H2O) en 50 ml de agua.
Adicione la solucin preparada en c) lenta y cuidadosamente, agitando continuamente, a la solucin preparada en b). Se contina agitando hasta que cese la emisin de dixido de carbono. Agregue la solucin preparada en a) a esta mezcla, agitando continuamente. Deje enfriar a temperatura ambiente, transfiera cuantitativamente a un matraz volumtrico de 1 000 ml aforado, diluya hasta la marca y filtre despus de 24 h. Es conveniente que el pH de la solucin despus de dilucin 1 + 49 con agua recin hervida y fra, sea de 10,0 0,1. 6.1.8 Solucin indicadora de almidn
Agregue una mezcla de 10 g de almidn soluble, 10 mg de yoduro de mercurio (como preservativo) y 30 ml de agua a 1 L de agua hirviendo. Contine hirviendo durante 3 min y deje enfriar. 6.1.9 Tiosulfato de sodio
Solucin volumtrica estndar de 0,1 N aproximadamente. 6.1.9.1 Preparacin Disuelva, en 1 000 ml de agua recin hervida y fra, 25 g de tiosulfato de sodio pentahidratado (Na2S2O3 5H2O) y agregue 0,2 g de carbonato de sodio decahidratado (Na2CO3 10 H2O). Deje reposar la solucin durante 1 d antes de estandarizarla. 6.1.9.2 Estandarizacin Pese 150,0 mg de yodato de potasio seco, disuelva en 25 ml de agua y agregue 2 g de yoduro de potasio y 10 ml de la solucin de cido clorhdrico (vase el numeral 6.1.3). Titule con la solucin de tiosulfato de sodio mientras agita continuamente. Adicione 1 ml de solucin indicadora de almidn (vase el numeral 6.1.8) cuando la solucin ha tomado un color amarillo plido, y contine la titulacin hasta que el color azul desaparezca. La normalidad N de la solucin de tiosulfato de sodio calcule entonces con la frmula:
N = en donde m V = = es la masa, en miligramos, de yodato de potasio. es el volumen, en mililitros, de la solucin de tiosulfato de sodio adicionada a la solucin de yodato de potasio.
214,0 = es la masa molecular realtiva del yodato de potasio 6
6m 214,0 V
Disuelva 10 g de yoduro de potasio en agua, y diluya hasta 100 ml. Almacene la solucin en una botella de color mbar. 6.1.11 cido clorhdrico, solucin al 25 % (m/m) (libre de sustancias oxidantes) Diluya 100 ml de cido clorhdrico concentrado, libre de sustancias oxidantes ( con 60 ml de agua. 6.2 EQUIPO Y MATERIALES
20
1,19 g/ml)
De 250 ml a 300 ml de capacidad, con cuello esmerilado, con un tapn de vidrio. 6.2.2 Papel de filtro plegado
Enfriado con aire, con junta cnica para ajustarlo en el erlenmeyer (vase el numeral 6.2.1). 6.2.4 Controladores para ebullicin
Con capacidad de 50 ml, que cumpla con la clase A de la NTC 2175 (ISO 385-1). 6.2.6 Matraces volumtricos
Con capacidad de 500 ml a 600 ml. 6.2.8 6.2.9 Bao de agua hirviendo. Medidor de pH.
6.2.10 Placa de calentamiento con un agujero circular Que se ajusta en la base del erlenmeyer (vase el numeral 6.2.1).
Tome una muestra representativa de 200 g como mnimo. Vase la NTC 5554
6.3.2 Almacene la muestra, si es necesario, de manera que se evite el deterioro y el cambio en la composicin. 6.4 6.4.1 PROCEDIMIENTO Preparacin de la muestra de ensayo
Se realiza de acuerdo a la NTC 5554. Guarde en un recipiente completamente lleno, cerrado hermticamente y almacene, si es necesario, de manera que se evite el deterioro y el cambio en la composicin. La muestra se analiza lo ms pronto posible despus de la homogeneizacin, pero siempre dentro de un lapso de 24 h. 6.4.2 Porcin de ensayo
En un vaso de precipitados de 500 ml a 600 ml (vase el numeral 6.2.7) pese 25 g de la muestra de ensayo (vase el numeral 6.3.1), con aproximacin a 0,1 g. Si la masa del almidn en esta porcin de ensayo se espera que sea mayor de 1 g, reduzca la masa de la porcin de ensayo de acuerdo con esto. 6.4.3 Aislamiento del almidn
Agregue 300 ml de la solucin de hidrxido de potasio etanlico caliente (vase el numeral 6.1.1), a la porcin de ensayo, mientras agite con una varilla de vidrio, luego tape el vaso de precipitados con un vidrio de reloj. Caliente en el bao de agua hirviendo (vase el numeral 6.2.8) durante 1 h, agitando ocasionalmente. Filtre la solucin a travs de un papel de filtro (vase el numeral 6.2.2) y luego lave el almidn en el papel de filtro usando etanol caliente (vase el numeral 6.1.2) y con la ayuda de una varilla de vidrio con punta de caucho. Se debe mantener hmedo el filtro.
