UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO CAMPUS DE SINOP INSTITUTO DE CINCIAS AGRRIAS E AMBIENTAIS CURSO DE AGRONOMIA

EFEITO DE BIOFORM I E II NO CRESCIMENTO MICELIAL IN VITRO DE Rhizoctonia sp. E NO CONTROLE DE QUEIMA DAS FOLHAS (Alternaria dauci) EM CENOURA

ANDERSON DALMOLIN

SINOP MT

Outubro 2012

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO CAMPUS DE SINOP INSTITUTO DE CINCIAS AGRRIAS E AMBIENTAIS CURSO DE AGRONOMIA

EFEITO DE BIOFORM I E II NO CRESCIMENTO MICELIAL IN VITRO DE Rhizoctonia sp. E NO CONTROLE DE QUEIMA DAS FOLHAS (Alternaria dauci) EM CENOURA

ANDERSON DALMOLIN ORIENTADORA: PROF Dr SOLANGE MARIA BONALDO COORIENTADOR: PROF. ROGELHO ALEXANDRE TRENTO

Trabalho de Concluso de Curso (TCC) apresentado ao Curso de Agronomia do ICAA/CUS/UFMT, como parte das exigncias para a obteno do Grau de Bacharel em Agronomia.

SINOP MT

Outubro 2012
Agradeo a Deus pela vida, Aos meus pais Jucelino Dalmolin e Irene Vanzella Dalmolin, pelo apoio e incentivo desde o princpio, por terem me educado e compartilhado de suas experincias para contribuir com minha vida. DEDICO.

A minha namorada Carla Regina Neves de Oliveira, pelo apoio, carinho, ateno, incentivo e principalmente amor. A meus colegas Morenci E. S. Ecco, Alana S. Ribeiro e meu irmo Jeferson Dalmolin pela ajuda e companheirismo. A Dra. Prof. Solange Maria Bonaldo pela ateno, auxlio e pacincia. Fapemat pelo auxlio financeiro PROCESSO N 449586/2009.

4 OFEREO.

SUMRIO
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RESUMO E PALAVRAS-CHAVE................................................................................................ ABSTRACT E KEYWORDS............................................................................................................ 1. INTRODUO................................................................................................................................... 2. REFERENCIAL TERICO.......................................................................................................... 2.1 Cenoura (Daucus carota).......................................................................................................... 2.1.1 Queima das folhas por Alternaria..................................................................................... 2.1.2 Sintomas ........................................................................................................................................ 2.1.3 Controle........................................................................................................................................... 2.1.4 Alternaria sp.................................................................................................................................. 2.2 Rhizoctonia sp. .............................................................................................................................. 2.2.1 Damping-off................................................................................................................................... 2.2.2 Mela e queima das folhas..................................................................................................... 2.3 Biofertilizantes.................................................................................................................................. 2.3.1 Mecanismos de resistncia a patgenos..................................................................... 3. MATERIAIS E MTODOS.......................................................................................................... 3.1 Efeitos dos biofertilizantes, Bioform I e II, no crescimento micelial de Rhizoctonia sp......................................................................................................................................... 3.2. Efeito do biofertilizante a base de teca (Tectona grandis),- Bioform II, no controle de queima das folhas, no crescimento, produo de massa fresca e seca da parte area, e massa fresca de razes de cenoura........................................................................................................................................................ 3.2.1. Avaliao do efeito do biofertilizante, Bioform II, isolado ou em associao com silcio no desenvolvimentocrescimento, na produo de massa fresca e seca da parte area, e massa fresca de razes de cenoura.
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4. RESULTADOS E DISCUSSES............................................................................................ 4.1 Crescimento micelial de Rhizoctonia sp. in vitro.......................................................... 4.2. Efeito do biofertilizante a base de Teca, - Bioform II, no desenvolvimento da cultura de cenoura e no controle de queima das folhas............................................ 5. CONCLUSES.................................................................................................................................. 6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS....................................................................................

RESUMO Com intuito de reduzir o uso de agroqumicos, os biofertilizantes vm se tornando fonte alternativa de controle, acrescentando no somente a agricultura orgnica, mas tambm aos grandes sistemas produtivos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos dos biofertilizantes produzidos a partir de folhas de Eucalipto (Corymbia citriodora) - Bioform I, e folhas de Teca (Tectona grandis) -, Bioform II, na inibio do crescimento micelial de Rhizoctonia sp., in vitro; bem como avaliao em campo do Bioform II, no desenvolvimento da cultura e no controle de queima das folhas (Alternaria dauci), em cenoura. Em laboratrio avaliou-se o efeito dos biofertilizantes, nas concentraes de 10, 25, 40 e 60%, sobre trs isolados de Rhizoctonia sp. quanto porcentagem de inibio do crescimento micelial e o ndice de velocidade de crescimento micelial (IVCM). Em campo foi avaliado a altura das plantas (cm) e, o percentual de doena provocada por Alternaria dauci (Queima das folhas) nas concentraes de 0, 10, 25, 40 e 60% de Bioform II e, fungicida (Opera, 0,6 L.ha-1) e Bioform II a 25% com adio de Sili-k, nas concentraes de 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 L.ha -1. Com relao ao Bioform I, observou-se inibio de 11, 13, 24 e 38% nas concentraes 10, 25, 40 e 60% respectivamente, no crescimento micelial para o isolado 1; 63 e 75% de inibio nas concentraes de 40 e 60% para o isolado 2 e, 2% de inibio na concentrao de 60% para o isolado 3. Na presena do Bioform II, houve inibio de 15% em relao a concentrao de 60% para o isolado 1, porm para os isolados 2 e 3 no houve inibio de crescimento. Tambm houve efeito positivo no desenvolvimento, produtividade das plantas de cenoura e controle para a queima das folhas, em funo da aplicao do Bioform II. Palavras chave: Biofertilizante, Queima das folhas, Cenoura, Rhizoctonia sp proteo, fungitoxicidade, induo de resistncia .

ABSTRACT In order to reduce the use of pesticides,thepesticides, the biofertilizers has become an alternative source control, adding not only organic farming but also large production systems. This study aimed to evaluate the effects of biofertilizers produced from teak leaves (Tectona grandis) ,- Bioform I, and Eucalyptus (Corymbia citriodora) -, Bioform II, inhibition of mycelial growth of Rhizoctonia sp., iIn vitro, as well as field evaluation of Bioform II in vegetative development and control of leaf blight (Alternaria dauci) in carrot. In the laboratory it was evaluated the effect of biofertilizer at concentrations of 10, 25, 40 and 60% isolate Rhizoctonia sp. and, the percentage inhibition of mycelial growth and the rate of mycelial growth rates (IVCM). In the field was evaluated plant height (cm) and the percentage of disease caused by Alternaria dauci (Leaf blight) at concentrations of 0, 10, 25, 40 and 60% of a biofertilizer Teak and fungicide (Opera, 0.6 L.ha-1) and fertilizer to 25% with the addition of Sili-k at concentrations of 0.5, 1.0, 2.0, 3.0 L.ha-1. There was inhibition of 11, 13, 24 and 38% at concentrations of 10, 25, 40 and 60% respectively in the mycelial growth for isolates of Rhizoctonia 1, 63 and 75% at concentrations of 40 and 60% for isolate 2:02 % at a concentration of 60% for strain 3, both Rhizoctonia sp. with respect to the Bioform II, in the presence of Bioform I, there was 15% inhibition against concentration of 60% for isolate 1, 2 and 3 isolated showed no growth inhibition. Also observed a positive effect on plant development, production and control of carrot to blight, depending on the application of Bioform II. Keywords: Biofertilizer, leaf blight, Carrot, Rhizoctonia sp.

