UNIVERSIDAD DE PLAYA ANCHA DE CIENCIAS DE LA EDUCACIN

Impacto a nivel celular y molecular de cultivo de especies transgnicas a gran escala de las especies endmicas
Valeria F. Abarcia, Catalina M. Contreras, Ayleen D. Espinoza Paulina A. Hernndez, Jos D. Infante, Maykol H. Rojas
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Universidad de Playa Ancha de Ciencias de la Educacin, Valparaso. Pedagoga en Biologa y Ciencias. Curso de Biologa Celular.

INFORMACIN
Inicio 15 de Marzo, 2011 Entrega 14 de Octubre, 2011

ABSTRACTO Durante los ltimos aos las investigaciones en el rea gentica han permitido elaborar nuevos productos alimenticios, de los cuales son posibles alimentar animales, sin tener conocimiento de las posibles consecuencias en su nivel metablico. Adems la insercin de la bioingeniera en la embriologa ha determinado caminos plausibles para la formacin y desarrollo de nuevos individuos animales con caractersticas genticamente modificadas, las que en copula con animales endmicos podran modificar en gran medida ciertas caractersticas fenotpicas a partir del nivel celular dando origen a estos cambios radicales a nivel de genotipo. Todo recae finalmente en la preocupacin que existe en el manejo de OMG.

Keywords: Transgnico Endemismo OMGs Genes Extincin Especies

1. Introduccin El trmino de Transgnico es utilizado para denominar a aquellos seres vivos que portan genes nuevos, obtenidos mediante la integracin de DNA forneo en el genoma propio, lo que le otorga caractersticas propias a este organismo transgnico. (1-6) La produccin de organismos modificados genticamente (OMG) o transgnicos tom partida cuando Donald Jones genetista estadounidense utiliz el mtodo de cruza doble para elaborar semillas de Zea mays (mazorca) (Fig. 1) a gran escala comercial, las cuales tenan como objetivo reemplazar las semillas naturales que se utilizaban en el cultivo de mazorcas en los campos norteamericanos. Tres dcadas ms tarde el producto del estudio de Jones revolucion el mercado agrcola de Norte Amrica, obteniendo mazorcas de buen color, sabor y calidad, las que tuvieron mayor demanda en cuanto a la venta de
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vegetales. Las Zea mays naturales en tanto disminuyeron sus ventas y la gente dio lugar a los productos transgnicos. (2) Otro mtodo de estudio fue la Tecnologa del DNA recombinante (rDNA), realizada por Stanley Cohen y Herbert Boyer la que permiti manipular los genes para as producir protenas extraas en un organismo y permitirle a este mejorar de cierta manera algunas caractersticas en particular. (3) Este ltimo evento dio inicio a la Biotecnologa Moderna y el ingreso al libre mercado de los Organismos Modificados Genticamente (OMG). En 1979 tras sintetizar la insulina humana por rDNA en la bacteria Escherichia Coli o simplemente por sustituir algunos aminocidos en la insulina del Sus scrofa domestica (cerdo comn) (4), se logr liberar al mercado la insulina transgnica humana la que tuvo por objetivo el servir de tratamiento para personas con Diabetes Mellitus. Todos los logros de la Biotecnologa en aquellas dcadas repuntaron en los primeros lugares del

Tabla 1. Especies vegetales de mayor demanda en el cultivo transgnicos y sus modificaciones. Nmero de Ensayos de Campo * Rasgo Tolerancia a herbicidas Mejora de Calidad Resistencia a Virus Resistencia a insectos (Bt) Gen Marcador Resistencia a Hongos Rasgos Mltiples Resistencia Bacteriana Sin Especificar Patata 16 (5) 31 (9) 60 (12) 34 (4) 23 (7) 9 (7) 8 (7) 9 (3) 3 Colza de semilla oleaginosa 94 (7) 57 (5) 2 (2) 3 (3) 17 (15) 5 (4) 2 (1) 1 (1) 1 Tabaco 29 (6) 13 (4) 24 (7) 19 (3) 28 (9) 9 (4) 4 (3) 5 Maz 54 (3) 15 (2) 10 (4) 24 (2) 8 (4) 2 (1) Tomate 21 (5) 39 (3) 20 (9) 16 (1) 4 (3)

* El nmero de las diferentes propiedades introducidas en el cultivo se muestran en parntesis. Bacillus thurigiensis = Bt.