NOTA En algunos casos, puede ser ms ventajoso el centrifugar en lugar de filtrar.
6.4.4
Hidrlisis
Despegue el precipitado del papel usando una varilla de vidrio. Abra un agujero en el papel de filtro y lave el almidn a travs de l usando 100 ml de solucin de cido clorhdrico caliente (vase el numeral 6.1.3), recoja en un vaso de precipitados. Tape el vaso de precipitado con un vidrio de reloj y sumerja en el bao de agua hirviendo durante 2,5 h, agite la solucin ocasionalmente con una varilla de vidrio. Enfre y neutralice la solucin aadiendo la solucin de hidrxido de sodio (vase el numeral 6.1.5), gota a gota, teniendo cuidado de que el pH no exceda de 6,5; esto se verifica con un medidor de pH (vase el numeral 6.2.9). Transfiera la mezcla cuantitativamente a un erlenmeyer de 200 ml, enjuagando con agua, y agregue 3 ml de la Solucin l (vase el numeral 6.1.6) y despus de mezclado, 3 ml de la Solucin II (vase el numeral 6.1.6) y diluya hasta la marca. Mezcle y pase por un papel de filtro plegado (vase el numeral 6.2.2). Inmediatamente antes de transferir con una pipeta una alcuota para la siguiente etapa, alcalinice el filtrado para la determinacin con azul de bromotimol (vase el numeral 6.1.4) aadiendo 1 gota 2 gotas de solucin de hidrxido de sodio (vase el numeral 6.1.5). 5
DETERMINACIN DE LA GLUCOSA
Si el contenido de almidn aproximado de la muestra es desconocido, se lleva a cabo un anlisis experimental preliminar para determinarlo. Diluya una alcuota (V2) del filtrado (vase el numeral 6.4.4) con agua hasta un volumen conocido (V3) de manera que 25 ml de la solucin diluida contengan preferiblemente de 40 mg a 50 mg de glucosa, pero en ningn caso ms de 60 mg. Mezcle y transfiera con una pipeta 25,0 ml de solucin diluida a un erlenmeyer (vase el numeral 6.1.5). Con la pipeta transfiera 25,0 ml del reactivo cobre (vase el numeral 6.1.7) al erlenmeyer y agregue algunos controladores de ebullicin (vase el numeral 6.2.4).
NOTA Es esencial que el volumen total del lquido en esta etapa sea siempre 50,0 ml.
Acople el condensador (vase el numeral 6.2.3) al erlenmeyer. Coloque este montaje sobre una malla metlica sobrepuesta a la placa de calentamiento (vase el numeral 6.2.10). Lleve el lquido a ebullicin, calentndolo con una llama de gas durante 2 min aproximadamente y contine hirviendo a fuego lento durante 10 min exactamente. Luego enfre rpidamente a temperatura ambiente. Retire el condensador y adicione 30 ml de solucin de yoduro de potasio (vase el numeral 6.1.10) y posteriormente, adicione 25 ml de solucin de cido clorhdrico, con cuidado, pero rpidamente (vase el numeral 6.1.11). Coloque un tapn al erlenmeyer hasta la titulacin. Titule el yodo liberado con la solucin estandarizada de tiosulfato de sodio (vase el numeral 6.1.9). Cuando la solucin ha tomado un color amarillo plido, se adicione, aproximadamente 1 ml de la solucin indicadora de almidn (vase el numeral 6.1.8) y contine la titulacin hasta que el color azul desaparezca. 6.4.6 DETERMINACIN DEL BLANCO
Lleve a cabo una determinacin del blanco, siguiendo el mismo procedimiento que en el numeral 6.4.5, tomando 25,0 ml de agua en lugar de 25,0 ml del filtrado diluido. 6.5 6.5.1 EXPRESIN DE LOS RESULTADOS Clculos
Calcule la diferencia entre los volmenes observados en las dos titulaciones, expresada en mililitros de solucin de tiosulfato de sodio de exactamente 0,1 N, de la frmula:
10 N x (V0 - V1) en donde N V0 V1 = es la normalidad de la solucin volumtrica normalizada de tiosulfato de sodio (vase el numeral 6.1.9.2). es el volumen, en mililitros, de la solucin estandarizada de tiosulfato de sodio (vase el numeral 6.1.9) necesaria para la determinacin del blanco (vase el numeral 6.4.6). es el volumen, en mililitros, de la solucin estandarizada de tiosulfato de sodio (vase el numeral 6.1.9) necesario para el filtrado diluido (vase el numeral 6.4.5).