1. INTRODUO A cenoura uma hortalia de grande importncia nutricional, com elevado teor de betacaroteno, precursor da vitamina A, sendo uma das melhores fontes dessa vitamina e apresentando tambm grandes quantidades de sais minerais. Alm de razes bem desenvolvidas, uniformes, lisas, sem ramificaes laterais ou secundrias, o comprimento e o dimetro, variando de 15 a 20cm e de 3 a 4cm, respectivamente, que so as caractersticas preferidas pelo mercado consumidor brasileiro (PUIATTI et al., 2007). A cultura da cenoura muito sensvel as condies ambientais, o que determina a recomendao do gentipo que melhor se adapta a poca de cultivo e local. No Brasil, uma grande problemtica na cultura da cenoura, a queima das folhas por alternaria (Alternaria dauci), que afeta a parte area com grande reduo da produo e qualidade das razes (FANCELLI, 1997). As leses causadas geralmente so pequenas, confundidas com sintomas de cercspora, se localizam nas margens do fololo e, sua maior severidade ocorre na fase em que a planta converge energia para produo das razes. A queima das folhas se torna um grande impasse no cultivo orgnico de cenoura, por no ser permitida a aplicao de agrotxicos, a no ser devido a aplicao de algumas caldas base de cobre, extratos de leos essenciais de plantas, tornando o controle da doena dependente do manejo e da resistncia genticas das plantas (CARVALHO et al., 2005). Alm da queima das folhas, a cenoura tambm apresenta outras doenas que afetam a sua produtividade, dentre elas encontram-se Rhizoctonia solani que causa podrido de pr e ps-emergncia. Esse fungo causador de doena em diversas culturas, como o feijo, batata, fumo, milho e soja, e capaz de atacar todas as partes da planta, em vrios estgios (PIEROBOM, 2009). Vrios so os fatores que podem promover o desenvolvimento da doena, entre eles a temperatura, umidade do solo e a concentrao do inculo so os mais importantes. Diversos trabalhos tm sido realizados para fomentar as necessidades da agricultura orgnica no contexto do controle de doenas em plantas. H relatos de trabalhos demonstrando o potencial de plantas medicinais no controle dos mais variados tipos de fitopatgenos, especialmente fungos (CARVALHO et al., 2006; RODRIGUES et al., 2006). Outros estudos mostram que a resistncia s doenas pode ser aumentada pelo uso de produtos ricos em silcio, por meio da alterao das respostas da planta ao ataque do parasita, aumentando a sntese de fitoalexinas e ou enzimas importantes para a defesa, que podem agir como substncias txicas, inibidoras ou repelentes, promovendo a formao de barreiras mecnicas e qumicas (WULFF; PASCHOLATI, 1999).

8 Entretanto, os estudos exploram basicamente o efeito de extratos de plantas medicinais no controle de doenas, seja atravs do controle direto sobre o fitopatgeno ou atravs da induo de resistncia; sem avaliar o potencial das plantas medicinais e da levedura em conjunto, bem como no aumento da produo das culturas e nas caractersticas organolpticas dos produtos consumidos in natura. Tambm no h relatos da tentativa de produo de biofertilizantes a partir dos extratos brutos aquosos de plantas medicinais, associados com a levedura Saccharomyces cereviseae; e o efeito destes produtos em associao com produtos que apresentam atividade nutricional como o caso do silcio. Assim busca-se obter produtos que possam ser produzidos e utilizados pelo prprio produtor na agricultura orgnica; incrementar a produo e reduzir o uso de produtos qumicos, especialmente para o controle de doenas; obter resultados que possam ser utilizados como referncia no intuito de suspender totalmente o uso de insumos sintticos substituindo os mesmos por insumos naturais e biodegradveis renovveis. Com base no exposto, este trabalho teve como objetivos: - Avaliar o potencial dos biofertilizantes Bioform I e II, na inibio do crescimento micelial de Rhizoctonia sp., in vitro; - Avaliar o potencial do biofertilizante Bioform II no desenvolvimento de cenoura, em ensaio de campo; - Avaliar o efeito da aplicao do biofertilizante Bioform II e da mistura biofertilizante + silcio, em diferentes doses, no controle de queima das folhas, em cenoura; - Avaliar o efeito da aplicao do biofertilizante Bioform II e da mistura biofertilizante + silcio, em diferentes doses, na produtividade de cenoura.

2. REFERENCIAL TERICO 2.1 Cenoura (Daucus carota) A cenoura, Daucus carota, originria da regio onde hoje se localiza o Afeganisto. Entretanto, as cenouras de colorao alaranjada foram selecionadas a partir de material asitico trabalhado na Frana e na Holanda durante o sculo XVII (FILGUEIRA, 2003). Segundo Filgueira (2003), a planta, herbcea, possui um caule pouco perceptvel, situado no ponto de insero das folhas formadas por fololos finamente recortados, com pecolos longos e afinados. Na etapa vegetativa do ciclo, a planta apresenta um tufo de folhas em posio vertical, atingindo 50cm de altura. Entretanto, quando entra em florao, o caule pode ultrapassar 1,5m de altura e, no topo, desenvolvem-se numerosas flores esbranquiadas reunidas em umbelas compostas. A parte utilizvel uma raiz pivotante, tuberosa, carnuda, lisa, reta e sem ramificaes, de formato cilndrico e colorao alaranjada. elevado o teor de betacaroteno, precursor da vitamina A, sendo a cenoura considerada a melhor fonte vegetal dessa vitamina. Quando mais intensa for a colorao, mais elevado o teor de betacaroteno e maior o valor nutricional. A raiz deve encontrar timas condies fsicas no solo para se desenvolver sem deformaes (FILGUEIRA, 2003). Os maiores produtores mundiais de cenoura so a China, os Estados Unidos e a Rssia. Na Europa, a Inglaterra tem a maior produo, seguida pela Frana, Holanda e Itlia. Outros pases com grande produo incluem Japo, Polnia e Alemanha (VIEIRA et al., 1999). No Brasil, so produzidas anualmente cerca de 750 mil toneladas de cenoura, com um valor da produo de aproximadamente 150 milhes de dlares, equivalente a 5% do valor total da produo de hortalias. Estima-se uma rea cultivada com cenoura de cerca de 30 mil hectares por ano, sendo os principais produtores os municpios de So Gotardo e Caranda (Minas Gerais), microrregio de Irec (Bahia), Piedade, Ibina e Mogi das Cruzes (So Paulo), Ponta Grossa e Marilndia (Parna). Para atender essa produo, existe uma necessidade de aproximadamente 140 toneladas de sementes. Dentre as cultivares de cenoura comercializadas em nosso pas para cultivo no vero, a cultivar Braslia aparece como destaque, sendo plantada em quase todo o territrio nacional (VIEIRA et al., 1999). 2.1.1 Queima das folhas por Alternaria A queima das folhas a doena foliar mais comumente observada na cenoura, descrita primeiramente na Alemanha em 1855 (PRYOR; STRANDBERG, 2002), atualmente

