INGENIERA GENTICA

Se trata de una serie de tcnicas que se basan en la introduccin de genes en el genoma de un individuo que no los presente. Estas tcnicas fundamentalmente son: a) Transferencia de genes de una especie a otra: Hay tcnicas por las que se pueden transferir genes de una especie a otra. As, mediante un vector apropiado, que puede ser un plsmido o un virus, se puede introducir un gen de una especie en otra diferente. Con estas tcnicas se pueden pasar genes de eucariotas a eucariotas, de eucariotas a procariotas y de procariotas a procariotas. Por ejemplo: se puede introducir en bacterias el gen que produce la insulina humana. De esta manera las bacterias producen fcilmente y en abundancia esta hormona. b) Tcnica de la PCR: Tambin existen mtodos para amplificar una determinada secuencia o fragmento de ADN. La ms conocida es la tcnica de la reaccin en cadena de la polimerasa PCR. As se consigue multiplicar un determinado fragmento de ADN millones de veces para poder tener una cantidad suficiente para estudiarlo. Sin esta tcnica seran imposibles los estudios de ADN para el reconocimiento de la paternidad o en caso de delito, pues la cantidad de ADN presente en las clulas es tan pequea, del orden de picogramos, que se necesitara una gran cantidad de material celular para tener una cantidad apreciable de ADN. Todo esto ha servido para el desarrollo de la ingeniera gentica, ya que aparte de conocer los aspectos moleculares ms ntimos de la actividad biolgica, se han encontrado numerosas aplicaciones en distintos campos de la industria, la medicina, la farmacologa, la agricultura, la ganadera, etc.

LA INGENIERA GENTICA Y LA TERAPIA DE ENFERMEDADES HUMANAS Hay en los humanos numerosas enfermedades de carcter hereditario o relacionadas con alteraciones genticas. En la mayora de los casos ni siquiera se han identificado los genes responsables y en muy pocos casos se dispone del mecanismo para incorporar el gen correcto a las clulas del individuo afectado. No obstante existen varias lneas de investigacin que se basan en: 1) Transferir un gen humano normal a una bacteria, obteniendo de ella la sustancia necesaria para luego inocularla en el enfermo. 2) Transferir un gen correcto a las clulas de una persona: terapia de clulas somticas. 3) En el futuro, si el gen se hiciera llegar a un vulo, un espermatozoide o el zigoto, todas las clulas del individuo tendran el gen normal: Terapia de clulas germinales (no es legal). Todas estas terapias estn sometidas a cambios muy rpidos. Veamos algunos ejemplos en los que ya en la actualidad se emplean estas tcnicas o estn en fase de ensayo o investigacin. 1) Sustancias humanas producidas por bacterias En la actualidad, una de las tcnicas de ingeniera gentica ms empleada consiste en la produccin de sustancias humanas por bacterias a las que se les ha introducido el gen correspondiente. Entre las sustancias que ya se obtienen mediante esta tcnica estn: * La insulina.- Es una hormona formada por dos pptidos. El pptido A (21 aminocido) y el pptido B (30 aminocidos). Los genes que codifican ambos pptidos se aslan de clulas humanas y se introducen en estirpes bacterianas diferentes. Cada clon sintetiza uno de los polipptidos. stos se aslan, se purifican, se activan los grupos -SH para que se unan los dos pptidos y obtenemos insulina humana. * La hormona del crecimiento.- Es un polipptido de 191 aminocidos. Se utiliza una tcnica similar al ejemplo anterior. * El interfern.- Es una protena de peso molecular entre 16.000 y 20.000, con una cadena glucosdica. En la actualidad se ha conseguido aislar el ADN responsable del interfern en leucocitos y linfoblastos infectados. El problema es que se obtiene una produccin baja a causa de la inestabilidad de la molcula. * El factor VIII de la coagulacin.