en donde V2 V3 m0 m1 0,9 = = = = es el volumen, en mililitros, de la porcin alcuota no diluida (vase el numeral 6.4.5). es el volumen, en mililitros, de la porcin alcuota diluida (vase el numeral 6.4.5). es la masa, en gramos, de la porcin de ensayo (vase el numeral 6.4.5). es la masa, en miligramos, de glucosa, determinada de la expresin 10 N x (V0 - V1) por referencia a la Tabla 1 o a la Figura 1. es el factor de conversin de la masa de glucosa m1 a la correspondiente masa de almidn.
6.5.2.1 Repetibilidad La diferencia entre los resultados de dos determinaciones llevadas a cabo simultneamente o en rpida sucesin por el mismo analista, no debe ser superior a 0,2 g de almidn por 100 g de muestra. 6.5.2.2 Reproducibilidad La diferencia entre los resultados de dos determinaciones llevadas a cabo en dos laboratorios sobre la misma muestra, no debe exceder 0,3 g de almidn por 100 g de muestra.
Tabla 1. Conversin de mililitros de solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N a miligramos de glucosa 10 N x (V0 - V1) ml de solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 Masa de glucosa correspondiente m1 m1 mg mg 2,4 4,8 2,4 7,2 2,4 9,7 2,5 12,2 2,5 14,7 2,5 17,2 2,5 19,8 2,6 22,4 2,6 25,0 2,6 27,6 2,6 30,3 2,7 33,0 2,7 35,7 2,7 38,5 2,8 41,3 2,8 44,2 2,9 47,1 2,9 50,0 2,9 53,0 3,0 56,0 3,0 59,1 3,1 62,2 3,1
Figura 1. Grfica para conversin de mililitros de solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N a miligramos de glucosa
El informe de ensayo debe mostrar el mtodo usado y el resultado obtenido. Tambin debe mencionar cualquier condicin de operacin no especificada en la presente norma, o considerada como opcional, al igual que cualquier circunstancia que pueda haber influido en el resultado. El informe debe incluir todos los detalles necesarios para una identificacin completa de la muestra.
7.