10 ocorre em todos os pases produtores do mundo responsvel pelos maiores prejuzos para cultura. Est relacionada diretamente com a produtividade e qualidade das razes. O plantio de hbridos susceptveis pode ocasionar o desenvolvimento da doena e destruio da folhagem das plantas em poucos dias (TFOLI; DOMINGUES, 2005). 2.1.2 Sintomas Apresentam-se como pequenas leses localizadas nas extremidades das folhas apresentando colorao marrom-esverdeada, e aspecto encharcado. O aparecimento das leses ocorre entre 8 a 10 dias aps a infeco. Com o crescimento da leso os tecidos adquirem colorao marrom-escuro a preto, podendo ser circundados por halos amarelos. Em condies favorveis as leses expandem at coalescimento, neste estgio os fololos secam e morrem (DOMINGUES, 2010), conferindo a planta aparncia de queimada. 2.1.3 Controle Prticas agronmicas como rotao de cultura, eliminao de restos culturais, plantio em solos bem drenados e espaamentos adequados podem desfavorecer a incidncia da doena. A queima das folhas bastante difcil de ser controlada em perodos quentes e midos, especialmente em reas onde se realizam semeaduras escalonadas e utilizam-se variedades susceptveis (PRYOR; STRANDBERG, 2002). O controle deve ser iniciado tomando medidas preventivas, sendo tratamento das sementes e escolha de sementes livre de patgenos uma eficiente preveno contra a doena. A escolha da variedade tambm uma medida importantssima de controle. O controle qumico uma medida adotada aps a implantao da doena, entretanto difcil conseguir uma boa uniformidade na cobertura com o fungicida na planta quando adulta, quando as folhagens esto bastante densas. Alm disso, a utilizao do mesmo princpio ativo para o controle pode ocasionar o aparecimento de raas do fungo resistente aos produtos qumicos, dificultando ainda mais o seu controle. A utilizao de hormnios pode ser uma alternativa tambm, como o cido giberlico, que pode ser utilizado para controle dessa doena, pois aumenta o comprimento da planta e o dimetro dos pecolos, modificando a estrutura da planta, tornando a folhagem mais ereta, aumentando a passagem de ar entre as plantas e reduzindo o perodo de molhamento foliar, consequentemente a severidade da doena.

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2.1.4 Alternaria sp.

A principal doena da cenoura causada por patgenos de Alternaria (Kuhn), fungo que pode estar associado e causar sintomas semelhantes (REIFSCHNEIDER, 1980). Classificada no Reino fungi, Filo Ascomycota, Subdiviso Pezizomycotina, Classe Dothideomycetes, Ordem Pleosporales, Alternaria considerada praga regulamentvel no Brasil e patgeno de trigo, soja, algodo, feijo, arroz, cenoura, milho, tomate e girassol (RODRIGUES, 2010). O fungo Alternaria possui conidiforos crescendo em pequenos grupos, retos ou flexveis, algumas vezes geniculados, septados, possuem colorao plea, marrom olivacencia, possui 80mu de comprimento e 6-10mu de largura. Condios usualmente solitrios, ocasionalmente em cadeia de 2, reto ou curvado, obclavando rostrado com estreitamento trs vezes do cumprimento do corpo do esporo (rostro) liso; podendo ter de 100 a 45mu de comprimento por 16 a 25mu de largura, possui 7-11 septos transversais e um septo longitudinal ou oblquo, so flexuosas hialinos ou pleos possuem de 5-7mu de espessura por 1-3mu de largura e provoca queima das folhas da cenoura (RODRIGUES, 2010). Espcies de Alternaria so facilmente reconhecidas pelos condios de grandes dimenses, tipicamente ovides ou obclavados, marrom claro a marrom, multicelular, com septos longitudinais, transversais e s vezes oblquos. So formados em cadeias ou solitrios, rostrados (com bicos) ou no. Infelizmente, caractersticas como catenulao, forma, dimenses, so fortemente influenciadas pelo ambiente, alm de muitas espcies apresentarem a variabilidade morfolgica como uma de suas caractersticas. Assim, a literatura est repleta de descries de espcies obscuras, jamais confirmadas por outros pesquisadores. Dvidas constantes em espcies saprofticas so menos comuns em espcies fitopatognicas, nas quais se combinam caracteres morfolgicos com os sintomas, hospedeiros, produo de toxinas, etc; porm mesmo assim, algumas dvidas permanecem. As colnias so geralmente difusas, cinza a marrom escuro, conidiforos diferentes das hifas, escuros, solitrios ou em fascculos. Condios solitrios ou em cadeia, tipicamente clavados ou ovides, freqentemente rostrados, com septos transversais e freqentemente tambm transversais e/ou oblquos (ELLIS, M. B.; 1971).

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2.2 Rhizoctonia sp. Descrito pela primeira vez em 1815 pelo micologista francs De Candolle, Rhizoctonia como sendo um fungo no esporulante que ataca principalmente as razes, e produz filamentos de hifas a partir de esclerdios (SNEH et al., 1991). O fungo classificado como Fungo mitosprico, Classe Hyphomycetes, Ordem Agomycetales por no produzir esporos em sua fase assexuada (PEREIRA, 1997). O miclio caracterizado pela ramificao em ngulo reto com septao imediatamente e aps o ramo, constrio na base da ramificao e septo doliporo (BUTLER; BOLKAN, 1973; ADAMS, 1988). O fungo, Rhizoctonia solani, cosmopolita com vasto nmero de hospedeiros, causando doenas na maioria das plantas cultivadas em todo mundo. uma espcie complexa com vrios bitipos que diferem quanto patogenicidade, aos hospedeiros, distribuio na natureza e aparncia em meio de cultura. Relatos sobre isolados de Rhizoctonia, fitopatognicos ou saprofticos, no descritos em nvel especfico, so comumente encontrados na literatura devido s dificuldades de identificao impostas por limitaes morfolgicas tais quais: (i) (ii) Ausncia de esporos assexuais; Instabilidade na morfologia de culturas e esclerdios, em funo das variaes nas condies de cultivo (PARMETER; WHITNEY, 1970 apud SILVEIRA; ALFENAS, 2002). (iii) Ampla variabilidade morfolgica, sendo que h espcies constitudas por diferentes grupos de isolados com afinidade para efetuar anastomose de hifas entre si (OGOSHI, 1987), (iv) (v) Necessidade de mtodos especficos para se induzir estruturas basidiais in vitro (CARLING; SUMMER, 1992), Desconhecimentos dos teleomorfos para algumas espcies anamrficas (STALPERS; ANDERSEN, 1996). O fungo sobrevive saprofiticamente no solo, relativamente fcil de detectar, porm de difcil quantificao. Geralmente encontram-se nas camadas superficiais do solo, principalmente nos 10 primeiros centmetros, devido a dependncia de oxignio (CARDOSO, 1994). Os sintomas variam extensamente e so facilmente confundidos com sintomas de outras doenas, produzidas por outros patgenos. Atuam em regies de alta temperatura e chuvas frequentes, acompanhadas de alta umidade relativa (95%), que o tornam de primordial importncia dentre os fatores limitantes ao cultivo de vrias culturas, cuja maioria

13 so plantas cultivadas, como soja, beterraba, cenoura, berinjela, melo, tomate, melancia, repolho, alface, figo, algodo, feijo-caupi e arroz, alm de plantas nativas (MATZ, 1917; MATZ, 1921; ATKINS e LEWIS, 1952 apud CASTRO, 2011).

2.2.1. Damping-off Doena causada por Rhizoctonia solani, desenvolve-se no sistema radicular causando podrides no incio do desenvolvimento da plntula e provocando reduo no vigor e na germinao da semente. A severidade e incidncia do ataque esto associadosassociadas s condies do solo e a seqncia de culturas cultivadas na rea. Ocorre em diversas culturas de importncia econmica, como batata, feijo, fumo, milho e soja (EMBRAPA, 2004). Os sintomas mais graves aparecem na primavera, pouco depois da semeadura, o estrangulamento parcial dos caules pode originar diversos sintomas, tais como, atraso do desenvolvimento da planta, deformao e descolorao do caule; necrose do tecido vascular; e pigmentao prpura nas folhas. Mantm-se no solo de um ano a outro na forma de esclerdios, ou como miclio de resduos vegetais existente no solo. Na primavera quando as condies so mais favorveis, os esclerdios germinam e invadem o caule da planta, principalmente atravs de feridas. O desenvolvimento da doena estimulado por temperaturas do solo baixa e elevada umidade (BERGAMIN et al., 2005). O controle se d atravs de rotao de culturas evitando as culturas que favorecem o desenvolvimento do fungo, outra medida adotada o tratamento de sementes. A fim de amenizar o desenvolvimento da doena, deve-se plantar a cultura em pocas quentes, para que haja rpida emergncia e desenvolvimento da planta. Deve-se evitar plantio em profundidades excessivas, pois a emergncia mais demorada e prolonga o perodo de exposio dos tecidos susceptveis ao patgeno (BERGAMIN et al., 2005). 2.2.2. Mela e queima das folhas A mela e queima das folhas, causada pelo fungo Rhizoctonia solani, uma das principais doenas que afeta a cultura da soja, pertence a fase anmorfica do gnero fitopatognico Thanatephorus (CAMPOS, 2006). Este fungo causa mela e/ou queima das folhas em soja e esta associado com outros hospedeiros tais como arroz, milho, sorgo,

