UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

5to PRCTICA Efectos del ambiente en el crecimiento y muerte de los microorganismos

Curso: Microbiologa pesquera

Alumna: Marilli Milagros Sosa Sarmiento

Profesora: Nancy Martinez Ordinola

Grupo: F*

Mesa: 1

Fecha de ejecucin: 25 abril del 2011

Fecha de entrega: 3 mayo del 2011

2011

INTRODUCCION El crecimiento de microorganismos se mide estimando los cambios en el nmero de clulas, en la cantidad de algn componente de las mismas o en el peso seco de las clulas. Hay dos formas de medir el crecimiento microbiano, el directo e indirecto. El mtodo directo incluye: recuento de clulas totales, recuento de clulas viables; mtodo indirecto: turbidez Debido a su pequeo tamao y a su estilo de vida individual, las clulas procariticas sufren los cambios ambientales de un modo mucho ms directo e inmediato que las clulas de los organismos pluricelulares. A lo largo de miles de millones de aos, las bacterias han venido estando sometidas a diversas presiones ambientales, y han respondido evolutivamente creando numerosos mecanismos de adaptacin. Actualmente, las nicas formas de vida existentes en determinados ambientes extremos son exclusivamente procariticas. Desafiando a nuestras ideas preconcebidas de lo que es la vida "normal", encontramos extraordinarios seres vivos unicelulares viviendo a pH muy cidos o muy alcalinos, medrando en salmueras y salinas, o reproducindose a temperaturas de ms de 100C y a grandes presiones.

REVISION BIBLIOGRAFICA El crecimiento de las bacterias en funcin de su fondo gentico, en relacin con los nutrientes, y en unas hipotticas condiciones ideales (ptimas). Sin embargo, el trabajo experimental con microorganismos ha de tener en cuenta los factores ambientales, es decir, una serie de agentes fsicos y qumicos que 1. modifican la velocidad de crecimiento, provocando cambios que, a determinados valores de dichos factores pueden llegar a ocasionar la muerte de microorganismos; 2. condicionan la distribucin de los microorganismos en sus ecosistemas y hbitat naturales; 3. permiten a los humanos controlar el crecimiento microbiano, por medio de la fijacin de parmetros para: la mutagnesis, la esterilizacin y desinfeccin, la quimioterapia. Efectos del ambiente en el crecimiento de microorganismos: 1- Efecto de la temperatura Los microorganismos segn sus caractersticas poseen temperaturas ptimas, mnimas y mximas de crecimiento. Tambin pueden ser termolbiles y termoresistentes, la mayora de los microorganismos que no poseen esporas, se destruyen a temperaturas de pasteurizacin, 2- Efecto del potencial redox En relacin con los microorganismos, el potencial redox indica las relaciones de oxgeno entre los mismos y es utilizado para especificar el ambiente en que un microorganismo es capaz de generar energa y sintetizar nuevas clulas. Los microorganismos aerobios necesitan para crecer valores redox positivos (Presencia de oxgeno), mientras que los anaerobios requieren valores redox negativos (ausencia de oxgeno). Una forma de reducir el crecimiento microbiano es controlando la atmsfera de los alimentos, creando condiciones de anaerobiosis.

3- Efecto del PH En general, las bacterias crecen con mayor rapidez a pH comprendido entre 6,0 y 8,0; las levaduras entre 4,5 y 6,0 y los hongos filamentosos entre 3,5 y 4,0. Si a un alimento se le cambia el pH ya sea por encima o por debajo del neutro, los microorganismos crecern ms lentamente. La capacidad del pH bajo para limitar el crecimiento microbiano, ha sido aprovechada deliberadamente desde los tiempos ms antiguos en la conservacin de alimentos, con la adicin de los cidos acticos y lctico. En los alimentos con pH menores a 4.0, no se produce crecimiento de microorganismos patgenos o indicadores de contaminacin fecal tales como,Salmonella spp., Escherichia, coli, Staphylococcus coagulasa positiva, Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Bacillus cereus, entre otros. 4- Efecto de la luz ultravioleta La luz es un importante factor ecolgico en el agua, siendo la fuente de energa de Id5 algas y bacterias fotosintticas intensidad disminuye rpidamente que penetra en el agua. Resulta biolgicamente activa ha5tLi u profundidad de 100 m o incluso 700 ni en aguas muy claras sin color ni turbidez. La luz solar tiene efectos inhibidores sobre las bacterias no pigmentadas, debido a la parte ultravioleta del espectro y a las longitudes de onda de la luz visible Estos efectos dependen de la intensidad de la radiacin y de la turbidez del agua, siendo mximos en aguas claras de regiones ridas. Las bacterias con pigmentos carotenoides, tolerantes a la luz en un grado considerable, no son inhibidas por la luz de intensidad normal. Por esta razn el aire contiene organismos con fuerte pigmentacin.