MTODO ESPECTROFOTOMTRICO
Este mtodo consiste en la extraccin previa de los azcares y grasas presentes en la muestra, con posterior separacin del almidn, desarrollo de color con el reactivo antrona y determinacin espectrofotomtrica del contenido total de almidn presente en la muestra. 7.1 EQUIPOS Y MATERIALES
Material usual de laboratorio y en particular: 7.1.1 7.1.2 7.1.3 7.1.3 7.1.4 7.1.5 7.1.6 7.1.7 7.1.8 7.2 7.2.1 7.2.2 7.2.3 7.2.4 7.2.5 7.2.6 Tubo de ensayo Tubos de Centrifuga de 50 ml a 100 ml Matraces aforados de 100 ml y 200 ml Pipetas aforadas Balanza analtica Centrfuga 2 500 rpm Espectrofotmetro o Fotocolormetro. Bao de agua hirviendo Bao con hielo REACTIVOS Solucin de ter etlico - ter de petrleo (1:3) Alcohol etlico al 80 % (V/V) Solucin de cido perclrico (HClO4) al 52 % 9,10 - dihidro - 9 - oxoantraceno (C14H10O) (antrona), para anlisis Papel de filtro Almidn soluble
Disuelva 0,5 g de antrona (9,10 - dihidro - 9 - oxoantraceno) en 250 ml de cido sulfrico concentrado de 96 %. El reactivo sirve por 3 d a 4 d conservndolo a 0 C. 7.2.9 Solucin patrn de glucosa
Disolver 100 mg de glucosa anhidra en 100 ml de agua destilada. (Preferiblemente utilizar glucosa grado reactivo para inyectables, desecada a 105 C). 7.3 7.3.1 PROCEDIMIENTO Extraccin de grasa y azcares
7.3.1.1 Pese 2 g de muestra previamente molida y homogeneice en un tubo de centrfuga de 50 ml a 100 ml con tapa hermtica. 7.3.1.2 Aada 25 ml de la solucin ter etlico - ter de petrleo, tape y agite vigorosamente. 7.3.1.3 Centrifugue a 2 500 rpm durante 5 min. Decantar y descartar la solucin ter etlico ter de petrleo. 7.3.1.4 Aada 10 ml de alcohol etlico al 80 % calentado previamente a 80 C, agite y centrifugue a 2 500 rpm durante 5 min. 7.3.1.5 Descarte la solucin alcohlica y repita la extraccin con alcohol etlico calentado a 80 C. Elimine el alcohol. 7.4 7.4.1 bien. 7.4.2 7.4.3 7.4.4 7.4.5 EXTRACCIN DE ALMIDONES Aada 5 ml de agua destilada al residuo obtenido en la extraccin de azcares, agite
Aada 6,5 ml de la solucin de cido perclrico 52 %, mezcle y agite por 5 min. Deje en reposo por 15 min. Aada 20 ml de agua y centrifugue por 5 min. Transfiera la solucin sobrenadante a un matraz aforado de 100 ml.
7.4.6 Aada 5 ml de agua al residuo, mezcle bien, adicione 6,5 ml de solucin de cido perclrico y deje en reposo por 30 min. 7.4.7 Agite, lave el contenido total del tubo de centrfuga y transferiera al matraz aforado de 100 ml que contiene el primer extracto. Lleve a volumen y filtre a travs de papel de filtro. 7.5 DETERMINACIN DEL ALMIDN
7.5.1 Diluya 5 ml del filtrado en un matraz aforado de 200 ml y lleve a volumen con agua destilada. 10
Tome una alcuota de 5 ml en un tubo de ensayo y enfre en bao de agua con hielo.
7.5.3 Aada 10 ml de la solucin de antrona, teniendo cuidado con el desprendimiento de calor. 7.5.4 7.5.5 Mezcle bien y caliente por 7,5 min a 100 C. Retire el tubo de ensayo del bao agua hirviendo y enfre rpidamente a 25 C.
7.5.6 Determine la absorbancia a 630 nm dentro de los primeros 30 min, ya que el color es estable slo este perodo, pasados los cuales comienza su disminucin. Lea en la curva patrn la concentracin de dextrosa equivalente a la absorbancia medida. 7.6 PREPARACIN DE LA CURVA PATRN
7.6.1 Diluya a volumen 1 ml, 2 ml, 3 ml, y 4 ml de la solucin patrn de glucosa en una serie de matraces aforados de 200 ml. 7.6.2 Determine la absorbancia correspondiente a cada una de estas soluciones a 630 nm. Con las lecturas de absorbancia obtenidas para cada una de las soluciones elabore una curva patrn de valores de absorbancia contra miligramos de dextrosa. 7.7 EXPRESIN DE LOS RESULTADOS
Determine la concentracin de almidn en la muestra a partir de la curva patrn mediante la siguiente expresin:
mgAlmidn = (mg Dextrosa )(1,06 )
Los resultados se refieren a 100 g y se expresan como porcentaje de almidn, utilizando la siguiente expresin:
% almidn = mg almidn x 100 m
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Journal Association of Official Analytical Methods AOAC Chemists Vol. 49 N 2 Abril de 1966. Victor Villacechia. Tratado de Qumica Analtica Aplicada. Editorial Gustavo Gil S.A. Enrique Granados 45 Barcelona. Tomo 2 pg. 418 (1944). INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. Meat Products. Determination of Starch Content (Reference Method). Geneva: ISO, 1978. 5 p. (ISO 5554).
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