14 feijo-de-corda e caupi. Alm de necrosar a folha, o fungo causa leses nas hastes e pecolos reduzindo drasticamente a produo de soja. A freqncia e distribuio das chuvas, e o clima chuvoso durante o ciclo da cultura so fatores determinantes para o desenvolvimento da doena. A disseminao do inculo primrio se d atravs dos respingos das gotas de chuva, careando resqucios de miclio ou esclerdios para as folhas e pecolos das plantas jovens, antes do fechamento das entre linhas da lavoura. Toda a parte area da planta afetada, surgindo inicialmente leses encharcadas, de colorao pardo-avermelhada a roxa, evoluindo rapidamente para marromescura a preta. As leses podem ser pequenas ou tomar todo o limbo foliar, em forma de podrido mole o murcha. Sobre baixa umidade as manchas necrticas ficam restritas a colorao marrom. Nas hastes, pecolos e vagens, normalmente aparecem manchas castanho-avermelhada. Em vagens novas, flores e racemos florais pode ocorrer completa podrido, e em condies favorveis comum a produo de microesclerdios nos tecidos infectados. As infeces podem ocorrer em qualquer estdio da cultura (EMBRAPA, 2004). Para o controle recomenda-se o uso de prticas conservacionistas, a fim de reduzir o inculo inicial presente no solo, reduo da populao de plantas por rea, utilizao de sementes de boa qualidade fitossanitria, e tratamento de sementes com fungicida. A presena de cobertura morta tem se mostrado uma eficiente forma para evitar que os respingos da chuva levem os propgulos do fungo para as folhas e hastes da planta. O controle qumico tambm uma alternativa eficiente (EMBRAPA, 2004; NECHET ,2004; MIRANDA, 2007; apud COSTA NETTO, 2009). 2.3. Biofertilizantes Produzidos a partir da fermentao anaerbica ou aerbica de diversos materiais orgnicos, sendo recomendados para o controle de diversos tipos de doenas. Essa nova abordagem do controle de doenas passou a ser considerada vivel aps observaes de uso prtico por agricultores. Bettiol (2003) descreve detalhadamente diversas tcnicas para a produo de biofertilizantes, que so realizados pela digesto anaerbica ou aerbica de material orgnico e vegetal em meio lquido, suplementado ou no por micronutrientes e outros aditivos. A composio do biofertilizante varia de acordo com o mtodo de preparo e o material ao qual foi obtido. Entretanto apresenta em sua composio elementos essenciais ao desenvolvimento das plantas (BETTIOL; GHINI, 2006). O biofertilizante apresenta a adio de macro e micronutrientes, microrganismos e seus metablitos e de compostos orgnicos e inorgnicos com efeitos sobre a planta e a comunidade microbiana da folha e solo.

15 De acordo com o decreto n 4.954 de 14 de Janeiro de 2004 (MAPA, 2004), biofertilizante um produto e contm princpio ativo ou agente orgnico, isento de substncias agrotxicas, capaz de atuar, direta ou indiretamente, sobre todo ou parte das plantas cultivadas, elevando sua produtividade, sem ter em conta seu valor hormonal e estimulante. Segundo Vessey (2003), do ponto de vista microbiolgico, o biofertilizante uma mistura que contm microrganismos vivos, os quais, quando dispersados nas plantas por diferentes mtodos, colonizam a rizosfera e, ou, o interior da planta que promovem crescimento, por aumentar a disponibilidade de nutrientes primrios. As alternativas para a produo de um biofertilizante so variadas, desde a origem do composto orgnico, a adio de substncias (sais, cinzas e outros), assim como o tipo de fermentao diferenciamdiferencia o produto final. Segundo PINHEIRO e BARRETO (1996), no existem receitas para produzir um biofertilizante. Receitas variadas vm sendo testadas, utilizando-se componentes minerais para o enriquecimento do meio de cultivo (SANTOS, 1992). O processo de fermentao complexo e os microrganismos existentes passam por quatro fases distintas de crescimento celular: 1) Latncia - Compreende o perodo de adaptao dos microrganismos, aps o qual as clulas do incio fermentao. 2) Crescimento exponencial Nessa fase ocorre elevado processo de diviso celular, com a produo de biomassa e liberao dos metablitos primrios: carboidratos, aminocidos, lipdeos, nucleotdeos, vitaminas, protenas e enzimas. 3) Fase estacionria As clulas param de se dividir e as colnias, aps juntarem-se, iniciam um processo de diferenciao celular produzindo metablitos secundrios como forma de defesa (antibiticos, toxinas, fenis, cidos orgnicos e outras protenas de cadeia longa, de alto interesse biotecnolgico). 4) Morte Celular- Esgotadas todas as reservas de energia, as clulas comeam a morrer numa velocidade exponencial (SEIXAS, 1980). A potncia biolgica de um biofertilizante expressa pela grande quantidade de microrganismos ali existentes, responsveis pela liberao de metablitos e antimetablitos, entre eles vrios antibiticos e hormnios vegetais (CASTRO et al., 1992; BETTIOL et al., 1998 apud MEDEIROS, 2003). O uso de biofertilizantes tem sido recomendado em agricultura orgnica como forma de manter o equilbrio nutricional de plantas e torn-la predispostas a ocorrncia de pragas e patgenos (PINHEIRO; BARRETO, 1996; PENTEADO, 2000; BETTIOL, 2001; SANTOS, 2001 apud FALDONI, 2011). Os efeitos obtidos a partir dos biofertilizantes no controle de pragas e doenas em plantas tm sido bem evidenciados. Efeitos fungistticos, bacteriostticos e repelentes sobre insetos j foram constatados. Santos e Sampaio (1993) apud Medeiros (2003), verificaram

16 uma propriedade coloidal, do biofertilizante que provoca a aderncia do inseto sobre a superfcie do tecido vegetal. Porm, apesar do uso frequente de biofertilizantes em diferentes culturas, seja como adubo foliar ou como auxiliar no controle de pragas e doenas, o seu modo de ao no conhecido, apesar de resultados prticos satisfatrios (BETTIOL, 1997).

