QuEChERS : Una innovadora preparacin de muestras para el anlisis alimentario y medioambiental

Julian de la Mata Agilent Technologies

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Mtodos de preparacin muestras tradicionales Qu es QuEChERS? Cmo elegir los kits correctos? Ventajas del mtodo QuEChERS Aplicaciones

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Mtodos de preparacin muestras tradicionales Qu es QuEChERS? Cmo elegir los kits correctos? Ventajas del mtodo QuEChERS Aplicaciones

Metodos preparacin de muestra tradicionales - SPE

Prelavado* Preacondiciona miento Cargar Lavar Eluir
Eluir el analitio en volumen ms pequeo posible Elimar contaminantes que Preparar el cartucho puedan eluir con el analito para aceptar la muestra Cargar muestra y Lavar con solvente que enjuagar cartucho) no eluya el analito

Si el solvente de elucin es ms fuerte que el solvente de preacondicionamiento

1. MeOH o ACN 2. Solvente dbil (agua, tampn)

Eluyen los componentes de la matriz deblimente retenidos

Se retienen analitos y otros compuestos de la matriz

Eluye el anallito dejando los compuestos altamente retenidos

Metodos preparacin de muestra tradicionales - GPC con columnas polimericas o de silice

Zorbax PSM 60 S para GPC clean-up Mezcla de test EPA Combinacin de 2 columnas 250 mm L x 6.2 mm i.d. x 5 m 60 A 1 mL/min MTBE/ciclohexano (50/50)

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Distintas aproximaciones al anlisis de pesticidas en alimentos

Extraccin con Acetato de Etilo de los 90 (Na2SO4/Acetato de Etilo) SRM anlisis de Imidacloprid (H2SO4/MeOH/H20/CH2Cl2/ Acetato de Etilo/ACN) Mtodo de Luke Modificado (DCM:Eter de petrleo) Mini-mtodo del Acetato de etilo (Na2SO4 /AcOEt) Micro-mtodo del Acetato de etilo-1 (NaCl/MgSO4) Micro-mtodo del Acetato de etilo( Na2SO4/MgSO4) Mtodo S19 (NaCl/Acetato de Etilo: Ciclohexano/ Na2SO4) Mtodo QuEChERS de los 2000 (NaCl/MgSO4 // PSA)
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Qu es QuEChERS (pronunciado Catchers)

Quick, Easy, Cheap, Effective, Robust and Safe , QuEChERS (Rpido, Fcil,Barato,Efectivo, Robusto y Seguro, RaFaBERS) Mtodo de Preparacin de Muestra orientado a los mercados de Seguridad Alimentaria.

Desarrollado conjuntamente por la USDA (2003) y por las Agencias Reguladoras de Alimentos Europeas (mtodo prEn 15662: 2007) Metodologa para una extraccin simplificada de un gran nmero de residuos de pesticidas multiclase y multiresiduo en frutas y vegetales.

Mercado al que se dirige

Cientficos en Seguridad Alimentaria que analizen residuos de pesticidas/herbicidas en frutas y vegetales Agencias reguladoras/inspectoras del Gobierno Compaas de proceso de alimentos y analisis medioambientales Investigadores en la Universidad/Centros de Investigacin
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Por qu es importante en los anlisis de pesticidas? La mayora de los mtodos actuales para extraccin de pesticidas usan extraccin en fase slida (SPE) Y se requieren mltiples mtodos para clases especficas de compuestos En cambio, un nico mtodo QuEChERS puede usarse para extraer +250 compuestos de una sola vez Despus de la extraccin, el extracto se puede analizar por GC/MS o LC/MS Reduccin de solvente, reduccin de trabajo, aumento de la productividad del laboratorio

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Primer Paso- Extraccin

Representacin Grfica de los pasos QuEchERS
El uso de Sulfato Magnsico en el paso de extraccin ayuda a mejorar las recuperaciones al facilitar la particin de los pesticidas en la capa orgnica, gracias a que retiene el agua.

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Segundo Paso SPE Dispersiva

Representacin Grfica de los pasos QuEchERS

La SPE Dispersiva implica la mezcla de la sal y los sorbentes con el extracto en un tubo de centrfuga para retener las interferencias de matriz, pero no los analitos.