2) La ingeniera gentica en humanos Esta tcnica se basa en la introduccin de un gen correcto en las clulas humanas para sustituir un gen deficiente. Algunos casos en los que esta tcnica est en estudio o en proceso de ensayo son: * La Talasemia.- Grupo de enfermedades relacionadas con la presencia de hemoglobina distinta de la normal. Tratamiento: retirar clulas de la mdula sea del enfermo, introducir en ellas el gen correcto mediante un virus, volverlas al torrente circulatorio. Dificultades: - La seleccin de las clulas que producen hemoglobina entre todas las clulas de la mdula, es difcil. - Los genes introducidos se expresan poco. - Las alteraciones en su manifestacin son peligrosas. * La carencia de la enzima Adenosin Desaminasa (ADA).- Fallo en los leucocitos. Enfermedad de los nios burbuja o inmunodeficiencia combinada grave (SCID). - Tratamiento: semejante al de la Talasemia.

3) Enfermedades sometidas a ensayos clnicos de terapia gnica * Cncer: melanoma, rin, ovario, neuroblastoma, garganta, pulmn, cerebro, hgado, mama, colon, prstata, leucemia, linfoma... * Fibrosis qustica * Hemofilia * Artritis reumatoide LA INGENIERA GENTICA Y LA PRODUCCIN AGRCOLA Y ANIMAL Llamamos organismos transgnicos a aquellos que se desarrollan a partir de una clula en la que se han introducido genes extraos. El objetivo de estas tcnicas es obtener caractersticas "tiles" de otros organismos. Estas caractersticas pueden ser muy variadas. Fue una tcnica difcil por la impermeabilidad de las membranas de las clulas eucariotas animales y por la pared celulsica de las vegetales, aunque cada vez hay mejores tcnicas para resolver estos problemas. La tcnica ms empleada es la de microinyeccin (introduccin de ADN mediante microjeringa y micromanipulador).

1) Ejemplos del empleo de estas tcnicas en la produccin agrcola: Las tcnicas ms empleadas en las plantas son: * Uso de pistolas con microbalas de metal recubiertas de ADN. * Uso como vector de un plsmido de una bacteria simbionte que produce tumores.

Mediante estas tcnicas se han obtenido o se est en vas de obtener: a) Variedades transgnicas del maz que:

* Resisten heladas.- incorporacin de un gen de un pez resistente al fro. * Resisten plagas.- incorporacin de un gen del trigo. * Resisten herbicidas.- incorporacin de un gen bacteriano. b) Variedades transgnicas del trigo que: * Son ms nutritivas. * Resistentes a plagas y herbicidas. Incorporacin de varios genes de insectos y bacterias. c) Variedades de tomate que maduran ms lentamente por anulacin de un gen que regula la maduracin por haberlo introducido en sentido contrario, se producen dos ARNm complementarios que hibridan y no se traducen. d) Plantas de tabaco transgnicas: Se est trabajando en la insercin de "genes nif" que posibilitaran el aprovechamiento directo del N2 atmosfrico. Se usa esta planta porque es una planta muy maleable.

2) Ejemplos del empleo de estas tcnicas en la produccin animal: En los animales estas tcnicas se emplean ms en peces porque la fecundacin es externa. Las tcnicas ms comunes son: * La microinyeccin de los genes en el zigoto. * Campos elctricos que hacen permeable la membrana y permiten la entrada de material gentico. Mediante estas tcnicas se han obtenido o se est en vas de obtener: * Carpas transgnicas que crecen de un 20 a un 40% ms rpido. Se consiguen introduciendo el gen de la hormona del crecimiento de la trucha arco iris. Se estimula aadiendo Cinc a la dieta. * Salmones transgnicos.- Resisten mejor las temperaturas bajas. Se consigue por incorporacin de un gen de una especie de platija del rtico. * En mamferos se han conseguido ratones que carecan de la hormona del crecimiento por mutacin del gen productor de la misma por introduccin en el zigoto de estos ratones del gen de la hormona del crecimiento de la rata. Los ratones transgnicos conseguidos producen 800 veces ms hormona que los normales. El gen de la rata no se introduce en el lugar propio, sino en otro.