2.3.1 Mecanismos de resistncia a patgenos Os biofertilizantes so fertiprotetores, provenientes de um processo de

decomposio da matria orgnica (animal ou vegetal), sendo os mais comuns produzidos atravs de fermentao aerbica (com presena de oxignio), em meio liquido. O resultado da fermentao um resduo lquido, utilizado como adubo foliar e defensivo natural, normalmente rico em matria orgnica e microrganismos. Castro et al. (1992) comprovaram o efeito do biofertilizante proveniente da digesto anaerbia do esterco bovino causando inibio do crescimento de Colletotrichum gloeosporioides, agente da antracnose do maracuj, de Thielaviopsis paradoxa, agente da podrido do abacaxi, de Penicillium digitatum agente causal do mofo verde dos citrus e de Cladosporium sp., agente causal da mancha deprimida do maracuj. As principais causas da inibio do desenvolvimento de patgenos pelos biofertilizantes seria o efeito fungisttico e bacteriosttico, principalmente pela presena da bactria, Bacillus subtilis (originria do rmen de bovinos), que sintetiza substncias antibiticas, aliado a diversos nutrientes, vitaminas e aminocidos. A ao dos biofertilizantes sobre os insetos de natureza repelente, devido a substncias volteis, como alcois, fenis e steres, equilbrio nutricional das plantas e/ou efeito mecnico por adesividade e desidratao (SANTOS, 2001). Portanto a ao biolgica de um biofertilizante se deve principalmente a grande quantidade de microrganismos ali presentes, responsveis pela liberao de metablitos e antimetablitos, entre eles vrios hormnios e antibiticos vegetais. Castro et al. (1992) e Bettiol et al. (1998) isolaram vrias leveduras e bactrias, destacando Bacillus subitilis, reconhecido produtor de antibiticos. Atualmente os biofertilizantes vm sendo aplicados em diversas culturas associadas com o fungo entomopatognico Beauveria bassiana, importante inimigo natural de pragas. Entretanto, difcil quantificar a ao de cada mecanismo, e o mais importante justamente a ao conjunta desses mecanismos (BETTIOL; GHINI, 2006).

17 3. MATERIAIS E MTODOS O presente trabalho foi realizado em duas etapas, uma sendo a avaliao do crescimento micelial de Rhizoctonia sp., em meio de cultura com a presena dos biofertilizantes (Bioform I e II) em laboratrio, e a outra, a avaliao do controle da queima das folhas (Alternaria dauci), crescimento da planta e produtividade com aplicao do Bioform II na cenoura, em campo. Os biofertilizantes utilizados foram obtidos a partir de plantas, sendo estas Teca (Tectona grandis) e Eucalipto (Corymbia citriodora). Para a obteno dos biofertilizantes utilizaram-se metodologias diferentes. No preparado do Biform I foram utilizados folhas de eucalipto triturado, caldo de cana, esterco de gado fresco, gua e levedura. Para a obteno do Bioform II foram utilizadas cinza, garapa, leite cru e folhas da planta (teca), que foram misturados em um tambor de plstico de 250 litros. Aps 20 dias da mistura de todos os ingredientes, o produto estava pronto para o uso. 3.1 Efeitos dos biofertilizantes, Bioform I e II, Rhizoctonia sp. A avaliao dos biofertilizantes sobre o crescimento micelial de Rhizoctonia sp. foi realizada no Laboratrio de Fitopatologia e Microbiologia da Universidade Federal de Mato Grosso UFMT, Campus Sinop, localizada na Avenida Alexandre Ferronato, 1200 Setor Industrial. Foram fornecidos pela UFMT Sinop, 3 isolados de Rhizoctonia, sendo, o isolado I-1 da regio da cidade de Cludia MT, o isolado I-2 da regio de Sinop MT, ambos coletados na cultura de soja e, o isolado I-3 da cultura do Pau de Balsa. Os biofertilizantes Bioform I e II, obtidos de plantas e levedura conforme descritos no item acima foram testados individualmente, nas concentraes de 10%, 25%, 40% e 60%. Foram utilizados 11,7g de BDA (batata-dextrose-gar) em cada erlenmeyer, com a relao biofertilizante/gua, para obteno das percentagens propostas para cada tratamento contendo os biofertilizantes (Tabela 1) e BDA e gua (300mL) para cada testemunha. no crescimento micelial de

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Tabela 1. Relao biofertilizante gua para preparo das diferentes concentraes de biofertilizantes, incorporados em meio de cultura. CONCENTRAES BIOFERTILIZANTES H2O 10% 30 mL 270 mL 25% 75 mL 225 mL 40% 120 mL 180 mL 60% 180 mL 120 mL

Aps agitao at a completa dissoluo do BDA, para as concentraes e para as testemunhas, os erlenmeyers foram colocados em autoclave a temperatura de 120C durante 20(vinte) minutos. Em cmara de fluxo laminar, o meio de cultura (BDA contendo solues) foi vertido em placas de Petri, previamente esterilizadas. Aps 24 horas, com o auxlio de um furador de rolha de 8mm de dimetro, um disco de miclio de cada isolado, previamente cultivado em BDA, foi retirado e colocado no centro de cada placa de Petri, contendo o meio de cultura BDA + biofertilizantes (Bioform I e II). As placas foram incubadas durante 3 dias, em estufa incubadora refrigerada tipo BOD, em temperatura de 25 2C. Diariamente, com o auxlio de uma rgua, fez-se as medies, em cm, da colnia do fungo em sentidos ortogonais (x e y), avaliando-se o seu crescimento micelial. As avaliaes foram realizadas at que a testemunha apresentasse crescimento mximo (preenchimento total da placa). Aps a coleta das medidas em centmetros das ortogonais (x e y) obteve-se o crescimento micelial a partir da frmula: CM = (X + Y) D 2 Em que: CM = crescimento micelial X = crescimento do fungo na horizontal (cm) Y = crescimento do fungo na vertical (cm) D = dimetro furador de rolha (cm) Os resultados de crescimento micelial obtidos foram utilizados de base para os clculos seguintes. Para os clculos da determinao do ndice de crescimento micelial foi seguido o mtodo descrito por Yoshimura et al. (2004). Os resultados foram dados em porcentagem de inibio do crescimento micelial, em relao testemunha, que consistiu na seguinte frmula: I = 100- (100*F/T), onde: I porcentagem de inibio; F dimetro mdio das colnias do fungo na presena de biofertilizante e T dimetro mdio da colnia testemunha.

19 Tambm foi calculado o ndice de velocidade do crescimento micelial conforme a frmula descrita por Oliveira (1991): IVCM= (D-Da) N Sendo: IVCM= ndice de velocidade de crescimento micelial D= dimetro mdio atual da colnia Da= dimetro mdio da colnia do dia anterior N= nmero de dias aps a inoculao Aps 10 dias da incubao do disco micelial, avaliou-se a presena de microesclerdios nas placas. Para isto foram divididas as placas de Petri em quadrantes iguais partindo do disco micelial central, sendo demarcados com sinal negativo (-), para ausncia de microesclerdios e positivo (+), para presena dos mesmos. Uma escala para quantificao da presena de microesclerdios na placa foi estabelecida sendo: (++++) Muito, (+++) Moderado, (++) Pouco, (+) Muito pouco, (-) Ausente. Obteve-se ento, a soma dos sinais positivos e realizou-se a mdia acrescida de arredondamento para obter os resultados. 3.2 Efeito do biofertilizante a base de teca ( Tectona grandis), Bioform II, no controle de queima das folhas, no crescimento, produo de massa fresca e seca da parte area, e massa fresca de razes de cenoura.

A avaliao foi realizada na rea experimental da Fazenda Santa Mnica, localizada na rodovia MT 140 km 11, em Sinop. O, o biofertilizante obtido a partir de Teca (Bioform II), conforme descrito anteriormente foi testado nas concentraes de 10%, 25%, 40% e 60% e em mistura com silcio, sendo que neste caso foi utilizada a concentrao de 25%, do biofertilizante obtido. Foi aplicado silcio (cido monosilcio, 17,4% de Si) nas doses crescentes do produto comercial Sili-K: 0,50; 1,0; 2,0 e 3,0 L ha-1. Utilizou-seUtilizaram-se dois tratamentos controle, uma testemunha sem aplicao de silcio e sem aplicao de biofertilizante (testemunha negativa) e, testemunha positiva com aplicao do fungicida Opera (Estrobilurina + triazol) na dosagem de 0,6 L.ha-1.