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Los kits SampliQ de QuEChERS Kits hacen fcil la seleccin del Kit correcto
Elige el Kit de Extraction basado en el mtodo QuEChERS que ests usando, y los pesticidas que ests monitorizando.. Todas las sales y sorbentes vienen pre-pesados y certificados de acuerdo con el mtodo especfico que ests usando. Elige tu Kit de SPE Dispersiva basado en el tipo de alimento que ests analizando y el mtodo que ests siguiendo Puedes encontrar una gua de referencia de los alimentos y seleccin de kits en www.agilent.com/chem/quechers

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Gua de Seleccin de SampliQ QuEChERS

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Kits de Extraccin QuEChERS

Producto Beneficios

Kits de Extracin SampliQ QuEChERS Designados para el uso con mtodos especficos, incluyendo: -Mtodo Original QuEChERS -Mtodo AOAC 2007.0 -Mtodo EN 15662 -Extracciones de Acrilamida

Fcil seleccin basada en paquetes Agilent por metdo Configuraciones de QueChERS estndar y tamponadas Sales pre-empaquetadas en paquetes anhidros para mantener la calidad y aadir en el paso apropiado del proceso Opciones de 10g o 15g de tamao de muestra Proporciona todos los tubos y tapones necesarios para el mtodo

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Sales de extraccion disponibles como paquetes individuales Kits de Extraction Kits (50 o 200 bolsas por kit)

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Kits de SPE Dispersiva

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Kits de SPE Dispersiva(continuacin)

Nuevo !!
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Kits SampliQ QuEChERS de Agilent

Proporciona a los laboratorios de anlisis de alimentos un mtodo simplificado para preparar muestras para el anlisis de pesticidas
Sin necesidad de pesadas: Kits de Extraction y SPE Dispersiva preempaquetados para adecuarse a los distintos protocolos especficos de alimentos y de screening. Sales de Extraccin prepesadas y suministradas liofilizadas anhidras en bolsas al vaco, lo que permite aadirlos convenientemente en el momento correcto y mejorar los resultados reduciendo la degradacin del analito. Los Sorbentes y las sales para el paso de SPE dispersiva se suministran en tubos de centrfuga de 2mL o 15mL, para volmenes de alcuota de 1mL, 6mL u 8mL, como se especifica en las metodologas QuEChERS que se usan hoy. Los exigentes procesos de control de calidad de Agilent aseguran que todas las sales, sorbentes y consumibles QuEChERS son de alta calidad, y libres de contaminantes, y por tanto los resultados son precisos y reproducibles.

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Cuatro Variantes del Mtodo QuEChERS

El Mtodo original QuEChERS introducido en 2003, usa cloruro sdico para mejorar la extraccin El mtodo AOAC 2007.01 usa acetato sdico como tampn reemplazando el cloruro sdico y 1% de cido actico en acetonitrilo Una variacin posterior introduce el uso de PSA y GCB para eliminar altos niveles de clorofila y esteroles en el extracto final sin la perdida de pesticidas planares(aromticos polares) usando una mezcla de acetona:tolueno (3:1) como solvente La version Europea es similar al mtod AOAC, excepto que en la la extraccin se usan, cloruro sdico, citrato sdico dihidratado y citrato sdico sesquihidrato, en vez de acetato sdico, y porque se aade cido al final del proceso.

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Modificaciones al mtodo original

Se han introducido algunas modificaciones al mtodo QuEChERS original para asegurar una extraccin eficiente de los compuestos dependientes del pH y para minimizar la degradacin de los pesticidas cidos y bsicos lbiles. El tamponado con sales de citrato se ha introducido en la microextraccin para ajustar el pH a un valor de compromiso de 5-5.5, donde se extraen la mayora de los compuestos cidos y bsicos de la muestra. Se aade una pequea cantidad de cido frmico al extracto final despus del clean-up. Los pesticidas cidos se analizan directamente del extracto crudo, antes de la adicin de la PSA ya que deberan absorberse y no liberarse por el sorbente. En otra modificacin introducida por Schenck, un cartucho de PSA con carbon negro grafitizado (GCB) se usa para retirar pigmentos de plantas sin la prdida de compuestos planares. La adicin de tolueno ha mostrado altas recuperaciones para los pesticidas planares
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Ventajas del Mtodo QuEChERS

en 30-40 min con un costo por muestra de 1-2 en materiales desechables y generar <12 mL de solventes de desecho

9 Un solo analista puede preparar un lote de 6-12 extractos

9 En la mayora de las matrices se pueden conseguir altas

recuperaciones consistentes (la mayora del 60-110% con RSDs < 5%) en un amplio rango de pesticidas cromatografiables por GC y LC. Un tcnica de preparacin de muestras altamente eficaz y de bajo costo que puede usarse en la mayora de la matrices de alimentos para el anlis de un amplio rango de clases de pesticidas.