campo cientfico, pero los problemas se generaron tras la manipulacin de organismos en empresas multinacionales las cuales comenzaron a comercializar productos tolerantes a herbicidas y a insectos que son los ms demandados contemporneamente, afectando as gravemente diversos ecosistemas y produciendo un desequilibrio en la interaccin que mantienen las especies endmicas. (5) En tanto a nivel celular, la interaccin de un nuevo compuesto dentro de una clula, como es el gen que contiene la nueva informacin gentica, ocurre de forma no controlada. Esto puede alterar los equilibrios metablicos de las clulas, generndose nuevos compuestos y en el caso de las plantas variando el contenido nutritivo del alimento modificado. Debido a esto para integrar a los OMG en el mercado se requiere probar la bioequivalencia entre la forma genticamente modificada y su contraparte convencional. Esto permite la identificacin de posibles diferencias sustanciales entre una y otra variante a partir de la comparacin entre: macronutrientes, minerales, vitaminas, perfil de aminocidos, cidos grasos, antinutrientes, metabolitos secundarios entre otros parmetros que abarcan desde los criterios de seguridad ambiental, agronmicos, estudios toxicolgicos, alergnicos y otros que permiten demostrar de forma precisa la inocuidad y calidad nutricional del producto animal o vegetal genticamente modificado. El impacto ms fuerte de los OMG recae en los productos que elaboran los laboratorios de las multinacionales a partir de
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mezclas entre especies transgnicas y especies no modificadas, es por ello que el entrecruzamiento entre estas dos especies podra llevar en gran parte a la desaparicin de las especies endmicas de cada pas. (6)

Fig. 1 Muestra de Zea mays. (Corn).

2. Especies, Mtodos y Tcnicas Especies como blanco de estudio Considerando que la cepa BALB/c (ratn albino) es la ms utilizada en los estudios que hacen referencia a los OMG, no es la nica especie involucrada con los respectivos experimentos, cada da la lista suma ms especies incorporadas a la investigacin, desde especies invertebradas (areos, terrestres o marinos) hasta mamferos conocidos como lo es el caso de los cinco cerdos clnicos o el tan conocido caso de Dolly la primera oveja transgnica. Sin embargo, ello no da

cuenta alguna de que la transgnesis se hubiese utilizado en grandes especies de mamferos, como cetceos o paquidermos, aunque grupos de investigacin han dado a conocer su inters por resucitar una especie extinta y an ms, esta misma sera endmica, se trata de el Tilacino tambin llamado Lobo de Tasmania o Lobo Marsupial, utilizando como animal base para el estudio una especie totalmente distinta, el Dingo, una especie de perro salvaje caracterstico de Australia, como donador de vulos dentro de cuyo ncleo se insertara el material gentico del animal extinto, los resultados son inesperados. (1) Los animales modificados conforman cierta parte de los estudios de OMG, otra gran parte de la investigacin es la que se realiza con vegetales. Hasta comienzos del siglo XXI se haban realizado en el mundo, unos 3.650 experimentos de campo con cultivos transgnicos lo que dieron a conocer resultados positivos. (7) En la revisin de los estudios de campo que se presentan en la Tabla 1 (8) se puede observar las plantas ms utilizadas, de las cuales un grupo mayor se modifican para que estas mismas presenten la tolerancia a los diferentes herbicidas, lo que indica un patrn mundial. Los genes para la tolerancia a herbicidas fueron los primeros y ms fciles en ser transferidos con xito al interior de las plantas de cultivo, lo que conlleva a los grupos de investigacin y a las multinacionales a desarrollar estudios con un alto porcentaje de vegetales, frutas, comida de animales y plantas de uso no alimentario (manzana, zanahoria, coliflor, achicoria, lechuga, maz, meln, patata, calabaza, fresa, tomate, trigo, vino, esprrago, pepino, kiwi, papaya, arroz, ciruelo, nogal, alfalfa, remolacha, algodn, colza de semilla oleaginosa, soja, azcar de remolacha, girasol, tabaco, lino) que son los que dan mejor sustento econmico, en tanto en menor cantidad se llevan a cabo estudios realizados con flores y especies vegetales mas grandes (crisantemo, petunia, calndula, clavel, gerbera, abedul, eucalipto, lamo) que presentan menor demanda. (9) Sustitucin de especies endmicas Ahora si bien ya se han enmarcado cuales son las especies, tanto animales como vegetales ms
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utilizadas en la transgnesis, es debido mencionar la causa ms importante por la cual se crean estos OMG. La causa radica en las especies endmicas, ya que estas carecen de lo que los ecologistas denominan como fitness, esto significa que las especies endmicas no tienen propiedades que las hagan ser capaces de asegurar su mantenimiento o incluso crecer en biomasa bajo condiciones ambientales estables, en simples palabras, las especies endmicas carecen de la capacidad de adaptarse a ambientes diferentes a los habituales. (10) Un caso comn se observa en las fresas en donde el factor que imposibilita el cultivo de estas es la temperatura en que son cultivadas, ya que pequeos incrementos de este parmetro implican apreciables aumentos de los procesos de deterioro del fruto y a la inversa. Es por esto mismo que solo se encuentran fresas naturales en pocas y regiones un tanto clidas, lo cual implica a que ciertos grupos de investigacin desarrollen fresas transgnicas para su comercializacin en pocas fras o en regiones en donde la temperatura es notoriamente ms baja. Para lograr esto la modificacin consta en insertar genes que son responsables de la sntesis de protenas anticongelantes, procedentes de un pez del rtico, especficamente la Platija rtica. Siendo as que las especies endmicas se ven sustituidas en su mayora por los OMG. (11-12) Tcnicas de obtencin de plantas transgnicas Es sorprendente que las plantas sean ms fciles de modificar por ingeniera gentica que la mayora de los animales. Es por lo mismo que las tcnicas de manipulacin gentica han ido en aumento, dos de las ms destacadas es la transferencia de genes mediados por el patgeno A. tumerfaciens y el disparo de partculas o Biolstica. En la primera tcnica el vector empleado con mayor frecuencia para introducir genes en clulas vegetales es un plsmido denominado plsmido Ti, que proviene de la bacteria de suelo Agrobacterium tumefaciens. Este plsmido integra un segmento de su DNA, conocido como T DNA, en el DNA cromosmico de las clulas de la planta husped. Para mejorar el vector, los investigadores trabajan con una versin del plsmido que no produce enfermedades, puesto

