COMO IDENTIFICAR LOS CARBOHIDRATOS, LIPIDOS Y PROTEINAS

LPIDOS

Solubilidad de lpidos 1. 2. 3. 4. Agregar 1 ml de aceite en cada uno de los tubos. Aade 1 ml de ter, 1 ml de cloroformo y 1 ml de agua a los tubos 1, 2 y 3 respectivamente. Agitar vigorosamente los tubos. Observa y anota los resultados.

Reconocimiento de lpidos 1. Colocar en un tubo de ensayo un trozo de queso maserado , en otro un trazo de una papa maserada y en el tercero agua 2. Aade unas gotas de Sudn III al tubo n 3. 3. Observa y anota los resultados.

1. Elaboracin de testigo

Coloca una gota de aceite comestible en un portaobjetos y agrega una gota de sudn III, coloca el cubreobjetos y observa en el microscopio globulos de grasa teidos de rojo.

2. Para las muestras Sigue el procedimiento que se describe a continuacin para cada tipo de muestra

A. MUESTRAS SOLIDAS : 1) Toma un trozo de aproximadamente 2 g de muestra 2) Depostalo en el cenicero y tritralo hasta convertirlo en una pasta homognea. 3) Psalo a un vaso del No 0 5 ml de agua y djalo reposar. 4) De la solucin obtenida, toma la cantidad indicada para cada prueba (la cantidad de la sustancia testigo) y sigue el procedimiento descrito en los testigos para cada caso.

B. MUESTRAS LIQUIDAS: No es necesario tratamiento previo, se puede iniciar el proceso de identificacin correspondiente

PROTENAS: Bsicamente, las protenas se aslan, se rompen en ciertos lugares y luego se las hacen correr por un gel (esta tcnica se llama blotting) sobre un campo elctrico. Hay una relacin entre la masa y la carga de una protena, de esa forma se separan y se detienen a una determinada distancia en el gel. Si tenemos un marcador con protenas conocidas y sabemos hasta donde se mueven, sabremos problemente que protenas tenemos en la muestra.

1. Agregar en cada tubo por separado 3 ml. de uno de los siguientes productos:

Solucin de clara de huevo Leche Jugo de naranja Solucin de macerado de papa.

2. Aade a cada tubo 3 ml. de hidrxido sdico al 10 % y una 3-5 gotas de sulfato cprico al 1 %. Reacciones de reconocimiento

Reaccin de Biuret

El reactivo de Biuret est formado por una disolucin de sulfato de cobre en medio alcalino, este reconoce el enlace peptdico de las protenas mediante la formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos, lo que produce una coloracin rojo-violeta.

Reaccin de Millon

Reconoce residuos fenlicos, es decir aquellas protenas que contengan tirosina. Las protenas se precipitan por accin de los cidos inorgnicos fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve gradualmente rojo al calentar.

Reaccin xantoproteica

Reconoce grupos aromticos, es decir aquellas protenas que contengan tirosina o fenilalanina, con las cuales el cido ntrico forma compuestos nitrados amarillos.

CARBOHIDRATOS: Tintura de yodo: significa que el resultado es positivo; Si hay carbohidratos en los alimentos analizados, (los carbohidratos son los azucares como: glucosa (monosacarido) o maltosa (disacarido), o alimdon (polisacarido) ; el almidon se encuentra en las papas))

.A REACCIN DE FEHLING

Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 3 cc.) Aadir 1 cc. de Fehling A y 1 cc. de Fehling B. El lquido del tubo de ensayo adquirir un fuerte color azul. Calentar el tubo al bao Mara o directamente en un mechero de laboratorio. La reaccin ser positiva si la muestra se vuelve de color rojo ladrillo. La reaccin ser negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul - verdoso.

.B REACCIN DEL LUGOL

Este mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico. Poner en un tubo de ensayo unos 3 cc. del glcido a investigar. Aadir unas gotas de lugol. Si la disolucin del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reaccin es positiva.

.C REACCIN DE MOLISH En un tubo de ensayo, colocar 2 mL de cada una de las muestras indicadas, adicionar 3 gotas de reactivo de Molish y mezclar. Aadir en zona (dejar resbalar por las paredes del tubo, lentamente), 2 mL de cido sulfrico concentrado. La formacin de un anillo de color prpura en la interfase indicar que la reaccin es positiva. Carbohidrato Fructosa Glucosa Sacarosa Xilosa Maltosa Almidn Reaccin de Molish Anillo violeta Anillo violeta Anillo violeta Anillo violeta Sin reaccin Sin reaccin

 .D REACCIN DE BIAL En tubos de pruebas, colocar 2 mL de cada una de las muestras indicadas, adicionar 4 mL de reactivos de Bial, calentar en bao mara durante 10 a 15 minutos hasta ebullicin. La coloracin verde indica la presencia de pentosas.

Carbohidrato Fructosa Glucosa Sacarosa Xilosa Maltosa Almidn

Reaccin de Bial Verde Negativo Verde Verde Negativo Negativo

.E REACCIN DE SELIWANOFF Colocar en tubos de pruebas 5 mL de reactivo de Seliwanoff y 3 mL de las muestras indicadas, llevar a bao mara durante 4 a 5 minutos. La coloracin salmn 8 rojo cereza) evidencia la presencia de cetohexosas.