MATERIALES Y METODOS Efecto de la temperatura Materiales o o o o o 6 tubos conteniendo c/uno 2ml de cultivo de la cepa bacillus subtilis 6 placas esteriles Matraz conteniendo agar nutritivo fundido Pipetas Bao mara

Mtodos o o o o Enumerar tubos y placas del 1 al 6 Tubo 1 como tubo patrn, tomar 0.5ml de cultivo de la cepa bacillus subtilis y colocarlo en la placa 1. Agregar aprox. 15ml de agar fundido(PCA), homogeneizar y dejar solidificar Luego incubar a 37C x24h

Los tubos 3,4,5,6 elevar la temperatura del bao maria 10 C mas cada vez cada vez que se coloque un tubo

Efecto del potencial redox Materiales o o o Las cepas bacillus subtilis y Enterobactero Placas con el medio:agar cerebro corazn(ACC) Sistema de anaerobiosis

Mtodos o o o Tomar una placa de ACC y dividirla en dos partes iguales con la ayuda de un plumn, sembrar en cada espacio la cepa bacillus subtilis y Enterobactero Colocar las placas en la jarra anaerbica, con el sistema de anaerobiosis Incubar 37C x24h

Efecto PH Materiales o o Cepa enterobactero 6 tubos con caldo nutritivo con PH 4,5,6,7,8,9

Mtodos o o Sembrar cada tubo por suspensin con la cepa proporcionada Incubar 37C x24h

Efecto de la luz ultravioleta Materiales o o o o 3 Placas estriles :P1,P2,P3 Pipetas Lmpara de luz U.V Cartn circular estril cortado en uno de los cuadrantes

Mtodos o o o o La placa 1 es la placa patrn Las Placas 2 y placas 3 llevarlas al gabinete microbiolgico para exponerlas a la radiacin U.V, utilizando para esto el cartn estril cortado en un cuadrante. Exponer cada cuadrante de la placa 0,5,10,15 minutos respectivamente a la luz U.V Luego, tapar y envolver la placa 2 en papel y la placa 3 exponerla 10 min. A la luz solar luego incubarlas 37C x24h

RESULTADOS Y DISCUSION EFECTO DE LA TEMPERATURA (cepa bacillus subtilis) Placa 1es placa patrn T 35C se observo pocos muertas, por lo tanto, hay mas supervivencia de este microorganismo Placa 2 T 45C un poco mas aumento las muertas, hay supervivencia de este microorganismo Placa 3 T 55C mas o menos aumento de muertas as tanto vivos de estos microorganismos Placa 4 T 65C mediano aumento las muertas, mediano a supervivencia de estos microorganismos Placa 5 T 75C abundante aumento de muertas, poca supervivencia de estos microorganismos Placa 6 T 85C abundante aumento de muertas, poca supervivencia de estos microorganismos o los colores eran distintos en las placas otros presentaban oscuros color otros blanquecinos.

EFECTO DEL POTENCIAL REDOX (cepa Baillus subtilis y Enterobactero) En la siembra Bacillus subtilis si hay crecimiento de estos microorganismos En la siembra Enterobactero si hay crecimiento de estos microorganismos o o Bacillus subtilis requiere de oxigeno para crecer es aerobio Enterobactero pareca que no haba crecimiento de microorganismos, los enterobacteros son microorganismos que pueden crecer en presencia o ausencia de oxigeno, tanto aerobio como anaerobio

EFECTO DEL PH

(Cepa Enterobactero)

PH4 negativa, no se observo turbidez PH5 negativa y ligera turbidez PH6 ligera turbidez PH7 mediana turbidez PH8 abundante turbidez PH9 mediana turbidez o o o Patrn comparacin con PH4 y PH5 entre negativa y ligera turbidez El PH 6.5-7.5 los microorganismos presentan una turbidez media, eso quiere decir que hay crecimiento en la neutralidad PH8 debera ser mediana turbidez y PH9 abundante turbidez, el laboratorio tuvimos error en estos resultados, por que ph9 es el alto y debera ser abundante turbidez.

EFECTO DE LA LUZ ULTRAVIOLETA (cepa bacillus subtilis) Placa 1 es placa patrn 100% supervivencia Placa 2 se observo 0 min mas supervivencia 75% ,5min 70% supervivencia, 10min 65% supervivencia, 15 min 60% supervivencia Placa3 se observo 0, 5, 10,15 minutos en proporciones iguales la supervivencia 50%

CONCLUSIONES A medida que aumenta la temperatura hay poca supervivencia de microorganismos de bacillus subtilis, eso quiere decir que la temperatura es indirectamente proporcional a la supervivencia. La temperatura es directamente proporcional a la muerte de microorganismos bacillus subtilis En el potencial redox que existe crecimiento de microorganismos tanto bacillus subtilis como enterobactero.

A medida que aumenta el PH aumenta la turbidez, aun PH bajo acido negativa ligera turbidez, aun PH medio neutro mediana turbidez PH alto bsico abundante turbidez Efecto luz ultravioleta las placas tanto la supervivencia y muerte es igual proporcin en estos microorganismos el bacillus subtilis

RECOMENDACIONES Observa las placas en temperaturas distintas y fijarse bien los colores para obtener buenos resultados Estar atentos y observar bien los tubos y placas.

BIBLIOGRAFIA Ecologa microbiana de los Alimentos. Factores que afectan la supervivencia de los microorganismos En los alimentos. Vol 1. Editorial Acribia. Espaa 1980 Ecologa microbiana de los Alimentos. Productos alimenticios. Vol II. Editorial Acribia Espaa 1980. Jay James. Microbiologa moderna de los Alimentos. Tercera edicin, Editorial Acribia. Zaragoza Espaa. 1994. Wiley J., Sherwood L. y C. Woolverton. 2009. Prescotts Principles of Microbiology. Mc Graw Hill Higher Education. United States. 847 p.p. BROOKS G, et al. Microbiologa Medica.2002.Segunda Edicin. Mxico Madigan, M. T., J. M. Martinko y J. Parker. 2003. Brock. Biologa de los microorganismos. 10 Ed. Prentice Hall Iberia. Espaa.