RIESGOS Y ASPECTOS TICOS DE LAS TCNICAS DE INGENIERA GENTICA * BIOSANITARIOS.- La mayora de los productos se destinan al consumo humano y an no se puede afirmar que no sean perjudiciales para la salud. * BIOTICO.- Hay derecho a monopolizar el uso de la informacin gentica presente en la naturaleza? * BIOTECNOLGICO.- Qu pasara si el material gentico de un virus tumoral terminara formando parte del genoma de alguna bacteria simbionte del ser humano? Y si los genes que permiten la resistencia a los antibiticos entraran en el genoma de los patgenos? O si los microorganismos inocuos adquirieran los genes para producir toxinas potentes como la difteria, el clera, el botulismo o el ttanos? EL PROYECTO GENOMA HUMANO
(Fuente Bibliogrfica: Ministerio de Educacin de Argentina)

La magnitud del Proyecto Genoma Humano promete revolucionar el futuro de una manera tan profunda que algunos han comenzado a nombrar a este siglo como el siglo de la biologa. Los beneficios abarcan reas tan diversas como la medicina, la ecologa, la agricultura, la evolucin y la antropologa. Y entre las reas donde ms impacto tiene en la investigacin bsica se encuentran la ingeniera, la computacin, la

matemtica, la sociologa, la tica, el derecho, la educacin, la medicina nuclear, la farmacutica e incluso la educacin. Los objetivos perseguidos con el Proyecto Genoma Humano son mltiples: Identificar los aproximadamente 30.000 genes en el ADN humano, determinar la secuencia de los tres billones de bases, guardar la informacin generada en bases de datos, mejorar las herramientas de anlisis de datos, transferir tecnologas al sector privado, analizar los aspectos ticos, legales, y sociales aparejados al proyecto,

Los dos ltimos objetivos distinguen el Proyecto Genoma Humano del resto de las investigaciones cientficas. En efecto, ninguno despert como este tanto inters en la poblacin por la gran controversia generada en torno a si se puede patentar el genoma o no, si es un patrimonio de la humanidad o si pertenece al que lo secuenci primero. La disputa no es trivial. De hecho, fue una de las ms grandes peleas que se generaron entre el consorcio privado encarnado en Craig Venter, un bilogo y empresario estadounidense (presidente de Celera Genomics) y Francis Collins, quien era el director del Proyecto Genoma Humano, financiado por los gobiernos y fundaciones. Dicha pelea termin cuando los gobernantes de los dos pases ms fuertes (Estados Unidos y el Reino Unido) se pusieron de acuerdo en definir al genoma humano como de dominio pblico. En junio de 2000, Francis Collins, Venter, Bill Clinton (el entonces presidente de los Estados Unidos) y Tony Blair (el entonces primer ministro britnico) se reunieron para anunciar que ya se contaba con un primer borrador del genoma. El Proyecto Genoma Humano concluy en abril de 2003, dos aos antes de lo esperado, justo a tiempo para la celebracin de los 50 aos del descubrimiento de la estructura del ADN. Luego de concluido el anlisis de todo el genoma, en 2005, la cifra final de genes result de alrededor 28.000, muy cercana a la de muchos organismos inferiores (y muy inferior a la cifra que se supona en un comienzo). Los conocimientos generados a partir del genoma humano y el uso de las herramientas del ADN recombinante permitiran desarrollar tcnicas de diagnstico prematuro para diferentes enfermedades, as como la prediccin de posibles sndromes relacionados con predisposiciones genticas. Esto provee una herramienta eficaz para la cura o el tratamiento dirigido especficamente a la causa de la enfermedad. El descubrimiento de los diferentes genomas permitir, en un futuro, disear frmacos a medida, no slo para enfermedades especficas, sino para enfermos especficos ya que tal vez se logre disear drogas que reconozcan epitopes (las mnimas unidades de antgenos). La biotecnologa dejar de optimizar procesos, y de redisear rutas de obtencin de protenas, para pasar al diseo de novo de enzimas, protenas, o frmacos. Aun cuando los pronsticos son sumamente alentadores, hay tambin un lado oscuro. La informacin generada podra ser usada para la discriminacin de seres humanos por tener en sus genes predisposicin a alguna enfermedad. El aspecto tico es slo uno de entre muchos otros que trae aparejado el Proyecto Genoma Humano. As como el microscopio que descrito al comienzo revel un mundo desconocido para la gente del siglo XVII, el Proyecto Genoma Humano abre nuevas ramas del conocimiento y genera una multitud de preguntas que, por su complejidad, tal vez ni nuestros alumnos ni sus hijos puedan llegar a contestar.