que la versin de tipo salvaje si lo hace. Los cientficos pueden introducir plsmidos Ti recombinantes en las clulas vegetales mediante electroporacin. En forma alternativa, el plsmido recombinante puede volver a insertarse en Agrobacterium, luego las plantas o las clulas vegetales en cultivo susceptibles son infectadas con las bacterias que contienen el plsmido recombinante. (13) En la segunda tcnica, en un proyectil se sita una carga de microbolitas de oro o tungsteno que han absorbido, en solucin adecuada, las cadenitas de DNA que se requieren transferir. Al disparar las bolitas penetran en las clulas y en los ncleos: la integracin del DNA proyectado en el cromosoma receptor es cuestin de azar, afinndose el resultado a base de ensayo y error. As pueden transformar tejidos (evitando la especificidad de Agrobacterium por parte de las dicotiledneas) o meristemos, tanto en cultivo como en la misma planta si se puede, en cuyo caso no necesitara regenerar nada mediante cultivo de tejidos. Originalmente el proyectil era una autntica bala; en la actualidad, el disparo se realiza con helio a presin. De ah se ha creado la palabra de biolstica para la transformacin por caon de partculas. (14) Tcnicas de obtencin de animales transgnicos La evidencia de varios estudios ha destacado dos tcnicas fundamentales para la obtencin de animales transgnicos: la microinyeccin de DNA a huevos fecundados y la introduccin de DNA a embrioblastos del blastocito. En la primera tcnica, se selecciona un gen de origen forneo se introduce por microinyeccin en el ncleo de un huevo que se acaba de fecundar. Esta incorporacin de un gen se produce en uno de los dos proncleos antes de que estos se fusionen. El huevo genticamente modificado se vuelve a implantar en el oviducto o en el tero de una hembra portadora. Solo un dbil porcentaje de huevos sometidos a una microinyeccin dar lugar a individuos transgnicos. Generalmente la transferencia no se realiza con el gen entero, sino con un cDNA. Es, por tanto, necesario aadir secuencias reguladoras, como por ejemplo un promotor delante y seales de fin de transcripcin detrs. Lo que se busca entonces al conseguir
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transferir el gen antes de la primera divisin es que este pueda presentarse en todas las clulas del organismo, incluyendo las clulas sexuales. (15) Por otra parte la segunda tcnica es resulta ser un mtodo alternativo a la microinyeccin que produce transgnicos integrales a partir de quimeras transgnicas. En donde se aislan los blastocitos del tero materno entre 3,5 y 4,5 das despus de la cpula. Del blastocito se aslan clulas troncales totipotentes (embioblastos y blastmeros), que se cultivan sobre una capa de clulas que actan de soporte. La introduccin del DNA puede realizarse por infeccin con retrovirus u otros tipos de transfeccin como la mediada por lisosomas. Las clulas troncales manipuladas son reinsertadas en un nuevo blastocito y ste en una madre pseudopreada por tratamiento hormonal y apareamiento con machos vasectomizados. Al cabo de unos 18 das aparecer la GO, cuyos individuos transgnicos sern todos quimeras, que por retrocruzamiento con los padres darn lugar a la F, que a su vez se analizar para detectar la presencia de hemicigotos transgnicos. Un cruzamiento entre hermanos F, dar lugar a homocigotos transgnicos que permitirn establecer una lnea pura. (16) 3. Riesgos y medios de proliferacin Los riesgos sanitarios a largo plazo de los OMG presentes en la alimentacin de las personas o en la de los animales, sumando a ello la interaccin de los animales con las plantas y ms an en la interaccin entre especies vegetales cuyos productos consumimos, no se estn evaluando correctamente y su alcance sigue siendo desconocido. En 2007 un grupo de investigacin del Departamento de Ingeniera Gentica de la Universidad de Caen, Francia, present un estudio el cual demostr que las ratas de laboratorio alimentadas con un maz transgnico autorizado para consumo humano y animal, el maz 863 de la transnacional Monsanto, presentan signos de toxicidad en el sistema renal y heptico. (17) Hay muchas cosas que an se ignoran sobre los cultivos transgnicos, aun en el caso de los cultivos que ya estn en el mercado desde hace unos aos. Esto se debe a que los genes insertados pueden interrumpir el funcionamiento de los