20 3.2.1 Avaliao do efeito do biofertilizante, Bioform II, isolado ou em associao com silcio no desenvolvimentocrescimento, na produo de massa fresca e seca da parte area, e massa fresca de razes de cenoura. Cada parcela foi constituda por canteiros de 1,0 x 2,0m de comprimento, tendo um total de 20m. A variedade testada foi a Braslia susceptvel a queima das folhas causada por Alternaria dauci. O plantio foi realizado no dia 13 de maro de 2012, as sementes foram dispostas nos canteiros de forma uniforme com distncia de 10 centmetros entre plantas e em 3 linhas paralelas, com 30 centmetros entre si. No dia 7 de abril de 2012 foi realizado o desbaste das plantas, deixando apenas uma planta a cada 10 centmetros. Foram realizadas 3 aplicaes dos tratamentos, a primeira aos 7 e a segunda aos 14 DAD e a terceira aos 21 DAD. As aplicaes foram efetuadas entre 6 e 7 horas, na parte da manh, utilizando-se pulverizador de CO2, presso constante, com bicos do tipo cone, e cada canteiro foi pulverizado com 1 litro de soluo, obtidas a partir das concentraes indicadas; sendo que toda a rea foliar da parcela recebeu o tratamento uniformemente. As seguintes variveis foram analisadas: altura das plantas (cm), severidade da queima das folhas por Alternaria, peso da massa fresca da parte area (PMFPA), peso da massa seca da parte area (PMSPA) e peso de massa fresca das razes (PMFR), da cenoura. Realizou-se a determinao da altura da planta com auxlio de uma rgua, foram escolhidas 5 plantas ao acaso para determinar a altura, das quais se obteve uma mdia, as plantas foram medidas da base do solo ao topo das folhas mais altas, conforme Vieira et. al. (1997). Foram realizadas 4 avaliaes, a primeira aos 7 dias aps o desbaste (DAD), a segunda aos 14 DAD, a terceira aos 21 DAD e a quarta aos 35 DAD, sendo que as coletas dos dados procederam-se pela manh, antes das aplicaes dos tratamentos. Para avaliao da Queima das folhas de cenoura (A. dauci) foi realizada 3 anlises visuais, a primeira 14 dias aps a segunda aplicao, a segunda e terceira com intervalos de 7 dias aps a primeira anlise, utilizando-se a escala proposta por Aguilar et al. (1985), modificada por Oliveira Filho et. al. (1990). Onde: 0% = ausncia da doena; 1 a 10% = leses escassas nas folhas superiores e abundantes nas folhas inferiores; 31 a 60% = leses abundantes nas folhas superiores e folhas inferiores mortas; 61 a 100% = a maior parte das folhas superiores e todas as inferiores mortas.

21 O peso da massa fresca (g) da parte area foi realizado com auxlio de balana de preciso com uma casa decimal aps a vrgula. Foi realizada a , realizou-se a pesagem das folhas de cada parcela separadamente, que foram posteriormente secas . Aps realizou-se a secagem das folhas de cada parcela em estufa com temperatura constante de 70C, durante 24 horas. Aps este perodo, as folhas foram, novamente pesadasou-se, determinando assim o peso de massa seca (g) da parte area. O peso da massa fresca das razes (g) foi realizado tambm com auxlio de balana de preciso com uma casa decimal aps a vrgula depois daaps a lavagem e secagem das razes.

22 4. RESULTADOS E DISCUSSES 4.1 Crescimento micelial de Rhizoctonia sp in vitro A avaliao do biofertilizante produzido a base de folhas de Eucalipto Bioform I apresentou resultado positivo quanto inibio para o isolado I-1 (Figura 1), porm em percentual baixo, e, para os isolados I-2 e I-3 (Figuras 2 e 3, respectivamente) no houve inibio do crescimento micelial do patgeno (Figura 4).

Figura 1. Efeito do biofertilizante a base de eucalipto Bioform I no crescimento micelial de Rhizoctonia sp. isolado de soja, proveniente da cidade de Cludia - MT, sendo a Testemunha, b Bioform I a 10%, c Bioform I a 25%, d Bioform I a 40% e e Bioform I a 60% aps 3 dias de incubao.

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Figura 2. Efeito do biofertilizante a base de eucalipto Bioform I no crescimento micelial de Rhizoctonia sp. isolado de soja, proveniente da cidade de Cludia - MT, sendo a Testemunha, b Bioform I a 10%, c Bioform I a 25%, d Bioform I a 40% e e Bioform I a 60% aps 3 dias de incubao.

Figura 3. Efeito do biofertilizante a base de eucalipto Bioform I no crescimento micelial de Rhizoctonia sp. isolado de Pau de Balsa, sendo a Testemunha, b Bioform I a 10%, c Bioform I a 25%, d Bioform I a 40% e e Bioform I a 60% aps 3 dias de incubao.

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Figura 4. Porcentagem de inibio do crescimento micelial dos isolados I-1, I-2 e I-3 de Rhizoctonia sp., submetidos a diferentes concentraes de Bioform I.

O biofertilizante de Eucalipto Bioform I produziu efeito significativo para inibio do crescimento micelial do isolado I-1, porm apresentou valor relativamente baixo (15% de inibio na concentrao de 60% do biofertilizante) comparado com os efeitos do Bioform II na mesma concentrao. Com relao ao isolado I-2 a porcentagem de inibio foi negativa, ou seja, o biofertilizante propiciou o desenvolvimento do fungo em todas as concentraes testadas. O isolado I-3 apresentou ineficincia quanto porcentagem de inibio, os valores obtidos se mantiveram, para todas as concentraes, portanto, houve ausncia de inibio. O biofertilizante produzido a base de folhas de teca Bioform II, apresentou resultados positivos, aumentando a inibio do crescimento micelial para o isolado I-1 (isolado de soja, proveniente da cidade de Cludia - MT) e isolado I-2 (isolado de soja, proveniente da cidade de Sinop MT) (Figuras 5, 6, respectivamente). Porm, no apresentou efeito sobre o isolado I-3 (obtido de Pau de Balsa) conforme Figura 7.

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Figura 5. Efeito do biofertilizante a base de teca Bioform II no crescimento micelial de Rhizoctonia sp. isolado de soja, proveniente da cidade de Cludia - MT, sendo a Testemunha, b Bioform II a 10%, c Bioform II a 25%, d Bioform II a 40% e e Bioform II a 60% aps 3 dias de incubao.

Figura 6. Efeito do biofertilizante a base de teca Bioform II no crescimento micelial de Rhizoctonia sp. isolado de soja, proveniente da cidade de Sinop - MT, sendo a Testemunha, b Bioform II a 10%, c Bioform II a 25%, d Bioform II a 40% e e Bioform II a 60% aps 3 dias de incubao.

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Figura 7. Efeito do biofertilizante a base de teca Bioform II no crescimento micelial de Rhizoctonia sp. isolado de Pau de Balsa, sendo a Testemunha, b Bioform II a 10%, c Bioform II a 25%, d Bioform II a 40% e e Bioform II a 60%, aps 3 dias de incubao.

Para o isolado I-1 houve um crescente aumento da porcentagem de inibio sendo a concentrao de 60% de Bioform II a mais eficiente com inibio de 38% do crescimento micelial do patgeno. No isolado I-2, nas concentraes de 10 e 25%, houve induo do crescimento, ou seja, o Bioform II propiciou o desenvolvimento acelerado do fungo, porm nas concentraes de 40 e 60% houve inibio do crescimento do fungo de 63 e 75%, respectivamente. Quando se testou o Bioform II sobre o isolado obtido de pau de balsa, I-3, no houve controle significativo para nenhuma das concentraes avaliadas (Figura 8)

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Figura 8. Porcentagem de inibio do crescimento micelial dos isolados I-1, I-2 e I-3 de Rhizoctonia sp., submetidos a diferentes concentraes de Bioform II.

