Universidad de Santiago de Chile Facultad Tecnolgica Depto.

de Ciencias y Tecnologa de los Alimentos Tecnlogo en Alimentos Microbiologa de Alimentos

Prctico N3 Morfologa de Microorganismos

Integrantes: Paula Alarcn Maryorie Ibez Profesor: Ayudante: Osvaldo Torres Javiera Araya

Fecha de realizacin: 22 de abril Fecha de entrega:

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Introduccin
El tamao de la mayora de las clulas bacterianas es tal que resultan difciles de ver con el microscopio ptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la clula y el medio que la rodea, y el medio ms simple de aumentar el contraste entre la clula y el medio que la rodea es la utilizacin de colorantes. Estos pueden emplearse tambin para localizar estructuras especficas en la clula o para distinguir entre tipos diferentes de clulas. Las clulas generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de teirlas, proceso llamado fijacin. Para las bacterias la fijacin por el calos es lo ms corriente, aunque tambin puede fijarse con sustancias qumicas como formaldehdo, cidos y alcoholes. Despus de la fijacin se realiza habitualmente en clulas que han sido secadas sobre un portaobjetos, tratando despus ste con el agente fijador y siguiendo inmediatamente el proceso de tincin. La fijacin produce generalmente el encogimiento de las clulas, la tincin, por el contrario, hace que las clulas aparezcan mayores que lo que son realmente, de manera que las medidas de las clulas que han sido fijadas o teidas no pueden realizarse con mucha precisin. Tincin de Gram Tambin puede utilizarse a menudo un mtodo que no tie igualmente todas las clulas, un proceso denominado tincin diferencial. La tincin de este tipo ms extensamente utilizada es la tincin de Gram, denominada as por el bacterilogo dans Hans Christian Gram, quien la desarrollo. Sobre la base de su reaccin a la tincin de Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, grampositivas y gramnegativas. Tincin de esporas Se utiliza para teir las estructuras de resistencia llamadas endosporas bacterianas. Sobre el portaobjetos con la preparacin se echa verde malaquita que tie las clulas de verde. Luego se lava con agua destilada con lo que las clulas se quedan incoloras y las endosporas permanecen verde. Finalmente se usa la safranina para obtener bacterias de color rosa mientras que las endosporas continan con su color verde del verde malaquita

Objetivos
Aplicar mtodos de tincin de microorganismos para su diferenciacin

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Mtodos y materiales Para la realizacin de la tincin de gran lo primero es tener todos los materiales a mano y haber desinfectado el sector de trabajo como tambin nuestras manos, se rotul el portaobjetos especificando con que microorganismos trabajamos , se prepar el frotis fijando los microorganismos que nos indico nuestro profesor en nustro E,Coli, Pseudomonas sp y yogurt, las otras mustras como endoesporas y levaduras ya haban sido preparadas, posteriormente cubrimos completamente el frotis con las solucin decolorante es importante mencionar que en todo momento se us el mechero para esterilizar tanto los tubos con los microorganismos y tambin el asa, la solucin decolorante se dej dos minutos y luego se enjuag, se cubri con solucin de lugol y se dej 30 segundos, se volvi a enjuagar, se agreg alcohol cetona y se aplic finalmente la safranina se dej un minuto y se enjuag se sec a la llama del mechero hasta que se enfri luego observamos en el microscopio en 100x10 y se anot lo observado.

Resultados Echerichia coli Dominio Familia genero organismo Reaccin a Gran forma aumento Bacteria Enterobacteria escherichia procariota negativa Bacilos cortos cadena 100x10

en

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Pseudomonas spp Dominio Familia genero organismo Reaccin a Gran forma Bacteria Pseudomonadaceae pseudomonas procariota negativa bacilo recto o ligeramente curvado, aislado, agrupado en parejas o cadenas cortas 100x10

aumento Endoesporas

Dominio Familia genero organismo forma aumento

Bacteria Bacteriaceae Bacillus procariota circular 100x10

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Levaduras Reino Familia fungi Ascomycota Saccharomycotina Taphrinomycotina Schizosaccharomycet es Basidiomycota Urediniomycetes Sporidiales Bacillus Eucariota Esfrica 100x10

genero organis mo forma aument o

Bacterias del yogurt Lactobacilos blgaros y spreptococcus

thermophillus
Reino Familia genero organismo forma aumento tincion bacteria Lactobacillaceae, Streptococcaceae Lactobacillus, Estreptococo procarita

laminar,enrollada y convoluta
100x10 Gran positivas