genes propios del organismo, por ejemplo un vegetal, en donde los transgenes pueden ser inestables en un nuevo entorno celular, o desarrollar una funcin diferente a lo esperado. (18) Riesgo por ingesta de DNA forneo Por primera vez se comprob mediante algunos estudios que el DNA transgnico al ser ingerido por medio de alimentos, se puede recombinar en el estmago y el intestino, ya sea de humanos o animales, produciendo que las bacterias de la flora intestinal adquieran propiedades de las plantas transgnicas o de los productos alimenticios provenientes de animales transgnicos, una caracterstica a resaltar es la resistencia a los antibiticos. (19) Los cientficos Fares y Sayed estudiaron el consumo de patatas con gen de una bacteria que les confera resistencia a herbicidas. Se encontraron escasos cambios en la estructura del leon de ratas, en comparacin con los animales alimentados con patatas no modificadas. Este resultado fue considerado como el producto de la expresin del gen, por lo que los autores recomendaron llevar a cabo cuidadosos exmenes de todos los posibles efectos de los OMG antes de su comercializacin. (20) En tanto en los estudios realizados por Brake y Vlachos (21) no se encontraron diferencias significativas en los ndices de supervivencia ni en los incrementos y porcentajes de peso en pollos alimentados con maz transgnico en relacin a los controles. El estudio de Tutelian (22), que se bas en ratas alimentadas con soya modificada, encontr una modificacin de la membrana celular y la actividad enzimtica de los hepatocitos. Riesgo por reproduccin transgnico-natural La reproduccin de un ratn quimera con animales normales resultar en alguna descendencia que son individuos hemicigotas para el gen extrao. La reproduccin de estos individuos hemicigotos producir ratones homocigotos para el gen original extrao que fue insertado en clulas de colonias embrionarias. El apareamiento de ratones quimricos produce hembras portadoras de la mutacin HPTR ligada al
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X. Cuando estas hembras portadoras fueron apareadas con machos normales, la mitad de los machos descendientes fueron deficientes para la hipoxantina fosforibosiltransferasa, que es una enzima fundamental en la biosntesis de purina, as como en las funciones del sistema nervioso central. (23) Evidenciando que si una especie de ratn endmico se cruzase con una hembra quimera la descendencia sera inestable, debido a los problemas que ocasiona la ausencia de la mencionada enzima, provocando un desequilibro a nivel de ecosistemas. Hans-Hinrich Kaatz, bilogo de University of Jena, ha dado indicios mediante pruebas experimentales de que genes sintticos en plantas transgnicas se han trasladado por el polen a bacterias y levaduras que viven en el intestino de larvas de abejas. Lo que indicara que los genes de las nuevas construcciones genticas introducidos en las cosechas transgnicas y otros organismos transgnicos, pueden extenderse no solo mediante polinizacin, cruza ordinaria, o por el cruce de especies estrechamente relacionadas, sino por lo genes sintticos que invaden los genomas de especies con la que no tienen relacin alguna, incluso en los microorganismos que viven en el intestino de animales que se alimentan de material transgnico. Adicionando tambin el riesgo de la transferencia horizontal de genes a especies no relacionadas son inherentes a la Ingeniera Gentica. Los genes y las construcciones genticas creadas por la Ingeniera Gentica nunca han existido en los mil millones de aos de evolucin. La consecuencia de esta transferencia de material gentico que es producida a partir de bacterias, virus y otros parsitos genticos que causan enfermedades, y resistencia de genes a los antibiticos, es cruzar la barrera de las especies e invadir genomas. La proliferacin de tales genes y construcciones tiene el potencial de hacer intratables las enfermedades infecciosas y crear nuevos virus y bacterias que causan enfermedades, inhibiendo el uso de medicamentos especficos para el tratamiento de estas mismas. (24) 4. Referencias
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