Houve interao entre IVCM (ndice de velocidade de crescimento micelial) e o isolado I-2 na presena do Bioform II (Figura 9), para os demais isolados, a reduo no foi significante (Figuras 10 e 11). O ndice de velocidade do crescimento micelial (IVCM), do isolado I-2 apresentou interao decrescente com o Bioform II, ou seja, o IVCM reduziu medida que as concentraes dos biofertilizantes aumentaram. Para o biofertilizante a base de eucalipto Bioform I, o IVCM manteve uma constante, permanecendo em mesmo patamar medida que as concentraes aumentaram.

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Figura 9. ndice de velocidade de crescimento micelial (IVCM), ao longo de 3 dias, de Rhizoctonia sp., isolado proveniente da cidade de Sinop MT (I-2) em relao concentrao dos biofertilizantes Bioform I (eucalipto) e II (teca).

Figura 10. ndice de velocidade de crescimento micelial (IVCM), ao longo de 3 dias, de Rhizoctonia sp., isolado proveniente da cidade de Cludia MT (I-1) em relao concentrao dos biofertilizantes Bioform I (eucalipto) e II (teca). .

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Figura 11. ndice de velocidade de crescimento micelial (IVCM), ao longo de 3 dias, de Rhizoctonia sp., isolado da espcie florestal Pau de Balsa (I-3) em relao concentrao dos biofertilizantes Bioform I (eucalipto) e II (teca).

Para os isolados I-1 e I-3 o IVCM, manteve-se constante igualmente para todas as concentraes independentes dos biofertilizantes testados, no representando significncia para os resultados. Os efeitos dos biofertilizantes testados, Bioform I e II, quanto produo de microesclerdios foi negativo para o isolado de Rhizoctonia sp. de Sinop, ou seja, ambos os biofertilizantes estimularam o desenvolvimento (Tabela 2). Para os isolados 1 e 3, no houve desenvolvimento de microesclerdios Tabela 2. Desenvolvimento de microesclerdios com relao s concentraes dos biofertilizantes Bioform I e Bioform II para o isolado de Rhizoctonia sp, de Sinop, baseado na escala: (++++) Muito, (+++) Moderado, (++) Pouco, (+) Muito pouco, (-) Ausente, em que sinal (+) presena e sinal (-) ausncia, de microesclerdios.

BIOFERTILIZANTES Bioform I Bioform II 0 ++ +++ 10 +++ ++++ 25 ++++ ++++ 40 +++ ++++ 60 ++ ++++ Tabela 2. Desenvolvimento de microesclerdios com relao s concentraes dos biofertilizantes CONCENTRAES (%) Bioform I e Bioform II para o isolado de Rhizoctonia sp, de Sinop, baseado na escala: ( ++++) Muito, (+++) Moderado, (++) Pouco, (+) Muito pouco, (-) Ausente, em que sinal (+) presena e sinal (-) ausncia, de microesclerdios.

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Para o biofertilizante de Teca - Bioform I a produo de microesclerdios apresentou variao quanto ao seu desenvolvimento, tendo na concentrao de 60% o desenvolvimento igualado a testemunha, ou seja, no apresentou estmulo, nas concentraes de 10 e 40% o desenvolvimento apresentou-se como moderado, em que o estmulo em relao a testemunha de microesclerdios, porm em menor proporo. Para a concentrao de 25% o desenvolvimento foi alto, tendo classificao como muito desenvolvido. Em relao ao biofertilizante de Eucalipto Bioform II houve estmulo da produo de microesclerdios em todas as concentraes testadas. O biofertilizante a base de teca Bioform II mostrou eficincia na maioria das avaliaes em relao ao isolado de Rhizoctonia sp. (I-2) proveniente da regio de Sinop MT, em laboratrio. Para os isolados I-1, isolados da regio da cidade de Cludia MT, e I3, isolado da espcie florestal Pau de balsa, o Bioform II no desempenhou controle do patgeno, porm deve-se ressaltar que em ambiente no controlado o biofertilizante pode assumir comportamento diferenciado. O biofertilizante a base de eucalipto- Bioform I, no proporcionou controle sobre os diferentes isolados do fungo. 4.2 Efeitos do biofertilizante a base de Teca, - Bioform II, no desenvolvimento, produo de massa fresca e seca da parte area, massa fresca de razes da cultura de cenoura e no controle de queima das folhas. Houve resposta da altura das plantas de cenoura em relao os tratamentos de Bioform II, sendo que o crescimento em altura (cm) variou conforme a concentrao utilizada. Aos 7 dias aps desbaste as alturas das plantas no tiveram variao expressiva em tamanho para ambos os tratamentos, significando que o crescimento inicial foi semelhante no incio do desenvolvimento das plantas antes das aplicaes serem realizadas (Figura 12). Para a segunda avaliao (14 DAD) o crescimento foi maior para as concentraes de 10, 25, 40 e 60% em comparao com a testemunha padro (sem aplicao), e para a concentrao de 25% em associao com 1,0, 2,0 e 3,0 L.ha 1 de silcio comparado a testemunha com aplicao de fungicida, para a concentrao de 25% + 0,5 L.ha 1 o crescimento foi inferior. (Figura 13).

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FIGURA 12. Altura das plantas de cenoura em funo de diferentes tratamentos, com avaliaoes realizadas aos 7 dias aps desbasteDAD. Testemunha negativa (TN): aplicao de gua; testemunha positiva (TP): aplicao de fungicida (Opera, 0.6 L.ha-1), 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, e 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0 3,0 L.ha -1 de Si (Sili-k).

FIGURA 13. Altura das plantas de cenoura em funo de diferentes tratamentos, com avalia o es realizadas aos 14 dias aps desbasteDAD. Testemunha negativa (TN): aplicao de gua; testemunha positiva (TP): aplicao de fungicida (Opera, 0.6 L.ha-1), 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, e 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0 3,0 L.ha -1 de Si (Sili-k).

Ambas as testemunhas (testemunha negativa e testemunha positiva) apresentaram nveis de crescimento inferior aos tratamentos em relao s concentraes de 10, 25, 40, 60% de Bioform II e, 25% de Bioform II + 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 L.ha -1 de Sili-k. Nas concentraes de 10% e 25% + 0,5 L.ha-1 de Sili-K aos 21 e 35 dias aps desbaste (DAD) as plantas apresentaram valores prximos aos das plantas que receberam as concentraes de 25, 40, 60% e 25% + 1,0; 2,0; 3,0 L.ha-1 de Sili-k (Figura 14 e Figura 15, respectivamente), respondendo a aplicao do biofertilizante. Em todas as concentraes testadas os nveis de crescimento foram significantes mantendo-se com mdias semelhantes 14 dias aps a ltima aplicao do biofertilizante a base de folhas de Teca.

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FIGURA 14. Altura das plantas de cenoura em funo de diferentes tratamentos, com avaliaoes realizadas aos 21 dias aps desbasteDAD. Testemunha negativa (TN): aplicao de gua; testemunha positiva (TP): aplicao de fungicida (Opera, 0.6 L.ha-1), 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, e 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0 3,0 L.ha -1 de Si (Sili-k).

FIGURA 15. Altura das plantas de cenoura em funo de diferentes tratamentos, com avaliaoes realizadas aos 35 dias aps desbasteDAD. Testemunha negativa (TN): aplicao de gua; testemunha positiva (TP): aplicao de fungicida (Opera, 0.6 L.ha-1), 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, e 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0 3,0 L.ha -1 de Si (Sili-k).