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Ventajas de la SPE Dispersiva frente a la SPE Estandard

Ahorro entre 65%-92% de solvente Reducin en desechos entre 56-87% Recuperaciones tipicamente > 90% *
Mtodos SPE Estndar Procesamiento de muestra: 120 min. Gasto de Solvente: 60-90 ml Solventes clorados: 20-30 ml Mtod QuEChERS 30 min. 25% del tiempo Gasto de Solvente: 10-15 ml Solventes clorados: Ninguno
* A Comparison of Solid Phase Extraction Cleanups for use with the Extraction Cleanups for use with the QuEChERS Method FRANK J. SCHENCK Southeast Regional Laboratory, FDA, Atlanta, GA Southeast Regional Laboratory, FDA, Atlanta, GA Jon Wong & Michael Hennessy CFSAN, FDA, College Park, MD CFSAN, FDA, College Park, MD

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Qu hace nicos los kit Agilent SampliQ para QuEChERS

Los Kits SampliQ QuEChERS tienen fuertes ventajas: Fcil seleccin: ningn otro competidor describe cmo elegir productos basados en el anlisis, metodo regulatorio o tamao de la muestra. Paquetes pre-pesados y certificados: suministrados en bolsas anhidras para asegurar que el procedimiento se sigue correctamente, dando lugar a datos ms precisos Inmediata implementacin en laboratorios acreditados Agilent focaliza en la educacin: Agilent proporciona un video (12min) (http://www.chem.agilent.com/en-US/products/consumables/samplepreparation/sampliqspe/sampliqquechers/video/Pages/default.aspx ) Homogeneizadores cermicos para los pasos de agitacin Agilent suministra patrones para QuEChERS

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Homogeneizadores Cermicos (% recuperacin)

Hechos de una mezcla de cermica y xido de aluminio. Son Inertes y mejoran los porcentajes de recuperacin. Reducen el tiempo de agitacin de 1 minuto a <20 segundos!

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Homogeneizadores Cermicos (tiempo de agitacin)

Recuperaciones medias de varias clases de Pesticidas con Homogeneizadores cermicos

Con 20 segundos de agitacin con homegeneizadores se consiguen recuperaciones equivalentes o mejores que 1 minuto de agitacin sin ellos.

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Patrones para QuEChERS

Preparados para usar en las extracciones QuEChERS. No se necesita diluir Para GC, LC con MS y MS/MS, y detectores selectivos. Elimina la variabilidad al hacer estandares y curvas de calibracin. Fabricados de acuerdo con Iso9001. Concentraciones verificadas por laboratorio con acreditacin 17025

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Tendencias actuales en la investigacion en QuEChERS

En general la metodologia de QuEChERS se est expandiendo hacia otras areas adems de frutas y vegetales.
Analisis de pesticidas en aceites y alimentacin infantil PAHs en pescados. Anlisis de residuos de frmacos: Frmacos en Sangre Total Antihelmnticos en tejidos animales Farmacos veterinarios en tejidos animales

(antibiticos (sulfonamida y quinolona) en higado de vaca.Pub number 5982-4921, 5982-4956)

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Aplicaciones

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Analisis de Residuos de Pesticidas en Espinacas usando los kits AOAC QuEChERS Agilent SampliQ por GC/MS (Publication 5990-4305EN)

En esta aplicacin se describe el uso los kits AOAC de QuEChERS, en la preparacin de muestra mediante extraccin y cleanup de 18 residuos de pesticidas multiclase, cromatografiables por GC en espinacas. Para evitar la prdida significante de pesticidas planares causados por el carbon grafitizado(GCB) en la SPE dispersiva, se utiliz un mtodo modificado con la adicin de tolueno Los pesticidas del extracto de espinacas se analizaron entonces por cromatografa de gases/espectrometria de masas (GC/MS) operando en modo selective ion monitoring (SIM).
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GC/MS de una extraccin de espinacas por QuEChERS

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GC/MS of a Spinach Extraction by QuEChERS

Blank

50 ng/g Fortified Spinach

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Resultados del mtodo original sin tolueno

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Resultados del mtodo modificado con tolueno

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Avances en QuEChERS
Se han presentado datos que muestran que la metodologa de QuEChERS puede ser usada para otros residuos adems de pesticidas. Gran cantidad de posibilidades, con una tcnica de preparacin de muestra muy simple, la preparacin justa de muestra Tcnica relativamente ecolgica y de bajo costo comparada con la Extraccin Lquido-Lquido y la Extracin en Fase Slida (SPE)

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Consiga un 20 % de descuento en columnas J&W GC

Consiga un descuento de un 20% en una columna Agilent J&W GC al pedirla junto con un kit SampliQ SPE en el mismo pedido. El 20 % de descuento aplica a ambos productos (1 columna de GC y un kit SPE) Mencione el cdigo de promocin 8465 en su pedido. Promocin vlida hasta el 15 de Marzo, 2010.
This information is subject to change without notice Agilent Technologies, Inc. 2010 Published in Spain, February 10, 2010 Page 39