Com relao ao peso da massa fresca da parte area (PMFPA), os resultados comparados com as testemunhas positiva e negativa, foram superiores. Para as concentraes de 10, 25, 40 e 60% de biofertilizante foram produzidas, respectivamente 678, 1207, 1092 e 549 gramas acima da produtividade da testemunha negativa (guasem aplicao), para a concentrao de 25% acrescida de 0,5, 1,0, 2,0 e 3,0 L.ha -1 de silcio, o acrscimo em gramas comparado com a testemunha positiva (aplicao de fungicida) foiram respectivamente de 746, 735, 919 e 564, respectivamente (Figura 16). O peso da massa

33 seca da parte area (PMSPA), tambm foiram superiores as testemunhas, para as concentraes de Bioform II, de 10, 25, 40 e 60%, sendo que o o acrscimo em gramas a partir do peso obtido na testemunha negativa, foiram de 159, 109, 167 e 115 respectivamente. Para , para a concentrao de 25% + 0,5, 1,0, 2,0 e 3,0 L.ha -1 de Sili-k foram produzidas 139, 243, 232 e 96 gramas acima da produtividade da testemunha positiva, respectivamente.

FIGURA 16. Peso Massa fresca da parte area da cultura da cenoura aps ser submetida a em funo de diferentes tratamentos. -. Testemunha negativa (TN): aplicao de gua; testemunha positiva (TP): aplicao de fungicida (Opera, 0.6 L.ha-1), 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, e 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0 3,0 L.ha -1 de Si (Sili-k).

FIGURA 17. Peso Massa seca da parte area da cultura da cenoura aps ser submetida a em funo de diferentes tratamentos -. Testemunha negativa (TN): aplicao de gua; testemunha positiva (TP): aplicao de fungicida (Opera, 0.6 L.ha-1), 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, e 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0 3,0 L.ha-1 de Si (Sili-k).

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Em relao ao peso da massa fresca de razes (PMFR) de cenoura as maiores produtividades foram observadas nas concentraes de 40% de Bioform II com produtividade de 1,8 kg (total da parcela) e 25% + 0,5, 1,0 e 2,0 L.ha -1 de silcio, com respectivos 1,7, 1,9, e 1,9 kg de razes de cenoura. Para as demais concentraes tambm houveram significativos resultados de produo, ambas aproximando-se de 1,0 kg de massa fresca de razes por parcela (Figura 18).

FIGURA 18. Peso Massa fresca de razes de cenoura em funo de diferentes tratamentos -. Testemunha negativa (TN): aplicao de gua; testemunha positiva (TP): aplicao de fungicida (Opera, 0.6 L.ha-1), 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, e 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0 3,0 L.ha-1 de Si (Sili-k).

O biofertilizante a base de folhas de Teca Bioform II proporcionou aumento do crescimento quando comparado com as plantas do tratamento testemunha negativa. Para as concentraes de Bioform II (10, 25, 40, 60%) o crescimento em porcentagem foi de 236, 246, 262 e 227%, respectivamente, superiores a testemunha. Na concentrao de 25% de Bioform II, em mistura com Sili-k (0,5, 1,0, 2,0, 3,0 L.ha-1) comparado com o crescimento da testemunha positiva as porcentagens de crescimento foram de 149, 147, 149 e 135% respectivamente. A produtividade em massa fresca da parte area foi superior nas concentraes de 25 e 40% de Bioform II e 25%+ 0,5, 1,0 e 2,0 L.ha -1 de silcio. Na massa seca da parte area, as concentraes que se destacaram foram as de 25 e 40% de biofertilizante e 25% acrescido de 0,5 e 2,0 L.ha -1 de silcio. Os melhores desempenhos em termos de peso de massa fresca de razes foram obtidos nas parcelas que continham as

35 concentraes de 40% de Bioform II e 25% de biofertilizante com adio de 0,5, 1,0 e 2,0 L.ha-1 de silcio. Com relao severidade da queima das folhas de cenoura por Alternaria (Figura 19) houve reduo da doena, para todas as concentraes avaliadas incluindo a concentrao em associao com silcio. Nas plantas da testemunha padro (controle negativo) houve a maior severidade da doena, que foi de 31%. Em plantas tratadas com fungicida (testemunha positiva) a severidade foi de 4%, nas parcelas tratadas com as concentraes de 10, 25, 40 e 60% a foram respectivamente 3, 5, 7 e 4%, para a concentrao de 25% + 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 L.ha -1 de silcio, a severidade da queima das folhas foi respectivamente 5, 7, 3 e 2% (Figura 20).

Figura 19. Planta de cenoura com sintomas de queima das folhas (Fonte: Anderson Dalmolin, acervo particular, 2012).

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Figura 20. Severidade dea queima de folhas (Alternaria dauci) de cenouras por Alternaria realizada em 3 avaliaes (1 avaliao 14 dias aps a segunda aplicao, 2 e 3 avaliaes com intervalos de 7 dias), para os diferentes tratamentos -. Testemunha negativa: aplicao de gua; testemunha positiva: aplicao de fungicida (Opera, 0.6 L.ha-1), 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, e 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0 3,0 L.ha -1 de Si (Sili-k).,,

O biofertilizante a base de folhas de Teca Bioform II proporcionou aumento do crescimento quando comparado com as plantas do tratamento testemunha negativa. Para as concentraes de Bioform II (10, 25, 40, 60%) o crescimento em porcentagem foi de 236, 246, 262 e 227%, respectivamente, superiores a testemunha. Na concentrao de 25% de Bioform II, em mistura com Sili-k (0,5, 1,0, 2,0, 3,0 L.ha-1) comparado com o crescimento da testemunha positiva as porcentagens de crescimento foram de 149, 147, 149 e 135% respectivamente. A produtividade em Peso de massa fresca da parte area foi superior nas concentraes de 25 e 40% de Bioform II e 25%+ 0,5, 1,0 e 2,0 L.ha -1 de silcio, para o peso de massa seca da parte area, as concentraes que se destacaram foram as de 25 e 40% de biofertilizante e 25% acrescido de 0,5 e 2,0 L.ha-1 de silcio. Os melhores desempenhos em termos de peso de massa fresca de razes foram obtidos nas parcelas que continham as concentraes de 40% de Bioform II e 25% de biofertilizante com adio de 0,5, 1,0 e 2,0 L.ha-1 de silcio. Em relao presena severidade da doena (queima das folhas) na cultura, em comparao aem relao severidade na testemunha, os tratamentos representaram um controle efetivo, nas concentraes de 10, 25, 40 e 60% de Bioform II, sendo que tambm houve controle para as concentraes de 25% de Bioform II em mistura com 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 de Sili-k. Recomenda-se a conduo de novos ensaios a campo, com Bioform II para o controle de queima das folhas por Alternaria, nas concentraes de 40% do biofertilizante e

37 na concentrao de 25% do biofertilizante em mistura com 0,5, 1,0 e 2,0 de Si (Sili-k) por apresentarem maior produtividade, bem como nveis aceitveis da presenacontrole da doena, maior produo de folhas e, ganho em altura das plantas, bem como controle do patgeno.

38 5. CONCLUSES

A partir dos resultados obtidos conclui-se que: i) O biofertilizante a base de teca Bioform II, apresenta potencial no controle in vitro de Rhizoctonia sp., isolada de soja, nas concentraes de 40 e 60%. Entretanto, o biofertilizante a base de eucalipto Bioform I mostrou-se ineficiente no controle in vitro de Rhizoctonia sp.; ii) O biofertilizante Bioform II influenciou positivamente no crescimento da cultura da cenoura; iii) As maiores produtividades em peso de massa fresca e seca da parte area foram obtidas nos tratamentos contendo 25 e 40% de biofertilizante e 25% acrescido de 0,5 e 2,0 L.ha-1 de silcio;. iv) As maiores produtividades em peso de massa fresca de razes foram obtidas nas concentraes de 40% de Bioform II e 25% de biofertilizante com adio de 0,5, 1,0 e 2,0 L.ha-1 de silcio;. vi) Houve maior controle da queima das folhas, quando se aplicoucom a aplicao de Bioform II nas as concentraes de 10 e 60% de Bioform II, e, com 25% de Bioform II em mistura com 2,0, 3,0 L.ha-1 de Si (cido monocclico 17,4% de Silcio).

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